Nurul Izzati binti Abdul Halim Umbi Kalthum binti Abdul Sani
PISMP Semester 6 TESL 1 Kemahiran asas Menyediakan dan mendapatkan radas dan bahan Teknik asas makmal Teknik Asas Makmal Pengawetan Spesimen Biologi Pengawetan Basah Pengawetan Kering Spesimen haiwan kecil
Tumbuhan (untuk mengekalkan warna) Bahagian luaran haiwan
Tumbuhan (warna tidak dapat dikekalkan) Pengawetan Basah Spesimen diawet di dalam larutan Etanol Spesimen kecil Formalin Spesimen besar Pengawetan Basah Balang Spesimen Balang reka ganti Botol kaca tanpa warna Botol kaca bermulut lebar Botol kaca tinggi Botol kaca mempunyai penutup Bahan/ Radas Spesimen pilihan Botol pilihan Botol spesimen Sekeping kaca nipis segi empat tepat Bahan pengawet, Etanol atau Formalin Contoh : Pengawetan Spesimen Secara Basah Spesimen Kaca segi empat tepat Botol pilihan Formalin Etanol Spesimen Kepekatan Pengawetan Haiwan kecil (seperti serangga dan invertebrata lain) Alkohol 70-80% Haiwan besar (seperti moluska, amfibia, reptilia dan mamalia) Formalin 4% [100ml 40% formalin asal + 900% ml air suling] Tali nilon atau benang Kloroform Kapas Forsep (peralatan lain yang sesuai) Nylon Kloroform Forsep Kapas 1. Matikan spesimen dengan menggunakan kloroform dalam sebuah botol berpenutup.
2. Ikat spesimen pada sekeping kaca nipis segi empat tepat dengan tali nilon atau benang
3. Pastikan susunan spesimen pada kedudukan yang terbaik supaya dapat dilihat dengan jelas Kaedah: 4. Botol pengawet mestilah diisi dengan bahan pengawet sehingga ke aras di mana apabila botol ditutup, tidak terdapat ruang udara di dalamnya. 5. Sapu tepi tudung dengan lilin cair supaya kedap udara. 6. Tampilkan label yang mengandungi antara maklumat-maklumat berikut: Nama sains: Nama am: Tarikh: Habitat/Tempat spesimen diperoleh: Nama pengumpul: Larutan Pengawet: 4% Formalin disuntik Anggota dalam turut di awet 5cm setiap jarak perlu disuntik di sepanjang badan Pengawetan kering Tidak direndam dalam bahan pengawet Tempat penyimpanan Kering, gelap, bebas daripada perosak, berhawa dingin Pengawetan Spesimen Tumbuhan Secara Basah Pengawetan Tumbuhan
Lumut Hati Lumut Jati 1. Lumut Hati dan Lumut Jati Spesimen-spesimen tumbuhan boleh diawet dalam jangka masa tertentu di dalam larutan Formalin Asetik-alkohol (F.A.A.). Pelbagai jenis larutan yang ditambah dengan kuprum telah disyorkan bagi mengawet dan mengekalkan warna hijau dalam tumbuhan. Meskipun begitu, masih tiada larutan yang mampu mengekalkan warna hijau tumbuhan buat selama-lamanya. (Pengawetan spesimen haiwan kecil dan tumbuhan, t.t.).
Gunakan 50% bagi pengawetan bahan tumbuhan yang lembut. Gunakan 3 ml asid asetik dan 7 ml formalin bagi bahan- bahan keras seperti berkayu (woody).
Penyediaan Larutan Formalin Asetik-alkohol (F.A.A.). Bahan Kuantiti Ethyl Alkohol 70% 90 ml Formalin, Formaldehyde 5 ml Asid Asitik Glacial 5 ml Kaedah-kaedah berikut mampu mengawet dan mengekalkan warna hijau pada tumbuhan dengan berkesan bagi satu-satu jangka masa tertentu bergantung kepada jenis tumbuhan. (Pengawetan spesimen haiwan kecil dan tumbuhan, t.t.)
Cara : Rendamkan spesimen dalam larutan ini selama 3-4 hari. Selepas itu pindahkan ke larutan F.A.A (tanpa CuSo4) untuk disimpan.
