LAPORAN MIKROBIOLOGI PANGAN

PEMBUATAN MEDIA DAN TEKNIK ISOLASI BAKTERI

Disusun oleh:
Kelompok A V
Juli Sek! A!um "#$"%%#&
M' Ti P!(i)i "#$"%%#*
Rini( +u!i, "#$"%%$-
Si.!(llh Solh "#$"%%&"
POLTEKKES KEMENKES TANJUNG KARANG
JURUSAN GI+I
#%"$/#%"&
BAB I
PENDAHULUAN
Soe!'o)ino(o M0 "12-0 Budidaya Jaringan dan Manfaatnya0 3o4'k!(: 5kul(s Biolo4i
Uni6e!si(s G,7h M,0
1.1 Latar Belakang
Ki( (hu .h) semu mkhluk hi,up mem.u(uhkn nu(!ien( un(uk pe!(um.uhn
,n !ep!o,uksin'0 Nu(!ien me!upkn .hn .ku 'n4 ,i4unkn un(uk mem.n4un
komponen/komponen selule! .!u ,n un(uk men4hsilkn ene!4' 'n4 8,i.u(uhkn
,lm p!oses kehi,upn sel0 Un(uk mem.u(uhkn ,n men4em.n4.ikkn mik!o.
,ipe!lukn su(u su.s(!( 'n4 ,ise.u( me,ium0 Se,n4kn me,ium i(u sen,i!i se.elum
,i4unkn h!us ,lm ke,n s(e!il !(in' (i,k ,i(um.uhi oleh mik!o. lin 'n4
(i,k ,ih!pkn 4! mik!o. ,p( (um.uh ,n .e!kem.n4.ik ,en4n .ik ,i ,lm
me,ium9 mk ,ipe!lukn s'!( (e!(en(u 'n4 ,in(!n' .h) ,i,lm me,ium h!us
(e!kn,un4 semu unsu! h! 'n4 ,ipe!lukn un(uk pe!(um.uhn ,n pe!kem.n4n
mik!o. kemu,in susunn mknnn'9 (eknn osmosis9 ,e!7!9 kesmn :p;<9
(empe!(u!e9 s(e!ilissi0
Pe!lu ki( ke(hui pem.u(n me,i ,i,s!kn p, =un4si9 komposisi me,i9 ,n
konsis(ensin' sehin44 ,lm kul(u! (u me,i 'n4 ,i.u( ,p( menum.uhkn
mik!o. ,en4n .ik ,n sesui ,en4n .ik ,n sesui ,en4n 'n4 ,ih!pkn0
3n4 mel(! .elkn4i p!k(ikum pem.u(n me,i ,lh 4! p!k(ikn ,p(
menm.h pen4e(hun men4eni 8! pem.u(n me,ium pe!(um.uhn mik!o.0
Me,i ,lh su(u .hn 'n4 (e!,i!i ,!i 8mpu!n >(/>( h! :nu(!ien(< 'n4
.e!4un un(uk mem.ikkn mik!o.0 Den4n mempe!4unkn .e!m8m/m8m me,i
,p( ,ilkukn isolsi9 pe!.n'kn9 pen4u7in si=(/si=( =isiolo4is ,n pe!hi(un4n
7umlh mik!o. :Su(e,7o9"11?<0
Di ,lm .i,n4 ilmu mik!o.iolo4i9 un(uk ,p( menelh .k(e!i khususn' ,lm
skl l.o!(o!ium9 mk (e!le.ih ,hulu ki( h!us ,p( menum.uhkn me!ek ,lm
su(u .ikn 'n4 mn ,i ,lmn' hn' (e!,p( .k(!i 'n4 ki( .u(uhkn (e!se.u(
(np ,n' kon(minsi ,!i mik!o. lin0 Bikn 'n4 sem8m ini .isn' ,ikenl
,en4n is(ilh .ikn mu!ni0 Un(uk melkukn hl ini9 h!uslh ,i men4e!(i 7enis/ 7enis
nu(!ien 'n4 ,is'!(kn .k(e!i ,n 7u4 m8m li4kun4n =isik 'n4 men'e,ikn
kon,isi op(imum .4i pe!(um.uhn .k(e!i (e!se.u( :Pel8>!9 "12?<0 Selin (eknik
pe!(um.uhn .k(e!i (u (eknik isolsi ,i (s9 ,ikenl 7u4 ,n' (eknik isolsi
mik!o. 'i(u inokulsi 'n4 me!upkn su(u (eknik pemin,hn su(u .ikn (e!(en(u
,!i me,ium 'n4 lm ke me,ium 'n4 .!u ,en4n (u7un un(uk men,p(kn su(u
.ikn 'n4 mu!ni (np ,n' kon(minsi ,!i mik!o. 'n4 lin 'n4 (i,k
,iiin4inkn0
Be!,s!k!kn hl (e!se.u( ,i (s mk ,ilkuknlh p!k(ikum ini un(uk men4e(hui
(eknik ,!i isolsi ,n inokulsi .k(e!i0
1.2 Tujuan
"0 Mempel7!i 8! pem.u(n me,i un(uk menum.uhkn mik!oo4nisme
#0 Mempel7!i (eknik pen44unn l( l.o!(o!ium9 konsep s(e!ilissi ,n p!ose,u!
