Professional Documents
Culture Documents
DANIELA TRIFAN
ETIMOLOGIE:
Termenul de ,,ameliorare provine din latinescul ad = la i melior = mai bine, avnd nelesul de mbuntire.
genetica,
fitotehnia
TERMENI DE SPECIALITATE:
Individul este unitatea biologic elementar a unei populaii, al crui
genotip are o manifestare fenotipic distinct, condiionat de relaiile dintre gene i condiiile de mediu.
Reproducerea este fenomenul prin care ntr-o populaie apar noi indivizi (generaia filial) dintr-o prim generaie (parental).
nmulirea este fenomenul prin care are loc sporirea numrului de indivizi
dintr-o populaie, pe cale sexuat (amfimictic) sau pe cale asexuat (apomictic sau apomixie) - prin agamospermie (seminele se formeaz n afara procesului de fecundare), nmulire vegetativ (prin diferite organe vegetative: tuberculi, bulbi, lstari, drajoni sau prin microclonare de celule, esuturi sau organe) sau prin transplantare (altoire).
Programul de ameliorare
Programul de ameliorare definete cadrul tiinific de desfurare a lucrrilor, stabilete natura acestor lucrri, ealonarea lor n timp i spaiu, metodologia de adoptat i estimeaz mijloacele materiale (utilaje, aparatur, suprafee de teren, fonduri bneti etc.) i forele umane necesare realizrii aciunilor respective. Programele de ameliorare se realizeaz pentru fiecare specie n parte, urmrindu-se studierea i sporirea variabilitii ntr-o populaie, urmate de alegerea i nmulirea acelor plante care satisfac cerinele programului.
Principalele etape sau faze de desfurare ale unui program de ameliorare sunt (dup Demarly, 1977; Gologan i Dorneanu, 1981):
- colecionarea materialului biologic i studierea variabilitii acestuia; - crearea de material biologic nou prin hibridare, mutagenez sau alte metode i evaluarea acestuia; - aplicarea seleciei n populaiile cu variabilitate existent sau creat util i obinerea de populaii noi, uniforme genetic; aceast faz se poate finaliza cu obinerea de populaii ce ndeplinesc condiiile de cultivar sau vor fi folosite n alte lucrri de ameliorare (prin hibridare, mutagenez etc.); obinerea i finalizarea populaiilor ce ndeplinesc condiiile de cultivar; - verificarea condiiilor de distinctibilitate, omogenitate i stabilitate (DOS) i a performanelor productive i biologice n diferite zone de cultur; - testarea i nregistrarea noului cultivar de ctre un organism guvernamental specializat (n Romnia, Institutul de Stat pentru Testarea i nregistrarea Soiurilor ISTIS); - selecia conservativ, obinerea seminei de baz a cultivarului i nmulirea acesteia.
d) Calitatea
e) Rezistena la boli i duntori f) Adaptabilitatea la diferite condiii agroecologice : rezistena la ger, rezistena la secet, ari i istvire, rezistena la cdere. g) Pretabilitatea la recoltarea mecanizat: uniformitatea, rezistena la scuturare h) Conjunctura de piaa
Organizarea propriu-zis a procesului de ameliorare Compartimentele procesului de ameliorare cuprinde urmtoarele cmpuri : A. Cmpul de colecie - Organizarea i studiul coleciilor de populaii, soiuri i hibrizi B. Cmpul de genitori - Meninerea, nmulirea seminei i studiul genitorilor C. Cmpuri de selecie pe obiective
dup efect: - metode care nu induc diversitatea genetic (doar ordoneaz zestrea genetic) - selecia, - consangvinizarea, - autofecundarea, - apomixia obligatorie. -metode care induc diversitatea genetic (modific esenial zestrea genetic prin introducerea nsuirilor de la alte specii): - hibridarea, - androsterilitatea, - mutaiile, - poliploidia, - electroporaia, - puca de gene, - apomixia facultativ.
- metode noi sau neconvenionale: - heterozisul, -variaia numrului de cromozomi; -tehnologia ADN-ului recombinat.
abilitatea amelioratorului
plante
-variabilitate fenotipic,
genotipic
Clasificarea metodelor de selecie: - dup modul de apreciere a materialului de selecie: - selecie fenotipic ; - selecie genotipic. - dup modul cum se repet alegerea: - selecie simpl; - selecie repetat ; - selecie recurent (alternarea alegerii elitelor cu autopolenizarea) - dup modul de studiere a elitelor i descendenelor acestora:
- selecia n mas ;
- selecia individual; - selecia liniar;
- selecia pe familii;
- selecia pe grupe; - selecia mixt.
