QBQ2457 Tecnologia do DNA Recombinante

04/08/2011

Exerccios 1 - Estrutura dos cidos nuclicos e replicao de DNA 1. RNA facilmente hidrolisado por lcali, enquanto o DNA no. Por que? 2. Uma molcula de cido nuclico tem a composio de bases abaixo. O que voc pode afirmar sobre esta molcula? C = 24,1% G = 18,5% T = 24,6% A = 32,8% 3. possvel replicar fragmentos pequenos de DNA in vitro, fornecendo as enzimas e reagentes necessrios. a. Cite 4 enzimas ou reagentes que seriam necessrios para se replicar um fragmento pequeno de DNA in vitro. b. Qual seria a consequncia de se misturar dideoxinucleotdeos (estrutura geral abaixo) na reao?

4. Descreva o experimento de Meselton-Stahl. Qual seria o resultado deste experimento se a replicao do DNA fosse conservativa? E se fosse dispersiva? 5. Se, em um experimento, extrato de E. coli for incubado com uma mistura de dATP, dTTP, dGTP e dCTP, todos marcados com 32P no grupo fosfato da posio , considere: a. Se qualquer dos nucleotdeos for omitido da reao, radioatividade vai ser incorporada ao DNA? Explique. 32 b. P seria incorporado no DNA se somente dTTP fosse marcado? Explique. c. Radioatividade seria incorporada ao DNA se 32P estivesse nas posies ou dos desoxiribonucleotdeos? Explique. 6. Considerando que o cromossomo de E. coli contm 4.639.221 bp: a. Quantas voltas da dupla hlice devem ser desenroladas durante a replicao do cromossomo? b. Assumindo que a replicao do cromossomo de E. coli ocorre a uma velocidade de 1.000 bp/s, quanto tempo levaria para replicar o DNA cromossomal a 37 C se 2 forquilhas de replicao fossem iniciadas na origem de replicao? c. Como voc explicaria o fato de que as clulas de E. coli podem se dividir a cada 20 min?