JIB 311 PRINSIP BIOKIMIA Nama: Norsyafawati Binti Ahmad Zabidi Nama Ahli kumpulan : Kumpu an !

Ekperimen 3: Kajian Aktiviti Enzim !"#!rila"e JP/4286/05

ABS$RAK "atu u#ian p$n%asin%an $n&im fofori as$ daripada ubi '$ntan% dan p$n$ntuan a'ti(iti sp$sifi' $n&im di a'u'an) P$m$*ahan 'arbohidrat da am s$ dapat di a'u'an o $h $n&im fosfori as$) P$n%asin%an $n&im fosfori as$ ini di a'u'an d$n%an 'a$dah +sa tin% out, iaitu d$n%an m$n%%una'an %aram ammonium su fat s$ba%ai bahan m$nda'an) -arutan yan% m$mpunyai '$'uatan ion t$rt$ntu dapat m$m$nda''an $n&im t$rs$but) .inda'ba as t$rba i''an yan% b$r a'u bo $h m$n%hasi 'an fosfat ta' or%ani' /Pi0 s$ba%ai produ'1 '$p$'atan hasi ini bo $h dihitun% d$n%an m$n%%una'an sp$'trofotom$t$r pada #ara' %$ omban% 225nm) K$putusan yan% dip$ro $hi m$nun#u''an tabun% u#i S1 m$mpunyai a'ti(iti $n&im fosfori as$ yan% tin%%i iaitu s$banya' %&%%%'(( umo /m%/min b$rbandin% tabun% u#i yan% ain) Ba%i u#ian 3o in1 ni ai '$p$'tan prot$in m$nun#u''an M1 yan% m$mpunyai ni ai '$p$'atan yan% tin%%i iaitu 3)*&) +,)

$EORI 5'sp$rim$n ini di#a an'an untu' m$n%asin%'an $n&im fosfori as$ daripada ubi '$ntan% dan #u%a untu' m$n$ntu'an a'ti(iti sp$sifi' $n&im) "atu unit $n&im bo $h dita'rif'an s$ba%ai #um ah yan% m$man%'in'an satu mi'romo substrat da am satu minit pada '$adaan yan% t$rt$ntu) 6nit ini di%una'an untu' m$n$ntu'an '$a'tifan sp$sifi' iaitu #um ah unit da am satu mi i%ram prot$in) K$a'tifan sp$sifi' s$suatu $n&im bo $h dit$ntu'an d$n%an formu a7

A'ti(iti sp$sifi' $n&im 8 #um ah a'ti(iti $n&im 8 umo substrat di%una/min #um ah prot$in m% prot$in

5n&im yan% di'ata'an s$para tu $n '$rana t$rdapatnya prot$in ain yan% t$ ah diasin%'an wu#ud pada $'stra' $n&im t$rs$but) K$tu $nan s$suatu $n&im bo $h di ihat m$ a ui #um ah a'ti(iti sp$sifi' $n&im yan% tin%%i) 6ntu' m$n$ntu'an a'ti(iti sp$sifi' $n&im1 a'ti(iti $n&im dan '$p$'atan prot$in p$r u dit$ntu'an t$r $bih dahu u)

K$hadiran 'umpu an b$rion s$p$rti N9!: dan ;<<= da am mo $'u

prot$in

m$mbo $h'an prot$in b$rtinda'ba as d$n%an mo $'u air) P$n%ionan pada mo $'u prot$in ini bo $h m$n%hasi 'an 'umpu an b$r'utub pada p$rmu'aan mo $'u prot$in dan ini m$mudah'an ia b$rtinda'ba as d$n%an mo $'u air) "ifat prot$in ini ah yan% m$mudah'an pros$s p$n%asin%an da am $n&im) Pros$s +sa tin% out, di a'u'an d$n%an m$n%hasi 'an p$m$nda'an daripada arutan) Ka$dah +sa tin% out, ini ada ah 'a$dah yan%

biasa di%una'an da am p$n%asin%an $n&im '$rana ia tida' a'an m$nd$naturasi'an prot$in) K$t$r arutan s$suatu prot$in dip$n%aruhi o $h '$'uatan ion s$p$rti b$ri'ut 7 > 8 4 cizi2 2 ?imana > ia ah '$'uatan ion1 ci ia ah '$p$'atan ion dan zi ia ah ;a pada ion itu) .inda'an fosfori as$ bo $h di%ambar'an s$p$rti7

fosfori as$ Kan#i : Pi @8888888 Kan#i n=4 : A u'osa=4 3osfat

.inda'an fosfori as$ ini m$rupa'an tinda'ba as b$rba i'1 di mana tinda'ba as ini a'an m$n%hasi 'an p$mb$ntu'an fosfat ta' or%ani* /Pi0 dan bo $h dihitun% d$n%an m$n%%una'an 'a$dah sp$'trofotom$t$r) A'ti(iti s$suatu $n&im bo$ h dita'rif'an s$p$rti b$ri'ut7 A'ti(iti $n&im 8 > mo hasi t$rb$ntu' minit