'n4 ,i4unkn ,lm subuculturing ,n isolsi .k(e!i0
$0 Men4e(hui (eknik isolsi .k(e!i0
&0 Mempel7!i mo!=olo4i koloni 'n4 (um.uh ,lm kul(u! mu!ni hsil isolsi0
A=!in(o9 L09 #%%&9 Menghitung Mikroba Pada Bahan Makanan, @k!)l :Suplemen
piki!n !k'( un(uk ip(ek<9 5!msi 5MIPA ITB : Bn,un40
D7i,9 N09 #%%%9 Metode Instrumental dalam Mikrobiologi Umum9 UN;AS
P!ess : Mkss!0
D)i,7osepu(!o9 "12%9 Dasar-Dasar Mikrobiologi9 D7m.(n : Jk!(0
;,ioe(omo9 R0 S09 "11$9 Mikrobiologi Dasar dalam Praktek9 G!me,i : Jk!(0
Nu! In,!i'ni9 Asnni9 #%%*9 Penuntun Praktikum Mikrobiologi Akuatik9 5kul(s Pe!iknn
,n Ilmu Kelu(n9 Unhlu : Ken,!i0
R(n9 S!i9 "11%9 Mikrobiologi Dasar dalam Praktek9 Jk!( : G!me,i0
BAB II
METODELOGI
2.1 Waktu dan Temat
Ak(u: "$0%% s, selesi
Temp(: L.o!(o!ium Te!p,u0
1.2 Alat dan Ba!an
"0 Pem.u(n me,i:
Al( :
4els pil
4els uku!
(im.n4n
pen4,uk
pipe( (.un4 !eksi
8)n pe(!i
(e!mome(e!
kps un(uk sum.(
ppn mi!in4
(.un4 !eksi
inku.(o!
u(okl=
Bhn :
NA
PDA
#0 Teknik isolsi .k(e!i:
Al( :
lmpu pi7! sp!i(us
7!um ose
7!um inokulsi
(.un4 !eksi
petridish
pipe( uku! s(e!il "ml
inku.(o!
u(okl=0
Bhn :
me,i Nu(!ien( 4! (e4k
me,i Nu(!ien( 4! mi!in4
nu(!ien( 8i!
(elu!
2." Pr#$edur Per%#&aan
"0 Pem.u(n nu(!ien 4!
Am.il kemsn smpel me,i9 .8 pe(un7uk pen'ipnn'0 ;i(un4 7umlh 'n4
,ipe!lukn un(uk mem.u( -% ml me,i kemu,in (im.n4lh sesui 7umlh 'n4
,ipe!lukn
Tun4kn -% ml Bu,es ke,lm 4els pil
@mpu!kn me,i 'n4 (elh ,i(im.n4 ke,lm Bu,es
Di,ihkn l!u(n me,i sm.il (e!us ,i,uk
Temp(kn me,i ,lm ),h un(uk s(e!ilissi 4! mi!in49 4! (e4k9 ,n 4!
8)n
Sum.( (.un4/(.un4 ,en4n kps9 un(uk 8)n pe(!i ,ilkukn ,en4n 8!
,i.un4kus ,en4n ke!(s
S(e!ilkn ,en4n o6en ,en4n suhu "#"
o
@ selm "- meni(
Un(uk 4! mi!in49 le(kkn (.un4 ,i(s ppn mi!in4 smpi ,in4in ,n p,(
#0 Pem.u(n PDA
Am.il kemsn smpel me,i9 .8 pe(un7uk pen'ipnn'0 ;i(un4 7umlh 'n4
,ipe!lukn un(uk mem.u( -% ml me,i kemu,in (im.n4lh sesui 7uml 'n4
,ipe!lukn
Tun4kn -% ml Bu,es ke,lm 4els pil
@mpu!kn me,i 'n4 (elh ,i(im.n4 ke,lm Bu,es
Di,ihkln l!u(n me,i sm.il (e!us ,i,uk
S(e!ilkn ,en4n o6en ,en4 suhu "#"
o
@ selm "- meni(
Am(i pe!u.hn ,n )!nn'
$0 ubculturing p, me,i 8i!
