Introduccin Objetivo Fundamento Procedimiento Resultados Conclusiones Bibliografa

Trabajo Prctico N 9

ESTERILIZACIN POR FILTRACIN

INTRODUCCIN La esterilizacin por filtracin se logra por el paso de un lquido o un gas a travs de un material capaz de retener los microorganismos presentes. La esterilizacin por filtracin se emplea para materiales sensibles al calor, tales como ciertos medios de cultivo, azcares, soluciones de antibiticos y otros medicamentos, etc.

TIPOS DE FILTROS Hay varios tipos de filtros, entre ellos los que ms se usan son los filtros de profundidad y los filtros de superficie o filtros de membrana. Filtros de profundidad Estos filtros estn elaborados por un material fibroso (papel, asbesto o fibra de vidrio) dispuesto al azar, de manera que dentro de la estructura del filtro se crean vas tortuosas donde pueden quedar retenidos la mayora de los contaminantes presentes.

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Entre sus ventajas se encuentran su alta capacidad de retencin de partculas sobre su superficie y a travs de toda su estructura y que permiten filtrar grandes volmenes. Sin embargo, tienen como desventajas que no presentan un tamao de poro uniforme y existe la posibilidad de liberacin, hacia el material filtrado, de partculas y microorganismos que hayan crecido dentro del filtro. Dadas sus caractersticas los filtros de profundidad se usan principalmente como prefiltros, ya que permiten eliminar las partculas grandes pero no la eliminacin total de los microorganismos. Filtros de superficie Son filtros elaborados generalmente de acetato de celulosa o nitrato de celulosa y contienen poros de tamao uniforme. Este tipo de filtro tiene como ventaja que, al conocer exactamente el tamao de poro que presentan, se pueden seleccionar filtros capaces de retener la totalidad de los microorganismos presentes en una solucin. Sin embargo, se saturan rpidamente y la velocidad de filtracin a travs de ellos es lenta. Para la filtracin esterilizante se pueden usar combinaciones de un filtro de profundidad con un filtro de superficie que tenga un tamao de poro de 0.22 m. La mayor parte de los filtros de membrana se pueden esterilizar en autoclave y luego se manipulan aspticamente al ensamblar el equipo. EQUIPOS DE FILTRACIN Existen diferentes equipos de filtracin, la seleccin del mismo est determinado principalmente por el volumen de lquido a filtrar. As tenemos equipos de filtracin para pequeos volmenes, los cuales generalmente se esterilizan por separado y se ensamblan aspticamente en el momento de la filtracin. Cuando se requiere filtrar volmenes mayores, el filtro de membrana se dispone en un cartucho y se coloca en un estuche de acero inoxidable. Tambin existen pequeos cartuchos de plstico que se pueden esterilizar despus de la insercin de un filtro de membrana; con estos dispositivos la filtracin se hace utilizando una jeringa que permite forzar el lquido a filtrar a travs del filtro hasta un recipiente estril.
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Antes de utilizar cualquier sistema de filtracin hay que determinar que los filtros no presenten ninguna ruptura, ya que esto puede ocasionar fallas en el proceso de filtracin. OBJETIVO Al finalizar el trabajo prctico el estudiante estar en capacidad de: Demostrar la esterilizacin de un medio de cultivo al pasarlo a travs de un filtro de membrana de 0,22 m. FUNDAMENTO Al pasar un medio de cultivo a travs de un filtro de membrana de 0,22m todos los microorganismos quedan retenidos sobre la superficie del mismo. PROCEDIMIENTO 1. Separar el medio de cultivo en dos porciones. 2. Pasar la porcin A a travs del equipo de filtracin preparado con un filtro de membrana de 0,22 m. 3. Recoger el lquido filtrado en un recipiente estril y rotular. 4. Colocar la porcin B directamente en un recipiente estril y rotular. 5. Incubar ambas porciones a 32,5C +/- 2,5C durante 24 horas. RESULTADOS Observar ambas porciones despus del periodo de incubacin y anotar sus observaciones. Aspecto de la porcin A: ______________________________________________

Aspecto de la porcin B: ______________________________________________

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CONCLUSIONES Anotar sus conclusiones __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________ __________________________________________________________________

BIBLIOGRAFA Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiologa. Manual de Mtodos Generales (segunda edicin). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela. Filter Types, Structure and Characteristics. Millipore. Agosto 2001. URL: http://www.millipore.com/catalogue.nsf/docs/C147 Madigan, M.; Martinko, J.; Parker, J. 2000. Biology of Microorganisms. Ninth edition. Prentice Hall. Inc. New Jersey. The Pharmacopeia of the United States of America. Sterilization and Sterility Assurance of Compendial Articles. Cap 1211. 32 Edition. Rockville: USP; 2008. Tortora G. J., B. R. Funke and Ch. L. Case 2007. Introduccin a la Microbiologa 9na Edicin. Editorial Mdica Panamericana.

Prof. Sofa Gutirrez de Gamboa Octubre 2001 Revisin 2008

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