abstrak

Ebola adalah virus patogen yang sangat virulen yang menyebabkan demam berdarah
yang parah dengan case fatality rate yang tinggi pada manusia dan primata non-manusia
(NHPs). Meskipun vaksin yang aman dan efektif atau obat-obatan lainnya untuk
memblokir infeksi Ebola saat ini tidak tersedia, upaya signifikan telah diajukan untuk
mengidentifikasi beberapa kandidat yang menjanjikan untuk pengobatan dan
pencegahan demam berdarah Ebola.
Di antaranya, vektor berbasis adenovirus rekombinan telah diidentifikasi sebagai
kandidat vaksin ampuh, dengan beberapa affording baik perlindungan pra dan pascapaparan dari virus. Baru-baru ini, Investigational Obat Baru (IND) aplikasi telah disetujui
oleh US Food and Drug Administration (FDA) dan fase I uji klinis telah dimulai selama dua
terapi molekul kecil: anti-sense oligomer phosphorodiamidate morfolino (PMOS: AVI-6002,
AVI-6003) dan nanopartikel lipid / kecil campur RNA (LNP / siRNA: TKM-Ebola). Ini
alternatif potensial untuk vaksin berbasis vektor memerlukan beberapa dosis untuk
mencapai keberhasilan terapi, yang tidak ideal berkaitan dengan kepatuhan dan wabah
pasien skenario. keprihatinan ini telah memicu pencarian untuk strategi vaksinasi dan
pengobatan yang lebih baik. Di sini, kita meringkas kemajuan terbaru dalam vaksin atau
terapi pasca pajanan untuk pencegahan demam berdarah Ebola. Pemanfaatan
pendekatan farmasi baru untuk memperbaiki dan mengatasi hambatan yang terkait
dengan platform terapi paling menjanjikan juga dibahas.
1 Pendahuluan: Ebola Biologi dan Patogenesis
Virus Ebola adalah filamen, negatif-stranded RNA virus dari keluarga Filoviridae, yang
menyebabkan demam berdarah parah, virus demam berdarah pada manusia dan primata
non-manusia (NHPs) [1]. Merupakan untai tunggal, negatif-sense 18,9 kb RNA genom
encode tujuh protein struktural dan dua protein non-struktural, seperti ditunjukkan pada
Gambar. 1a. The nukleoprotein (NP) merupakan komponen penting dari nukleokapsid
yang erat mengikat genom virus. Ini, bersama dengan protein virion (VP) -30 dan VP35
dan polimerase RNA RNAdependent (L), membentuk ribonucleoprotein (RNP) kompleks
yang bertanggung jawab untuk transkripsi dan replikasi virus (Gbr. 1b) [2-4]. Protein
matriks VP40 dan VP24, terkait dengan kompleks RNP dan permukaan bagian dalam
masing-masing amplop virus, juga terlibat dalam pembentukan nukleokapsid. Mereka
juga memainkan peran dalam pemula virus, perakitan dan kisaran inang penentuan [510]. Virus partikel tertutup dalam amplop lipid bilayer yang berasal dari membran sel
inang selama proses budding (Gbr. 1b). Ebola glikoprotein (GP), tersebar di seluruh
amplop virus sebagai paku trimerik, terdiri dari dua fragmen; sebuah protein ekstraseluler
(GP1) dan membran-berlabuh protein (GP2). Ini diselenggarakan bersama oleh ikatan
disulfida [11-14]. Preferential mengikat virus Ebola endotel dan sel monositik dimediasi
oleh urutan asam amino 17-dalam domain GP1, yang menyerupai motif imunosupresif di
beberapa protein amplop manusia dan hewan retrovirus [15-21]. Interaksi urutan peptida
ini dengan sel target diperkirakan memainkan peran kunci dalam apoptosis dan
immunopathology infeksi Ebola [22]. Proteolisis protein prekursor (pre-SGP) oleh furin
menghasilkan non-struktural sekretorik glikoprotein (SGP) homodimer dan yang lebih
kecil D-peptida. SGP shared menetralisir epitop dengan amplop GP1,2 trimer lonjakan dan
dilepaskan dari sel-sel dalam jumlah besar pada awal infeksi [23-25]. Ini akan
menunjukkan bahwa mungkin umpan diproduksi oleh virus untuk mengikat beredar
penetral antibodi (Tangkap). Studi tambahan mengevaluasi fungsi D-peptida telah
menghasilkan bukti bahwa hal itu berperan dalam masuknya virus dan mencegah
superinfeksi dari target seluler. Hal ini juga mencegah menjebak virion matang dalam
retikulum endoplasma [26]. Sebuah produk gen GP ketiga, lebih kecil, larut glikoprotein

yang disekresikan (ssGP), baru-baru ini ditemukan. Meskipun perannya dalam infeksi
Ebola saat ini belum jelas, memiliki sifat yang sangat berbeda dari SGP dan D-peptida
[27].
