Professional Documents
Culture Documents
Abordri biotehnologice
Introducere
Plantele sunt surse consacrate de compui farmaceutici, aromatici i industriali,
civilizaia fiind indisolubil legat de lumea plantelor, acestea constituind de milenii sursa
major de obinere a unor bio-produse eseniale pentru supravieuirea ntregului regn animal.
Adevrate uzine biochimice acionate de energia solar, plantele sintetizeaz nu numai
compuii de baz necesari supravieuirii lor, din categoria hidrailor de carbon, proteinelor i
lipidelor, ci i o gam larg de substane organice ce pot fi extrase n cantiti suficiente pentru
a prezenta importan semnificativ ca materii prime cu variate aplicaii tiinifice,
tehnologice i comerciale. i n prezent zestrea botanic a planetei stocheaz numeroase
resurse nc insuficient cunoscute, care pot reprezenta alternative rentabile pentru obinerea
unor materii prime deficitare n diferite domenii economice. Regnul vegetal continu s
reprezinte principalul furnizor de compui fitochimici utilizai n diferite ramuri industriale
cum sunt cele ale produselor farmaceutice, alimentare, cosmetice, agrochimice, cu valori
comerciale exprimate n miliarde de dolari. Plantele constituie surse de nenlocuit pentru
uleiuri industriale (volatile i fixe), arome, parfumuri, rini, gume hidrocoloidale, saponine i
ali surfactani, colorani, pesticide, cauciuc natural, substane medicamentoase i muli ali
compui speciali.
Fitochimicalele cele mai cunoscute includ medicamente ca morfina i codeina
(alcaloizi analgezici derivai din latexul de la Papaver somniferum), cocaina (alcaloid
anestezic local, derivat din frunze de coca), chinina (alcaloid antimalaric derivat din scoar
de Cinchona), curare i digitalina; parfumuri i esene ca uleiul de trandafir i jasminul;
materii prime industriale ca acizi grai, ulei de pin i cauciuc natural; pesticide ca piretrinele
i nicotina (figura 1).
Statisticile recente evideniaz faptul c peste 1500 de compui noi sunt identificai
anual n diferite specii de plante i c aproximativ un sfert dintre medicamentele prescrise
conin substane de origine vegetal. Totodat rapiditatea procesului de extincie a speciilor i
de ngustare a bazei genetice a resurselor vegetale n lume a stimulat att reconsiderarea
importanei vitale a resurselor genetice ct i interesul pentru obinerea metaboliilor de
interes prin metode neconvenionale.
99
CO2
H2O
h
FOTOSINTEZ
GLICOZIZI
TERPENOIDICI
GLUCIDE
digitoxin
steviozid
NAFTOCHINONE
shikonin
ACID
PIRUVIC
ACETIL-CoA
AMINOACIZI
MALONIL-CoA
POLIKETIDE
ALCALOIZI
reserpin
codein
morfin
vincristin
vinblastin
atropin
cocain
nicotin
LIGNIN
LIGNANI
TERPENOIZI
mentol
ulei de trandafir
GLICOZIZI
CIANOGENICI
acizi grasi
uleiuri vegetale
ceruri
podofilotoxin
FLAVONOIZI
2
FENOLI
POLIFENOLI
TANINURI
ulei de ment
mirt
terebentin
vanilin
steroli, steroizi
caroten
cauciuc natural
Figura 1. Originea biosintetic a unor compui vegetali; grupele majore de metabolii secundari sunt ncadrate n
chenare (dup Balandrin i colab., 1985).
metaboliii secundari vegetali pot servi ca atractani pentru polenizatori, pot reprezenta
adaptri chimice la stresul factorilor de mediu sau pot constitui mijloace chimice ofensive,
defensive sau protectoare mpotriva microorganismelor, insectelor , animalelor ierbivore i
chiar mpotriva altor plante superioare (cum este cazul compuilor alelochimici, numii i
ierbicide naturale), fiind evident rolul lor de compui activi n plan biologic, fiziologic i
ecologic.
Sunt numeroase exemplele de compui bioactivi din categoria metaboliilor secundari,
dintre care trebuie s amintim n primul rnd nicotina, piretrinele i rotenona care sunt
utilizate ca pesticide i anumii steroizi i alcaloizi utilizai in industria medicamentelor.
Balandrin i Klocke (1988) au efectuat o evaluare amnunit a efectelor terapeutice
i a valorii comerciale a celor mai importante substane bioactive extrase din plante, care
includ sapogenine steroidale (digoxin i digitoxin), alcaloizi cu efect anticancerigen
(vincristin i vinblastin), alcaloizi beladonici (atropin, hiosciamin i scopolamin), i
numeroi ali compui utilizai n industria medicamentelor, ca de exemplu: cocain,
colchicin, alcaloizi de tip opium, fitostigmin, pilocarpin, chinin, chinidin, reserpin i
d-tubocurarin (tabelul 1).
Figura 2. Diagram ce exemplific posibilele interaciuni dintre metabolismul primar i metabolismul secundar
(dup M. M. Yeoman i C. L. Yeoman, 1996).
