Guillermo Umaña

Gimnasio La Montaña
Bogotá, Colombia

Marcadores Moleculares y la Huella Genética

Contenido:
1. Introducción: La Huella Genética
2. Técnicas de la Huella Genética: Marcadores
3. Usos de la Huella: Bioética
4. Bibliografía

1. Introducción: La Huella Genética

La huella genética también es llamada prueba de ADN y sirve para la identificación de

individuos en Ciencia forense, pruebas de paternidad, identificación de inmigrantes,
estudios de la compatibilidad de órganos y estudios sobre migraciones y evolución
humana. Estas pruebas se hacen con muestras de sangre, pelo, saliva y semen entre
otros. La técnica para la obtención de la huella genética fue descubierta por el científico
Alec Jeffreys en la Universidad de Leicester de Inglaterra. Este investigador fue uno de los
primeros en mostrar que los genes de mamíferos no son simples, pues están
interrumpidos por intrones. Después de muchos estudios sobre biología molecular y
secuencias en el ADN llegó de forma accidental al desarrollo de la huella genética en
1984. “Desde ese momento se ha hallado el perfil genético de aproximadamente dos
millones de ciudadanos del Reino Unido, el cual se guarda en la UK criminal DNA
Database”.1 El inconveniente de todo este avance tecnológico es el problema ético que
trae la obtención y almacenamiento de la huella genética. En este punto se abren muchas
puertas para preguntarnos sobre hasta donde debe tener acceso la policía a la
información de ciertos individuos y cómo se deben manejar las bases de datos. Hoy en
día, esta tecnología ya es usada por la Ley en problemas de inmigración y casos de
paternidad. Qué podría pasar en el futuro cuando se llegue a tener la información del
material genético de toda una nación?

“Los seres humanos somos en un 99.9 % genéticamente idénticos, es decir, la secuencia

de nucleótidos que componen nuestros ácidos nucleídos sólo difiere en un 0.1 %.”2 Esta
pequeña parte del ADN de cada persona tiene un lugar específico en la cadena de
información genética y puede ser identificada y así hallar la huella genética de cada

1Información tomada de http://royalsociety.org/page.asp?id=1523

2http://www.divulgon.com.ar/agosto04/bajolalupa-ago04.html
individuo. Para hallar este perfil individual se usan los marcadores moleculares, que
permiten que, usando muestras de sangre, semen, pelo, piel y hasta uñas, se encuentren
las secuencias específicas de una persona. Esta diferencia entre la información genética
de toda la población se llama polimorfismo.

Polimorfismo se refiere a la multiplicidad de alelos existentes de un gen. En una población

se producen polimorfismos genéticos a través de la evolución por factores como la
selección natural, mutaciones o recombinación genética. La selección natural “es un
mecanismo evolutivo que se define como la reproducción diferencial de los genotipos en
el seno de una población biológica.”3 Esta teoría, propuesta en un principio por Darwin, se
basa en que la naturaleza busca el éxito de supervivencia seleccionando a los mejores
individuos de cada especie en cuanto a su adaptación al medio ambiente. Así, en una
población los alelos de un gen van cambiando y produciendo variaciones en el material
genético en los individuos de una población. La recombinación genética también permite
crear diversidad en los alelos de un gen al combinar la información genética en los
organismos, tomando como un ejemplo de este proceso la meiosis. Por último, las
mutaciones, que pueden ocurrir por muchas razones y tienen la desventaja de producir en
el organismo cambios negativos además de positivos. Éstas son indispensables para la
evolución; pues al cambiar, ya sea simples nucleótidos en la cadena o afectarse el total
de un cromosoma, cambian procesos en el organismo, para bien o para mal, y se
producen polimorfismos genéticos.

En un individuo existen repeticiones de nucleótidos en una secuencia llamada tándem,

estos se llaman microsatélites. Para obtener la información sobre los microsatélites y
secuencias de ADN en un individuo se usan marcadores moleculares. El análisis de
sangre como marcador molecular es una de las técnicas más antiguas para diferenciar
individuos en grupos RH, pero los hallazgos del polimorfismo genético de una persona,
usando esta técnica, son bajos por que es dominante. Dominante se refiere a que se
analizan muchos loci al tiempo y no es posible encontrar la información exacta de un gen
específico ni la presencia de un microsatélite. El uso de sangre en laboratorios de
Medicina Forense para hallar el Rh o sistema ABO tiene una limitación que es que se
necesita que el material usado sea muy reciente por que la sangre se degrada fácilmente
y su análisis puede llevar a errores por que empieza a influir la actividad bacteriana. Por
eso el análisis basado en el ADN es muy útil y preciso. En el siguiente ensayo se
explicará cómo es el proceso para la identificación de la huella genética humana usando
marcadores moleculares y que implicaciones éticas pueden tener las aplicaciones de la
información obtenida mediante el uso de métodos como el RFLP.