Pe!h(ikn (eknik sep(is ,lm inokulsi
Lkukn pemin,hn .k(e!i p, me,i 8i!
Be!i l.el p, (ip hsil subculturing
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-
o
@
selm # C #& 7m
Am(i pe!u.hn p, me,i ,en4n melih(
Keke!uhn me,i
A, (i,kn' en,pn p, me,i
&0 ubculturing p, me,i 4! (e4k
Lkukn pemin,hn .k(e!i se8! sep(is ,en4n menusukkn 7!um ose 'n4
su,h ,i8elupkn p, suspensi .k(e!i me,i 4! (e4k
Be!i l.el p, se(ip (.un4 hsil subculturing
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-
o
@
selm # C #& 7m
Am(i pe!(um.uhn kloni p, me,i9 p!(um.uhn 'n4 le.ih .n'k p,
.4in pe!mukn menun7ukkn si=( e!o. .k(e!i9 se,n4 pe!(um.uhn ,i.4in
,s! me,i menun7ukkn si=( ne!o. .k(e!i
-0 ubcultiring p, me,i 4! mi!in4
Lkukn pemin,hn .k(e!i se8! sep(is ,en4n men44o!eskn " ose suspensi
.k(e!i p, pe!mukn me,i 4! mi!in4
Pe!lu ,ipe!h(ikn pe!mukn me,i 7n4n smpi (e!luk : !usk < p, )k(u
men44o!es
Be!i l.el p, se(ip (.un4 hsil subculturing
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-
o
@
selm # C #& 7m
Am(i pe!(um.uhn koloni p, pe!mukn me,i
?0 ubculturing p, me,i pl(e 4! se8! 4o!esn
Lkukn pemin,hn .k(e!i se8! sep(is ,en4n men44o!eskn " ose suspensi
.k(e!i p, pe!mukn 4! pl(e9 pe!lu ,ipe!h(ikn pe!muknme,i 7n4n
smpi (e!luk p, )k(u men44o!es
Be!i l.el p, se(ip (.un4 hsil subculturing
Inku.sikn (nun4 hsil subculturing p, inku.(o! ,en4n (empe!(u! $-
o
@
selm # C #& 7m
Am(i pe!(um.uhn koloni p, pe!mukn me,i
*0 Pen4en8e!n suspensi .k(e!i
Se,ikn $ (.un4 N@l %92-D s(e!il 1 ml
Tun4kn " ml suspensi .k(e!i p, (.un4 N@l %92-D se8! sep(is9
homo4enkn9 pen4en8e!n ini ,lh "E"%C9 .e!i l.el
Am.il " ml hsil pen4en8e!n "E"%C9 (un4 ke ,lm (.un4 1 ml N@l %92-D
s(e!il .e!iku(n' se8! sep(is9 homo4enkn9 pen4en8e!n ini ,lh "E"%%C9 .e!i
l.el
Am.il " ml hsil pen4en8e!n "E"%%C9 (un4 ke ,lm (.un4 1 ml N@l %92-D
s(e!il .e!iku(n' se8! sep(is9 homo4enkn9 pen4en8e!n ini ,lh "E"%%%C9
.e!i l.el
Am(i
Pem&a!a$an '$#la$'
Pe!8o.n kli ini mem.hs (en(n4 8!/8! (u (eknik 'n4 .is ,i4unkn ,lm
men4isolsi mik!o. ,!i h.i(( lmin'0 Teknik isolsi mik!oo!4nisme ,lh su(u
ush un(uk menum.uhkn mik!o. ,i lu! lin4kun4n lmihn'0 Pemishn
mik!oo!4nisme ,!i lin4kun4nn' ini .e!(u7un un(uk mempe!oleh .ikn .k(e!i 'n4
su,h (i,k .e!8mpu! l4i ,en4n .k(e!i linn' (u 'n4 ,ise.u( .ikn mu!ni0 Di
kehi,upn no!mln' (u ,i h.i(( lmihn' mik!o. suli( ,i(emukn ,lm .en(uk
koloni sen,i!i0 Mik!o. ini ps(i ,i(emukn ,lm .en(uk koloni 'n4 hi,up .e!sm/sm
,en4n koloni mik!o. 'n4 linn'0 Oleh k!en i(u9 pen4isolsin ini ,ilkukn0
Pe!8o.n ini ,i)li ,en4n (hp pen4en8e!n0 Dlm hl ini9 me,ium 4! 'n4
,i4unkn ,ien8e!kn (e!le.ih ,hulu selm F"- meni( p, ;o( Pl(e ,en4n suhu $%%G@0
;l ini .e!(u7un 4! me,ium 'n4 ,i4unkn ,p( men8i! se(elh ,isimpn selm
.e.e!p h!i ,i !e=!i4e!(o!0 Se(elh ,ien8e!kn ,en4n men44unkn ;o( Pl(e9 me,ium ini
,i,in4inkn seki(! - meni( nmun (i,k 7n4n smpi ,in4in sekli0 ;l ini ,ilkukn un(uk
men4hin,!i me,ium 4! (i,k kem.li men4e!s0 Se(elh 4k ,in4in9 me,ium ini pun sip
un(uk ,i4unkn0
Pen4isolsin ini ,iln7u(kn ,en4n pem.u(n me,ium (emp( mik!o. ini nn(in'
kn (um.uh (u ,en4n k( lin mem.u( h.i(us sin(e(isn'0 Me,ium ini (e!le.ih ,hulu
,is(e!ilkn ,en4n 8! meli,h/pikn mulu( .o(ol (emp( pen'impnn me,ium 4!
