22

.
.


()
.
,
S,

.


.


.
.
.

29.
.

23

.
.
(),

, ,
.


, .
.

- (S).


.
k1

+S

k3( kcat)

ES

E+P

k2

.

.


.

24

.

.

.

3036.

.


.

,
,
.

25

.
,
-
.
.
.

.

:
1.

( reduce = )

.


.
.


NADH H+
.

26

+ NAD+

+ NADH H+

22.

22 22 2
2.


.

.


:
1.1. CHOH,
1.2.

1.10.

1.11 H2O2
1.12.

1.3. CH-CH1.4. CH-NH2

1.5. -CH-NH-

1.14.

1.6. NADH, NADPH

27
1.7.

1.15

1.16.

1.8.

1.17 CH2-

1.9.

. 1.1
, -CHOH,
:
1.1.1. NAD+ NADP+,
1.1.2.
11.3. O2
1.1.99.

2.


.
.


.
-CH3, -COOH,
CO-R, NH2 .

, , -

28

, .

(),

GTP.

:

.
,
:
2.1. (-, -,
-)
2.2.
2.3.
2.4.

2.5.

2.6.

2.7.

()

2.8.

29

3.

. ,
.

CO-
.

R-CO-O-R.

.

(C-O-PO3H2).

(-O-PO2H--).

30

DN, RN
DNA, RNA .
3.1
(, , ,
)
,
:
3.1 (, ,
, )
3.2

3.3

3.4.

3.5. C-N ( )
3.6.

3.7 . C-C
3.8. C-X, P-X
3.9. P-N
3.10. C-P

4.



.

CO2

(-COOH)

31

. (-CH2-CH2-COOH
-CH=CH2 + CO2 ).
.
,
:
4.1. C-C

4.2. C-O

4.3. C-N

4.4. C-S

4.5. C-X

4.6. P-O

4.99

5.

.

, cis- trans- ,
.

R1

R1

R2 C H
H C R2
R3
R3

H

R2

R1

C=C
R1

R2
C=C
H

cis- trans-

:
5.1. ,
5.2. cis-trans

32
5.3. (
C=C, S-S,)
5.4.

, ..)
5.5.

6.


.

, ATP,

, GTP, .
,
:
6.1. C-O

6.2. C-S

6.3. C-N

6.4. C-C

6.5. -

33

1.

. :
NAD+ :
NADP+ :

--
---

NAD+ :
S2 + NAD+

S + DH + H+

S2
.
NADP+
S2 + NAD+

. : FMN
FAD
S2 + FMN+
S2 + FAD+
.
.
.
.
. ( C)

2.

S + DH + H+

S + FMNH2
S + FADH2

34

. P ( ):
: , ,
(), ()
. (CoA) :
(COCH3)
. :

. :
(CH3)
. ( , c):
: (CH3),
(-CH2OH), (-CHO)
. ( ) :
(COOH).
CO2
. ( 1 ):

. ( B6) :
(2) (COOH).

3. , ,

12
.

.
,

35

.
..

.
Enzyme
Commission EC
. , 1.1.1.1
.


1 : .

.
1.1. :

1.1.1.
NAD NADP
.
1.1.1.1

36

1. pH

.
, -
,
.
, pH
.

pH .
pH
. ,
pH
. pH
pH .

pH

31. pH

37

,

.
: pH
,
pH
, .
, ,
, , , ,
.
(pH 4-6)
:

.
.

.
.


.


.
( pH 5-7)
.

,


.

38

(pH 10)
.
, , , ,
. ,
.
,
.
.

.

2.

,
.

. ,

.


50C.

.
90C
60 70C .

39

C
t

3265.

6- (G6PD)
.
.


.
.

. ,


G6PD.

3. .

40

.
, , .
120

100
80
60
40
20
0

50

100

150

200

250

300

350

(mM)

33.
.

.

4.
.


32.

41

. ,

.


