BAB I PENDAHULUAN

1.1

Prinsip Percobaan Prinsip percobaan didasarkan pada proses isolasi yang diawali dengan

pemutusan ikatan antara senyawa diosgenin dengan glikonnya melalui proses refluks dengan penambahan HCl pekat. Filtrat hasil refluks kemudian disari dengan CHCl3 untuk menarik senyawa diosgenin. Sari kasar diosgenin kemudian ditotolkan pada plat KL untuk dipisahkan berdasarkan kelarutannya.

1.2

Tujuan Percobaan u!uan dari percobaan ini antara lain" #engetahui cara dan prinsip penarikan diosgenin dari tanaman Pacing dengan alat refluks #engidentifikasi diosgenin dengan metode Kromatografi Lapis ipis $KL %

1.3. Manfaat Percobaan Percobaan ini diharapkan memberikan manfaat seperti " Sebagai informasi untuk mengetahui cara penarikan diosgenin dari tanaman Pacing dengan alat refluks Sebagai informasi untuk mengetahui harga &f dan warna noda dari diosgenin

'

BAB II TIN AUAN PU!TA"A

2.1.Uraian Tu#bu$an Tu#bu$an Pacin% &Costus speciosus '

(ambar ' " umbuhan Pacing &Costus speciosus ' !inoni# ( ) Costus sericeous *l. ) Costus laureiri Horan ) +momum arboreum Lour. ) +momum hirsutum Lamk. ) *anksia speciosa Koenig )a#i*ia ( &utaceae Habitat +an persebaran

umbuh liar di tempat yang lembab dengan sedikit naungan atau tumbuh liar di bawah tumbuh-tumbuhan yang tinggi seperti di hutan primer. hutan permukaan laut. *anyak ditemukan di pulau /awa $Soegihard!o. ,001%.

Na#a Lo,a* ( epung tawar. (aloba utan $#elayu%. abar-tabar. otar $*atak%. Sitawar $#inangkabau%. abar-tabar. awar-tawar. Kalacim. Kalacing $*angka%. Pacing. Pacing tawar $Sunda% Pacing. Poncang pancing. pacing tawa $/awa%. *unto. *into $#adura%. Palai batang. Lingkuas intalun $#inahasa%. (aloba utan $#anado%. ampung tawara. apung tawara $#akasar%. epu tawa $*ugis%. ehe tepu. ubutubu $+mbon%. 2ga-uga $ ernate%. #uri-muri. ebe pusa $Seram%. 3hang liu tou $Cina% $Soegihard!o. ,001%. . Uraian ( umbuhan berupa herba tahunan. tegak. tingginya dapat mencapai 0.1 sampai 4 meter. *atangnya banyak mengandung air. mudah dipatahkan. dari luar kasar dan dari dalam licin dan mehgkilat. *atang tertutup oleh pelepah daun. berwarna hi!au keunguan $/eanny. ,000%. 5aunnya merupakan daun tunggal. berwarna hi!au. berbentuk lon!ong sampai lanset meman!ang. tersusun secara spiral melingkari batang. 2!ung daun meruncing. tepi rata. pangkal daun tumpul. pan!ang ''-,6 cm dan lebarnya 6-'' cm. Permukaan daun bagian bawah berbulu lembut. sedangkan permukaan atas beralur. angkai daun pendek $/eanny. ,000%.

Perbungaan berbentuk bulir besar yang terietak pada u!ung batang. *unganya berwarna putih atau kuning. 5aun pelindung bulat telur dengan u!ung runcing. #ahkota berbentuk tabung. pan!ang lebih kurang ' cm dan di- ameter sekitar 1 mm. *enang sari sepan!ang 7 cm. u!ungnya runcing. berwarna hi!au. Putik tersembul di atas kepala sari. warnanya putih $/eanny. ,000%. *uahnya buah kotak berbentuk bulat telur. berwarna merah. *i!i keras. kecil. diameter lebih kurang , mm. berwarna hitam. +kar serabut berwarna putih atau kuning kotor. &impang mengandung pati $/eanny. ,000%. "ANDUN-AN "IMIA ( &impang dan bi!inya mengandung diosgenin $sapogenin steroid%. tigogenin. diosin. grasillin. sitosterol. metiltriakontan. 6-hidroksitriakontan-,1-on. 1-alfa -stigmast-8$''%-en-3-beta-ol-,4-hidroksitriakontan-,7-on. dan ,4-