1) Larutan F.A.A. dengan Kuprum Sulfat Bahan Kuantiti Kuprum Sulfat 0.1 g Ethyl alkohol, 50% 90ml Formalin, 40% formaldehyde 5 ml Asid Asetik 5 ml Larutan ini dicadangkan untuk alga hijau tetapi sesuai juga untuk lumut hati dan lumut jati. Rendamkan spesimen dahulu dalam larutan selama 3 hingga 10 hari bergantung pada saiz tumbuhan. Kemudian pindahkan ke dalam larutan F.A.A. untuk disimpan.
2. Lactophenol kuprum Bahan Kuantiti Fenol 20 g Asid Laktik 20 g Gliserin 40 g Air Suling 20 ml Kuprik Keloroid 0.2 g Kuprik Asetat 0.2 g i) Alga air tawar : 2. Alga Rumpai Air i) Alga air tawar : Larutan-larutan yang disebut di bawah dicadangkan bagi semua jenis alga kecuali yang berbentuk unicellular lembut (delicate). Penambahan sedikit kuprum sulfat mungkin dapat membantu mengekalkan sedikit warna alga hijau.
A) Formalin-chroma alum Bahan Kuantiti Kalium-kronalum 10 g Formalin 4% 5 ml Air 500 ml B) Formalin -Asid Asetik Glacial
Bahan Kuantiti Air 72 ml Formalin (40% Formaldehyde) 5 ml Gliserin 20 ml Asid Asetik Glacial 3 ml c) Transeans solution Bahan Kuantiti Air 60 ml Ethyl Alkohol 30 ml Formalin 10 ml Gliserin 5 ml
Alga Merah ii) Alga Laut a) 3 % Formalin
Untuk alga yang besar gunakan 5 ml formalin
Bahan Kuantiti Formalin 3 ml Air Laut 97 ml b) Ethly alkohol
Untuk menetapkan warna hijau dalam alga laut, larutan berikut adalah dicadangkan.
Bahan Kuantiti Ethyl Alkohol 70 ml Air Laut 30 ml
Kulat Mangkuk Cendawan rak Bracket Fungus 3. Kulat Kulat-kulat segar (freshy) seperti cendawan, kulat bracket dan kulat mangkuk serta bahagian-bahagian yang dijangkiti parasit-parasit kulat boleh diawet untuk jangka masa tertentu dengan menggunakan bahan-bahan pengawet berikut:
a) 5 % formalin (tambahkan 5 ml formaldehyde kepada 5 ml air suling. b) F.A.A. (Formalin-asid asetik alkohol)
Bahan Kuantiti Formaldehyde (larutan 40%) 50 ml Asid asitik glacial 50 ml Alkohol 60% (ethanol atau isopropil) 900 ml Bagi mengawet kulat berwarna formulasi- formulasi berikut adalah disyorkan. a) Kulat yang terdapat pigmen larut air
Bahan Kuantiti Asid Asetik Glacial 10 ml Mercuric Acetate 1.0 ml Plumbum Asetat Neutral 10.0 ml Ethyl Alkohol 90% 1000 ml b) Kulat yang terdapat pigmen tak larut
Bahan Kuantiti Asid Asetik Glacial 5 ml Mercuric Acetate 10 ml Air Suling 100 ml Pengawetan Spesimen Haiwan Secara Kering
Prosedur Pengawetan Matikan haiwan yang ingin diawet dengan menggunakan kloroform. Bahagian tubuh yang mudah rosak dikeluarkan dan digantikan dengan bahan kering lain seperti sabut atau kapas. Tempat pembedahan dijahit dengan baik dan kemas supaya kesan-kesan pembedahan dapat diminimumkan. Bahagian-bahagian lembut lain yang sukar dikeluarkan atau tisu yang tebal boleh diawet secara suntikan formalin 3% Bahagian mata boleh diganti dengan mata palsu. Spesimen haiwan dikeringkan di dalam oven pada suhu 50C.-70C. Pengawetan Spesimen Serangga Langkah 1: Mengumpul Serangga
1) Serangga dikumpulkan daripada persekitaran dengan menggunakan jaring (sweep net). 2) Jaring berkenaan sesuai digunakan pada permukaan-permukaan tumbuhan.
