Dra.

Mrean A Vsquez R

Mayo, 2014
E6
E7
Estructura del virus de VPH
Dinitroclorobenceno
Hipersensibilidad de tipo IV.
La respuesta inmune es dirigida contra un hapteno
unido a una protena de origen vrico o humano
Rx de hipersensibilidad, >T CD8 y actividad de las
clulas NK, y regulacin de la respuesta Th1
Se plantea toxicidad a largo plazo del DNCB
Arginasa
enzima para
metabolizar
las argininas
La enzima arginasa
descompone el
aminocido de
arginina y asimismo
no se elimina el
amoniaco fuera del
cuerpo
Regulador importante de la
inflamacin y la inmunidad
Dra. Mrean A Vsquez R

Mayo, 2014
Introduccin
La infeccin persistente por virus del papiloma humano
oncognicos (VPH), en particular de HPV16, se asocia
con selectiva expresin de dos protenas codificadas por
el virus (E6 y E7)
K14.E7 son ratones transgnicos, que expresan
HPV16.E7 oncoprotena dentro de los queratinocitos
basales, ampliamente utilizado como un modelo inmune
inducido de VPH oncognico

Inmunoterapia tpica con agentes
inmunoestimulantes se ha utilizado clnicamente para
tratar lesiones cancerosas
2,4-dinitroclorobenceno (DNCB) es un terapia eficaz
para condiloma acuminado causado por VPH
El uso de DNCB para tratamiento ha sido desalentado
por su potencial mutagnico
Introduccin
La Arginasa, que metaboliza L-arginina a ornitina y N-
urea, ha sido identificado como un regulador clave de la
inflamacin.
La arginase- 1 y 2, tienen distribucin tisular y
localizacin subcelular
Arginasa puede funcionar como un factor
inmunosupresor en el ambiente del virus
Introduccin
Objetivo
Como la inflamacin es la clave en la
progresin de la infeccin por VPH..
La arginasa es un regulador importante
de la inflamacin y la inmunidad..
Se investig la interaccin entre la
inflamacin inducida por DNCB y la
protena HPV16.E7
DNCB 1%
20 mcl
Tpico orejas
EDEMA en
orejas
Biopsia HE
Grosor de la oreja mediante el uso de la
pinza digital
hinchazn de la oreja, mediante el
clculo del aumento del grosor en
comparacin con las orejas no tratadas.
Procedimiento
24 horas
6 a 9
semanas
de edad
DNCB 1%
20 mcl
Tpico oreja
EDEMA en
orejas
Muestras de tejido fueron tenidas con
hematoxilina eosina
PCR en tiempo real
Se midi actividad de Arginasa por
medio determinacion colorimtrica de
urea
La citometra de flujo y clasificacin
de clulas

Procedimiento
6 a 9
semanas
de edad
Resultados
Resultados
Posterior al tratamiento DNCB, los ratones transgnicos
K14.E7. exhiben una mayor respuesta inflamatoria local, en
comparacin con no transgnicos
Resultados

Resultados
Luego de DNCB y el aumento de la actividad de arginasa-1 (lo
cual promueve especficamente inflamacin ), la expresin de
clulas mieloides aument.


Conclusiones
Ratones K14.E7 desarrollan una respuesta
inflamatoria fuerte a DNCB
K14.E7 muestra una mayor infiltracin de
clulas mieloides y la expresin de citoquinas
Th2
Arginasa-1 es inducida especficamente en
los ratones tratados con DNCB K14.E7
La inflamacin y la activacin de las clulas
mieloides se pueden asociar con la induccin
de arginasa
Especulamos que la comprensin de la
respuesta aguda por DNCB como induccin de
respuesta inflamatoria puede disminuir la
inmunosupresin localmente
La inmunidad podra conducir a tratamientos
ms aceptables para la infeccin persistente por
VPH.


Conclusiones