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INTODUO

4 Os microrganismos no crescem no ar.

4 Esporos so carreados pelo ar.

4 Clulas vegetativas so carreadas em partculas de poeira e gotculas de gua no ar.

4 Composio da atmosfera: 4 78% de nitrognio, 4 21% de oxignio, 4 1% de dixido de carbono e outros gases (nenio, argnio e hlio).

4 Partculas de p e gua (sob forma de vapor lquido ou cristais de gelo).

As condies fsico-qumicas da atmosfera no favorecem a sobrevivncia de microrganismos.

Temperatura, presso atmosfrica e concentrao de oxignio livre

Altitude

4 Microbiota do ar: 4 Transitria e varivel; 4 O nmero e o tipos de agentes contaminantes do ar so determinados pelas vrias fontes de contaminao existentes no ambiente; 4 Podem ser encontrados em suspenso, material particulado e gotas de gua; em

4 Transporte: atravs de ventos, massas de ar e turbulncias da atmosfera.

4 Bioaerossis: partculas biolgicas finas.

MICRORGANISMOS ENCONTRADOS NO AR
4 Variam em ambientes diferentes.

4 Fungos filamentosos.

Cladosporium

4 Bactrias.

Bacillus subtilis

Micrococcus

Algas, protozorios, leveduras e vrus tambm podem ser isolados do ar.

4 Fungos predominantes: Cladosporium, Alternaria, Penicillium, Aspergillus, Pullularia e Agaricus; esporos de bolores constituem a maior parte da microbiota area.

4 Bactrias: bacilos gram-positivos esporulados (Bacillus) e no-esporulados (Kurthia), bacilos gram-negativos

(Alcaligenes) e cocos gram-positivos (Micrococus e Sarcina).

Leveduras e actinomicetos tm sido detectados em alguns locais, mas em baixa porcentagem.

Origem dos microrganismos do ar


4 Solo: ventos. 4 gua: gotas dgua na superfcie de: 4 Oceanos. 4 Lagos. 4 Baas.

4 Irrigao com efluentes de esgoto.


Cana irrigada com efluente do esgoto domstico.

4 Debulhamento de vegetais.

4 Abatedouros.

Fatores que afetam a microbiota do ar


4 Umidade. 4 Temperatura. 4 Radiao. 4 Densidade populacional.

Microorganismos do ar externo (Atmosfera)


4 Superfcie da terra representa a principal fonte dos microrganismos. 4 Gotculas dgua produzidas pela ruptura de bolhas de ar.
Micrbios podem ser transportados pelo ar: bactrias, fungos e vrus podem viajar por milhares de quilmetros em partculas de poeira.

Transporte de microorganismos pela atmosfera


4 Microrganismos como vrus, bactrias e fungos podem pegar uma carona nas nuvens de poeira.
Imagem de satlite mostra uma nuvem de poeira saindo do Delta do Nilo rumo sia e Europa.

Nuvem de poeira parte da frica rumo ao nordeste do Brasil e Amaznia.

4 Instalaes industriais, agrcolas e municipais que produzem aerossis microbianos: 4 Irrigao de lavouras com efluentes de esgoto, mediante o uso de burrifadores. 4 Filtros gotejadores de estao de tratamento de esgotos. 4 Matadouros e instalaes de distribuio. 4 Incineradores mal operados e estaes de

tratamento de composto orgnico e lodo de esgoto.

4 Intensidade

da

contaminao

microbiana

influenciada por:

4 Mecanismos de disperso a partir da superfcie da terra. 4 A hora do dia. 4 A estao do ano. 4 Situaes de ordem climtica.

Microbiologia do ar das camadas mais altas: pesquisas eventuais.

4 A habilidade dos microrganismos em causar doenas depende da sobrevivncia e infectividade ao

hospedeiro suscetvel e tambm de parmetros ambientais como:

4 Umidade relativa. 4 Temperatura. 4 Radiao. 4 Tenso de oxignio. 4 Poluentes.

Microorganismos do ar interno
4 Fatores determinantes do grau de contaminao do ar: 4 Taxas de ventilao. 4 Nmero de pessoas que ocupam o ambiente. 4 Natureza e grau de atividade exercida. 4 Indivduos.

