Prctica 1: La tinci Gram

Nom i Cognoms: Grup:

1. Introducci.

La tinci de Gram s un tipus de tinci diferencial emprada en microbiologia per a la visualitzaci de bacteris en mostres. Deu el seu nom a Christian Gram, bacterileg dans que va desenvolupar la tcnica el 1844. S'utilitza indistintament tant per a referir-se a la morfologia cellular bacteriana com tamb per al primer pas en la diferenciaci bacteriana, considerant-se bacteri Gram positiu que es visualitzen de color violeta i bacteri Gram negatiu que es visualitzen de color rosa. 2. Objectius.

Aprendre i aplicar una tcnica de tinci complexa. Diferenciar bacteris Gram + i Gram -. Relacionar el tipus de tinci amb les caracterstiques de la paret bacteriana.

3. Material.

Microscopi Portaobjetes Cobreobjetes Nansa de sembra Fogonet dalcohol Pseudomonas Bacillus cereus 4. Procediment.

Alcohol-acetona Cristall violeta Lugol Safranina Pinces Serratia marcescens

Haurs de fer el mateix protocol amb les tres mostres de bacteris. a. Pren amb la nansa de sembra una mostra del bacteris i dilueix-la en una gota d'aigua. Fixa-la amb calor lleu. b. Tenyeix amb cristall violeta durant 1 minut. c. Renta amb aigua abundant lexcs de colorant. d. Afegeix Lugol durant 1 minut.

e. Renta lexcs de Lugol amb aigua. f. Decolora amb alcohol-acetona ( o simplement amb alcohol) fins que la preparaci perdi el color (30 segons). g. Renta amb aigua abundant per eliminar la resta de dissolvent. h. Tenyeix amb safranina durant 1 minut. i. Renta amb aigua per eliminar lexcs de colorant. j. Colloca el cobreobjectes.

5. Investigaci.

a. Fes un dibuix de les preparacions realitzades a diferents augments (sigues especialment curs a lhora de pintar els colors). Pseudomonas

.............. X

.............. X

.............. X

Serratia marcescens

.............. X

.............. X

.............. X

Bacillus cereus

.............. X

.............. X

.............. X

b. De quin color sha tenyit els diferents bacteris? Quin tipus de bacteri sn respectivament segons la tinci Gram?

c. Descriu lestructura de la paret bacteriana Gram + i Gram . Ajudat dels segents esquemes:

Gram positiu

Gram negatiu

d. Explica els fonaments de la tinci Gram seguint el segent esquema (relacional amb lestructura de la paret bacteriana):

e. Pinta els colors corresponents dels dos tipus de bacteris al llarg de cada pas.