(e!se.u(0 Be4i(upun ,en4n 8)n pe(!i i(u sen,i!i0 Se.elum semu p!ose,u! ke!7 ,ilkukn
(e!le.ih ,hulu (n4n h!us ,is(e!ilkn men44unkn l8ohol *%D 'n4 ,isemp!o(kn ke
selu!uh pe!mukn (n4n0
Dlm pe!8o.n ini9 kmi men44unkn 7!um ose se.4i me,i un(uk memin,hkn
mik!o. (e!se.u( ,!i h.i(us lmin'0 J!um ose (e!se.u( (e!le.ih ,hulu h!us ,is(e!ilkn
,en4n 8! mem.k!n' p, .unsen smpi 7!umn' pi7!0 Llu 7!um ose (e!se.u(
,i,imkn selm F# meni(9 (u7un hl ini 'i(u un(uk men,in4inkn 7!um ose/n' 'n4
h.is ,ipi7!kn (,i 4! ke(ik 7!um ose i(u ,i4o!eskn ke ,lm 8)n pe(!i 'n4 .e!isi
o.7ek mik!o. 'n4 kn ,iisolsi9 (i,k se4e! mem(ikn mik!o.n'0
P!k(ikum kli ini ,lh mempel7!i (eknik isolsi mik!o. ,en4n 8! 4o!esn0
Teknik 4o!esnn' ,ilkukn ,lm 8)n pe(!i0 Den4n men44unkn 7!um ose 'n4
se.elumn' ,ipnskn p, pi .unsen llu ,i8elupkn p, lkohol un(uk s(e!ilissi
7!umn'0 Go!esn ,i.e!ikn sn4( (ipis sekli p, pe!mukn (s me,ium ,lm 8)n
pe(!i se8! >i4/>49
P, pe!8o.n ini mik!o. 'n4 ,i4unkn hn' s(u 7enis 'i(u .k(e!i ,n
men44unkn ,u me,ium 'kni me,ium NA ,n me,ium PDA0
Me,ium NA .e!=un4si un(uk mem.ikn .e!.4i m8m mik!oo!4nisme se!( kul(u!