KEP-$-SAN./ASI0 Ja1ual 1 Penentuan kepekatan PI /1en,an merujuk keluk pia2ai 1&3 ek"perimen '0 $a3un, uji 4a5a pen5erapan pa1a jarak ,el!m3an, *')nm 4)258 2)!8! 0)620 0)245 0)25! 0)5BB 0)650 0)564 4)52B 2)0!4 0)8B6 0)6!6 0)!!4 0)552 0)64! 0)644 0)000 Kepekatan #!"#at 6+,7

4 2 ! 4 "2 4 2 ! 4 C4 4 2 ! 4 C2 4 2 ! 4 B an'

"4

640 4445 !00 !50 422 2B0 !48 220 260 B80 4!5 !40 460 220 2B5 2B5 0)000

Ja1ual ' Penentuan kepekatan pr!tein men,,unakan rea,en !lin89i!:alteau No .abun% 6#i 4 /B an'0 "4 "2 C4 C2 ?aya p$ny$rapan pada #ara' %$ omban% 200nm 0)000 0)242 0)245 0)2B8 0)!00 K$p$'atan prot$in /D%0

0)000 !42)5 400 3)*&) 4!5

Rumu" Ek"trak ;m!l Pi . min.ml Pr!tein 6;,7 Aktiviti Enzim "4/tabun% u#i40 "4/40 E "4/!0 8 F F / 45 / 2 G 40 8 H4 "4/tabun% u#i 20 JCI "4/20 E "4/40 8 F F / 45 / 2 G 40 8 H2 JCI <Rumu" 1i ata" ju,a 1i,unakan untuk men1apatkan keputu"an 3a,i "ampel S'= M1= M' untuk "etiap ta3un, uji 5an, a1a& JMR 3a,i #!"#at a1alah () J y4 G 2 G 40K 8 LF H2 LF 6um!l.m,.min7 H4 LF Spe"i#ik

Pen,iraan Aktiviti Spe"i#ik Ek"trak "4 /tabun% u#i40 "4 /tabun% u#i 20 "2 /tabun% u#i40 "2 /tabun% u#i20 B5 Aktiviti Spe"i#ik Ek"trak ;m!l Pi . min.ml Pr!tein 6;,7 Enzim 6um!l.m,.min7 5 B5 2B0 = 220 8 20 20 / 45 / 2 G 40 8 0)020 B5 422 = !48 8 =4B6 =4B6/45 / 2 G 40 8 0)688 J 400 G 2 G 40K 8 2000 0)020 8 0)0000!5 2000 =0)48048 0)000!44 2000 !40 B5 4445 = !50 8 2B5 2B5 / 45 / 2 G 40 8 2)28B ;m!l Pi . min.ml 640 = !00 8 !40 / 45 / 2 G 40 8 4)088 J !42)5 G 2 G 40K 8 6!50 2)28B 8 0)0004!B 6!50 Pr!tein 6;,7 Enzim 6um!l.m,.min7 4)088 8 0)000424 6!50

C4 /tabun% u#i40 C4 /tabun% u#i 20 C2 /tabun% u#i40 C2 /tabun% u#i20 B5 B5 B5 B5

260= 4!5 8 !25 !25 /45/2 G 40 8 4)440 B80 = !40 8 620 620 / 45 / 2 G 40 8 2)!54 460 = 2B5 8 4!5 =4!5/45/2 G 40 8 0)424 J 4!5 G 2 G 40K 220 = 2B5 8 25 =25 /45 /2 G 40 8 0)0822 8 2200 J !52)5 G 2 G 40K 8 2450

4)440 8 0)00045B 2450 2)!54 8 0)000!2B 2450 =0)4248 0)000426 2200 =0)0822 8 0)0000!25 2200

< Nilai ne,ati# 5an, 1iper!leh 1ia3aikan&

Ja1ual 3& Aktiviti "pe"i#ik enzim 1alam ek"trak S1=S'=M1 1an M'

Ek"trak

;m!l Pi . min.ml

Pr!tein 6;,7

Aktiviti Spe"i#ik

enzim 6um!l.m,.min7 "4 /40 "4/20 "2/40 "2/20 C4/40 C4/20 C2/40 C2/20 4)088 2)28B 0)688 0)020 4)440 2)!54 0)424 0)0822 2200 2450 2000 6!50 0)00045B 0)0004!B 0)000!44 0)0000!5 0)00045B 0)000!2B 0)000426 0)0000!25

Purata 3a,i aktiviti "pe"i#ik enzim: Ek"trak "4 "2 C4 C2 Aktiviti "pe"i#ik enzim 6um!l.m,.min7 0)0002BB 0)0004B0 0)000244 0)000254