Cu toate acestea, plantele rmn singurele surse de extracie, ntruct muli dintre
metaboliii secundari de interes farmaceutic nu pot fi sintetizai pe cale chimic, fiind
stereostructuri complexe cu muli centri chirali care pot fi eseniali pentru activitatea
biologic.
Metaboliii vegetali primari i secundari de interes economic au cteva caracteristici
comune: majoritatea sunt compui chimici non-proteici, pot fi extrai din materialul vegetal
prin distilare cu aburi, cu solveni organici sau apoi, iar cu excepia biopolimerilor
cauciucului natural, a taninurilor condensate i a unor polizaharide precum gumele, pectinele
i amidonul, sunt compui cu greutate molecular mic (sub 2000 Da).
Tabelul 1. Exemple de compui de interes farmaceutic obinui la scar comercial din surse
vegetale (dup Balandrin i Klocke, 1988)
Clasa de compui
Sursele botanice
Utilizarea terapeutic
A. Steroizi
Hormoni (derivai ai
diosgeninei, hecogenin i
stigmasterol)
Glicozizi digitalici (digoxin,
digitoxin)
Dioscorea sp.,
Glicine sp.
Contraceptivi
orali i ali hormoni
steroizi
Digitalis purpurea,
D. lanata
Cardiotonici
B. Alcaloizi
Alcaloizi beladonici (atropin, lhiosciamin, scopolamin)
Alcaloizi tip opium (codein,
morfin)
Anticolinergici
Analgezici
Reserpin
Rauwolfia serpentina
Antihipertensivi, psihotropici
Vincristin, vinblastin
Catharanthus roseus
Anticancerigeni
Physostigmin
Physostigma venenosum
Cholinergic
Pilocarpin
Pilocarpus sp.
Cholinergic
Chinin, chinidin
Cinchona sp.
Colchicin
Cocain
Colchicum autumnale
Erythroxylon coca
5
Antimalaric,anti-aritmie
cardiac
Gut
Anestezic local
d-Tubocurarin
Relaxant muscular
leguminoase), ionii unor metale grele toxice, care mpreun cu excesul de salinitate,
excesul de umiditate sau uscciune, determin stresarea biochimic a plantelor.
3. Poluanii nenaturali. n cadrul acestei categorii de factori se includ poluanii
atmosferici (praf, gaze industriale, gaze de eapament etc.), poluanii apei i ai solului,
urmarea folosirii neraionale a substanelor fitofarmaceutice, a ngrmintelor
chimice i a amplasrii unor obiective industriale i zootehnice n zonele de cultur.
4. Animalele. Cu toate c ntre plante i animale exist numeroase raporturi de simbioz
(polenizarea, micorize, raporturile n cadrul unor fitocenoze etc.), ierbivorele sunt
ostile plantelor deoarece existena lor depinde de prezena plantelor furajere. Se
cunosc numeroase i diferite mijloace de aprare ale plantelor fa de aciunea
animalelor ierbivore.
5. Competiia ntre plante. Competiia ntre plante se poate realiza att prin intermediul
unor relaii interspecifice, ct i n cadrul unor relaii intraspecifice.
Plantele conin mult mai muli compui secundari de metabolism dect animalele.
Termenul de plant se refer n ecologie, de obicei, la plantele superioare, mai cu seam la
angiosperme, gimnosperme i ferigi. Ciupercile, bacteriile i virusurile sunt, n general,
denumite ca microorganisme. Algele, muchii i lichenii sunt mai puin exemplificate
deoarece biochimia lor ecologic nu a fost studiat n detaliu. Repartizarea n mare a
compuilor secundari din plantele superioare este prezentat n tabelul 2.
Prezena unor compui secundari n plante se explic prin faptul c plantele fiind fixate
prin rdcini n sol, nu se pot deplasa i deci nu pot rspunde deschis ca animalele la aciunea
factorilor de mediu. Compuii secundari de metabolism ajut plantele la o mai bun i uoar
adaptare la mediu, la stabilirea unor interrelaii ct mai complexe ntre plante i animale. Peste
45 din compuii secundari de metabolism prezeni n animale sunt de origine vegetal. O parte
din compuii secundari mresc rezistena plantelor la atacul microorganismelor. Unii compui
sun toxici i constituie arme de aprare ale plantelor mpotriva ierbivorelor, insectelor i a
altor duntori.