2. Técnicas de la Huella Genética: Marcadores

3http://es.wikipedia.org/wiki/Selecci%C3%B3n_natural
El análisis de ADN se basa en que es muy poco probable que dos seres humanos tengan
la misma cantidad de microsatélites, es decir de repeticiones de unos pocos pares de
bases nitrogenadas, en un mismo loci. “Para encontrar marcadores verdaderamente
individuales hay que estudiar las secuencias que no codifican proteínas y que no parecen
desempeñar una función relevante. Se usan sobre todo las secuencias que se llaman
minisatélites, que consisten en numerosas repeticiones de cadenas cortas de nucleótidos.
Estas secuencias cambian rápidamente por mutación y recombinación y generan los
complejos patrones que identifican a cada persona.”4 En el pasado se cometieron
injusticias por el análisis del material genético activo, llegando a inculpar a gente inocente
por que el ADN estudiado coincidía con el de otra persona.

En las técnicas que usan marcadores para analizar la cadena de ADN es indispensable la
reacción en cadena de la polimerasa o PCR por sus siglas en ingles “Polimerase Chain
Reaction”. Esta técnica se le ocurrió al científico Kary Mullis, que en 1983 se dio cuenta
de cómo hacer múltiples copias de un fragmento de ADN que se necesita. Más tarde en la
revista Scientific American dijo: “Empezando por una sola molécula de AND, el PCR
puede generar más de cien mil millones de moléculas similares en una tarde…no se
necesita más que un tubo de ensayo y calor”5 El material puede venir de cualquier lugar,
desde sangre humana hasta restos de un mamut. El PCR fue el motor que permitió la
creación de técnicas como RFLP, la cual permite darse cuenta de las secuencias de
nucleótidos que componen una parte del ADN.

El PCR se hace usando un Termociclador, que es una maquina que calienta el recipiente
en el que se encuentra una enzima llamada polimerasa y el material genético. La función
de la polimerasa es pegar nucleótidos libres a una de las hebras que componen la doble
hélice del ADN para formar una nueva cadena complementaria. El PCR se divide en
diferentes etapas. En la etapa de iniciación se eleva a temperatura a más de 90˚ C y se
mantiene durante menos de 10 minutos. En este momento la enzima se activa para
empezar a funcionar en el ADN. Después viene la desnaturalización del material genético.
La desnaturalización se refiere a la separación de la doble hélice de la cadena de ADN
por el rompimiento de los puentes de hidrógeno, esto pasa debido a la alta temperatura
del termociclador. Cuando esto pasa, se reduce la temperatura por unos segundos a 50 ˚
C aproximadamente para que los Primers se unan a la secuencia de ADN en el proceso
llamado hibridación. Los Primers delimitan la región del material genético que va a ser
copiada y así la polimerasa puede empezar a copiar. Empieza la elongación de la cadena
complementaria de ADN. La polimerasa adiciona nucleótidos libres en un promedio de mil
bases por minuto si está en una temperatura óptima. Al agregar todos los nucleótidos
avanzando de 5' o grupo fosfato a 3' o hidroxilo y llegar al alto en la reacción. Este
proceso se repite las veces necesarias hasta que se obtenga el número necesario de
copias. Al final se eleva la temperatura por un tiempo para asegurar que todas las
cadenas que se obtengan estén completamente copiadas. Las muestras extraídas se

4http://mundobiologia.portalmundos.com/huella-genetica-%C2%BFcomo-se-obtienen/

5http://www.karymullis.com/
pueden conservar a una temperatura de menos de 15˚ C y almacenarlas en bases de
datos. El proceso de PCR al principio fue muy lento pues se necesitaba agregar una
polimerasa nueva en cada reacción; más tarde se descubrió que microorganismo
resistentes a altas temperaturas podían aportar enzimas que fueran termoestables, es
decir que pudieran funcionar sin degradarse en varias reacciones en cadena.

