LAPORAN RESMI PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK

PERCOBAAN I
PENETAPAN KADAR KREATININ
Hari/ Tanggal Percobaan : Selasa/ 02 Maret 2010
Golongan/ Kelas : I/ FKK 2008
Dosen Jaga : Dr. Edy Meiyanto, M.Si, Apt
Asisten Jaga : Mbak Putri dan Mbak Fitria
Nama Anggota :
1. Nanda Huda Ardianto
2. Falita
3. Niken Feladita
4. Dian Tyas Ariestya
5. Vera Irine Riseno
6. Fenny Christine. H
7. Fadhilla Dini Ishmatika
8. Anastasia Putri Rahayu
9. Fadhliyani Nst
10. Meyfhanuranie Yolanda. P
11. Intan Anatasia
12. Annisa Nadya Utami
13. Yanita Harliana Atharini
14. Anis Puji Lestari
15. M. Zaki bin Illias
16. Husna Zainal

(FA/ 08017)
(FA/ 08018)
(FA/ 08023)
(FA/ 08028)
(FA/ 08029)
(FA/ 08034)
(FA/ 08037)
(FA/ 08038)
(FA/ 08041)
(FA/ 08043)
(FA/ 08045)
(FA/ 08046)
(FA/ 08048)
(FA/ 08055)
(FA/ 08216)
(FA/ 08217)

LAPORAN RESMI
PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK
Hari/Tanggal Praktikum : Selasa, 02 Maret 2010
Golongan : I
I. Tujuan Percobaan
Agar mahasiswa mampu menetapkan kadar kreatinin dalam sampel plasma dan urin dengan
metode Jaffe tanpa deproteinisasi.
II. Prinsip Dasar Percobaan
Metode Jaffe merupakan salah satu metode kolorimetri. Metode ini pertama kali diperkenalkan
pada tahun 1886. Prinsip reaksi Jaffe adalah reaksi antara kreatinin dengan pikrat dalam suasana
basa, membentuk kompleks kreatinin pikrat berwarna jingga dan diukur menggunakan
spektrofotometer visibel pada 492 nm.
Reaksi:

O-

N+

O2 N

O-

Asam pikrat

Kreatinin
NO2

CH

CO

NH

Kreatinin pikrat

NH

III. Metode Sistematis

A. Alat dan Bahan
Alat:
-

Tabung reaksi
Labu takar 50 mL
Beaker glass
Mikropipet
Blue dan yellow tip
Spektrofotometer visible
Kuvet
Pipet tetes
Tissue
Jarum suntik

Bahan
-

Aquadest 50 L
Sampel plasma dan urin 50 L
Baku kreatinin 50 L
Larutan Buffer (NaOH dan Na2HPO4)
Larutan asam pikrat 250 L
Alkohol
kapas

B. Cara kerja
- Kadar Kreatinin dalam Plasma
Sampel 50 L Blangko Standart 50 L
+ Reagen 1 (Buffer)
Campur, inkubasi 5 menit pada suhu kamar
+ Reagen 2 (asam pikrat)
Campurkan, baca absorbansi 1 menit pertama (A1)
Baca absorbansi 2 menit kemudian (A2)

- Kadar Kreatinin dalam Urin

Sampel 50 L Blangko Standart 50 L
+ Reagen 1 (Buffer)
Campur, inkubasi 5 menit pada suhu kamar
+ Reagen 2 (asam pikrat)
Campurkan, baca absorbansi 1 menit pertama (A1)
Baca absorbansi 2 menit kemudian (A2)
-Perhitungan Leukosit
4 mL darah EDTA + pereaksi Hayem 4 ml
Tunggu 15 menit
Hitung jumlah leukosit menggunakan hemositometer di mikroskop
- Perhitungan Eritrosit
2 mL darah EDTA + Amonium Oxalat 1% 2 ml
Tunggu 2

3 menit

Hitung jumlah eritrosit menggunakan hemositometer di mikroskop

- Perhitungan Trombosit
0,5 mL darah EDTA + Amonium Oxalat 1% 2 ml
Tunggu 3-5 menit
Hitung jumlah trombosit menggunakan hemositometer di mikroskop

IV. Hasil Percobaan

DATA PERCOBAAN
Data Absorbansi Baku
Menit ke-1: 0,02
Menit ke-3: 0,03
1. Kadar Kreatinin dalam Urine
Kelompok

Data Urine

1.
2.
3.
4.
5.