(Shaari Omar, t.t.) Langkah 2: Mematikan serangga
1) Ethyl acetate diletakkan pada kapas atau bahan-bahan jerap (absorbent materials) di dalam sebuah botol (killing bottle). 2) Ethyl acetate tidak sebahaya sianid meskipun ia terbakar. 3) Spesimen akan menjadi lebih lembut (relex dan tidak tegang) walaupun ditinggalkan selama beberapa hari di dalam botol yang mengandungi ethyl acetate. Rajah 1.1: Serangga dimatikan di dalam botol. Langkah 3: Mengawet
1) Serangga-serangga yang berkulit keras biasanya dipin atau disemat. 2) Serangga berbadan lembut seperti afid dan anai-anai boleh dibunuh dan disimpan dalam alkohol 70%. 3) Alkohol isopropyl adalah bahan pengawet alternatif yang dapat digunakan selain ethyl alkohol. Bahan Kuantiti Ethyl Alkohol 1485 ml Air Suling 330 ml Asid Glacial Acetik 83 ml Benzol 83 ml Larutan Hoods 4) Larva kupu-kupu atau rama-rama perlu disimpan dalam larutan KAAD sehingga kembang sepenuhnya (30 minit hingga beberapa jam). 5) Seterusnya, spesimen disimpan dalam alkohol 95 %. Larutan KAAD Bahan Kuantiti Kerosene 1 bahagian Alkohol Ethyl 95% 10 bahagian Asid Asetik Glacial 2 bahagian Diaxane 1 bahagian 1) Serangga berkulit keras (bersaiz besar) disemat dengan pin dari atas menembusi badannya. Jenis Coleoptera (kumbang) disemat menerusi kepak kanannya. 2) Lebah, rama-rama/kupu-kupu disemat menerusi thorax dan pangkal kepaknya.
(Shaari Omar, t.t) Langkah 4: Menyemat Serangga (Pinning)
3) Serangga kecil boleh ditenggekkan (mount) ke atas kertas tebal (cardboard points) dengan menggunakan gam. 4) Serangga diletakkan dalam kedudukan di mana kepalanya berhadapan kehadapan dan point hujung tiga segi cardboard tersebut berada di sebelah kiri pin. Menyemat Serangga Kecil Rajah 1.2: Cara penyematan rama-rama/ kupu-kupu 1) Serangga yang telah disemat dikeringkan sebelum disimpan di dalam kotak-kotak serangga. 2) Serangga disusun di atas keratan polystyrene dan masukkan ke dalam ketuhar pada suhu 45C,dan dikeringkan sehingga beberapa hari. 3) Serangga boleh dikeringkan di bawah matahari dengan penjagaan rapi daripada dimakan oleh semut-semut perosak dan lainnya. Langkah 5: Mengering Serangga 1) Spesimen mestilah dilabel: -nama tempat dari mana ianya dikutip. -tarikh kutipan -nama pengutip 2) Saiz label mestilah kecil dan diletakkan lebih kurang 5/8 inci pada pin serta dilekatkan selari dengan spesimen. Langkah 6: Melabel 3) Nota-nota tambahan boleh ditulis pada label yang lain dan dilekatkan lebih kurang inci pada pin di bawah label yang terdahulu tadi: - jenis - tumbuhan di mana ianya dikutip
Rajah 1.3: Spesimen-spesimen serangga yang telah dilabel. 1) Spesimen disimpan dalam kotak-kotak serangga khusus yang dilapis gabus dan ditutup dengan kertas putih. Ianya seeloknya mesti kedap udara dan dapat menghalang perosak-perosak seperti semut, lipas atau gegat memasukinya. 2) Ubat gegat (Naftalena) perlu dilekatkan dalam gulungan kain nipis di bahagian bawah disebelah tepi kotak. Ini perlu diperiksa dan ditambah dari masa ke semasa. Langkah 7: Menyimpan Serangga Bahan Kuantiti Serbuk Naftalena 3 Ib (1360g) Kloroform 1 Ib Beechwood Creosolte 1 Ib Minyak petrol 4 pts Larutan Rawatan Kotak 3) Ianya disapukan di permukaan dalam kotak dan dijemur sehingga kering. 1) Campurkan kloroform dengan 1 Ib serbuk naphthalene, kacau hingga sekata dan tambahkan lagi 1 Ib serbuk naftalena dan diikuti dengan beechwood Creosolte. 2) Kacau untuk melarutkan dan kemudian tambahkan petrol. 3) Selepas disapukan pada kotak, keringkan kotak sehingga yang tinggal cuma selapis serbuk halus naftalena. Cara Penyediaan: 1) Spesimen yang kering mestilah dilembutkan sebelum ianya disemat atau ditenggek. 2) Serangga-serangga yang kering boleh diletakkan dalam bekas yang tidak masuk angin (air-tight) di atas sekeping kertas tebal ataupun kertas jerap yang diletakkan di atas pasir basah.