.k(e!i0 Se,n4kn me,ium PDA .e!=un4si un(uk menum.uhkn =un4i 7enis kpn40 P,
p!k(ikum ini ki( mempel7!i .4imn melkukn (eknik inokulsi .ikn
mik!oo!4nisme p, me,ium s(e!il sehin44 .is men,e=inisikn .h) (eknik inokulsi
,lh peke!7n memin,hkn .k(e!i ,!i me,ium lm keme,ium .!u ,en4n (in4k(
ke(eli(in sn4( (in44i ,n ,i(un(u( un(uk .eke!7 se8! sep(i8 'i(u .e.s ,!i pen4!uh
kon(minn mik!oo!4nisme 'n4 lin0 Teknik sep(i8 ,ilkukn ,en4n pen'e,in l(/l(
ke!7 'n4 s(e!il ,n .eke!7 ,i,ek( pi Bunsen 4! (e!hin,! ,!i kon(minn u,!0p,
)k(u inokulsi 7!um 'n4 ,i4unkn un(uk mein,hkn mik!o. h!us ,ipi7!kn ,i(s pi
se4e! se.elum ,n sesu,h melkukn pemin,hn0 Pemnsn ini men4hn8u!kn semu
.en(uk kehi,upn 'n4 , p, pe!mukn 7!um (u l( pemin,hn9 se(elh ,i inokulsi
.ikn .k(e!i ,isimpn ,n ,iinku.si ,lm lin4kun4n 'n4 sesui un(uk pe(um.uhn0
Se(elh ,iinku.si selm &2 7m ,ipe!oleh hsil pe!(um.uhn mik!o. hn' p,
me,ium NA9 se,n4kn p, me,ium PDA (i,k men4lmi pe!(um.uhn sm sekli0 ;l
ini ,ik!enkn mik!o. 'n4 ,iisolsi ,lh 7enis .k(e!i9 ,n .k(e!i hn' ,p( (um.uh
p, me,ium NA0 J,i 'n4 kn ,i.hs p, kli ini ,lh .4imn pe!(um.uhn
mik!o. p, me,ium NA0 P, 8)n pe(!i pe!(m9 7umlh koloni 'n4 (um.uh ,lh
se.n'k 2 koloni ,n memiliki mo!=olo4i sepe!(i )!n pu(ih susu9 (epi .e!lekuk9 .en(uk (k
.e!(u!n ,n men'e.!9 pe!mukn (im.ul9 ,n (eks(u! kusm0 P, 8)n pe(!i ke,u9
7umlh koloni 'n4 ,i(emukn ,lh se.n'k & koloni ,n .e!)!n k!em9 (epi .e!lekuk9
.en(uk (k .e!(u!n ,n men'e.!9 pe!mukn (im.ul9 ,n (eks(u! kusm0 P, 8)n pe(!i
ke(i4 ,n keemp(9 msin4/msin4 ,i(emukn mik!o. ,en4n 7umlh - koloni ,n "
koloni9 ,n un(uk mo!=olo4in' sm ,en4n p, 8)n pe(!i ke,u0 Un(uk 8)n pe(!i
(e!khi! ,i(emukn mik!o. se.n'k ? koloni9 ,n memiliki mo!=olo4i sepe!(i )!n k!em9
(epi (k .e(u!n9 .en(uk (k .e!(u!n ,n men'e.!9 pe!mukn (im.ul ,n (eks(u! kusm0
Be!,s!kn hsil pe!8o.n (e!se.u( ,i(s mk ,p( ,ik(kn pe!8o.n (e!se.u(
.elum .e!hsil0 Menu!u( R(n :"11%<9 .il men44unkn (eknik men44o!es 'n4 .ik mk
p, su(u !e (e!(en(u p, pe!mukn me,ium 'n4 ,i4o!es9 sel/sel .k(e!i kn
(e!pishkn s(u ,!i linn'0 Sel/sel (un44l 'n4 (e!pishkn sepe!(i ini ,ise.u( sel in,uk0
B4i ke.n'kn .k(e!i9 se(elh ms inku.si selm #& 7m9 s(u koloni mu!ni ,p(
(e!,i!i ,!i -%/*# 4ene!si sel 'n4 (im.ul ,!i s(u sel in,uk (un44l0 Den4n pe!k(n lin9
s(u koloni mu!ni (e!,i!i ,!i .e!mil'!/mil'! sel nk0 K!en i(u9 hen,klh ,iphmi
.h) pe!(um.uhn .k(e!i sesun44uhn' me!upkn pe!(m.hn 7umlh sel ,n .ukn
uku!n sel0
(.2.1. Nutrient Agar )NA*
Me,ium ,lh .hn 'n4 men4n,un4 8mpu!n nu(!isi 'n4 .e!mn=( un(uk
menum.uhkn mik!o.0 Me,ium !utrient Agar :NA< msuk ke,lm me,ium khusus k!en
,i .u( se.4i (emp( menum.uhkn mik!o. 'n4 su,h ,ike(hui komposisi
pem.u(nn'0 NA ,i .u( ,en4n komposisi 4! H 4! 'n4 su,h ,ip,(kn sehin44
NA 7u4 .is ,ise.u( ,en4n nu(!ien( p,( 'n4 ,i4unkn un(uk menum.uhkn .k(e!i0
5un4si 4! H 4! hn' se.4i pen4en(l nmun .ukn >( mknn p, .k(e!i9 4!
,p( mu,h men7,i p,( p, suhu (e!(en(u0 ;l ini sesui ,en4n pen,p(
D)i,7osepu(!o :"11&< 'n4 men'(kn .h) me,ium !utrient Agar ,lh slh s(u
me,ium p,( 'n4 memiliki komposisi 'i(u 4! H 4! 'n4 (elh ,i pnskn ,n men8i!