4 Microrganismos: expelidos em gotculas do nariz e da boca durante o espirro, tosse, ou at mesmo pelo ato de falar.

4 Dimenses das gotculas: 4 Faixa micromtrica: podem permanecer em

suspenso durante um tempo. 4 Faixa milimtrica: depositam rapidamente, como poeiras, em diversas superfcies.

4 A poeira pode ser veiculada pelo ar, nos perodos de atividade no interior do recinto ou atravs de correntes de ar. 4 A sobrevivncia dos microrganismos por tempo relativamente longo na poeira cria importantes riscos, particularmente em reas hospitalares. 4 So freqentemente encontrados: bacilos da tuberculose, bacilos da difteria e estreptococos hemolticos.
Tuberculose (Bacilo de Koch)
Corynebacterium diphtheriae

4 Atos domsticos: ex.: arrumar as camas e varrer o piso.

4 Muitas tcnicas laboratoriais produzem aerossis (finos borrifos que produzem gotculas capazes de permanecer em suspenso durante um certo tempo) contendo

microrganismos.

4 Partculas carregadas pelo ar (principal causa de problemas respiratrios): 4 Alergias. 4 Asma. 4 Doenas infecciosas do trato respiratrio. 4 Esporos de fungos: agentes de doenas de plantas. 4 Principal meio de disseminao de fungos

saprofticos.

4 BIOAEROSSOL: Microbiota dispersa no ar: Fungos, bactrias, vrus, polens, algas etc.

DOENAS HUMANAS VEICULADAS PELO AR

PATGENOS NO AR
4 Seres humanos podem expelir patgenos com gotculas de gua.

Os trabalhadores da rea de sade devem manipular cuidadosamente as secrees dos pacientes, para evitar a produo de aerossis de patgenos.

4 Grande nmero de infeces humanas so veiculadas pelo ar, nas quais o agente etiolgico penetra no hospedeiro atravs do trato respiratrio (doenas pulmonares).

4 Tendncia causar epidmica: aparecendo explosivamente e atingindo grande nmero de indivduos em curto espao de tempo.

4 Aumenta durante o outono e inverno (aumento do nmero de pessoas em ambientes confinados).

4 Contato direto com indivduos infectados: atravs das secrees do nariz e da garganta, disseminados por gotculas devido tosse, no espirro, na conversao, no ato de assoar o nariz.

4 Contato indireto: resduos infecciosos, vmitos ou artigos de pessoas infectadas.

4 Poucos microrganismos podem colonizar as vias areas e causar doenas. 4 Microrganismos so inalados com o ar e aspirados com secrees da faringe, podendo ter destinos diferentes: 4 Rapidamente eliminados do pulmo.

4 Alojados no trato respiratrio superior colonizando assintomaticamente essa rea.

4 Permanecer em regies que so normalmente estreis (abaixo da faringe) como observada em doenas pulmonares obstrudas crnicas.

4 Penetrar no epitlio e iniciar uma doena parenquial, como a pneumonia, ou podem invadir a corrente sangnea e causar uma doena sistmica.

Pneumonia

4 Os agentes etiolgicos de cerca de 1/3 dos casos de infeces respiratrias superiores so de natureza viral:

Rinovrus

Adenovrus

Herpes Parainfluenza

4 Bactrias: estreptococos; causam de resfriados at srias infeces pulmonares.

4 Fungos patognicos e alguns actinomicetos: causam micoses sistmicas ou profundas, graves ou fatais.

Histopatologia de paracoccidioidomicose (Paracoccidioides brasiliensis)

Doenas transmitidas pelo ar


4 Doenas de plantas: 4 Ventos na superfcie dos rgos atacados (parte area) ou na superfcie do solo (patgenos de razes). Ferrugem do caf

Hemileia vastatrix (Fungo)

4 Doenas do homem e dos animais:

4 Inalao

de

poeira

ou

gotculas

contendo

propgulos,

provenientes de:
Outras fontes: roupas, cama, solo.

Pessoas infectadas (diretamente).

Aerossis: Infeces respiratrias (secrees nasais, garganta).

