BLOC 3 Metabolisme i creixement dels bacteris

3.3. Creixement de les poblacions bacterianes

Creixement cellular: Escissi binria
La escissi binria ser la manera que tenen de dividir-se els rocariotes i bacteris en
!eneral" La c#llula anir a dulicar-se er$ arribar un moment en el que aquesta c#llula
%ormar dues& es searar %'sicament" El que ocorre es que es %orma aret cellular i
membrana cellular ca a dins" En el unt mi! s(estren)er %ins que s(*a!in searat" +ix$
ser un septe" En %ormes allar!ades el creixement de la c#llula ocorre en diversos unts i
el sete estar tamb, al mi! entre c#llules"
+bans de serarar-se la c#llula s(*aur de dulicar tot el contin!ut& esecialment el
!enoma"
La %ormaci del sete ser acci del divisoma o septasoma& que ser un comlex roteic"
Les rote-nes FtsZ seran les que %ormaran la contricci& ,s a dir& les membranes ca a dins&
es olimerit.aran erqu# aix$ si!ui ossible" La /ts0 tindr relaci amb la tubulina dels
eucariotes" 1irem que aquesta olimerit.aci d(aquests rote-nes diri!ir a les c#llules a la
%ormaci de setes"
Creixement cellular: %orma cellular
La %orma cellular estar dissen)ada bsicament er la paret cellular" 2o obstant& tamb, *i
*aur una altra rote-na que *i articia& la Mreb" Crear una estructura *elico-dal que
quedar 3ust er sota de la membrana citolasmtica" +quest citoesquelet ser el que
donar %orma a la c#llula" Els que tindran %orma de coc no tindran aquesta rote-na" 4er
tant& en conclusi& sense resencia d(aquesta rote-na es %orma una c#llula es%#rica& en
canvi& si tenim Mreb 3a no *o ser" +questa rote-na tamb, tindr %unci en searaci de
cromosomes er a c#lluels %illes 5segregaci de cromosomes6 i tamb, en la polaritat
cellular& es a dir& quan els comonents interns no estan reartits uni%ormement er tota la
c#llula& s(*aur d(or!anit.ar aquesta c#llula i diri!ir"
Creixement oblacional: mesura del creixement
El creixement d(una oblaci de bacteris es odr mesurar"
4odrem contar les c#llules totals a artir d(un orta esecial" +l!unes estaran vives i
altres mortes" Com a m'nim s(*auran de contar 788 c#llules" 1esr,s alicarem la
%rmula"
La %rmula ser: 9 n:mero de quadres 7;1 7;<
=n altres m#tode ser contar directament de la laca" Es contaran viables
cultivables" El resultat seran =/C;ml"
4er %er aquest recomte odrem %er una sembra en superfcie o sembra en
profunditat"
> tamb, es ot %er mesurant densitats ptiques& el que mesurem en aquets cas es
la terbolesa del tub a artir de la absorbncia" +quest ser el m#tode m,s rctic"
Calcular el pes sec o biomassa" 2ormalment exressat en m!;ml" El rimer que es
%a quan es treu una al'quota ser centri%u!ar er tal d(obtenir el sediment" <essariem
el sobrenedant i desr,s amb un %orn acabar'em d(assecar el sediment" 1esr,s *o
essarem& *avent tarat" ?indrem m! er ml" ?amb, ens serveix er mesurar el
creixement& erqu# com m,s creix& m,s biomassa tenim"
1esr,s tindr'em altres m#todes alternatius:
Comptador Coulter que mesurar la conductivitat el#ctrica& a ma3or oblaci menor
conductivitat"
Citometria de flux ser molt semblant a l(anterior" @(utilit.ar llum lser" 1e manera
que en ocasions distin!irem oblacions er mida %orma i densitat" 4odrem distin!ir
di%erents oblacions marcades amb %luorocroms"
4er :ltim& tindr'em unes t#niques que no mesurarien el nombre de c#llules sin que