,en4n suhu 1-
%
@0 A4! H 4! ,lh >( pen4en(l ,n .ukn se.4i sum.e! mknn .4i
.k(e!i0 Menu!u( pen,p( Ameli09 et all :#%%-< 'n4 men'(kn .h) 4! H 4!
,i4unkn un(uk mem.u( me,ium p,(9 4! l!u( ,n men7,i p,( p, suhu &-
%
@0 NA
le.ih .e!si=( umum sehin44 mik!o. .n'k (um.uh p, me,i ini k!en s(uk(u! ,!i
nu(!ien( 4! i(u sesui ,en4n (emp( mik!o. (um.uh 'i(u suhu ,n kelem.pn n'
sehin44 mik!o. ,p( 8ep( (um.uh p, kon,isi (e!se.u(0
Ameli9G09 R9 et" al0 #%%-0 Isolsi ,n Pen4u7in Ak(i6si En>im Amilse ,n P!o(ese
Mik!o. ,!i Te!si Asl Klimn(n Timu!0 Bo4o!: Pus( Peneli(in Biolo4i0
D)i,7osepu(!o9 D0 "11&0 Ds!/,s! Mik!o.iolo4i0Jk!(: D7m.(n0
+. Pem&a!a$an
Me,ium me!upkn .hn 'n4 ,i4unkn un(uk menum.uhkn mik!oo!4nisme
,i(s (u ,i,lmn'9 me,ium (e!se.u( h!us memenuhi s'!(/s'!(9 n(! lin ,lh
h!us men4n,un4 semu >( h! 'n4 mu,h ,i4unkn oleh mik!o.9 h!us mempun'i
(eknn osmosis9 (e4n4n pe!mukn ,n p; 'n4 sesui ,en4n ke.u(uhn mik!o. 'n4
kn ,i(um.uhkn9 (i,k men4n,un4 >(/>( 'n4 ,p( men4hm.( pe!(um.uhn
mik!o.9 h!us .e!, ,lm ke,n s(e!il se.elum ,i4unkn9 4! mik!o. 'n4 ,i
(um.uhkn ,p( (um.uh ,en4n .ik0 Pe!8o.n kli ini 'i(u pem.u(n me,ium NA9
PDA9 LB DAN MEA0
NA :!utrien agar< ,i4unkn se.4i me,i pe!(um.uhn .k(e!i0 Pem.u(n me,ium
pe!8o.n ini ,en4n men44unkn NA :Nu(!ien A4!<9 ,imn ,lm pem.u(nn'
(e!le.ih ,hulu ,en4n 8! menim.n4 .hn 'n4 kn ,i4unkn ke,lm ne!8 nli(ik
sesui ,en4n 7umlh 'n4 ,ipe!lukn kemu,in memsukkn .hn ke,lm E!lenme'e!
#-% ml9 ,imn .hn (e!se.u( ,lh B,es #-% ml9 NA $9*- ,n 4! * 4!m se(elh i(u
,ipnskn ,i(s ho( pl(e &&%
o
@ ,i iku(i oleh pen4,ukn ,en4n men44unkn m4ne(ik
s(i!e!9 (u7un ,!i pemnsn ,n pen4,ukn ini ,lh un(uk men4homo4enkn NA ,en4n
B,es9 ,imn ,en4n pemnsn ,p( mempe!8ep( pel!u(n ,!i N ,n AB,es0 Se(elh
,ipnskn .e.e!p meni( l!u(n .e!u.h )!n ,!i ke!uh men7,i kunin4 ke8okl(n hl
ini menn,kn l!u(n (elh homo4en0 Se(elh i(u l!u(n ,i(m.hkn KO; " D 'n4
.e!(u7un men,p(kn p; ne(!l 'i(u * ,n ,i,in4inkn kemi,in ,iuku! p;n'9 p; 'n4
,ipe!oleh * hl ini menn,kn .k(e!i ,p( hi,up p, p; (e!se.u(9 hl ini sesui ,en4n
li(e!(!u! 'n4 men'(kn .k(e!i ,p( hi,up p, p; ?92/*0 Kemu,in ,imsukkn
ke,lm u(okl6 ,en4n mulu( E!lenme'e! ,isum.( ,en4n kps ,n ,ilpisi ke!(s
,ilu!n'0 Tu7un ,!i penu(upn ini 4! meminimlkn kon(minsi0 Pem.u(n NA
.e!,s!kn konsis(enn' (e!msuk me,ium p,( ,n menu!u( ke4unnn' (e!msuk
me,ium umum0
PDA :Potato Destore Agar< ,i4unkn un(uk menum.uhkn =un4i (u 7mu!0
Pem.u(n me,ium p, pe!8o.n ini ,en4n men44unkn PDA :Potato Destore Agar<
,imn ,lm pem.u(nn' (e!le.ih ,hulu ,en4n 8! memsukkn #%% ml B,es ,n -%
