Evaluacin del uso de enterofagos y colifagos para detectar contaminacin fecal en aguas superficiales tropicales

Nicolle E. Lebrn Dr. Javier Arce Nazario 17 de mayo de 2013

Objetivos principales
Analizar aguas superficiales mediante el uso de enterofagos y colifagos como indicadores de contaminacin fecal Comparar la efectividad del mtodo de Enterofago / Colifago con el mtodo de Colilert / Enterolert

Calidad de agua

Qu son enterofagos y colifagos?

ENTEROFAGOS: Un grupo de bacterifagos que infectan especficamente a Enterococcus faecalis COLIFAGOS: Un grupo de bacterifagos que infectan a Escherichia coli

Metodologa

PREPARACIN DE LOS MEDIOS PREPARACIN DE LOS HOSPEDEROS

RECOGER MUESTRAS DE AGUA

PROCEDIMIENTO ENTEROFAGO/COLIFAGO MTODO DE ENTEROLERT/COLILERT VER RESULTADOS

Preparacin de los medios

Crecimiento del hospedero
Azide Dextrose TSB

Preparacin de los hospederos

Inoculacin de bacterias
Azide Dextrose E. faecalis TSB E. coli

Incubadora (24 horas / 37C)

Preparacin de los medios

Procedimiento Enterofago/Colifago
ENTEROFAGO E. faecalis COLIFAGO E. coli

Agar + TSB

Recoger muestras de agua

Un control negativo y muestras frescas
Control negativo (-): se recoge de un punto de muestreo y se autoclavea

Procedimiento Enterofago/Colifago

Materiales para analizar las muestras de agua:

Muestras de agua (100mL cada una) Medios preparados de Enterofago y Colifago (50mL cada uno)

Hospederos: E. faecalis (10mL cada uno) y E. coli (1mL cada uno)

Errores que pueden afectar los resultados

Contaminacin de las bacterias
Hablando Condensacin en las placas Otros factores externos

Temperatura Utilizar material viejo No aadir el hospedero al medio

Mtodo de Enterolert/Colilert
35C

Colilert

Quanti-Tray

41C

Enterolert

RESULTADOS PRELIMINARES

Procedimiento de Enterofago/ Colifago (sbado, 4 de mayo de 2013) Lugar de la muestra Entrada al Sector Los Cedros Quebrada de Culebra Alto Borde entre Guayama y Cayey Sector Los Cedros Enterofago (PFU/50mL) 0 0 0 0 Colifago (PFU/50mL) 127 0 1 52

Mtodo de Colilert y Enterolert (sbado, 4 de mayo de 2013) Lugar de la muestra Entrada al Sector Los Cedros MPN (Total coli) >2,419.6 >2,419.6 >2,419.6 >2,419.6 MPN (E. coli) >2,419.6 7.4 26.2 51.2 MPN (Enterococci) 1,046.2 410.6 90.8 579.4

Quebrada de Culebra Alto

Borde entre Guayama y Cayey Sector Los Cedros

Jueves, 9 de mayo de 2013 Lugar de la muestra Ro La Plata (Puente 171) Quebrada detrs de la universidad UPR-Cayey (origen) Ro al lado de la plaza de Cayey UPR-Cayey (bambs) UPR-Cayey (detrs de la biblioteca) UPR-Cayey (al lado de la cafetera)

Procedimiento de Enterofago/ Colifago (viernes, 10 de mayo de 2013) Lugar de la muestra Ro La Plata (Puente 171) Quebrada detrs de la universidad UPR-Cayey (origen) Ro al lado de la plaza de Cayey UPR-Cayey (bambs) UPR-Cayey (detrs de la biblioteca) UPR-Cayey (al lado de la cafetera) MPN (Total Coli) >2,419.6 >2,419.6 >2,419.6

Enterofago (PFU/50mL)
122 N/A N/A 1 15 90 11

Colifago (PFU/50mL)
N/A 13 42 35 30 42 15 MPN (Enterococci) >2,419.6 >2,419.6 2,419.6

Mtodo de Colilert y Enterolert (viernes, 10 de mayo de 2013) Lugar de la muestra Ro La Plata (Puente 171) Quebrada detrs de la universidad UPR-Cayey (origen) MPN (E. coli) >2,419.6 >2,419.6 >2,419.6

Pasos a seguir
Reducir lo ms posible los errores de procedimiento Recoger ms muestras de ros en reas urbanas y rurales Incorporar pruebas qumicas a la metodologa

Agradecimientos

NIH BRIC Grant # XXXXX NSF CAREER Grant # XXXX Departamento de Biologa y el Insituto de Investigaciones Interdisciplinarias de Puerto Rico