La primera técnica de marcadores moleculares es la RFLP, que viene de la sigla en ingles

que significa Variación en la Longitud de los Fragmentos de Restricción. Esta técnica se
basa en las enzimas de restricción. Las enzimas de restricción separan la cadena de ADN
en fragmentos de diferente tamaño dependiendo del número de veces que aparezca la
secuencia de reconocimiento de la enzima en la cadena. La enzima digiere la molécula y
la rompe en pedazos según la repetición en tándem de los nucleótidos que especifican la
enzima. Los fragmentos más grandes, cargados positivamente, van a la pate superior del
tubo de ensayo; los fragmentos más pequeños y con carga negativa se quedan abajo. En
esta técnica se usan químicos radiactivos que muestran los nucleótidos. Cuando en el
tubo están los fragmentos separados, se agrega una polimerasa y esta se activa por calor.
La enzima empieza a agregar nucleótidos libres que forman una sonda radiactiva. Cada
vez que la muestra tenga Guanina o Citocina se volverá radiactiva.

El proceso de RFLP termina analizando los fragmentos de ADN de dos individuos o del
individuo sospechoso y la muestra. Si los dos fragmentos de ADN coinciden en cuanto a
que los son del mismo tamaño, es decir iguales en su repetición de nucleótidos, se puede
deducir que son de la misma persona o del familiar. En un caso de crimen en el que se
toma una evidencia y se analiza con el material genético del sospechoso, esta técnica
arrojaría información muy segura para la conclusión del caso pues, como se dijo antes,
por la existencia de polimorfismos genéticos en la población, las secuencias especificas
del 0.1% del material genético de una persona son propias y diferentes de los demás. En
un caso de paternidad sospechosa se compara el material genético del supuesto padre
con el del bebe, partiendo de la premisa de que parte del material genético entre
familiares es similar. La similitud entre los dos se produce por la herencia, entonces si el
supuesto padre es el verdadero padre, se comprobaría por que ambos comparten
secuencias de nucleótidos especificas.

Otra técnica del uso de marcadores moleculares es STR o Short Tandem Repeat en
ingles. Esta técnica se basa en los microsatélites. Dentro de nuestro material genético se
encuentran, como se dijo antes, repeticiones de bases que son detectables. Una persona
puede tener repeticiones de más bases, otra de menos bases y así es reconocible un
individuo por esta técnica. Los microsatélites pueden tener un motivo repetido varias
veces, es decir un par o trío de pares de bases seguidas y repetidas un número especifico
de veces; estos se llaman puros o perfectos. Por ejemplo (ATATATATATATAT). También
existen repeticiones interrumpidas, en las que se intercalan nucleótidos entre las
repeticiones de la serie. Por ejemplo (ATATGCATATATAT). Además existen repeticiones
combinadas en las que se repiten secuencias de bases una después de la otra. Por
ejemplo (GTGTGTGTCACACACAGTGT). Así, por ejemplo, una persona puede tener una
serie de 23 repeticiones AT mientras que otra una de 31. La longitud de la repetición
puede utilizarse como marcador genético.

La técnica STR en la actualidad, se basa en la determinación de 13 lugares distintos de