Clasa de compui
compui Numrul
chimici aproxi-mativ de
400
30
sesquiterpenice
Diterpene
Saponine
Limonoide
Cucurbitacin
Cardenolide
Carotenoide
c. Fenoli
Fenoli simpli
Flavonoide
Chinone
d. Ali compui
Poliacetilene
i n alte Angiospermae
toxice i alergice
1000 Larg rspndite n latex i n rinile
Unele sunt toxice
plantelor
500 Sunt identificate n peste 700 familii de Produc hemoliza
plante
globulelor sanguine
100 Prezente mai ales n Rutaceae, Meliaceae Gust amar
i Simaroubaceae
50 Predomin n Cucurbitaceae
Gust amar, sunt toxice
150 Comune n Apocynaceae, Aschepiadaceae Gust amar, toxice
i Scrofulariaceae
400 Universal rspndite n frunze, adesea n Substane colorate
flori i fructe
200 Universal rspndii n frunze i alte
Aciune antimicrobian
esuturi
1000 Universal rspndite n Angiospermae,
Adesea colorani
Gimnospermae i Ferigi
500 Larg rspndite, predomon n
Colorani
Rhamnaceae
650 Larg rspndite, predomin n
Unele toxice
Compositae i Umbeliferae
Carotenoide mg/100
g produs
2,0 2,2
0,76
0,3 0,8
0,3
0,3 0,8
0,3 0,5
0,4
0,1
11
12
plante, unele flavonoide se pot transforma n altele, realizndu-se o bun utilizare a acestor
pigmeni.
fac parte din grupa pigmenilor azotai. Ei se gsesc n regnul vegetal
sub form de cromoproteide sau glicozide.
Indigoul este un pigment care se utilizeaz din antichitate ca i colorant. Se gsete
sub form de glicozid numit indican, n Indigofera tinctoria, plant originar din India i n
Isatis tinctoria, plant cultivat n Europa. Prin macerarea plantelor n mediu apos, se produce
hidroliza enzimatic a indicanului i se obine indoxilul, care prin autooxidare va forma
indigoul. Indirubina este un izomer al indigoului, numit i rou de indigou.
Purpura antic este un derivat al indigoului (6,6-dibrom-indigo) care se extrage din
unele molute (Murexbranderia) i servete ca i pigment colorat nc din antichitate. Din
grupa pigmenilor azotai fac parte i melaninele, care sunt pigmeni de culoare nchis, ce se
formeaz din aminoacizi aromatici (fenilalanina i tirozina). Se gsesc n plantele superioare,
la animale vertebrate i nevertebrate, n cuticula insectelor. Tot din grupa pigmenilor azotai
fac parte unele cromoproteine colorate, cum sunt cloroglobulinele, hemoglobulinele,
citocromii etc. Cloroglobulinele au rolul esenial n fotosintez, cel mai important proces de
biosintez de pe pmnt.
PIGMENII INDOLICI
3.2. Alcaloizii
Sunt substane organice azotate complexe, produse doar de ctre organismul vegetal,
ce prezint o reacie alcalin mai mult sau mai puin important. Sunt produi finali ai
metabolismului azotat. Se cunosc aproximativ 5000 de alcaloizi naturali diferii. Alcaloizii se
pot localiza n frunze (ceai, coca), semine (cafea), rdcini i scoar, spermoderm
(brndue), "scoara" fructului (mac), canale secretoare, laticifere etc.
n general alcaloizii se caracterizeaz prin structuri heterociclice. Datorit azotului din
molecul, prezint caracter bazic. Sunt substane insolubile n ap i solubile n solveni
organici. Reacioneaz cu acizii minerali i formeaz sruri solubile. n plante se gsesc sub
form de sruri ale acizilor oxalic, citric, malic, fumaric etc. Dau reacii caracteristice de
precipitare cu numeroi reactivi (iodura de potasiu, clorura de platin, acid picric, acid
sulfuric etc.).
Exercit efecte fiziologice considerabile asupra omului i asupra animalelor. Alcaloizii
sunt folosii n terapeutic ca narcotice i calmante. Unii alcaloizi sunt otrvuri puternice, spre
exemplu curara, ce are capacitatea de a paraliza sistemul nervos. Se consider c alcaloizii
constituie mijloace de aprare ale plantelor mpotriva insectelor. Unii alcaloizi, de exemplu
nicotina, joac rol n procesele enzimatice de oxido-reducere.
Plantele productoare de alcaloizi sunt dicotiledonatele, iar n msur mai mic
monocotiledonatele i criptogamele. n general o plant conine mai muli alcaloizi.
Coninutul n alcaloizi depinde de vrsta plantei, regiune, clim i anotimp. Algele i muchii
nu au alcaloizi. Ei sunt rari la ciuperci (ergotamina), la pteridofite (nicotina de la Equisetum,
coniina sporilor de Lycopodium) i la gimnosperme (efedrina de la Ephedra). La
angiosperme, anumite familii sunt reputate prin bogia lor n alcaloizi : Solanaceae (solanina,
nicotina, hiosciamina, atropina .a.), Rubiaceae (cofeina, ernetina, chinina), Papaveraceae
(morfina, papaverina, codeina, narseina .a.). Alcaloizii mai importani sunt : coniina,
nicotina, tropanul, atropina, cocaina, chinina, papaverina, morfina, codeina, stricnina,
cofeina etc.
14
CONIINA se extrage din seminele de cucut. Este o otrav puternic, care n doze
mari produce moartea prin paralizia centrului nervos respirator. Acest alcaloid prezint nucleu
piperidinic.