Selecia n mas se practic ncepnd cu alegerea elitelor dup valoarea fenotipic i continund cu nmulirea lor n amestec n generaiile urmtoare. Scopul acestei metode este de a reduce variabilitatea populaiei respective i mai rar de a obine soiuri noi. n mod curent, metoda se aplic n cadrul schemelor de selecie conservativ i de obinere a seminelor de baz la unele cultivare cu polenizare liber. Selecia n mas poate fi pozitiv (se aleg i se nmulesc plantele valoroase) sau negativ (se elimin plantele nevaloroase sau netipice soiului = purificare biologic). Selecia n mas poate fi simpl (cnd se face o singur alegere) sau repetat (cnd alegerea elitelor se face n mai multe generaii).
Selecia individual
Alegerea individual a plantelor elit urmat de nmulirea separat a descendenilor i studierea acestora se numete selecie individual. Aceast tip de selecie este genotipic deoarece apreciaz valoarea genotipic a elitelor alese prin valoarea descendenilor. Scopul metodei este diferit, n funcie de materialul biologic folosit i de procedurile adoptate. Selecia individual se poate realiza pentru: -conservarea unor soiuri existente; -obinerea unor cultivare noi; -obinerea unor linii consangvine homozigote.
Selecia individual simpl (pe linii)- se aplic numai la plantele autogame i const n alegerea individual de elite, o singur dat, n cmpul de alegere i urmrirea descendenilor (liniilor), separat, 2 3 generaii.
Selecia individual repetat (Selecia genealogic sau metoda pedigree-ului) const n alegerea repetat n mod individual a elitelor n fiecare generaie de selecie, n funcie de valoarea descendenelor. Se aplic n populaiile hibride, att la plantele autogame ct i la plantele alogame. Scopul acestei metode este de a extrage linii sau familii cu o baz ereditar ct mai ngust, care s confere n descenden o variabilitate mai mare. n mod special, metoda se folosete la extragerea liniilor homozigote la plantele alogame, n procesul de consangvinizare.
Schema seleciei individuale repetate la plantele autogame (a) si la plantele alogame (b)
Hibridarea este metoda de ameliorare prin care se dirijeaz procesul de ncruciare sexuat ntre partenerii alei, cu scopul realizrii de genotipuri noi, n vederea realizrii a cel puin unuia dintre urmtoarele obiective (dup N. Munteanu, 2000) : -
Comparativ cu selecia care restrnge variabilitatea, hibridarea are o aciune invers, de sporire a variabilitii. Din acest motiv, ntotdeauna hibridarea trebuie urmat de selecie pentru a uniformiza i stabiliza populaia hibrid pn la obinerea unui nou cultivar.
Baza teoretic a hibridrii o constituie legile ereditare amintite n partea introductiv a ndrumarului i anume: legile mendeliene (legea uniformitii n F1, legea segregrii n F2, legea liberei combinri a genelor); legile morganiste (plasarea liniar a genelor; linkage-ul i crossing-over-ul); legile sau regulile transmiterii i segregrii caracterelor n funcie de relaiile dintre gene .
Principalele tipuri de relaii dintre gene i modurile de segregare (dup N. Munteanu, 2000) Grupul de relaii Tipul de relaii Raportul de segregare
alelice
1. dominan 2. 3. 4. 5.
3:1 9:3:3:1 1:2:1 1:2:1 1:2:1 1:2:0 3:0 12 : 3 : 1 9 : 3 :4 15 : 1 9:7 13 : 3 9:6:1 1:4:6:4:1
nealelice
6. epistazia dominant 7. epistazia reciproc 8. epistazia dominant reciproc 9. epistazia recesiv reciproc 10. epistazia mixt 11. izomeria dominant 12. izomeria nedominant
a) dup modul de implicare a omului : - natural (fr implicarea omului, la speciile alogame) - artificial (prin intervenia contient a omului) b) dup modul de participare a gameilor : - sexuat (particip gamei de sex opus) -vegetativ (prin contopirea a dou celule vegetative) c) dup gradul de nrudire dintre parteneri : - apropiat (ntre indivizii aceleiai specii intraspecific) - ndeprtat (ntre indivizii din specii diferite interspecific sau ntre indivizii din genuri diferite intergeneric)
a) dup modul n care grunciorii de polen ajung pe stigmat: - liber (prin polenizare liber) - semiliber (cultivarea genitorilor n amestec i introducerea sub acelai izolator, de regul polenizare entomofil) - forat (castrarea genitorului femel i polenizarea cu polen de la genitorul mascul, urmat de izolare) b) dup numrul genitorilor participani la hibridare: - simpl (doi parteneri, rezultnd un hibrid simplu) - complex (mai mult de doi parteneri, rezultnd hibrizi compleci)
