Organismos Modificados Genticamente y Baculovirus

Definicin
Un organismo genticamente modificado es cualquier organismo capaz de reproducirse cuyo material gentico ha sido modificado de manera artificial.

Organismos Modificados Genticamente

Todo lo que contiene ADN, se puede modificar por la ingeniera gentica. La ingeniera gentica es la que posibilita esta rea de estudio. Ejemplos de organismos modificados genticamente. Tomate E. coli Ratones Maz

Aplicaciones
En plantas se utiliza para crear cultivos resistentes a herbicidas, tambin se pueden usar para que contengan mas nutrientes. En microorganismos se ha utilizado para produccin de insulina, hormona de crecimiento humano, factores coagulacin para tratamientos para pacientes hemoflicos. En insectos se ha utilizado para crear mosquitos resistentes a la malaria.

Aplicaciones
En mamferos se utilizan para:
Crear modelos de distintas enfermedades. Produccin de bienes (seda) Disminuir las interacciones negativas con humanos (perros, gatos) Mejorar la produccin y/o el crecimiento Mejorar la salud de estos animales

Historia
Gregor Mendel (1822-1884) Utilizo guisantes para estudiar las caractersticas heredadas. De sus estudios surgi la gentica mendeliana, o las leyes de Mendel. Publico sus estudios 1866.

Historia
Friedrich Miescher (1844-1895) Analizaba los restos de pus de los desechos quirrgicos, aislando los ncleos de los glbulos blancos. De estos ncleos extraa una sustancia cida y cargada de fsforo a la que denomin "nuclena". Cuando trato los ncleos aislados con una solucin alcalina y luego la acidifico, observo un precipitado. El anlisis de este precipitado mostr que se trataba de un material complejo que contena nitrgeno y fsforo, entre otros. Las proporciones eran diferentes a cualquier otro material biolgico estudiado por lo que concluyo que haba aislado un componente biolgico no descrito previamente, asociado casi exclusivamente con el ncleo. Este componente biolgico es el ADN.

Historia
Albrecht Kossel (1853-1927) Descubre los componentes del ADN, citosina, guanina, timina, adenina. Tambin descubri uracilo. Oswald Avery (1877-1955) y Maclyn McCarty (1911-2005) Descubren que el ADN, es el responsable de transmitir esa informacin hereditaria, y los genes y los cromosomas estn compuesto de el.

Historia
James Watson (1926) y Francis Crick (19142004)

Historia
En 1971, Paul Berg y su equipo de trabajo sugirieron un experimento donde se introduca ADN de un mono(SV40) en E. coli, utilizando un virus. Esto corresponde a la aparicin del ADN recombinante. En 1975, establecen las primeras guas de como se debe trabajar este campo. En 1978, Genetech comienza a producir insulina utilizando ingeniera gentica. Tambin lograron sintetizar la hormona del crecimiento humano.

Historia
En 1982,Monsanto comienza a inyectar somatotropina bovina a vacas para aumentar su produccin de leche. En 1983, 4 grupos distintos presentan plantas con genes de bacterias. Entre 1986 y 1987 comienzan las pruebas de campo en plantas. En 1992, Flavr Savr es aprobado por FDA, y establecen que los productos GM no son nocivos para los humanos.

Historia
En 1997, la Unin Europea establece que se tienen que identificar los productos GM. En 1999, comienza a dominar los cultivos GM. En 2003, se observa la primera sper plaga, las plantas que contienen Bt no resisten las plagas. En 2010, el FDA recibe una solicitud para el consumo humano del un animal genticamente modificado. En 2011, se lleva conduce un estudio en Quebec, donde se encontr que una mujer embarazada que contenga Bt en la sangre le pasara esas toxinas al feto.

Presente
93% de la soja sembrada en los EE.UU. Es modificada genticamente. 86% del maz sembrado en los EE.UU. entra en la categora de un GM.

Ventajas
Reduce el uso de pesticidas y otros productos qumicos txicos. Mejor manejo en produccin de alimentos. Control de alrgenos. Aumento de la nutricin por alimento. Aumento en la produccin de alimentos. Aplicaciones en medicina.

Desventajas
En 2012, se publico un estudio en Francia donde alimentaron con productos GM a ratones por 90 das. Al terminar el estudio la incidencia de tumores en los ratones aument drsticamente. En 1999, Celera intent patentizar algunos de los genes del genoma humano. El caso de Jesse Gelsinger: sufra una deficiencia de la enzima ornitina transcarbamilasa; se utilizo terapia gentica y esta le causo la muerte. Resistencia a plaguicidas y herbicidas.

Tcnicas
ADN recombinante Microinyecciones Electroporacin Biobalistica

ADN Recombinante

Microinyeccin

Electroporacin

Biobalistica

Baculovirus: Introduccin
Se describe por primera vez alrededor de los 1500. En los 1930 se comenz a utilizar en los EEUU como bioplaguicida. En 1990 comienzan las investigaciones utilizando la ingeniera gentica. Permite sintetizar protenas que podran ser letales en otros organismos (sntesis de la vacuna del H5N1).

Infeccin del baculovirus al insecto

Patgeno de Lepidoptera Los hospederos se convierten en una estructura pegajosa compuesta por polihedrina. La polihedrina no es vital y puede sustituirse por protenas de inters antes que clulas del hospedero mueran.