NICOTINA ( - piridin - N - metilpirolidina) este principalul alcaloid din tutun. n
cantiti mici este excitant al nervilor centrali i periferici i provoac contracia vaselor
sanguine. n cantiti mari este un toxic puternic. Nicotina este o substan cancerigen. Este
un alcaloid care conine un nucleu piridinic legat de un heterociclu pirolidinic.
TROPANUL, ATROPINA I COCAINA se extrag din solanaceae, convolvulaceae,
dioscoraceae i eritroxilaceae. Din punct de vedere chimic aceti alcaloizi sunt esteri ai unor
alcooli derivai de la tropan. Atropina acioneaz asupra sistemului nervos parasimpatic. Ea
produce o relaxare a muchilor netezi i se folosete ca medicament antispasmodic. n
cantitate mic dilat pupila, n cantiti mari este toxic. Cocaina, n cantiti mici este
anestezic local, iar n cantiti mari produce paralizia nervului central.
MORFINA I CODEINA se extrag din opiu. Morfina determin o insensibilitate la
dureri datorit aciunii asupra sistemului nervos central. Codeina nu posed nsuiri narcotice.
n cantitate mic se folosete ca medicament contra tusei. Codeina are structur chimic
similar morfinei cu deosebirea c din nucleul A este nlocuit hidroxilul cu o grupare
metoxilic. Morfina i codeina conin n molecul un inel fenantrenic parial saturat.
CHININA se extrage din arborele de chinin. Se utilizeaz la combaterea malariei.
Regleaz temperatura corpului uman. Chinina conine n molecula ei un heterociclu
chinolinic.
PAPAVERINA se extrage din sucul lptos al capsulelor necoapte de mac (opiu). Ea
acioneaz direct asupra musculaturii netede. Papaverina conine n molecul heterociclu
izochinolinic.
STRICNINA se extrage din seminele i frunzele plantei numit Strychnos nux vomica
(turta lupului). Este o otrav puternic. n cantiti mici este toxic general iar n cantiti mari
este insecticid. Stricnina conine n molecul heterociclu indol.
COFEINA se extrage din boabele de cafea. Este un excitant al sistemului nervos
central. Cofeina conine n molecul ciclul purinic.
Alcaloizii sunt produi finali de metabolism ai compuilor azotai i constituie
mijloace de protecie i de aprare ale plantelor. n cantiti mici pot fi folosii ca substane
farmaceutice, iar n cantiti mari acioneaz ca insecticide i otrvuri.
3.6. Lignine
Ligninele sunt substane macromoleculare care nsoesc celuloza n diferite organe i
esuturi ale plantelor. Sunt substane foarte rspndite n regnul vegetal, ocupnd locul al
doilea dup celuloz. Se gsesc n lemnul diferitelor specii de plante n proporie de 21-30%
din materia uscat. Fibrele de in i de cnep sunt srace n lignin, iar cele de iut conin
19% lignin. n tabelul 4 este dat coninutul n lignine al lemnului de conifere i foioase i al
unor fibre textile.
Ligninele sunt substane ternare, formate din C, H i O, de natur aromatic.
Caracteristic este prezena n molecul a gruprilor metoxil i hidroxil. Substanele
constituente de baz din lignine sunt alcoolii aromatici derivai de la fenilpropan: alcoolul
coniferilic, alcoolul hidroxiconiferilic i alcoolul sinapinic. Ligninele se formeaz prin
condensarea acestor alcooli. Ligninele din diferite plante nu sunt identice, ele difer prin
numrul i felul unitilor structurale. Astfel, n ligninele de foioase predomin alcoolul
sinapinic, iar n cele ale coniferelor alcoolul coniferilic. Masa molecular a ligninelor variaz
ntre 700 100.000 Da. Sunt substane amorfe, de culoare nchis, insolubile n ap, acizi i
alcalii diluate. Sunt solubile n acizi tari concentrai i alcalii concentrate.
Tabelul 4. Coninutul n lignine al lemnului de conifere i foioase i al unor fibre textile
17
Lignine %
n material uscat
19,6-22,2
18,2-20,30
27,3-29,4
0
1,4
0,8
19,0
3.7. Glicozide
Glicozidele sunt substane formate din dou componente: o component glucidic i o
component neglucidic, numit aglicon. Componenta glucidic se leag de aglicon prin
legtur glicozidic, prin intermediul hidroxilului semiacetalic. Componenta glucidic poate
fi monoglucid, diglucid sau o oligoglucid. Predominant se ntlnete glucoza sau
oligoglucide ce conin glucoz. Agliconul poate aparine unor clase de substane extrem de
diferite ca alcooli, fenoli, steroli, tioalcooli, hidroxichinone, pigmeni, substane cu azot etc.
