Exercices - Cintique enzymatique

1. Que devient la valeur de quand

max
/V v [ ]
m
K S 4 = ?
2. Si s ml mol V / / 100
max
= et K
m
= 2mM, quelle est la vitesse de la raction quand
[S]=20 mM ?
3. Dans une raction cintique de type Michaelis-Menten,
Quelles sont les valeurs de K
s
et de K
m
? La fixation
du substrat atteint-elle lquilibre ou plutt ltat stationnaire?
, 10 7
1 1 7
1

= s M X k
. 10 2 , 10 1
1 4
2
1 3
1

= = s X k et s X k
4. Les rsultats suivants sont obtenus au cours dune raction enzymatique, (1) en
labsence dinhibiteur, (2) et (3) en prsence de deux inhibiteurs diffrents la
concentration 5 mM. [ est le mme dans chaque exprience. ]
T
E

[S]
(mM)
(1)
s ml mol v / / (
(2)
s ml mol v / / (
(3)
s ml mol v / / (
1 12 4,3 5,5
2 20 8 9
4 29 14 13
8 35 21 16
12 40 26 18
a. Dterminez V
max
et K
m
de

lenzyme.
b. Dterminez le type dinhibition et le K
i
pour chaque inhibiteur.

5. Lalcool dshydrognase hpatique (ADH) nest pas trs spcifique quant la nature
de lalcool oxyd, thanol, mthanol, et dautres alcools. Loxydation du mthanol
produit de laldhyde formique qui est toxique, provoquant divers troubles dont la ccit.
Mon chien, Pitou, qui prfre gnralement le vin bon march, a par erreur ingr 50 ml
dun produit lave glace (une solution 50% de mthanol). Sachant que le mthanol serait
limin par voie rnale si son oxydation tait inhibe, et sachant que lthanol agit
comme un inhibiteur comptitif de loxydation du mthanol par lADH, jai dcid
doffrir du vin Pitou. Combien de litres de sa boisson favorite ( 12% dthanol) mon
chien devra-t-il boire pour rduire lactivit de lADH sur le mthanol 5% de son
activit normale si les K
m
de lADH pour lthanol et le mthanol sont respectivement
1mM et 10mM. (Le K
i
de lthanol dans son rle dinhibiteur comptitif de lADH est le
mme que son K
m
). Le mthanol et lthanol diffusent rapidement et uniformment dans
les 15 l. de fluides du corps de Pitou. On supposera que les densits de la solution de
lave glace et du vin sont les mmes, 0,9 g/ml.

Rponses - Cintique enzymatique
1. = 0,8
max
/V v
2. .
1 1
/ 91

= s ml mol V
3. Comme k
2
est 20 fois plus grand que k
-1
, le
systme se comporte comme un systme ltat stationnaire.
. 10 3 ; 10 43 , 1
4
5
M X K M X K
m s

= =

4. Avec un graphe selon Lineweaver-Burke (double inverse) :
V
max
= et K
m
= 3,2 mM. Linhibiteur (2) agit par comptition, avec
K
i
= 2,13 mM. Linhibiteur (3) provoque une inhibition non comptitive, avec K
i
= 4mM.

1 1
/ 51

s ml mol
5. Pitou doit boire 694 ml de vin, soit prs dune bouteille (750 ml).