Mentor: dr Dragoljub Cvetkovi Student: Marina Raji

PRO podravaju, favorizuju BIOTICI imaju ulogu u ivotnom ciklusu Mikroorganizmi koji su neophodni u digestivnom traktu (Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium spp., Lactobacilus casei...)

Svojim kolonijama zajedno formiraju biofilm na zidu creva simbioza sa ovekom Pored digestije, imaju ulogu i u imunom sistemu, proizvodnji B komplexa, vitamina K... Za bolje dejstvo koriste se zajedno sa prebioticima

Vlakna sainjena od ugljenih hidrata (oligosaharidi); brojni su u povru Stimuliu rast probiotikih bakterija, ali ne i patogena kao to je Candida albicans.

Prebiotiki proizvodi moraju ispunjavati sledee uslove: ne smeju se apsorbovati ni razlagati u GIT-u selektivni su za odreen broj korisnih bakterija menjaju floru tako to daju prednost probioticima

PROBIOTICI
Bifidobacterium pod elektronskim mikroskopom

PREBIOTICI
ematski prikaz lanca inulina

Naruavanje biofilma u crevima moe nastati usled uzimanja antibiotika, unoenja toxina, poremeene ishrane... Za ponovno uspostavljanje ravnotee najvie se koriste fermentisani mleni proizvodi.

Da bi se ispoljilo povoljno delovanje bakterija nakon unoenja u organizam neophodna je minimalna koncentracija od 106 cfu/g

Imaju najvaniju ulogu pri proizvodnji jogurta i sira, fermentacijom prevode laktozu u mlenu kiselinu. To su Streptococcus thermophilus, Lactobacillus lactis i dr.
Ove bakterije oslobaaju odgovarajue lipolitike i proteolitike enzime koji utiu na krajnji izgled, aromu i gustinu proizvoda. L. lactis

U praksi se uglavnom za razlikovanje vrsta bakterija koriste razlike u makromorfologiji kolonija, kao i mikroskopske razlike.
To nije uvek najpogodniji nain za identifikaciju i kvantifikaciju probiotikih bakterija.

Da li probiotike bakterije mogu da preive procese proizvodnje i skladitenje proizvoda u kojima se deklariu kao prisutne?
Ako mogu, da li to utie na njihov ivotni ciklus, i da li moemo pratiti biohemijske promene koje su izazvane? Da li postoje dovoljno selektivne podloge kojima moemo tano razlikovati probiotike bakterije od starter kultura u proizvodnji jogurta i sireva?

Ispitati da li u deklarisanim probiotkim proizvodima ima dovoljno aktivnih probiotskih bakterija

Proveriti selektivnost preporuenih podloga za odreene rodove probiotskih bakterija Praenje varijacija u broju bakterija jednog proizvoda u zavisnosti od datuma proizvodnje (are)

U cilju ispitivanja viabilnosti elija mlenih bakterija u komercijalnim proizvodima jogurta i kapsulama sa liofilizovnim bakterijama koristile su se selektivne hranljive podloge. Zasejavanje je vreno metodom poseva. Inkubacija se odvijala na temperaturi od 37oC tokom 72h.

MPA mesopeptonski agar, ukupan broj mezofilnih aerobnih i anaerobnih bakterija MRS dupli sloj, izolovanje laktobacila (de Man Rogosa and Sharp), aerobno ENT Chromocult Enterococci agar, detekcija enterobakterija fekalnog porekla, aerobno COLIFORM (+/-) Chromocult Coliform agar, (saplament = antibiotik sa selektivnim G+ delovanjem), aerobno WILKINS-CHALGREN (+/-) preporuna selektivna podloga za bifidobakterije, dodaci: pirocin, sojin pepton, glacijalna siretna kiselina, anaerobno (Rada i sar., 2009) M17 poldloga za selektivnu detakciju streptokoka, aerobno

kapsule sa liofilizovanim kulturama bakterija, deklaracija Lb. acidophilus, Bifidobacterium infantis, St. faecium uzorak 1: jogurt, deklaracija Lb. bulgaricus; St. thermophilus
uzorak 2 : jogurt, deklaracija Lb. casei; Bifidobacterium uzorak 3 : jogurt, deklaracija Lb. acidophilus, Bifidobaterium lactis; St. thermophilus

kapsule I [cfu/g] II [cfu/g] kapsule I [cfu/g] II [cfu/g]

MPA 69106 41106 MPA an 97106 118106

MRS 103106 118106 MRS an 159106 203106

M17 76106 50109 WCH+ an 251105 63105 WCH- an 249106 238106

MPA MRS

ENT
COLCOL+ MPA an WCH+ an WCHan M17

podloga

UZORAK1 [cfu/ml] I
200105 60103

UZORAK 2 [cfu/ml] I
170105 138105

UZORAK 3 [cfu/ml] I
< 105 49107

II
89105 20107

III
61105 bb 106 * 128104 ND ND 116105 28103 75104

II
bb104 48107

III
8105 185105

II
61105 63107

III
10105 52107

ND
ND ND 65104 24103 18104

ND
ND ND bb 104 27103 53104

ND
ND ND 120105 43105 252105

ND
ND ND bb 104 84105 408106

40104
ND ND 79105 106104 101105

ND
ND ND < 103 108104 32107

ND
ND ND 70103 57105 108104

ND
* 1810 * 1110 184103 78105 50105

61107

85107

73107

Odabir podloge zavisi od matrixa, ciljane grupe i pratee populacije bakterija Neto veu selektivnost su pokazale selektivne podloge u poreenju sa podlogom za odreivanje ukupnog broja bakterija.

U svim ispitivanim uzorcima je ukupan broj elija bio vei od 106 cfu/g Ipak, kvantifikacija probiotikih bakterija se ne moe izvriti na osnovu jednog medijuma. Neophodna je dodatna verifikacija biohemijskim testovima.