ml eks(!k ken(n49$9*- ,e4lu8ose ,n * 4! 4! kemu,in ,ipnskn ,i(s ho( pl(e &&%
o
@ ,iiku(i oleh pen4,ukn ,en4n (u7un ,!i pemnsn ,n pen4,ukn ini un(uk
men4homo4enkn PDA ,en4n B,es9 ,n pemnsn .e!(u7un mempe!8ep( pel!u(n
,!i PDA0 Se(elh ,ipnskn .e.e!p meni( l!u(n .e!u.h )!n ,!i ke!uh men7,i
kunin4 (u9 hl ini menun7ukkn l!u(n (elh homo4en0 Kemu,in l!u(n ,i,in4inkn ,n
,ipe!oleh p; -9*# hl ini sesui ,en4n li(e!(u! =un4i hi,up p, p; -9#/-920 Se(elh i(u
,imsukkn ke,lm u(okl6 (e(pi se.elum ,imsukkn mulu( E!lenme'e! ,i(u(up ,en4n
kps ,n kemu,in ,i.un4kus ,en4n ke!(s9 hl ini .e!(u7un 4! meminimlkn
kon(minsi0 PDA (e!msuk me,ium nonsin(e(ik k!en (e!msuk me,ium p,( se,n4kn
menu!u( =un4sin' (e!msuk me,ium umum0
MEA :Malt #$tract Agar< ,i4unkn se.4i me,i pe!(um.uhn khmi!0 Dimn
,lm pem.u(nn' (e!le.ih ,hulu mel!u(kn MEA :Malt #$tract Agar< se.n'k "#9-
4!m ke,lm e!lenme'e! #-% ml ,n menm.hkn B,es #-% ml se(elh i(u ,ipnskn
,i(s ho( pl(e ,en4n suhu &2%
%
@ ,iiku(i ,en4n pen4,ukn men44unkn m4ne(i8
s(i!e!9 (u7un ,!i pen4,ukn ,n pemnsn un(uk men4homo4enkn MEA ,en4n B,es
,n pemnsn .e!(u7un un(uk mempe!8ep( pel!u(n ,!i MEA0 Se(elh ,ipnskn
.e.e!p meni( l!u(n .e!u.h )!n ,!i 8okl( men7,i (u hl ini menu7ukkn l!u(n
(elh men7,i homo4en kemu,in l!u(n ,i,in4inkn ,n ,iuku! p;n'9 Ph p, MEA I -9&
F /%9# p; mksiml -9? ,n p; miniml -9#0 p; 'n4 ,ipe!oleh p, pe!8o.n ini 'i(u -9?0
Se(elh i(u ,imsukkn ke,lm u(okl= ,en4n mulu( E!lenme'e! ,i(u(up ,en4n kps ,n
,ilu!n' ,i.un4kus ,en4n ke!(s9 hl ini .e!(u7un un(uk meminimlkn kon(minsi0
LB :%aktosa Broth< ,i4unkn un(uk =e!men(si0 Dimn ,lm pem.u(nn' (e!le.ih
,hulu LB ,il!u(kn se.n'k $9#- 4!m ke,lm E!lenme'e! #-% ml ,n menm.hkn
B,es "%% ml se(elh i(u ,ipnskn ,en4n suhu $%%
%
@ ,iiku(i ,en4n pen4,ukn
men44unkn m4ne(ik s(i!!e!9 (u7un ,!i pen4,ukn un(u men4homo4enkn LB ,en4n
B,es se,n4kn pemnsn .e!(u7un un(uk mempe!8ep( pel!u(n ,!i LB0 Se(elh
,ipnskn l!u(n .e!u.h )!n ,!i me!h men7,i me!h (u9 hl ini menu7ukkn l!u(n
(elh homo4en0 Se(elh ,ipnskn l!u(n ,i,in4inkn kemu,in ,i uku! p;n'9 Ph 'n4
,ipe!oleh ?9* se,n4kn Ph ne(!l un(uk LB 'i(u ?920 Se(elh i(u mulu( E!lenme'e! ,isum.(
,en4n kps ,n ,ilu!n' ,i.un4kus ,en4n ke!(s9 hl ini .e!(u7un un(uk meminimlkn
kon(minsi ,n ,imsukkn ke,lm u(okl60
Au(okl6 ,lh l( 'n4 ,i4unkn un(uk s(e!ilissi0 Au(okl= (e!msuk ,lm (eknik
s(e!ilissi se8! =isik ,en4n p!insip !us up ,n (eknn0 Al( ini se!in4 ,i4unkn ,lm
(eknik pens(e!iln k!en (in4k( koe=isien ,n si=( l( 'n4 (i,k me!usk kn,un4n
,lm me,i pe!(um.uhn 'n4 ,ipki 'i(u NA9 PDA9 MEA ,n LB0
S(e!ilissi 'n4 ,ilkukn .e!(u7un un(uk men4hin,!i kon(minsi9 'i(u msukn'