a) hibridarea simpl : - direct = A x B; - reciproc = B x A; - retroncruciat repetat (backcross): = (AxB) x B x B x x B = Abn - ciclic (cu un tester T): = (AxT)+(BxT)+(CxT)+(DxT) - dialel: (AxB)+(AxC)+(AxD)+(BxC)+(BxD) +(CxD) b) hibridarea complex : - tripl = (AxB)xC sau Cx(AxB) se obin hibrizi tripli; - dubl = (AxB)x(CxD) se obin hibrizi dubli; - sintetic = se ncrucieaz 6 8 parteneri n mod randomizat ntre ei, obinndu-se un hibrid sintetic; - n mas = folosit naintea seleciei clonale prin ncruciarea liber a mai multor forme valoroase n condiii de polenizare liber
Tehnica de efectuare a hibridrii Obinerea hibrizilor este condiionat de executarea corect a unor etape obligatorii care se desfoar n programul de ameliorare i care, n ordine cronologic a executrii lor, sunt: 1. alegerea genitorilor, n funciile de obiectivele urmrite n ameliorarea speciei urmrite n programul de ameliorare; 2. asigurarea coincidenei la nflorire (nsmnarea n epoci diferite, grbirea sau ncetinirea vegetaiei, etc.); 3. alegerea plantelor care particip la hibridare (plante bine dezvoltate, sntoase i viguroase din cadrul soiurilor alese); 4. alegerea inflorescenelor pentru hibridare (se aleg cele mai dezvoltate inflorescene: spicul principal la cereale, inflorescenele bazale la leguminoase, inflorescenele de la baza lstarilor la via-devie, inflorescenele de la baza ramurilor la speciile pomicole) ; 5. alegerea florilor din cadrul inflorescenei alese pentru hibridare (se aleg numai florile normal dezvoltate); 6. castrarea sau emascularea genitorilor femeli (eliminarea elementelor sexuale mascule nainte de maturarea acestora, executat de regul dimineaa, dup ridicarea picturilor de rou sau spre sear, pentru a se evita temperaturile ridicate din timpul zilei, care afecteaz negativ organele sexuale femele); 7. izolarea florilor emasculate cu pungi de hrtie, pergament sau tifon (rezistente la factori climatici), pentru a evita fecundarea cu polen strin; 8. polenizarea se execut la momentul optim (cnd pe suprafaa stigmatului apare o secreie specific, reprezentnd gradul maxim de receptivitate pentru fecundare).
Polenizarea liber autogam i alogam Polenizarea const n transportul grunciorilor de polen de la anterele staminelor pe stigmatul gineceului. Dup proveniena polenului, polenizarea liber este de dou feluri:
1. polenizare direct sau autopolenizare, numit i autogamie este caracteristica plantelor la care polenul de la o floare ajunge pe stigmatul aceleiai flori: asemenea plante poart denumirea de autogame (ex: orzul, grul, orezul, ovzul, soia, fasolea, mazrea, inul, ardeiul, tomatele .a.). Descendena unui individ sexuat, autogam, constituie o linie.
2. polenizare indirect sau ncruciat, numit i alogamie se caracterizeaz prin aceea c pe stigmatul unei flori poate ajunge polen provenit de la o floare de pe un alt individ; astfel de plante se numesc alogame (ex: cnepa, porumbul, secara, floarea soarelui, sfecla de zahr, ceapa, morcovul, mrul, trandafirul etc.). Fecundarea ncruciat determin schimbarea genotipului, favoriznd heterozigoia.
F2 F3 F4 F5 F6 F7 F8
50% heterozigoie + 25% heterozigoie + 12,5 % heterozigoie + 6,25% heterozigoie + 3,12% heterozigoie + 1,56% heterozigoie + 0,78% heterozigoie +
50% homozigoie 75% homozigoie 87,5% homozigoie 93,75% homozigoie 96,87% homozigoie 98,33% homozigoie 99,11% homozigoie
capacitatea de cretere, capacitatea de adaptare, capacitatea de reproducere etc. micorarea nsemnat a taliei, volumului i greutii individului consangvin
Heterozisul (vigoarea hibrid) reprezint superioritatea genotipurilor heterozigote din F1 n privina uneia sau mai multor caracteristici n comparaie cu prinii homozigoi. Este un fenomen rezultat din hibridarea a doi printi homozigoi (cu vigoare mic, dar deosebii genetic), care se manifest printr-o cretere neobinuit n prima generaie hibrid, F1, a vitalitii, prin sporirea capacitii de producie, prin adaptarea mai bun la condiiile de via etc. Crearea de linii homozigote (prin polenizare cu
polen propriu a plantelor selecionate). n mod obinuit se consider c dup 5 6 generaii de fecundare consangvin controlat, liniile ajung la un nalt grad de homozigoie, cptnd o mare uniformitate, mai ales n privina caracteristicilor morfologice; Alegerea celor mai bune linii pe baza caracteristicilor pozitive manifestate n descendena hibrid F1. Pentru relevarea capacitii combinative, liniile se ncrucieaz n prima faz cu un genitor comun numit tester (cnd se afl capacitatea combinativ general).