Glicozidele sunt larg rspndite n regnul vegetal. Se gsesc att n plantele
superioare: n frunze, flori, fructe, semine, rdcini, lemn etc., ct i n cele inferioare. Sunt
substane solide, cristaline, incolore sau colorate (n funcie de felul agliconului), cu gust n
general amar. Unele au o arom specific. Glicozidele prezint activitate optic. Majoritatea
sunt solubile n ap, alcool, aceton i insolubile n eter. Nu prezint fenomenul de mutarotaie
i nu au proprieti reductoare. Se hidrolizeaz cu uurin n mediu acid, bazic sau sub
aciunea enzimelor. Numeroase glicozide au aciune fiziologic asupra organismelor animale
(curativ sau nociv) i se ntrebuineaz nc din antichitate ca medicamente sau ca otrvuri.
Se presupune c unele glicozide reprezint pentru plante forme inofensive de depozitare a
unor agliconi toxici. Prin hidroliz parial plantele elibereaz o parte din aglicon n doze
netoxice, exercitnd asupra plantei o aciune protectoare. Unele substane farmacologice
active, printre care i glicozidele, n cantitate mic se utilizeaz ca medicamente, iar n
cantitate mare sunt toxice.
Dintre diferitele tipuri de glicozide, cele mai numeroase sunt O-glicozidele, care se
deosebesc ntre ele prin felul glucidei i a agliconului. Dintre O-glicozidele formate din 18
glucopiranoz, alcooli i fenoli, menionm arbutina, extras din Arbutus uva ursi, salicina
izolat din Salix helix i coniferina identificat n diferite conifere. Agliconul acestor
glicozide, n ordinea prezentat este hidrochinona, alcoolul salicilic i alcoolul coniferilic.
n migdalele amare, smburii de caise, piersici, prune, ciree etc., se gsete
amigdalina, care prin hidroliz sub aciunea emulsiei formeaz dou molecule de glucoz,
aldehid benzoic i acid cianhidric. Glicozidele care conin acid cianhidric sunt substane
toxice i se numesc glicozide cionogenice. Unele plante furajere conin glicozide
cianogenetice care prin hidroliz elibereaz acid cianhidric. Aceste plante consumate n
cantitate mare n stare proaspt produc intoxicri la animale. Prin uscarea sau murarea
acestor furaje acidul cianhidric se elimin n mod treptat, n urma reaciilor de hidroliz
enzimatic sau acid i astfel crete calitatea acestor furaje. n amigdalin, componenta
glucidic se afl sub form de gentiobioz, o diglucid format din dou molecule de glucoz
unite prin legtur 1,6- -glicozidic. Dintre O-glicozidele steroidice, care au ca aglicon
steroli, mai importante sunt glicozidele cardiotonice i saponinele.
GLICOZIDELE CARDIOTONICE n cantitate mic ntresc muchiul inimii i produc o
mrire a amplitudinii contraciilor. Acestea, administrate n cantitate mare determin oprirea
inimii n sistol. Cele mai utilizate glicozide cardiotonice n medicin sunt digitalina i
strofantina. Aceste glicozide se gsesc n Digitalisa lanata, D. purpurea, Strophantus kombi,
Scilla maritima etc. Agliconul strofantinei se numete strofantiolin, iar componenta glucidic
este o triglucid.
SAPONINELE sunt glicozide steroidice, identificate n peste 80 familii de plante.
Agliconul lor poart numele general de sapogenin. Saponidele sunt glicozide cu proprieti
specifice. Injectate intravenos la om i la animale produc hemoliz. Au aciune iritant asupra
mucoaselor i sunt extrem de toxice pentru peti. Au proprieti tensioactive i emulsioneaz
grsimile. Prin agitare cu ap formeaz o spum abundent i persistent.
Datorit proprietilor lor, saponidele au numeroase utilizri practice. Sunt folosite ca
ageni de spumare (n extinctoare), detergeni, coloizi protectori etc. Unele saponide se
utilizeaz ca materie prim pentru sinteza hormonilor sexuali i n general a hormonilor
steroidici.
O alt grup de O-glicozide o formeaz glicoalcaloidele, care au ca aglicon un
alcaloid, de regul cu structur steroidic. Dintre acestea se menioneaz solanina i tomatina.
Solanina se gsete n Solanum tuberosus. Ea este format dintr-o triglucid i din solanidin,
ca aglicon. Triglucida se numete solatrioz i este format din glucoz, galactoz i ramnoz.
Tomatina se gsete n Solanum lycopersicum. Agliconul se numete tomatidin, iar
componenta glucidic este o tetraglucid.
Tot din grupa O-glicozidelor fac parte unele glicozide flavonoidice, carotenoglicozide,
glicozide xantonice, glicozide indolice etc.
S-glicozidele sunt mai puin rspndite n natur. Ele se gsesc, predominant, n plante
din familia cruciferelor. Dintre S-glicozide, importan alimentar mai mare o are sinigrina,
care se gsete n seminele de mutar negru (Sinapis nigra), n hrean, ridichii, rapi. Prin
hidroliza sinigrinei, sub aciunea mirozinazei, se obin ca produi finali, glucoza, alilsenevolul
i KHSO4. Senevolii sunt substane cu miros caracteristic neptor, uneori lacrimogeni, irit
pielea i mucoasele. n doze mici, stimuleaz secreia gastric, n doze mari determin
paralizia sistemului nervos. n mutarul alb se gsete sinalbina. S-glicozidele se pot forma i
din tioglucoz, ce are hidroxilul semiacetalic substituit printr-o grupare tiolic.