Infeccin del baculovirus al insecto en la naturaleza

Baculovirus
ADN circular Estructura de varilla El ciclo de vida esta compuesto por dos formas. Virus derivados ocluidos (ODV) Virus de gemacin(BV)

Ciclo de Vida

Baculovirus: Introduccin
Dos de los Baculovirus ms comunmente aislados y utilizados en la expresin de genes son:

Virus de la poliedrosis nuclear (AcMNPV) de Autographa californica Virus de la poliedrosis nuclear (BmNPV) de Bombyx mori (gusano de seda)

El sistema de expresin del Baculovirus (BEVS)

BEVS es usado para expresar protenas en clulas. La expresin de la protena de inters se controla utilizando el promotor de polihedrina del Baculovirus (pPolh).

Tcnica de recombinacin de Baculovirus

Produccin del vector recombinante

Tcnica de recombinacin de Baculovirus

Insercin del vector a las clulas del insecto

Tcnica de recombinacin de Baculovirus

Produccin del Baculovirus recombinante extracelular

Tcnica de recombinacin de Baculovirus

Amplificacin del virus para creacin del stock Infeccin de las clulas para produccin de la protena recombinante

Ventajas de BEVS
Tamao ilimitado de los insertos de ADN Expresin simultanea de multiples genes. Mtodos simples de obtencin y seleccin de las proteinas recombinantes.

Altos niveles de expresin Actividad funcional y modificaciones posttraduccin. Incapacidad de replicar en clulas de mamferos.
Se pueden congelar.

Modificaciones postraduccionales
Las clulas de insecto son capaces de lidiar con modificaciones postraduccionales como: Clivaje de pptido seal Fosforilacin N y O glicosilaciones Miristilacin Plegamiento, formacin de puentes S-S, oligomerizacin Modificaciones lipdicas

Desventajas
Clase y grado de modificacin puede no ser idntico al encontrado en la especie o tejido original. El muy alto nivel de expresin puede disminuir la capacidad de la clula de modificar correctamente el producto. Secrecin, fosforilacin y glicosilacin pueden verse particularmente afectadas. Algunos de estos inconvenientes pueden resolverse usando promotores ms tempranos.

Desventajas
Crecimiento lento Medio de cultivo costoso La posibilidad de una modificacin postraduccional resulta tediosa Costoso como plaguicida

reas de aplicacin del BEVS

Biomdicas: Protenas activadoras de sistema inmunolgico (vacunas) Agrcolas: Bioinsecticidas Investigacin y desarrollo (R&D)

Baculovirus en la industria biomdica

Cervarix
Glaxo Smith Kline en Londres. Vacuna para el papiloma humano . Clulas derivadas de Trichoplusia ni. HPV tipo 16 y 18.

Baculovirus en la industria biomdica

Provenge
Dendreon Corp. de Seattle. Cncer de Prstata Fosfatasa cida recombinante Necesita un componente del paciente antes de su fabricacin (clulas inmunes del paciente).

Baculovirus en la industria biomdica

Vacunas
Protein Sciences Corporation Gripe aviaria (H5N1) Tenia una tasa de muerte mayor de un 70% Antgeno HA cDNA codificado del gen hemaglutinado (HA)

Baculovirus en la agricultura
Bioplaguicida Gypchek-Se utiliza para la erradicacin de los insectos del genero Lymantria y especie dispar. Lo utiliza de servicio de bosques de los Estados Unidos. Se utiliza en un sistema integrado de plagas.

Baculovirus en la agricultura
Bioplaguicida Se pude utilizar en conjunto con plantas transgnicas, y qumicos para crear un sistema ms efectivo. Los baculovirus no representan riesgo para las plantas ya que el virus no las afecta.

Baculovirus en la agricultura
Bioplaguicida

Los baculovirus representan una alternativa al uso de qumicos como pesticidas. Tienen el potencial de alterarse genticamente para afectar una amplia seleccin de insectos. Una ventaja de los baculovirus es que el virus se transmite dentro de la poblacin.

Baculovirus en la agricultura
Bioplaguicida
Una desventaja es que los organismo pueden desarrollar resistencia al virus. Para evitar que se desarrolle la resistencia al virus se utilizan los sistemas integrados de control de plagas. Los virus se encuentran en todos lugares facilitando la propagacin de ellos dentro de la poblacin de insectos.

Baculovirus: mercado agrcola

COMMODITY
Apple, pear, walnut and plum Cabbage, tomatoes, cotto

INSECT PEST
Codling moth
Cabbage moth, American bollworm, diamondback moth, potato tuber moth

VIRUS USED
Codling moth granulosis virus Cabbage army worm nuclear polyhedrosis virus Spodoptera littoralis nuclear polyhedrosis virus Helicoverpa zea nuclear polyhedrosis virus Spodoptera exigua nuclear polyhedrosis virus Anagrapha falcifera nuclear polyhedrosis virus

VIRUS PRODUCT
Cyd-Xe Mamestrin* Spodopterin Gemstar LC, Biotrol, Elcar Spod-X none at present Gusano Biological Pesticide TM Biocontrol Gypchek

Cotton, corn, tomatoes Spodoptera littoralis Cotton and vegetables Vegetable crops, greenhouse flower Vegetables Alfalfa and other crops Forest Habitat, Lumber Forest Habitat, Lumber
Tobacco budworm Helicoverpa zea

Beet armyworm (Spodoptera exigua) Celery looper (Anagrapha falcifera)

Alfalfa looper Autographa californica (Autographa californica) nuclear polyhedrosis virus

Douglas fir tussock moth (Orgyia psuedotsugata) Orgyia psuedotsugata nuclear polyhedrosis virus

Gypsy moth (Lymantria dispar)

Lymantria dispar nuclear polyhedrosis viru

Baculovirus: mercado agrcola

Conclusin
Los organismos genticamente modificados tienen gran potencial para mejorar la calidad de vida y superar una gran cantidad de problemas. De igual manera pueden ser desastrosos para el mundo.

Bibliografia
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