4 Gotculas de 10 mm: 4 Inaladas. 4 Depositadas nos objetos. 4 Manuseio. 4 Ressuspenso. 4 Gotculas de 1 a 4 mm: inalao.

O sistema respiratrio dos seres humanos e as regies onde os microrganismos patognicos geralmente iniciam as infeces

Importantes doenas transmitidas de pessoa a pessoa pela inalao de partculas areas


Doenas virais Catapora (Varicela) Gripe (Influenza) Resfriado comum Sarampo Rubola Caxumba Varola Doenas bacterianas Coqueluche (Bordetella pertussis) Meningite (Neisseria spp.) Difteria (Corynebacterium diphtheriae) Pneumonia (Mycoplasma peneumoniae, Streptococcus spp.) Tuberculose/Lepra (Mycobacterium tuberculosis, M. leprae) Amigdalites (Streptococcus pyogenes) Impetigo (Staphylococcus aureus)

Outras doenas adquiridas pela inalao de partculas de fontes ambientais


Doena Fonte

Psitacose (Chlamydia psittaci) Gotculas de poeira oriundas de pssaros infectados (papagaios, pombos). Doena do Legionrio (Legionella pneumophila) Alveolite alrgica aguda (vrios fungos e actinomicetos) Aspergilose (Aspergillus fumigatus, A. flavus, A. niger) Histoplasmose (Histoplasma capsulatum) Coccidioidomicose (Coccidioides immitis) Gotculas de sistemas de ar condicionado, tanques de armazenamento de gua etc. onde a bactria cresce. Esporos de fungos ou de actinomicetos de matria orgnica em decomposio (compostos, armazenamento de gros, feno etc.). Esporos de fungos inalados de matria orgnica em decomposo. Esporos do fungo de excrementos de morcegos ou de pssaros. Esporos em poeira de regies desertas (Amrica Central, do Sul e do Norte), onde o fungo cresce no solo.

Vrus
4 Rhinovirus (resfriado comum). 4 Influenza (gripe comum). 4 Vrus Respiratrio Sincicial (bronquite e pneumonia). 4 Adenovirus (vias areas superiores: otite, faringite, amigdalite).

Bactrias Gram Negativas


4 Legionella pneumophyla (legionelose). 4 Haemophilus influenzae: Cocobacilos sem motilidade (meningite, infeces do ouvido mdio e, raramente, pneumonia).

Bactrias Gram Positivas


4 Staphylococcus (infeces hospitalares). 4 Streptococcus: diversidade de gnero complexo, (febre maior nmero e

doenas

escarlatina,

faringite,

laringite, pneumonia pneumoccica). 4 Mycoplasma pneumoniae (pneumonia branda).

Bactrias Gram Positivas - Actinomycetes


4 Apresentam filamentos freqentemente ramificados. 4 Filamentos formados por clulas procariticas,

dimetro muito inferior ao de fungos.

Actinomycetes - Principais gneros


4 Actinomyces (Actinomicose). 4 Norcadia (Infeco pulmonar). 4 Mycobacterium (Tuberculose pulmonar).

Actinomyces sp.

Mycobacterium tuberculosis

Fungos
4 Leveduras e fungos filamentosos esto presentes no ar. 4 Alm de alergnicos, so, em sua maioria, organismo oportunistas. 4 Pneumocystis spp., Cryptococcus spp. e Penicillium spp.: Infeces freqentes em pacientes com AIDS.

Penicillium spp.

Pneumocystis spp.

Cryptococcus spp.

Fungos
4 Stachybotrys chartarum: Hemorragia pulmonar fatal em lactentes.

Fungos
4 Rhizopus spp. e Mucor spp.: Pacientes com diabetes mellitus, leucemia ou pessoas sob tratamento com drogas

imunossupressoras.

Rhizopus spp.

Mucor spp.

Fungos
4 Aspergillus spp.: Pode atingir indivduos debilitados com doenas nos pulmes ou cncer.

Fungos
4 Cladosporium spp.: Raramente patognicos, podem causar infeces na pele, unhas ou trato respiratrio (podendo levar pneumonia caso no seja tratada).

TCNICAS DE ANLISE MICROBIOLGICA DO AR

4 Uma variedade de tcnicas tem sido desenvolvida com objetivo de se determinar o contedo

microbiano em: 4 Hospitais. 4 Escolas. 4 Locais pblicos e no ar livre (ETE e estaes de compostagem).

4Diversos instrumentos foram feitos para tais anlises:

4Aparelhos de impacto slido.

4Aparelhos de impacto lquido.

Avaliao da Microbiota do ar
4 H trs mtodos principais para a coleta de partculas que so usados em testes microbiolgicos:

impactao, filtragem e sedimentao.