N-glicozidele sunt substane larg rspndite n natur. Din aceast grup fac parte
nucleozidele i nucleotidele. Dintre glicozidele cu azot fac parte i glicozidele cianogenice i
glicoalcaloidele, dar la aceste substane legtura glicozidic nu se stabilete la nivelul
atomului de azot, de aceea s-au prezentat la O-glicozide.
19
3. 8. Taninurile
Taninurile vegetale sunt substane foarte cunoscute pentru multiplele lor aplicaii
practice, n special n medicina tradiional i n industria tbcritului. Literatura de
specialitate amintete de vechi triburi din America de Nord care foloseau decocturile i
cataplasmele preparate din rdcinile unor plante (cunoscute n prezent ca avnd un coninut
ridicat n taninuri, precum crinul de ap canadian Nuphar variegatum) pentru a trata durerile
de gt, leucoreea, rceala, rnile, durerile interne sau alte infecii ale pielii. Tbcirea pielii cu
ajutorul taninurilor vagatale este cunoscut nc din antichitate i ea era realizat folosindu-se
coaja diferitelor specii de copaci, n special specii de stejar.
Stabilirea structurii lor moleculare a permis de asemenea stabilirea unor diferene, n
ceea ce privete utilitatea practic, ntre diferitele tipuri de taninuri. S-a ajuns astfel la
concluzia c n special galotaninurile, dar i elagotaninurile, ambele aparinnd clasei de
taninuri hidrolizabile, au aplicaii practice mult mai numeroase dect taninurile condensate.
Din punct de vedere chimic taninurile sunt substane polifenolice (derivai ai 3hidroxi-flavanului sau poliesteri ai acidului galic) solubile n ap, cu gust astringent, care
prezint reacii caracteristice fenolilor i care precipit cu alcaloizii i cu proteinele, formnd
combinaii impermeabile i imputrescibile (caracteristice procesului de tbcire a pielii).
Taninurile sunt mult rspndite n natur. Se ntlnesc n cantiti foarte mici la
majoritatea plantelor, iar n cantiti mari se gsesc n scoara, lemnul i frunzele de stejar, n
scoara de arin, molid, plop, nuc, afin, coronite, mangrove, n fructele unor specii ca
Terminalia chebula, Caesalpinia brevifolia etc. Sunt substane astringente, utilizate ca
antidiareice. Dup tipul de legtur dintre polifenoli i acizi fenolici se deosebesc : taninuri
hidrolizabile i taninuri nehidrolizabile sau condensate.
TANINURI HIDROLIZABILE. Prin hidroliz acid sau n prezena tanazelor, pun n
libertate o oz, de obicei glucoz i acid galic sau un derivat al acidului galic, ca acid mdigalic sau acid elagic. Taninurile care conin acid galic se numesc galotaninuri, iar cele care
conin acid elagic se numesc elagotaninuri. Din categoria galotaninurilor fac parte taninul
turcesc i taninul chinezesc. O molecul de tannin turcesc elibereaz prin hidroliz cinci
molecule de acid galic i o molecul de glucoz, iar o molecul de tannin chinezesc elibereaz
prin hidroliz nou molecule de acid galic i o molecul de glucoz. Prin hidroliza
elagotaninurilor rezult acid elagic i glucoz sau acid elagic, acid galic i glucoz. Prin
nclzirea galotaninurilor la temperaturi ridicate se formeaz pirogalol.
TANINURI NEHIDROLIZABILE (CONDENSATE). Nu pot fi descompuse n prile
lor componente dect prin topire alcalin. Ele nu conin glucoz. Taninurile nehidrolizabile
rezult prin condensarea derivailor catechinici i au o structur necunoscut pn n prezent.
Prin nclzire n prezen de hidroxizi alcalini elibereaz pirocatechin (ortodifenol).
Taninurile catechinice sunt foarte rspndite n natur i prezint o mare importan
practic. Pe cale industrial, acestea se extrag din scoara de stejar, salcm, mesteacn, salcie
etc. Spre deosebire de galotaninuri, taninurile catechinice precipit numai gelatina din piele i
nu au proprieti de tbcire. Prin nclzire sau pe cale enzimatic, mai multe molecule de
catechine se condenseaz i formeaz tanin condensat, cu proprietile taninului natural.
n organismul vegetal, taninurile joac un rol biochimic important. Ele mresc
rezistena plantelor fa de virusuri i microorganisme. De asemenea dau gustul i aroma unor
produse vegetale (ceai, cafea, vin etc.). Practic, taninurile se folosesc la tbcirea pieilor,
fabricarea cernelurilor, limpezirea vinului etc. Tbcirea pieilor cu taninuri este un procedeu
cunoscut din vechime. n procedeele moderne de tbcire soluia de tanin, obinut din coaja
de stejar, este nlocuit de alte substane ca aldehida formic, sruri de crom etc.