Crearea hibrizilor comerciali F1 ntre liniile homozigote (linii consangvinizate la plantele alogame i linii pure la plantele autogame) se desfoar n trei etape mai importante (dup T. Crciun, 1978):
Ploidie
Monosomie (2x 1) Nulisomie (2x 2) Trisomie (2x +1) Tetrasomie (2x +2)
Mecanismele de producere a poliploizilor Obinerea artificial a autopoliploizilor Obinerea alopoliploizilor cuprinde Metoda centrifugrii turaiile mari dou faze distincte :
distrug fusul nuclear i mpiedic migrarea cromozomilor spre cei doi poli ai celulei. Metoda ocurilor de temperatur alternana de temperaturi extreme n timpul diviziunii meiotice sau n perioada diviziunii oului fecundat (43 45oC timp de 24 de ore) oprete formarea fusului nuclear. Metoda aplicrii mutagenilor chimici colchicina inhib formarea fusului nuclear (descoperit de C. Lits n 1934 i folosit pentru prima oar n vederea obinerii de poliploizi de A.F. Blakeslee i A. Avery, n 1937). Folosirea colchicinei se face sub form de soluii apoase n concentraii de 0,001 1,5% sau n amestec cu agar, n concentraii de 0,5 1,0%. Materialul biologic se imerseaz n soluia mutagen i se las o anumit perioad de timp, n funcie de specie, dup care se planteaz. hibridarea ndeprtat ; dublarea numrului de cromozomi.
1 Partener 1(AA) x Partener 2(BB) Amfiploid F1(AB) colchicinizare Amfidiploid (alotetraploid) (genom AABB)
2. Partener 1 (AA) x Partener 2 (BB) colchicinizare colchicinizare tetraploid 1 (AAAA) x tetraploid 2 (BBBB) amfiploid (alotetraploid) (AABB)
Mutageneza
este metoda de ameliorare genetic n care se valorific efectul agenilor mutageni asupra materialului genetic al plantelor i anume mutaia. n sens larg, mutaia poate fi definit ca o modificare a materialului genetic, care nu e provocat de recombinarea genetic sau de segregare. Termenul de mutaie provine din latinescul mutatio = schimbare, nsemnnd o variaie ereditar permanent i transmisibil celulelor fiice i generaiilor urmtoare. Acest termen a fost introdus n 1901 de Hugo de Vries, care a studiat fenomenul schimbrii substanei ereditare la Lumnric (Oenothera lamarckiana), ns fenomenul s-a dovedit a nu fi mutaie ci o greal de distribuie a cromozomilor metafizici.
Clasificarea mutatiilor
Criteriul de clasificare Dup modul de apariie : Dup mrimea efectului exteriorizat : Dup modul de manifestare : Tipuri de mutaii Mutaii naturale sau spontane Mutaii artificiale sau induse Mutaii mari (macromutaii) Mutaii mici (micromutaii) Mutaii morfologice Mutaii fiziologice Mutaii biochimice Mutaii germinale Mutaii somatice Mutaii genomice Mutaii cromozomice Mutaii genice (dominante sau recesive) Mutaii directe Mutaii inverse (retromutaii)
Dup locul afectat : Dup cantitatea de material genetic modificat Dup sensul modificrii
Ageni mutageni chimici: - Dup mecanismul de aciune: Compui alchilici (peroxizi, aldehide, hidroxilamine, acid azotos, analogii bazelor azotate) Produi antimetabolici (srurile metalelor grele, colorani cu proprieti bazice, substane aromatice erbicide, insectofungicide, substane cancerigene etc) - Dup momentul aciune asupra acizilor nucleici ageni care acioneaz n perioada de biosintez replicativ (substane analoage bazelor azotate, inhibitori ai ac. nucleici, acridine) ageni mutageni care acioneaz asupra acizilor nucleici n repaus (ageni alchilani iperita i epoxizii; acidul nitros, hidroxilamina, hidrazina)
Ageni mutageni fizici: Radiaii: - ionizante (electromagnetice gamma i Roentgen; corpusculare alfa, beta, protonii i neutronii rapizi i termici) - neionizante (ultraviolete) Variaiile de temperatur: ocurile de temperatur utilizate n primele stadii de diviziune a zigotului. Ultracentrifugarea: n timpul diviziunii celulare, fora centrifug mpiedic migrarea cromozomilor spre cei doi poli.