hidroksihentriakontan-,9-on. Kandungan kimia tersebut adalah bahan baku obat kontrasepsi $ anti hamil%. Selain itu rimpang !uga mengandung saponin. fla:onoida. dan tanin $Smith. ,008%. 5aun mengandung saponin. fla:anoida. dan tanin. *atang !uga mengandung saponin. fla:onoida. dan tanin. *unga mengandung saponin. fla:onoida. dan senyawa- senyawa polifenol $Smith. ,008%. PEN--UNAAN T.ADI!I/NAL Seluruh bagian tumbuhan digunakan sebagai obat luar untuk luka akibat digigit ular atau digigit serangga. /uga digunakan sebagai obat disentri. 5aun digunakan sebagai obat radang selaput lendir mata. 5aun yang masih muda !uga digunakan untuk menyuburkan rambut. *atang digunakan sebagai obat

demam dan disentri. ;mpulur batang untuk mendinginkan mata pada penderita cacar $Smith. ,008%. Penyebaran diosgenin pada rimpang Costus speciosus adalah sebagai berikut. bagian luar rimpang yang dibatasi oleh lapisan endodermis mengandung !umlah diosgenin '.4'< $densitometri%. 3.03< $spektrofotometri% dan bagian dalam rimpang yang dibatasi oleh lapisan endodermis mengandung !umlah diosgenin '.'8< $densitometri% dan '.,, $spektrofotometri% $Smith. ,008%. MAN)AAT TUMBUHAN &impang yang berumbi dapat dimakan pada saat paceklik. rimpangnya mengandung kurang lebih 77< karbohidrat. tetapi agak berserat. *atangnya yang empuk dapat dimakan sebagai sayuran. &impang dan bi!inya mengandung diosgenin $'.,1-3< dalam berat kering% dan *-sitosterol $sapogenin%= bi!i !uga mengandung minyak lemak berbau manis. Sari dari daun yang dihancurkan dan batang yang masih muda dapat digunakan sebagai obat luar penyakit mata dan telinga. sari dari rimpang yang masih segar dapat dipakai sebagai pencahar. 5i #alaysia. pacing merupakan tanaman yang sangat penting dalam upacaraupacara. sebagai tonik dan untuk pen!ernih. &impang yang dimakan dengan pinang dapat dipakai sebagai obat batuk. rebusan daun dan daun yang dihancurkan dapat dipakai sebagai obat luar penyakit kulit dan demam. Saponin dari rimpangnya mempunyai kasiat anti radang $Soegihard!o. ,001%. #enurut caranya. ekstraksi dibagi ke dalam dua !enis yaitu. ekstraksi secara dingin dan secara panas. ;kstraksi dingin meliputi maserasi. sokletasi. dan perkolasi. Sedangkan ekstraksi secara panas meliputi refluks dan metode destilasi uap $&a!u. ,0''%.

2.2. "ajian Teoritis

(ambar +lat &efluks 5iosgenin $saponin steroid% merupakan senyawa yang sangat bermanfaat untuk mengontrol hiperkolesterolemia dengan menghambat absorbsi kolesterol dan meningkatkan sekresi kolesterol $>urhaedah. '864%.