Sampel 1
Sampel 2
Sampel 3
Sampel 4
Sampel 5

Absorbansi

0,275
0,018
0,202
0,052
0,141

Rumus perhitungan:

Konsentrasi Kreatinin =

A2 (sampel) - A1 (sampel)
A2 (baku) A1 (baku)

Kadar Sampel 1
Konsentrasi kreatinin = 0,321 0,275 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 0,046 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 9,2 mg / 100 mL
= 9,2 mg/ dL
Kadar Sampel 2
Konsentrasi kreatinin = 0,072 0,018 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 0,054 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 10,8 mg / 100 mL
= 10,8 mg/ dL

0,321
0,072
0,280
0,148
0,161

Kadar Sampel 3
Konsentrasi kreatinin = 0,280 0,202 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 0,078 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 15,6 mg / 100 mL
= 15,6 mg/ dL
Kadar Sampel 4
Konsentrasi kreatinin = 0,148 0,052 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 0,096 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 19,2 mg / 100 mL
= 19,2 mg/ dL
Kadar Sampel 5
Konsentrasi kreatinin = 0,161 0,141 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 0,02 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 4 mg / 100 mL
= 4 mg/ dL

Rata-rata konsentrasi kreatinin = 9,2 + 10,8 + 15,6 + 19,2 + 4 = 11,76 mg/dL

5
SD (dengan kalkulator) = 5,870
SE
= SD = 5,870 = 2,625
N
5
LE
= t x SE
= 2,57 x 2,625
= 6,746
Rentang Kadar
= x LE
= 11,76 6,746 x 11,76 + 6,746
= 5,014 x 18,506
CV
= SD x 100%
x
= 5,870 x 100%
11,76
= 49,915 %

2.

Kadar Kreatinin dalam Darah

Kelompok

Data Plasma

1.
2.
3.
4.
5.

Sampel 1
Sampel 2
Sampel 3
Sampel 4
Sampel 5

Absorbansi

0,019
0,011
-0,049
0,066

Rumus perhitungan:

Konsentrasi Kreatinin =

A2 (sampel) - A1 (sampel)
A2 (baku) A1 (baku)

Kadar Sampel 1
Konsentrasi kreatinin = 0,022 0,019 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 3 x 10-3 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 0,6 mg / 100 mL
= 0,6 mg/ dL
Kadar Sampel 3
Konsentrasi kreatinin = 0,015 0,011 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 0,004 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 0,8 mg / 100 mL
= 0,8 mg/ dL
Kadar Sampel 4
Konsentrasi kreatinin = -0,049 (-0,029) x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= -0.02 x 2 mg / 100 mL (dianggap positif)
0,01
= 4 mg / 100 mL
= 4 mg/ dL

0,022
0,015
-0,029
0,076

Kadar Sampel 5
Konsentrasi kreatinin = 0,076 0,066 x 2 mg / 100 mL
0,03 0,02
= 0,01 x 2 mg / 100 mL
0,01
= 2 mg / 100 mL
= 2 mg/ dL

Rata-rata konsentrasi kreatinin = 0,6 + 0,8 + 4 + 2 = 1,85 mg/dL

4
SD (dengan kalkulator) = 1,561
SE
= SD = 1,561 = 0,781
N
4
LE
= t x SE
= 2,78 x 0,781
= 2,171
Rentang Kadar
= x LE
= 1,85 2,171 x 1,85 + 2,171
= -0,321 x 4,021
CV
= SD x 100%
x
= 1,561 x 100%
1,85
= 84,37 %

DATA PENGAMATAN SEL DARAH

1. Eritrosit
a. Bentuk

b. Pengamatan

2. Leukosit

3. Trombosit

Jenis Sel
Darah
Leukosit

Volume
Darah
(mL)
20 L

Eritrosit

20 L

Trombosit

20 L

Volume
Pereaksi

Pengenceran
(kali)

Volume
Kotak

Jumlah

0,5 mL
Turk
4,0 mL
Hayem
2,0 mL
Ammonium
Oksalat
0,1%

26

0,4

150

9750

200

0,02

600

6000000

101

0,04

79

199475

Perhitungan:
1. Leukosit
Pengenceran

Jumlah leukosit

Normal
Hasil percobaan
2. Eritrosit
Pengenceran

Jumlah leukosit

Normal
Hasil percobaan

= Vol. Pereaksi + 0,02

0,02
= 0,5 + 0,02
0,02
= 26
= 1 x Pengenceran x N
Vol.kotak
= 1 x 26 x 150
0,4
= 9750
: 5000-10.000 sel/mm3
: 9750
normal

= Vol. Pereaksi + 0,02

0,02
= 4 + 0,02
0,02
= 201
= 1 x Pengenceran x N
Vol.kotak
= 1 x 201 x 600
0,02
= 6.030.000
: 4,1-5 sel/mm3
: 6.030.000
diatas normal

3. Trombosit
Pengenceran

Jumlah leukosit

Normal
Hasil percobaan

= Vol. Pereaksi + 0,02

0,02
= 2 + 0,02
0,02
= 101
= 1 x Pengenceran x N
Vol.kotak
= 1 x 101 x 79
0,04
= 199475
: 150.000 400.000 sel/mm3
: 199.475
normal