mik!oo!4nisme 'n4 (i,k ,iin4inkn0 S(e!ilissi me!upkn su(u p!oses :kimi ,n =isik<
'n4 mem.unuh semu .en(uk hi,up (e!u(m mik!oo!4nisme0 S(e!ilissi 'n4 ,i4unkn
,lm pe!8o.n ini ,lh se8! =isik 'i(u men44unkn pns9 ,imn pns 'n4
,i4unkn ,lh .e!sm up i! 'n4 .isn' ,ise.u( s(e!ilissi .sh0
BAB ,
PENUTUP
A. -e$'mulan
Kesimpuln 'n4 ,i,p( ,!i pe!8o.n ini ,lh:
"0 Teknik s(e!ilissi ,p( ,ilkukn ,en4n (eknn up (in44i men44unkn o(okl= sehin44
l( ,n me,i s(e!il0
#0 NA :Nu(!ien( A4! < ,i4unkn se.4i me,i pe!(um.uhn .k(e!i0
$0 MEA :Ml( EC(!8( A4!< ,i4unkn se.4i me,i pe!(um.uhn 'es( (u khmi!0
&0 PDA :Po((o Des(!oCe A4!< ,i4unkn un(uk menum.uhkn =un4i (u 7mu!0
-0 LB :Lk(os B!o(h< ,i4unkn un(uk =e!men(si0
?0 S(e!ilissi ,ilkukn .e!(u7un un(uk men4hin,!i kon(minsi9 'i(u msukn'
mik!oo!4nisme 'n4 (i,k ,iin4inkn0
*0 Komposis me,i .hn sn4( pen(in4 ,lm memenuhi ke.u(uhn nu(!isi s(e!ilissi
,ilkukn .k(e!i ,emi men4op(imlkn pe!(um.uhnn'9 'n4 mn (ip/(ip komposisi
h!us se(im.n4 7umlhn'0
B. .aran
P, p!k(ikum seln7u(n' me,ium un(uk pe!(um.uhn mik!o. ,p( ,i.u( le.ih
.n'k l4i ,n p, s( p!k(ikum ke,epnn' ,ih!pkn p!k(ikum .e!7ln ,en4n
(e!(i. (np ke4,uhn ,lm !un4n0
DA/TA0 PU.TA-A
D)i,7osepu(!o9 D9 "11&9 Dasar-Dasar Mikrobiologi0 D7m.(n9 Jk!(0
;,ioe(omo9 R0 9 "11$9 &eknik dan Prosedur Dasar %aboratorium Mikrobiologi, G!me,i: Jk!(0
Lim9D9 "1129 Microbiology, 'nd #dition, M8G!o)/hill .ook9 Ne) 'o!k0
S8he4el9 G0;9 "11$9 (eneral Microbiologi se)enth edition9 @m.!i4e Uni6e!si(' P!ess9 USA0
Su!i)i!i9 U9 #%%-9 Mikrobiologi Dasar9 Pps Sin! Sinn(i9 Jk!(0
Plate Count Agar (PCA)
PCA dapat mengisolasi organisme dalam susu dan diary product lainnya. Tryptone
menyediakan substansi asam amino dan nitrogen kompleks yang lain, sedangkan
yeast ekstrak menyuplai vitamin B kompleks. Mikroorganisme yang tumbuh yaitu E.
Coli, B. subtilis, L. lactis, Lysteria monocytogenes, S. Aureus, S. Agalatus, dan L.
achidophilus. omposisi dari media plate Count Agar (PCA) antara lain!
a. Tryptone
b. "ekstrose
c. Agar
d. #east $kstract
T#P%CA& C'MP'(%T%')
(can be ad*usted to obtain optimal per+ormance)
,or - liter o+ medium !
. Tryptone .........................................................................................../.0 g
. #east e1tract ....................................................................................2./ g
. 3lucose ............................................................................................-.0 g
. Bacteriological agar .......................................................................-2.0 g