4 Os

mtodos

de

impactao

filtragem

so

considerados tcnicas de amostragem ativa e exigem a coleta de um volume de ar conhecido.

4 O mtodo de sedimentao a coleta passiva de contaminao vivel no ar por deposio em uma placa de Petri aberta.

Aparelhos de impacto slido


4 Os microrganismos so colhidos diretamente na superfcie slida de um meio a base de gar ou de membranas filtrantes.

Aparelhos de impacto slido


4 Tcnica da sedimentao em placa.

4 Coletores do tipo crivo.

4 Tcnica da membrana filtrante.

4 Amostrador automtico de ar do tipo Surface Air System (SAS).

Tcnica da sedimentao em placa

4 Tcnica muito utilizada, porm no se pode avaliar o volume de ar que foi efetivamente analisado.

4 Obtm-se

uma

estimativa

aproximada

da

contaminao area e dos tipos de microrganismos presentes numa determinada rea.

Tcnica da sedimentao em placa

Tcnica da sedimentao em placa

Coletores do tipo crivo

Tcnica da membrana filtrante


4 Os aparelhos so semelhantes aos usados para anlise bacteriolgica de gua e apresentam a vantagem de reter todo tipo de partculas.

4 Essa

tcnica

permite

medir

volume

de

ar

amostrado e no indicada para amostras de ar muito contaminadas.

Tcnica da Membrana Filtrante

Contagem

Amostrador de Anderson

Tcnica da Membrana Filtrante


4 Membranas filtrantes.

4 Meios para membranas filtrantes.

Amostrador automtico de ar (SAS)

4 Ar aspirado num amostrador, a uma velocidade e tempo pr-fixados, atravs de um sistema mvel, que contm em seu interior uma placa de Petri (com meio de cultura especifico).

4 A placa retirada do aparelho, incubada.

4 Contagem e identificao dos microrganismos.

Amostrador automtico de ar (SAS)


4 Sistema porttil.

4 Tem sido amplamente empregado no controle microbiolgico da qualidade do ar de ambientes hospitalares, industrias farmacuticas e de cosmticos em geral, escolas, ETE, etc.

Amostragem por impactao em membrana

Amostrador automtico de ar (SAS)

Amostrador Automtico de Ar (SAS)

Amostrador de Andersen

Amostradores em cascata

4A

ANVISA

recomenda impactador

utilizar-se

em cascata, de 1, de 2 ou de 6 estgios, para a coleta e anlise de em

bioaerossol ambientes interiores.

Impacto - Furo
Amostrador de Andersen - 1 estgio

Amostrador de Andersen

Placas aps a incubao

AMOSTRADOR DE ANDERSEN DE 6 ESTGIOS

Placas removidas de um amostrador de ar Andersen e incubadas a 37 C. P: placa do fundo do aparelho. As colnias so do actinomiceto termoflico (Faenia rectivirgula ou Thermoactinomyces vulgaris) que causa a "doena do pulmo do fazendeiro". Q e R: placas da regio intermediria do aparelho, com espcies de Aspergillus e Penicillium que se desenvolveram a partir de esporos de cerca de 3-5 mm de dimetro.

Amostragem de microrganismos
4 Considera-se que os microorganismos dispersos no ar esto suportados no material particulado.

Aparelhos de impacto lquido


4 A atmosfera de ar, sob a forma de fino borrifo, passa atravs de um caldo nutritivo ou outro lquido, onde os microrganismos so retidos.

4 Alquotas do lquidos so plaqueadas ou cultivadas, a fim de se determinar o contedo microbiano.

Plaqueamento

4 Partculas contaminadas so coletadas. 4 Meio incubado e cultivado para verificar a presena de microrganismos. 4 Tipo de coletor o frasco Impinger (semelhante tcnica de membranas filtrantes).

Amostrador do tipo impinger


4 Soluo estril: gua, leo mineral ou glicerol.

4 Consideraes: 4 Reteno no total. 4 Eficincias em amostradores . 4 Destruio de certas espcies. 4 Mais de uma clula por partcula. 4 Meio de cultura no de garante todas o as

desenvolvimento espcies.

