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Cromatografa Lquida

Tipos
C. de reparto C. de adsorcin C. inica C. de exclusin por tamaos C. en capa fina

Eficiencia de la columna
Efecto del tamao de la partcula de relleno Ensanchamiento de banda extracolumna Hex = ( r2 u) / 24 DM
r = radio del tubo u = flujo lineal ( cm/s) DM = coeficiente de difusin del soluto en fase mvil

Eficiencia de la columna
Efecto del tamao de muestra

Instrumentacin

Instrumentacin
Tipos de elucin
Isocrtica En gradiente

Instrumentacin
Sistema de Bombeo
Deben generar presiones mayores a 6000 psi Flujo libre de pulsaciones Intervalo de caudales de 0,1 a 10 mL/min Control y reproducibilidad del caudal Componentes resistentes a la corrosin

Bombas ms empleadas
Bomba Recproca Ventajas Desventajas -Alta presin de salida - Flujo con pulsaciones -Pequeo volumen interno -Fcil adaptacin a elucin en gradiente -Caudal constante -Flujo independiente de la viscosidad -Libre de pulsaciones -Baratas -Libre de pulsaciones -Capacidad de solvente limitada -Incomodidad para el cambio de solvente -Limitada capacidad y presin de salida -Caudal dependiente de la viscosidad -No pueden emplearse para elucin en gradiente -Presin limitada a 2000 psi

Desplazamiento

Neumticas

Sistemas de inyeccin de muestra


Bucles de muestra ( 5 500 L) Vlvulas de inyeccin ( 0,5 5 L)

Columnas
Material: acero inoxidable o vidrio Longitud: de 10 a 30 cm Dimetro interno: 4 10 mm Tamaos de partcula de relleno: 3, 5 y 10 m Rellenos: Pelculares (pre-columnas) Partcula porosa

Pre-columnas
Se colocan antes de la columna para eliminar materia en suspensin y contaminantes, y para saturar la fase mvil con fase estacionaria

Termostatos
Regulan la temperatura de la columna desde la temperatura ambiente hasta 150 C

Detectores
Requisito adicional: volumen interno pequeo para evitar ensanchamiento de banda Tipos:
Los que responden a una propiedad de la fase mvil Indice de refraccin Constante dielectrica Responden a una propiedad del soluto Absorbancia (UV-Visible, IR) Fluorescencia Electroqumicos Espectrmetros de masa

Cromatografa de reparto
Tipos:
Fase inversa: Fase estacionaria no polar, fase mvil polar Fase normal: Fase estacionaria polar, fase mvil no polar

Cromatografa de adsorcin
Lquido - slido

Cromatografa de intercambio inico


Columnas rellenas con resinas de intercambio inico x RSO3-H+ + Mx+ (RSO3-)x Mx+ + xH+ x RN(CH3)3+ OH- + Ax- RN(CH3)3+ Ax- + xOH-