Kratak podsetnik osnovne histoloke tehnike

Fiksacija tkiva Tkivo je fiksirano u 4% vodenom rastvoru formaldehida ( nainjenog od 1 dela 40% formaldehida i 9 delova H2O) Dehidratacija tkiva Pre poetka dehidratacije iseak tkiva se 10-15min ispira u mlazu vode sa esme. Staviti u plastinu boicu koja ima improvizovani otvor zatvoren gazom da nebi iseak ispao u mlazu vode. Nakon toga se iseak ocedi na papiru, stavi u novu plastinu boicu i obavezno na njoj oznai broj preparata. Boica se zatvori poklopcem. Potom se moe otpoeti sa dehidratacijom po sledeem protokolu: 1. 97% etil - alkohol br. 1 2. 97% etil - alkohol br.2 3. Izopropil - alkohol br 1. : 6h (npr. oko 14h) iseak staviti u 4. Izopropil - alkohol br. 2 : 24h 24h staviti izjutra (npr. oko 8h) i potom nakon i ostaviti do sutradan ujutru.

Nakon to je iseak bio u izopropil-alkoholu br.2 do sutradan ujutru, izliti iz plastine boice izopropil, iseak ocediti na papiru, vratiti ga u boicu i iz termostata naliti na njega parafin i ostaviti u termostatu do sutradan ujutru. Kalupljenje Prvo se na malom papiriu napie oznaka preparata, potom se pomou metalnih ploica naini modlica u koju e se izliti kalup. Najpre se do pola modlice nalije parafin, potom se paljivo pincetom uzme iseak i postavi u modlicu, a zatim se nalije parafin do vrha modlice i odozgo stavi papiri na kome pie oznaka preparata. Kalup se na sobnoj temperaturi stegne za nekih 15-20 minuta, zatim se odvoji od metalnih ploica modlice i spreman je za seenje na mikrotomu. Primer postupka: ponedeljak: oko 8h , isprati iseak 15-ak min., potom ocediti i staviti u 97% etil alkohol br. 1 utorak: oko 8h odliti etil-alkohol u bocu za korieni etil-alkohol i naliti novi 97% etil - alkohol br. 2 sreda: oko 8h odliti etil-alkohol, naliti Izopropil - alkohol br 1., potom oko 14h odliti izopropil u bocu za korieni i naliti novi Izopropil - alkohol br 2, i ostaviti do sutradan ujutru. etvrtak: oko 8h odliti izopropil u bocu za korieni, iseak ocediti na papiriu, vratiti u boicu i naliti otopljeni parafin iz termostata. Boicu ostaviti do sutradan ujutru u termostatu. petak: ujutru oko 8h, ukalupiti preparat! Prof. dr Duan Laloevi

student demonstrator: Ivan apo