,
.

S.

3436. Michaelis-Menten


Michaelis-Menten.

.
Michaelis :
[S]
V = Vmax

Km = k2 + kcat / k1
[S] + Km

, Vmax,
,

42

-

. Vmax
.
V=Vmax/2
m, m=[S]. , Km(
Michaelis),
V=Vmax/2. m


.


. m
.
Vmax
m .
Km Vmax
( pH,
, , ).

Vmax/Km.

.
Vmax ,

kcat/Km
. ,

. []=[S] (Vmax)

S.

43

kcat
[ES]

E+P

([E]=[ES])

Vmax = kcat [ES]

Vmax = kcat [E] kcat = Vmax/ [E]

kcat
( min sec)
. mole/L.sec
kcat sec-1,
sec sec
.
O kcat/Km Vmax/Km
kcat/Km = (Vmax/Km)/[E].



.

.


Lineweaver-Burk ,
1/v 1/S.
,
Km Vmax.

3536. Lineweaver-Burk

44

Km

,


.
, Km
Km.
CH3CH2OH + NAD

CH3CHO + NADH2

.
.

Km ( )

5.
.

45

.

.

.
.
.
.


.

.
, -
,
, .

.
,

()

+

,
: H ,
, .

46

.
,
.

. ,
,


. ,
Km
Vmax.

36. . : , : ,
:


.
.
,
.
Vmax
Km .

47

A
Y
A

37.
.



. Vmax
() Km ( ).
.
,
- S + I
ESI .
Km
Vmax.

38.


, .



.

48

.

.
(feedback
inhibition),
.
, L-
L-,
, L 2 .
1

L-

L-

.


.
.

.

Mg2+, Mn2+, Ca2+, Ni2+, Zn2+ .


.

49

.
.
,
,


.

.



.

. ,
.



.

.

.
.

.
.

50

39 65, 66.


.
1-
,
,
.

().

. glu342 Lys (
),
Lys342
Glu
.

.

51

.

, (Mevinolin,
Mevastatin, Lovastatin) 3--3--CoA (HMG-CoA )

. ,


.

.
,

.



.

6.

,

52

. , ,
Vmax = kcat . [E]

[S]

40.

[P]

41.
.

53

.
,
.
()

.


( pH).

.
.
,

.

.


.




.

54

Vmax.

, ,

.


.

.
S

[P]
=
t

[S]
t

.
.

.


.

. ,

.

55

P1

E1

E2

P1

P2

,

.

NAD NADP.
NADH2 NADPH2 340 nm

.
FAD.
450 nm
FADH2.

(nm)

42.
NAD FAD.

56

COOH

COOH
H C NH2
CH3

COOH

GPT

C O

C O

CH2

COOH

CH3

CH2

CH2

CH2

COOH

COOH

+ -

C O
CH3

COOH

H C NH2

+ NADH H +

340 nm

+ NAD +
340

COOH
H C OH

+ NAD+

CH3
+ NAD+

o (mole)
.

,

(=mol
/ ) .

( pH ),
. .
(International
Unit, IU, Unit, U).

57

Katal. katal
mole .

mg
katal kg .


.

.

.
mole katal
mole .

.
Km Vmax
.
.

.

58

,
.

.

. ,
,
,
.

.


.

.

,
SDS


. 30
.
,


.

,
.

59

.
,
,
, ,


.

.
.

(heart), 4.
(muscle), 4.
3, 22, 3.
4 4
.
.

. 1:
. 2-5: . 2: ,
3: , 4: , 5: .
(lactate
dehydrogenase, LDH)
. LDH
.


.

60

43.
(CPK), (LDH)
- (DH)
.

. ,

.


.

.

61

.

. ,
.

. pH 5,

44 .
, ,

(,

) .

.

.

62

44.

,
pH, ,
, ,
.

.
,
.
(
).
.
.

63

, .
.
.. , ,

.

pH,
.

.