Amostrador do tipo impinger

Amostrador do tipo impinger

Clculo da concentrao de microorganismos no ar

CONTROLE DE MICRORGANISMOS NO AR

Controle das populaes microbianas do ar


4 Medidas de controle de microrganismos no ar dependem muito da finalidade a que se destinam: 4 Ambientes fechados: simples circulao do ar. 4 Ambiente hospitalar: circulao do ar, desinfeco e limpeza. 4 Microbiologia industrial: se necessita de uma completa remoo dos germes, deve-se lanar mo de

mecanismos de esterilizao ou de desinfeco.

Mtodos mais utilizados na desinfeco de ambientes


4 Vaporizao do ar (nebulizao). 4 Desinfeco por radiaes. 4 Filtrao. 4 Aquecimento. 4 Desinfetantes/esterilizantes.

Mtodos de controle dos microrganismos do ar


4 Agentes qumicos, radiao, filtrao e fluxo laminar.

Ingrediente ativo: Trietilenoglicol 5,40%.

Radiao Ultravioleta

Sistema de Fluxo Laminar: filtro de acetato de celulose.

Vaporizao do ar (nebulizao)
4 Com substncias germicidas eficiente na

desinfeco do ar atmosfrico.

4 Composto qumico dispersado em aerossol e manifesta sua ao antimicrobiana atravs do contato com as partculas contaminadas.

4 Exige grandes cuidados.

Aparelhos de desinfeco e Sistemas de Aplicao

Desinfeco de Espaos

Sistema de Vaporizao

Desinfeco por radiaes


4 Ondas snicas, raios catdicos de alta energia, raios gama e ultravioleta.

4 Deve-se levar me conta a eficincia de destruio dos germes, custo envolvido na obteno da radiao e a periculosidade.

4 Utilizadas para desinfetar o ar condicionado em dutos antes de chegar ao local desejado.

As ondas ultra-snicas so normalmente utilizadas para limpeza e desinfeco de ambientes industriais.

Raios catdicos pode ser compreendido como sendo um feixe de partculas carregadas de carga eltrica negativa.

Os raios gama, devido alta energia que possuem, so capazes de penetrar profundamente na matria.

A radiao ultravioleta no pode ser utilizada como processo de esterilizao. Fatores como matria orgnica, comprimento de onda, tipo de material, tipo de microrganismo e intensidade da radiao interferem na sua ao germicida.

Filtrao
4 Camada porosa, que permitem a filtrao de grandes quantidades de ar. 4 Sistema de fluxo laminar: filtros High Efficiency Particulate Air (HEPA). 4 Eficaz na remoo de partculas to pequenas como 0,3 mm. 4 Vrias aplicaes industriais.

Capela de Fluxo Laminar

Aquecimento
4 Mtodo de esterilizao que deve levar em conta o tempo e a temperatura de exposio.

4 Aquecimento

direto,

aquecimento

por

meio

de

resistncias eltricas e aquecimento por meio de compresso.

Radiao

Esterilizante

4 Registrado em 1948 nos EUA como um pesticida antimicrobiano. 4 Utilizado para esterilizar material hospitalar, tratar processados e locais de manuseio e preparo de alimentos. temperos

4 Usado diretamente no estado gasoso, pode agir como desinfetante, fumigante, esterilizante e inseticida. 4 Em 2001, foi usado para esterilizar prdios nos EUA contaminados com esporos de Bacillus anthracis, agente do antraz.

4 Efeitos adversos na sade podem incluir doenas ou respostas alrgicas. Embora no existam padres para regular a contaminao microbiana, algumas organizaes apresentam sugestes para os limites aceitveis:

Bioaerossis Amostras de superfcie

Amostras de gua

menos de 1000 UFC/m3 (OSHA: Field Technical Manual) menos de 100 UFC/in2 em dutos de ventilao (NADCA) superfcie menos de 10.000 UFC/mL (OSHA)

OSHA = Occupational Safety & Health Administration, U.S. Department of Labor NADCA = National Air Duct Cleaners Association Fonte: http://www.eagleih.com/microbiology.html

RE 09 da ANVISA (BRASIL, 2003)


4 Valor mximo recomendado em 750 ufc/m3 de fungos, para amostragem ativa. 4 I/E < 1,5 4 onde: 4 I = quantidade de fungos no ambiente interior. 4 E = quantidade de fungos no ambiente exterior. ANVISA, Resoluo (RE) no 9 de 2003. Padres Referenciais de Qualidade do Ar Interior, em ambientes climatizados artificialmente de uso pblico e coletivo.