mesurar'em altres caracter'stiques que indiquen creixment" @e sol utilit.ar en or!anismes
%ilamentosos" 4er tant:
1isminuci OA: er a microor!anismes aerobis& en sistemes tancats" Baurem de
rendre mostres al llar! del tems"
Concentraci de rote-nes totals i de 12+" Ca que les oblacions creixeran i tamb,
tots els seus comonents de la mateixa maenera" ?amb, es odr %er concentraci
de etido!lic& +?4&"""
1e totes aquests t#cniques la m,s utilit.ada ser el recomte de c#llules viables"
Creixement oblacional: corba de creixement
El creixement c#llular es donar en una corba de creixment. ?indrem:
/ase de lat#ncia: %ase d(adataci de la maquinria cellular al medi i a les seves
condicions 5temeratur& oxi!enaci& """6" 4odr ser m,s o men)s llar!a o curta" =na
%ase de lat#ncia molt curta ocorrir quan les condicions de vida del bacteri i del nou
medi son rcticament i!uals"
/ase exonencial: ser el creixement a velocitat constant" El creixement ser
equilibrat& creixeran les c#llules i tots els comonents *o %aran de la mateixa
manera" Es creen metab$lits rimaris" ?robarem la velocitat mxima de creixement"
/ase estacionaria: s(acaben els nutrients i moren i!ual que creixen" Es crearan
metab$lits in*ibidors o t$xics& 3a que al!uns residus del creixement seran t$xics"
@er una %ase de suerviv#ncia cellular" @er una %ase molt imortant a nivell
industrial& 3a que en la %ase estacionaria es creen metab$lits secundaris& com er
exemle els antibi$tics" Els que %ormen end$sores tamb, *o %aran en aquesta %ase"
+l comenDament de la %ase estacionaria obtindrem la oblaci mxima"
/ase de lisi cellular: les c#llules es moren erqu# *an arribat al l'mit d(estr,s
ne!atiu" @er una %ase exonencial ne!ativa" 4erque la lisi es roduir a velocitat
mxima i constant er$ ne!ativa"
Baurem de mirar que ens interessa a nivel industrial& quina %ase& se!ons si volem metabolist
rimaris o secundaris"
4odrem exressar matemticament el creixement" La manera d(exressar-*o ser: A
n
" La
EnF %ar re%er#ncia a quina !eneraci est" 4er exemle& en !eneraci 8 tindriem 7 i en la
!eneraci G tindriem 7H" ?amb, *o odrem %er tenint en comte que semre artim d(una
oblaci inicial" +questa ser la 28 5oblaci a tems 86" El que %arem ser 28 x A
n
"
En la se!Ient !r%ica veiem que els unts corresonen al unts de la taula anterior" 2o ser
una !r%ica :til a nivell matemtic& er tant& s(*aur de %er una semilo!aritme 5%ent el
lo!aritme de la oblaci bacteriana l'nia blava6"
4er tant:
2t: oblaci en un determinat tems" Bo *em d(exressar com a A
n
"
28: oblaci inicial" Bo *em d(exressar com a A
n
"
n: nombre de !eneracions
!: tems de !eneraci& cada quant tems es dulica una !eneraci" @er el tems al
qual *em a!a%at la mostra i *em calculat el nombre de !eneracions en aquest tems"
Es odr saber tot men)s el nombre de !eneraci" El que %arem ser alicar lo!aritemes i
extraolar"
Es odran %er altres oeracions matemtiques er con#ixer la taxa de creixement a la %ase
exonencial"
J: constant de velocitat esec'%icia de creixment" 1een de les condicions de cultiu i
els nutrients"
2: nombre de c#llules ;ml 5biomassa& comonent cellulars&"""6
@i substitu-m a la %ormula t er ! 5tems determinat de !eneraci en el que es duliquen6" @i
tenim una 28 el dulicat"
Creixement oblacional: equaci de Monod i rendiment
Creixement oblacional: cultiu diuxid
Creixement oblacional: cultiu sincr$nic
Creixement oblaiconal: cultiu continu