repetición y así descartar que los individuos estudiados tengan las mismas repeticiones
encontradas. Aún con estas medidas, la posibilidad de que las dos personas estudiadas
tengan el mismo tándem de nucleótidos es de 1 en un trillón, lo cual hace que esta técnica
sea valida pero menos precisa que la RFLP. “Para una región del ADN en la que se ha
detectado la existencia de 10 variantes alternativas en la secuencia de nucleótidos, la
frecuencia de aparición de una variante es 0.1. Si se estudian en forma simultánea 10 de
estas regiones entre dos individuos, la probabilidad que estos coincidan en todos las
posibilidades es de 0.1 x 1010. Es decir, la posibilidad que 2 individuos tomados al azar
posean el mismo perfil de ADN es de 1 en 100 000 millones.” 6 En esta técnica los
microsatélites “son atacados con primers específicos de secuencia y se amplifican
mediante PCR. Los fragmentos de ADN que son resultado entonces detectados y
separados mediante electroforesis.”7
Existen otros tipos de marcadores moleculares como las isoenzimas. Éstas son enzimas
que catalizan la misma reacción pero difieren en su secuencia de aminoácidos. Son una
técnica barata y muy usada con plantas. Se basa en la identificación de genes por medio
del análisis de las proteínas liberadas en procesos celulares. Hoy en día existen muchas
variaciones del proceso RFLP, algunos más simples, otros más complejos. Las técnicas
RAPD (Random Amplification of Polymorphic DNA), AFLP (Amplified Fragment Length
Polymorphism, SFP (Single Feature Polymorphism), VNTR (Variable Number Tandem
Repeat) o SNP(Single Nucleotide Polymorphism) usan la técnica PCR o las enzimas de
restricción y se basan en los polimorfismos de los microsatélites, en su gran mayoría. Por
eso es preciso centrarse en el RFLP para entender las demás técnicas.
3. Usos de la Huella: Bioética
Habiendo entendido cómo funcionan las técnicas para analizar el material genético de un
individuo y cómo el polimorfismo se tiene en cuenta para entender las secuencias
específicas de la cadena de ADN. Habiendo ilustrado cuáles son las técnicas para extraer
datos y almacenarlos y cómo funcionan los procesos llevados a cabo, podemos
centrarnos en los usos de la información derivada de los procesos de obtención de la
huella genética.
A grandes rasgos, las aplicaciones de la huella genética son8:
• En Ciencia forense, para comparar sospechosos.
• En la Identificación de restos humanos por comparación con muestras de
familiares.
• Pruebas de paternidad.
• Estudios dela compatibilidad en donaciones de órganos.

6http://www.divulgon.com.ar/agosto04/bajolalupa-ago04.html

7http://es.wikipedia.org/wiki/Huella_gen%C3%A9tica

8http://es.wikipedia.org/wiki/Huella_gen%C3%A9tica
 • Generación de hipótesis sobre las migraciones humanas.
• Identificación de inmigrantes y personas indocumentadas.
En principio pareciera que esta tecnología revolucionaria para la criminalística es la que
traería justicia al mundo. En un futuro se podría usar la huella genética en todos los casos
relacionados con la justicia, convirtiendo a la genética en la única vía para desmentir
casos relacionados con la Ley. Si miramos por encima podemos ver que casos de
asesinato, robo y otros delitos se solucionarían perfectamente y casi con un 100% de
veracidad usando marcadores moleculares para encontrar la huella genética de los
sospechosos. Se tomarían muestras de los fluidos corporales o pedazos de piel, pelo,
uñas etc. encontrados en la escena del crimen y se compararían, usando RFLP por
ejemplo, con los del acusado, llegando a la verdad irrefutable en casi el 100% de los
casos. Casos de comprobación de la paternidad de una persona serían perfectamente
viables y solucionarían el problema rápidamente. Se compararían los resultados de las
muestras del bebe con las del presunto padre y se llegaría a la verdad en cuanto a la
relación familiar. Se podría usar la genética para resolver todos los problemas de
inmigración ilegal, lo cual ya ha pasado. “El primer caso en que se utilizó esta técnica fue
en un caso de inmigración al Reino Unido. Se trataba de un chico originario de Ghana al
que, al volver de un viaje a su país, se le negó la residencia porque su documentación
parecía falsificada. Las pruebas de ADN demostraron con un 99,997% de probabilidad,
que era hermano de los demás hijos de su madre, de nacionalidad británica, por lo que
pudo quedarse en el Reino Unido.”9
Toda esta maravilla no es gratis, tiene un precio. Hay quienes comparan el avance en el
uso de la huella genética en la criminalística con la figura de “Big Brother” en el libro 1948,
de Orwell. En un futuro se podría obtener le huella genética de todos los individuos de un
país, y hasta del mundo entero. Se guardaría la información en una gran base de datos y
la policía podría tener acceso a esta información para todos los casos de crimen en el
planeta. ¿Acaso esto no se convertiría en la gran distopia de “1984”? El Estado tendría
acceso a todos los aspectos privados de los individuos y la gran base de datos se
convertiría en su gran arma de persecución. La llegada de un gobierno corrupto y
totalitario se convertiría en un martirio para los ciudadanos pues los abusos estarían a la
orden del día, todos fundamentados en la información de la “gran base de datos”. El suo
de la huella genética es un horror desde este punto de vista.
Otros casos reales del uso de la huella genética son: en 1988 fue comparado el ADN de
los restos de un participante de la Segunda Guerra Mundial, Josef Mengele, que yacían
en un cementerio en Brasil, con el ADN de la esposa de este combatiente Nazi. Los
resultados arrojaron que en un 99.9% la información de ambas muestras coincidía,
comprobando que era él quien yacía en el cementerio. 10 Recientemente en Francia hubo
una polémica discusión porque se aprobó una ley que obligaba a los inmigrantes a
realizarse pruebas genéticas si solicitaban el reagrupamiento familiar.11
Otro caso reciente fue el de Krik Bloodsworth, que fue exonerado en 1993 después de
haber sido condenado a muerte por el supuesto asesinato y violación de una niña. Pasó 9
años en la cárcel y fue dejado en libertad al ver que las pruebas de ADN de las muestras
tomadas cuando se encontró a la niña muerta no coincidían con las de él. Éste es un

