Bioqumica I 2do.

cuatrimestre 2004

Trabajo Prctico Caracterizacin de hidratos de carbono

OBJETIVO: Identificar el azcar presente en distintas soluciones problema, aplicando reacciones que reconocen determinadas propiedades de los azcares. Esquema de identificacin: (- !o azcar "olisc#(* +zcar ,e#lin-(* /eductor %eli)anoff(* ,ructosa I T!O"#CCI$ : 0a caracterstica qumica principal de los #idratos de carbono es la presencia de un -rupo carbonilo (alde#do o cetona ( de )arios -rupos #idro1ilo. 0os monosac2ridos en medio 2cido fuerte se des#idratan para dar furfurales$
HO H C CH HOCH2 OH OH CH HC O OH H H2SO4 Calor CH2OH O O H 3 H2o

(- !o reductor$ %acarosa &idr'lisis ( %eli)anoff (- .lucosa

Glucosa HO H C OH CH

Hidroximetil-Furfural

H2SO4 Calor HO O O H

CH O CH2 HO HO H

3 H2o

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4n el caso de oli-o ( polisac2ridos, el medio 2cido cataliza la #idr'lisis de los enlaces -licosdicos, por lo que las reacciones tambi5n son )2lidas. 0os furfurales se condensan con di)ersos fenoles ( aminas dando productos coloreados. 4n la reacci'n de "olis#, el a-re-ado de 2cido sulfrico concentrado a una disoluci'n de azcar pro)oca la des#idrataci'n del -lcido en la interfase, para dar un anillo de furfural o #idro1imetilfurfural que reacciona con -naftol, para dar un producto de color prpura. 6sta es una prueba -eneral de #idratos de carbono.

0as cetosas se des#idratan m2s r2pidamente que las aldosas. 6ste es el fundamento de la prueba de %eli)anoff, el furfural formado reacciona con resorcinol para dar un producto coloreado. 7on cetosas se obser)a aparici'n de color muc#o m2s r2pido que con aldosas. 4sta prueba se usa para distin-uir cetosas.
O

HO HO O O H +

OH O HO Resorcinol O

8tra propiedad apro)ec#ada para la identificaci'n de azcares es el poder reductor. 4l -rupo carbonilo de los -lcidos es o1idado a carbo1ilo por a-entes o1idantes sua)es, el m2s empleado es el cati'n 7u2*, cu(as sales son de color azul, 5ste i'n se reduce a 7u*, que forma un precipitado ro9izo de 7u28. 6ste es el fundamento de la reacci'n de ,e#lin-, que se #ace en medio b2sico fuerte 2

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(!a8& , lo que requiere la presencia del tartrato como estabilizador del 7u2*, al formar un comple9o, de lo contrario se formara 7u(8& 2 que es insoluble. 4l -rupo reaccionante es el alde#ido de la aldosa, sin embar-o, las cetosas en condiciones basicas se tautomerizan a aldosas, debido a un equilibrio ceto-enol catalizado por el medio basico. 4n el caso de la fructosa, esta se isomeriza a .lucosa ( "anosa, se-n el esquema indicado mas aba9o. O%idacin de& '&dehido:

Equi&ibrio ceto(eno& )ara &a *ructosa en medio basico:

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Com)&ejo Trartrato(Cobre:

P!EP'!'CI$ "E !E'CTIVO+: !eacti,o de -o&isch: ;isol)er 0.< - de -naftol en 30 ml de etanol =<>. +lmacenar prote-ido de la luz, a temperatura ambiente. !eacti,o de *eh&in.: "ezclar )olmenes i-uales de los dos reacti)os$ ,e#lin- +$ disol)er ? - de sulfato cprico mono#idrato en 300 ml de a-ua destilada. ,e#lin- B$ disol)er :< - de tartrato de sodio ( 30 - de #idr'1ido de sodio en 300 ml de a-ua destilada. +-itar ( calentar a ebullici'n durante 3 minuto. !eacti,o de +e&i,anoff: ;isol)er 0.0< - de resorcina en 300 ml de &7l :". +lmacenar en oscuridad.

P!OCE"I-IE TO: @odas las reacciones se #ar2n en tubos de ensa(o. 4s esencial que el calentamiento a llama directa se #a-a con cuidado, para e)itar pro(ecciones.

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!eaccin de -o&isch: + 2 ml de soluci'n de azcar a-re-arle 2 -otas de reacti)o de "olisc#. 7on pipeta Aasteur de9ar resbalar por la pared del tubo 2 ml de 2cido sulfrico concentrado, sin mezclar, para que se forme una capa en el fondo del tubo. Aositi)o$ anillo )ioleta oscuro en la interfase. /Cuidado con e& +u&f0rico1112 !eaccin de *eh&in.: + 3 ml de la soluci'n de azcar a-re-arle 2 -otas de reacti)o de ,e#lin- ( calentar a ebullici'n por 3 minuto. Aositi)o$ precipitado naran9a a ro9o. Prueba de +e&i,anoff: + 3 ml de soluci'n de azcar a-re-arle 3 ml de reacti)o de %eli)anoff. 7alentar a ebullici'n por 3 minuto. Aositi)o$ color ro9o. 3idr&isis cida de un disacrido: "ezclar 3 ml de soluci'n de azcar con 3 ml de &7l 0,<! ( #er)ir por 3 minuto. 0ue-o #acer la prueba de %eli)anoff.

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