20
Hemisintez
Sintez
chimic
Celule vegetale
in vitro
Producia cu ajutorul
microorganismelor
Sue morfogenetice
Rdcini transformate
Elicitare
Selecia suelor productoare
Conservare
Clonare de gene
Producie de enzime
Trecere la nivel industrial
Reactoare
enzimatice
-celule libere
-celule imobilizate
Figura 3. Posibiliti de producere a metaboliilor secundari (dup G. Freyssinet, M.Lebrun, B. Pelissier i
T. Hardy, 1993).
Dac nici una dintre aceste ci nu este posibil sau dac ele sunt limitate, se va putea
realiza producia substanelor cercetate de ctre culturile celulare vegetale in vitro, evitndu-se
concepia conform creia acest procedeu poate fi lung i riscant. Numeroasele avantaje ale
aplicaiilor culturilor celulare vegetale in vitro contrazic aceast concepie:
Prin valorificarea potenialului de biosintez sau de biotransformare se pot
obine produi noi (domeniul farnaceutic);
Eticheta produs natural permite cucerirea unei pri rentabile de pia,
fa de produii de sintez.
25
Studii similare au ntreprins i Eikind i colaboratorii (1990), ncercnd s induc supraexpresia unei gene PAL de la fasole ntr-o plant transgenic de tutun, spernd c n acest fel
acestea vor acumula un coninut crescut n lignin. n realitate, s-a constatat ns o reducere a
cantitii de lignin i de fenoli solubili, i n consecin a devenit evident faptul c sunt
necesare mai nti cercetri aprofundate n domeniul reglrilor metabolice pentru ca aceast
abordare s poat fi utilizat cu succes pentru a stimula acumularea unor compui secundari n
culturile de celule vegetale.
Prima ncercare de a manipula metabolismul secundar prin utilizarea tehnologiei ARNantisens pentru reglarea activitii unor gene specifice aparine lui Krol i colaboratorii (1988)
care au experimentat manipularea genetic a culorii la Petunia hybrida. n acest caz,
pigmenii aparin grupului flavonoizilor, i un numr de gene codificatoare ale enzimelor
implicate n biosinteza flavonoizilor au fost izolate i caracterizate.
n mod special, CHS (chalcon-sintaz), prima enzim a cii fenilpropanoidice care
conduce la biosinteza autocianilor, a fost identificat ca o int pentru manipulri genetice.
Prin transformarea plantelor de Petunia cu gene antisens chs (menit s blocheze expresia
complet a genei) s-a constatat c pigmentaia de tip slbatic a fost perturbat i a rezultat o
gam de transformani cu diferite niveluri i tipuri de pigmentaie, fapt ce demonstreaz
potenialul important al acestei abordri.
Progresele nregistrate n ultimii ani n domeniul tehnicilor moleculare i ingineriei
biochimice dau garania obinerii unor succese remarcabile n producerea de compui utili n
culturi de celule vegetale, cu att mai mult cu ct identificarea unor compui deosebii de
valoroi (cum este de exemplu Taxolul), care pot fi produi la parametrii optimi numai n
culturi celulare, a dat un nou impuls reconsiderrii importanei culturilor celulare vegatale, ca
surse eficiente de compui de interes practic deosebit.
Concluzii
n secolul urmtor, caracterizat drept era biotehnologiilor , strategiile
biotehnologice vor determina schimbri ample, prin noi dimensiuni ale eficienei i
productivitii n numeroase domenii economice.
n cadrul noilor biotehnologii, tehnicile moderne de culturi de celule i esuturi
vegetale ofer poteniale relevante de aplicabilitate n unele domenii biotehnologice
competitive, viznd obinerea unor medicamente, produse alimentare, pigmeni naturali
alimentari sau industriali, arome alimentare sau cosmetice etc.
Interesul pentru obinerea metaboliilor secundari prin metode neconvenionale
este stimulat de pronunata descretere a resurselor vegetale consacrate, ca urmare a
perturbrii echilibrului mediului natural, a exploatrii nelimitate a acestor resurse, a
creterii costului forei de munc i dificultilor tehnice i economice n cultivarea
plantelor din flora spontan.
Ca impact socio-economic, nmulirea prin culturi in vitro permite adaptarea rapid
la cerinele pieii, aplicarea biotehnologiei respective oferind posibilitatea nceperii unei
activiti profitabile prin obinerea unor venituri substaniale n urma aclimatizrii i
certificrii materialului sditor propus n condiii aseptice, n timp scurt, pe suprafee de teren
restrnse.
Cercetrile ntreprinse au adus un plus substanial de informaie tiinific privind
valorificarea pe ci neconvenionale a potenialului regenerativ al celulei vegetale, ca
expresie a totipotenei morfogenetice i biochimice.
27
Bibliografie selectiv
1. Alfermann A. W., Bergmann W., Figur C., Helmbold U., Schwantag D., Schuller I.,
Reinhard E., 1983. Bitransformation of O-methyldigitoxin to p-methyldigoxin by cell
cultures of Digitalis lanata. In: Mantell SH, Smith H., eds. Plant Biotechnology.