5iosgenin. saponin steroid secara alami ditemukan berlimpah kacangkacangan $ rigonella sp.% dan ubi $5ioscorea sp.%. 5iosgenin adalah prekursor berbagai obat-obatan steroidal sintetis yang secara luas digunakan dalam industri farmasi. Selama dua dekade. serangkaian studi pre-clinical dan mekanistik telah secara mandiri dilakukan untuk memahami peran bermanfaat diosgenin terhadap penyakit metabolik $hypercholesterolemia. dislipidemia. diabetes dan obesitas%. peradangan dan kanker. 5alam model eksperimental obesitas. diosgenin menurun plasma dan trigliserida hepatik dan meningkatkan glukosa homeostasis masuk akal dengan mempromosikan adipocyte diferensiasi dan menghambat peradangan dalam !aringan adipose. Se!umlah percobaan telah dilakukan untuk memahami keman!uran praklinis diosgenin sebagai agen chemopre:enti:e?terapeutik melawan kanker beberapa organ situs. #ekanistik penelitian menggunakan model in :itro menun!ukkan bahwa diosgenin menekan pertumbuhan sel kanker melalui beberapa sel yang menandakan peristiwa terkait dengan proliferasi. diferensiasi. apoptosis. peradangan dan oncogenesis $&a!u. ,0''%.

BAB III MET/D/L/-I PE.0/BAAN 3.1. A*at *lender +lat refluks Kertas saring Corong pisah Cawan penguap Lumpang Stamfer Pipet tetes

3.2. Ba$an &impang Pacing $Costus speciosus% +ir HCL pekat CHCl3 Plat pra lapis silika (F,14 ;tanol 81<

Larutan SbCl3

3.3. Prose+ur a% @solasi diosgenin dari rimpang Pacing. 5itimbang '1 g bahan segar rimpang Pacing. dihaluskan dengan blender dengan ,0 ml air. Campuran direfluks dengan penambahan 1 ml HCl pekat $sehingga konsentrasi akhir HCl ,-3 >% selama 4 !am. kemudian disaring. ampas dibuang. Filtrat dimasukkan ke dalam corong pisah. disari dengan ,0 ml CHCl 3 sebanyak tiga kali. Kumpulkan sari CHCl3 dan diuapkan pelarutnya sehingga diperoleh sari kasar diosgenin. b% @dentifikasi sari kasar diosgenin dengan Kromatografi Lapis ipis $KL % Fase diam Fase gerak Bisualisasi " plat pra lapis silika (F,14 " campuran CHCl3 A etanol 81< $81"1% dalam 1 ml " larutan SbCl3 dalam CHCl3

Chamber di!enuhkan dengan pelarut pengembang. caranya ,?3 bagian dari chamber dilapisi dengan kertas saring. 5imasukkan pelarut prngrmbang ke dalamnya.. chamber dikatakan !enuh bila seluruh kertas saring telah basah oleh pelarut pengembang. 5itotolkan larutan ekstrak yang mengandung diosgenin kasar pada plat KL . sampai plat KL !enuh oleh larutan ekstrak. 5iamkan plat KL selama C '1 menit. kemudian plat KL dimasukkan ke dalam chamber yang sudah !enuh. >oda dari titik penotolan akan merambat sampai ke garis batas pengembangan. dikeluarkan plat KL lalu dikeringkan. 5isemprot plat KL dengan larutan penampak bercak. diamati noda yang terbentuk 3.1. )*o2s$eet

a. @solasi 5iosgenin dari rimpang Pacing

'1 g rimpang Pacing

ditambah ,0 ml air dihaluskan dengan blender ditambah 1 ml HCl pekat direfluks selama 4 !am disaring Filtrat &esidu

dimasukkan ke dalam corong pisah disari dengan ,0 ml CHCl3 sebanyak tiga kali dikumpulkan hasil sari diuapkan pelarut Sari kasar 5iosgenin

b. @dentifikasi sari kasar 5iosgenin dengan Kromatografi Lapis ipis Fase diam " plat pra lapis silika (F,14 Fase gerak " campuran CHCl3 A etanol 81< $81"1% dalam 1 ml Bisualisasi " larutan SbCl3 dalam CHCl3 Kristal 5iosgenin 5ilarutkan dalam sedikit metanol 5itotolkan pada plat KL yang telah diaktifkan '0

5imasukkan ke dalam be!ana Kromatografi yang telah !enuh dengan uap pengembang 5ibiarkan naik sampai garis pengembang 5ikeluarkan dari be!ana 5iamati secara :isual Kromatogram 5icatat harga &f 5isemprot dengan penampak noda SbCl3 dalam CHCl3 5icatat harga &f Hasil