PERBIN9AN>AN .inda' ba as 'an#i d$n%an $n&im fosfor$ as$ m$rupa'an tinda' ba as b$rba i' dan a'an m$n%hasi 'an 'an#i n=4 dan % u'osa=4 fosfat) .inda' ba as b$rba i' ini bo $h b$r a'u 2

d$n%an mudah t$tapi da am '$adaan yan% *$pat di mana '$p$'atan fosfat ta' or%ani' b$rada da am '$adaan '$s$imban%an yan% m$n%arah '$pada d$%radasi bu'an '$pada sint$sis) 6#i'a#i ini m$ ibat'an $mpat #$nis samp$ iaitu "41"21C4 dan C2) "$tiap samp$ t$rdiri daripada $mpat tabun% u#i) .abun% u#i 4 dan 2 a'an m$n%hasi 'an tinda'ba as yan% $bih tin%%i b$rbandin% tabun% u#i ! dan 4) -arutan tampan yan% di $ta''an s$banya' 0)5m b$rtinda' s$ba%ai p$n%awa an da am ni ai p9) Ni ai p9 yan% '$'a a'an m$mbantu $n&im itu b$rtinda' ba as d$n%an subsrat d$n%an mudah) ?a am $'sp$rim$n ini tabun% u#i di $ram'an pada suhu !20; iaitu suhu badan manusia di mana ia m$rupa'an suhu optimun ba%i '$banya''an $n&im) "uhu yan% t$r a u tin%%i a'an m$ny$bab'an $n&im itu musnah s$t$rusnya tinda' ba as $n&im tida' dapat dit$rus'an) -arutan .;A yan% ditambah'an pada tabun% ui#i '$=! dan '$=4 ada ah untu' m$n%h$nti'an a'ti(iti $n&im daripada b$rtinda'ba as dan bo $h m$n%hasi 'an m$nda'an) ?a am tinda'ba as $n&im fosfori as$1 '$p$'atan fosfat ta' or%ani' dit$ntu'an) A u'osa =4= fosfat a'an m$ny$sar'an tinda'ba as '$d$pan1 ini m$ny$bab'an a'ti(iti $n&im fosfori as$ s$suai di t$ntu'an d$n%an '$p$'atan fosfat Pi yan% t$rb$ntu') 3osfat ta' or%ani' '$mudiannya a'an b$r'omp $'s d$n%an 'umpu an mo ibdat da am r$a%$n fosfat untu' m$mb$ntu' 'omp $'s fosfomo ibdat ) Komp $'s ini s$t$rusnya b$rtinda'ba as d$n%an 3$"<4 untu' m$n%hasi 'an warna biru) Marna yan% t$rhasi ba%i samp$ t$rs$but bo $h dihitun% d$n%an m$n$ntu'an daya s$rap *ahaya d$n%an m$n%%una'an a at sp$'trofotom$t$r pada #ara' %$ omban% 200nm) Ni ai daya s$rap ba%i s$tiap samp$ bo $h diru#u' '$p$'atannya m$ a ui %raf yan% t$ ah dip ot dan m$n$pati 9u'um B$$r dan -amb$rt) Ba%i u#ian 3o in=;io*a t$au1 ni ai M1 m$nun#u''an '$p$'atan prot$in yan% tin%%i iaitu 3)*&)+, ) Cana'a a ba%i u#i'a#i yan% m$ ibat'an $n&im fosfori as$ d$n%an

'an#i m$n%hasi 'an ni ai S1 yan% a'an m$n%a ami a'ti(iti sp$sifi' $n&im yan% tin%%i iaitu %&%%%'(( um!l.m,.min b$rbandin% "21C41 dan C2)

KESIMP-0AN

B$rdasar'an '$pada ama i yan% t$ ah di#a an'an1 '$putusan a'ti(iti sp$sifi' $n&im yan% di dapati pada samp$ S1 ada ah $bih tin%%i daripada samp$ yan% ain) Cana'a a ba%i u#ian 3o in=;io*a t$au ni ai M1 m$nun#u''an '$p$'atan prot$in yan% tin%%i b$rbandin% samp$ ain)

BA/AN R-J-KAN 4) P$n%$na an Bio'imia Ama i N ?a(id .)P umm$r N 4B82 2) Ais#ah AirindraN Bio'imia 4N P. Aram$dia Ja'artaN 4B86 !) Iodn$y Boy$rN ;on*$pts of Bio*h$mistryN Broo's/;o $ Pub ishin% ;o) 4) http7//staff)s*i$n*$)nus)$du)s%/Odbsyhh/ ab4)htm

40

P-SA$ PEN>AJIAN PEN4I4IKAN JARAK JA-/ -NI?ERSI$I SAINS MA0A@SIA ACA-P ! JPB !44 PIPN"PP BP<KPCPA

"idan% A'ad$mi' 2006/2002

P$n%urus Kursus7 Prof)Cadya ?r) Ni' Noru aini Ni' Ab) Iahman

Nama P$ a#ar 7 Norsyafawati Binti Ahamad Zabidi No) Catri' No) KP 7 JP/4286/05 7 824242=40=5286

Pusat Mi ayah 7 Kuantan

44