Cambridge University Press, p. 67-74.
2. Alfermann A. W., Reinhard E., 1980. Biotransformation by plant tissue cultures. Bull.
Soc. Chim. Fr., 2, p. 35-45.
3. Balandrin M. F., Klocke J. A., 1988. Medicinal, Aromatic, and Industrial Materials from
Plants. In Biotechnology in Agriculture and Forestry 4, Medicinal and Aromatic Plants I,
Ed. by Y. P. S. Bajaj, Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg, p. 191-199.
4. Berlin J., Slag S., Strack D., Bokem M., Harms H., 1986. Production of betalains by
suspension cultures of Chenopodium rubrum L. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 5, p.
163-174.
5. Bohlmann J., Eilert U., 1994. Elicitor induced secondary metabolism in Ruta graveolens
L. Role of chorismate utilising enzymes. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 38, p. 189198.
6. Boulter M.E., Croy E., Simpson P., Schields R., Croyand R.R.D., Shirsat A.H., 1990.
Transformation of Brassica napus L. (oilseed rape) using Agrobacterium tumefaciens and
Agrobacterium rhizogenes a comparison. Plant Sci., 70, p. 91-99.
7. Boyd M. G., 1991. Studies on carotenoid production in cultures of Bixa orellana. Ph. D.
thesis, University of Edinburgh, UK.
8. Buitelaar R. M., Tramper J., 1992. Strategies to improve the production of secondary
metabolites with plant cell cultures: a literature review. Journal of Biotechnology 23, p.
111-141.
9. Constantin Toma, Mihaela Ni, 1995. Celula vegetal. Editura Universitii Al. I.
Cuza, Iai, p. 39.
10. Croes A. F., Jacobs J. JMR, Arroo RRJ, Wullems GJ., 1994. Thiophene biosynthesis in
Tagetes roots: molecular versus metabolic regulation. Plant Cell, Tissue and Organ
Culture 38, p. 159-165.
11. Dekeyser R., Inze D., Van Montagu M., 1990. Transgenic plants. In: Gene manipulation
in plant improvement II. Ed. P. Gustafson. Plenum Press, New-York, p. 237-250.
12. Dore C., 1990. Cinquantenaire de la culture in vitro chez les vgtaux. Les Colloques
de lINRA, 51. INRA PARIS.
13. Emil Pop, St. Peterfi, N. Slgeanu, H. Chirilei, 1960. Manual de fiziologia plantelor.
Editura de Stat Didactic i Pedagogic, Bucureti, vol. II, p. 54.
14. Fleurentin J. R., Pelt J. M., 1990. Les plantes mdicinales. La Recherche, 21, p. 811-818.
15. Gavril Neamu, 1983. Biochimie ecologic. Editura Dacia, Cluj-Napoca, p. 13-54.
28
16. Gavril Neamu, Cmpeanu Gheorghe, Enache Aurelia, 1989. Dicionar de Biochimie
vegetal. Editura Ceres, Bucureti, p. 46-246.
17. Gavril Neamu, Ionela Popescu, t. Lazr, I. Burnea, I. Brad, Gh. Cmpeanu, T. Galben,
1983. Chimie i biochimie vegetal. Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti, p. 260282.
18. Hamill J. D., Parr A. J., Rhodes M. J. C., Robins R. J., Walton N. J., 1987. New routes to
plant secondary products. Bio/Technology, 5, p. 800-804.
19. Meyer P., Heidmann I., Forkmann G., Saedler H., 1987. A new petunia flower colour
generated by transformation of a mutant with a maize gene. Nature, 330, p. 677-678.
20. Richard A. Dixon, Christopher J. Lamb, 1990. Regulation of secondary metabolism at the
biochemical and genetic levels. In Secondary Products from Plant Tissue Culture, Ed. by
Barry V. Charlwood and M. J. C. Rhodes.
21. Schmauder H. P., Doerel P., 1990. Plant cell cultivation as a biotechnological method.
Acta Biotechnol., 6, p. 501-516.
22. Wink M., 1986. Production of plant secondary metabolites by plant cell culture in
relation to the site and mechanism of their accumulation. In: Plant vacuoles: their
importance in solute compartmentation in cells and their applications in plant
biotechnology. Ed. Marin B. Plenum Press, NATO ASI serie, vol. 134, p. 477-484.
23. Wink M., 1988. Plant breeding: importance of plant secondary metabolites for protection
against pathogens and herbivores. Theor. Appl. Genet., 75, p. 225-233.
24. Yeoman M. M., Yeoman C. L., 1996. Manipulating secondary metabolism in cultured
plant cells. In Phytol., 134, p. 553-569.
25. Zryd J. P., 1988. Cultures in vitro et production de mtabolites secondaires. Dans:
Cultures de cellules, tissus et organes vgtaux. Ed. Zryd J. P., Presses Polytechniques
Romandes, p. 227-234.
29