BAB I3 HA!IL DAN PEMBAHA!AN 1.1. Hasi* Darna dan harga &f sebelum :isualisasi Kesimpulan minimal senyawa yang teridetifikasi Darna dan harga &f setelah :isualisasi &f E 0.'3 $hi!au kekuningan% erdapat satu senyawa &f' E 0.06' $coklat%

''

&f, E 0.4'6 $coklat lembut% &f3 E 0.9'6 $coklat lembut% Kesimpulan minimal senyawa yang teridetifikasi Kesimpulan teridentifikasi akhir minimal senyawa yang erdapat tiga senyawa idak diosgenin terdapat senyawa

1.2. Pe#ba$asan Pada percobaan yang dilakukan. setelah penyemprotan dengan larutan penampak bercak SbCl3 dalam CHCl3 terdapat tiga bercak. yaitu coklat $&f E 0.06'%. coklat lembut $&f E 0.4'6%. dan coklat lembut $0.9'6%. 5ari bercak yang terlihat. tidak ditemukan adanya senyawa diosgenin. #enurut Stahl $'87'%. penampak bercak SbCl3 dalam CHCl3 akan memberikan warna ungu. biru. merah. hi!au atau biru setelah penyemprotan lalu dipanaskan pada suhu '00-'01F C. 5iosgenin merupakan senyawa saponin-steroid yang bersifat nonpolar. Pada tahap awal isolasi yang dilakukan. rimpang Pacing diblender dengan penambahan air. kemudian direfluks dengan HCl selama empat !am untuk memecah ikatan antara glikon dan aglikon. Kemudian dilakukan penyaringan dan diambil filtratnya. Filtrat yang diambil merupakan air yang bersifat polar. artinya. di dalam filtrat terdapat glikon yang bersifat polar dan tidak terdapat senyawa diosgenin yang bersifat nonpolar. Sehubungan dengan hal ini. telah dilakukan penelitian oleh Soegihard!o $,001%. dimana setelah direfluks dengan HCl dan disaring. bagian yang diambil bukanlah filtratnya. melainkan residu yang mengandung senyawa diosgenin.

',

BAB 3 "E!IMPULAN DAN !A.AN 4.1. "esi#pu*an Penarikan diosgenin dari Costus speciosus diawali dengan pemecahan ikatan antara diosgenin dengan glikonnya melalui proses refluks dengan penambahan HCl pekat. kemudian disari menggunakan pelarut CHCl3 @solasi dan identifikasi diosgenin dengan metode Kromatografi Lapis ipis menggunakan larutan penampak bercak SbCl3 dalam CHCl3 menun!ukkan

'3

hasil bahwa tidak terdapat senyawa diosgenin dalam ekstrak yang ditotolkan. 4.2. !aran Pada proses awal isolasi. setelah rimpang Pacing diblender dengan air. direfluks dengan penambahan HCl pekat. kemudian disaring. sebaiknya diambil residunya. karena filtrat yang merupakan air bersifat polar sehingga tidak dapat melarutkan senyawa diosgenin.

'4

DA)TA. PU!TA"A /eanny. D dan Kosasih. P. $,000%. Penentuan Kadar 5iosgenin dalam &impang Costus dengan Cara 5ensitometri dan Spektrofotometri. 5iambil dari http"??bahan-alam.fa.itb.ac.id?detail.phpGidE'7, >urhaedah. >assa. $'864%. 2saha isolasi dan penetapan kadar diosgenin dalam bi!i pacing $Costus speciosus Smith% asal 2!ung Pandang. 5iambil dari http??fa.unhas.ac.id &a!u. /ayade:.$,0''%. 5iosgenin. a Steroid Saponin Constituent of Hams and Fenugreek" ;merging ;:idence for +pplications in #edicine. 5iambil darihttp"?www.intechopen.com Smith. /.;.$,008%. Costus speciosus $Koenig%. 5iambil dari http"??komo.padinet. comFttg ItanamanIobat Soegihard!o dan Koensoemardiyah. $,003%. Produksi diosgenin dengan sistem sel amobil dari Costus speciosus smithJ. 5iambil dari http"??mfi.farmasi.ugm.ac.id?files? news?'0.

'1