Langkah 8: Melembutkan (relax) Serangga (dewasa) 3) Bubuh sedikit (beberapa titik) asid karbolik pada pasir ini bagi mengelakkan kulat dari tumbuh. Spesimen-spesimen akan menjadi lembut selepas 24 jam hingga 48 jam. 4) Spesimen-spesimen seeloknya disemat ketika baru ditangkap berbanding ditunggu hingga di saat-saat akhir dimana ianya perlu dilembutkan.
Rajah 1.4: Contoh koleksi spesimen serangga Pengawetan Spesimen Tumbuhan Secara Kering (Herbarium) Pengumpulan Penekanan Pengeringan Pemanjangan Pengelasan Pelabelan Penyimpanan Kaedah (proses yang terlibat) Perlu mengumpul bahagian-bahagian penting; buah, daun dan bunga. Jika tumbuhan bersaiz kecil, lebih baik masukkan bahagian-bahagian akar dan struktur istimewa. Keratan spesimen yang diambil haruslah segar dan sihat.
Pengumpulan Susun spesimen secara mendatar di antara kertas akhbar lama. Pastikan bahagian-bahagian seperti daun dan bunga terbuka/ kembang supaya mudah dilihat. Bahagian daun pula perlu diselang-selikan antara bahagian terlentang dan tertiarap. Letak papan lapis di bahagian atas dan bawah susunan spesimen Untuk menambah tekanan, ketatkan ikatan antara papan lapis atau letakkan pemberat di atas bahagian susunan. Penekanan Keringkan bahagian daun dan bunga dalam alat tekanan kerana ia mudah kuncup dan layu. Atau, keringkan didalam ketuhar pada suhu 45-60 selama 3-6 hari. Atau, keringkan pada udara biasa tetapi kertas akhbar perlu ditukar selang sehari dan berat pemberat sentiasa ditambah (selama kira-kira 2 minggu) Pengeringan Spesimen yang belum mati sepenuhnya tidak boleh dikeringkan. Jika tidak, spesimen berkenaan akan layu semasa pengeringan. Jadi, kertas pembalut hendaklah disemburkan dengan larutan formalin 40%. Buangkan kertas yang sudah dilembabkan apabila penukaran berikutnya dilakukan. Susun spesimen yang kering di atas kertas yang tebal dan terang (putih dan cerah) bersaiz 28 cm x 43 cm. Lekatkan spesimen pada kertas dengan menggunakan kertas pelekat atau benang supaya spesimen boleh dipindahkan ke atas bahan lain tanpa merosakkan spesimen. Pelekat selofan pula kurang sesuai kerana ia mudah rosak, bertukar warna serta kehilangan pelekat. Pemanjangan Untuk mengelakkan serangan perosak atau kulat, sapu atau titikan spesimen dengan larutan merkuri klorida 2% di dalam alkohol. Lakukan rujukan pada buku atau pakar dalam bidang pengelasan seperti muzium, universiti atau Institut Penyelidikan Perhutanan Malaysia (FRIM) di Kepong, Kuala Lumpur. Pengelasan Nilai sesuatu koleksi herbarium bergantung kepada pelabelan yang tepat Biasanya diletak pada suatu sudut herbarium tersebut Pastikan anda menomborkan spesimen dan menyimpan salinan untuk rujukan
Pelabelan Nama saintifik/botani Nama tempatan/asal Nama Bahasa Inggeris Lokasi spesimen ditemui Nama orang yang menemui/pengumpul Tarikh Warna asal dan bentuk bunga Jenis : pokok renek, herba,memanjat,sayuran Warna batang, tebal kulit Tarikh berbuah/berbunga Jenis tanah spesimen tumbuh Sifat tumbuhan: Kaedah pendebungaan dan penyebaran benih Simpan dalam keadaan yang gelap, kering dan sejuk agar tahan lama. Penyimpanan Pengawetan spesimen haiwan kecil dan tumbuhan. (t.t.). Dicapai pada 10 Ogos, 2014, daripada http://makmal.9f.com/awethaiwan.htm Shaari Omar (t.t.). Pengawetan spesimen biologi. Dicapai pada 11 Ogos, 2014, daripada ashaario.jimdo.com/app/download/.../KULIAH+4.pdf...