9http://es.wikipedia.org/wiki/Huella_gen%C3%A9tica

10http://journalsip.astm.org/JOURNALS/FORENSIC/PAGES/1133.htm

11http://www.scribd.com/doc/989330/Un-examen-de-huellas-geneticas-antes-de-cruzar-
la-frontera
contraargumento de la tesis que pone al estudio de la huella genética como un peligro
social y lo compara con la distopia del libro “1984”. En este caso, que además tiene el
peso de que fue real, el estudio del ADN proporcionó las bases para que se hiciera justicia
después de una injusticia que iba a llevar a la muerte de un inocente. Éste caso “sirve
como una ponderosa ilustración de las pérdidas sistemáticas que el sistema judicial puede
llegar a cometer por malas convicciones sobre inocentes”12
Entonces que podemos concluir? La genética desde que se empezó a desarrollar ha
traído problemas éticos en los usos que se le da. En este siglo los problemas han
aumentado y mucha gente ve el futuro negro debido a el mal uso que se le está dando a
la información que se tiene sobe el material genético de plantas, animales y el ser
humano. La patente del genoma humano, los casos polémicos de clonación, el uso de
células madre, los productos transgénicos etc. son casos muy polémicos y que requieren
que se imponga la ética y se creen pautas y derechos que protejan a la gente del
monstruo que viene impulsado por los avances genéticos. El caso de la huella genética es
igualmente grave y lleva consigo una gran carga ética relacionada con la privacidad del
individuo. Si no se hace algo para regular la manipulación de la información encontrada
en los análisis del ADN, el poder que tienen los conocedores de la información se
desbordará y llevará a un grave problema social. El futuro en el que el Estado tiene
control sobre todos los individuos no es imposible, pero puede ser evitado si se toman
medidas. Lo que si se puede decir es que todos los avances en la genética que se han
hecho, se hacen y se seguirán haciendo en éste, el llamado siglo de la genética, son
importantes y muy útiles si se toman medidas para regular sus usos. En las últimas
décadas el hombre ha mejorado su calidad de vida (aunque la pobreza siga existiendo) y
cada vez la vida está más llena de comodidades. Los avances tecnológicos no son malos,
como afirman unos pocos; son buenos siempre y cuando sean regulados y no se dejen a
la merced de unos pocos.

4. Bibliografía:

http://www.karymullis.com/
http://royalsociety.org/page.asp?id=1523
http://es.wikipedia.org/wiki/Recombinaci%C3%B3n_gen%C3%A9tica
http://mundobiologia.portalmundos.com/huella-genetica-%C2%BFcomo-se-obtienen/
http://es.wikipedia.org/wiki/Huella_gen%C3%A9tica
http://journalsip.astm.org/JOURNALS/FORENSIC/PAGES/1133.htm
http://www.scribd.com/doc/989330/Un-examen-de-huellas-geneticas-antes-de-cruzar-la-frontera
http://www.thejusticeproject.org/profiles/bloodsworth/
http://www.divulgon.com.ar/agosto04/bajolalupa-ago04.html
www.greenfacts.org/es/glosario/ghi/huella-genetica.htm
www.datagene.es/DATAGENE/Servicios/Huella_Genetica/huella_genetica.htm
en.wikipedia.org/wiki/Genetic_marker
www.uv.mx/cienciahombre/revistae/vol18num1/articulos/moleculares/index.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/ADN_polimerasa
http://es.wikipedia.org/wiki/Microsat%C3%A9lites
http://es.wikipedia.org/wiki/RFLP

12http://www.thejusticeproject.org/profiles/bloodsworth/