Infeksi virus Ebola pada manusia umumnya terjadi melalui kontak langsung dengan
permukaan mukosa, kulit lecet, atau jarum terkontaminasi [28]. Sel-sel antigen (APC),
seperti makrofag dan sel dendritik (DC) yang terletak di tempat infeksi, adalah target
utama replikasi Ebola. Terlepas dari kenyataan bahwa virus memasuki belum matang DC
melalui khas tipe C lektin (DC-SIGN) atau reseptor pengenalan pola lainnya, sel-sel
menjadi fungsional diregulasi dan tidak dapat mengekspresikan molekul co-stimulasi atau
merangsang limfosit, sel T naif yaitu [29 . 30]. VP24 dan VP35 kemungkinan memainkan
peran penting dalam mencegah DC dari menanggapi infeksi, karena mereka memblokir
tipe 1 interferon (IFN) respon anti-virus pada terinfeksi target seluler dengan mencegah
akumulasi nuklir sinyal transduser dan penggerak 1 (STAT1) dan menghambat aktivitas
interferon faktor regulasi (IRF) -3 dan IRF-7 [31, 32]. Efek ini lebih diperbanyak dengan
VP24, karena juga menghambat p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase dalam
kinase Janus (JAK) -STAT secara independen dan oleh VP35 karena mencegah aktivasi dari
RNA-dependent protein kinase doublestranded diperlukan untuk produksi IFN [33-35].
Unresponsiveness dari DC terhadap infeksi Ebola paling mungkin berkontribusi terhadap
apoptosis limfosit besar secara rutin diamati dalam kasus klinis infeksi pada manusia
[36]. Infeksi Ebola monosit dan makrofag memunculkan pelepasan sejumlah besar sitokin
dan kemokin pro-inflamasi, termasuk interleukin (IL) -1b, IL-2, IL-6, IL-8 dan IL-10; tumor
necrosis factor (TNF) -a; monosit protein kemo-atraktan (MCP) -1; diatur pada aktivasi sel
T yang normal diekspresikan dan disekresikan (RANTES); dan nitrogen dan oksigen
spesies reaktif (ROS RNS dan masing-masing) [37-39]. Ini '' sitokin badai '' merekrut APC
tambahan untuk tempat infeksi, meningkatkan jumlah host untuk mendukung replikasi
virus. Hal ini juga berkontribusi pada patogenesis pada tahap akhir penyakit dengan
meningkatkan permeabilitas endotel dan kebocoran pembuluh darah yang, pada
gilirannya, mendorong penyebaran cepat APC yang terinfeksi di seluruh sirkulasi sistemik
untuk melepaskan Ebola di sekunder organ limfoid, paru-paru, hati, dan situs pendukung
lainnya replikasi virus (Gbr. 2) [40-43]. Selama 35 tahun terakhir, banyak wabah Ebola
memiliki tercatat [44]. Virus Ebola pertama kali diidentifikasi selama dua wabah hampir
bersamaan di Afrika Tengah pada tahun 1976 oleh dua spesies yang berbeda dengan
tingkat fatalitas hingga 90%: Zaire ebolavirus (EBOV) dan Sudan ebolavirus (SUDV). Sejak
itu, spesies tambahan telah diidentifikasi: Reston (RESTV), Tai Hutan (TAFV), dan
Bundibugyo (BDBV) [45]. RESTV, diisolasi pada tahun 1989 dari kera cynomolgus
diekspor dari Filipina ke Amerika Serikat, adalah satu-satunya spesies yang belum
berhubungan dengan penyakit manusia [46-48]. Meskipun kasus virus Ebola Infeksi
terbatas pada Afrika, jumlah wabah dan kematian terkait telah perlahan-lahan meningkat
dari waktu ke waktu. Ini, ditambah dengan laporan mencatat bahwa Ebola dapat
ditularkan di seluruh spesies melalui aerosolisasi partikel virus [49, 50], telah
menimbulkan kekhawatiran yang signifikan atas penggunaan mungkin sebagai senjata
biologis, membuat virus Institut Nasional Alergi dan Infeksi Penyakit (NIAID) Kategori A
Patogen Prioritas, dan membatasi percobaan menggunakan semua spesies Ebola ke
tingkat biosafety (BSL) -4 penahanan laboratorium [50-52]. Ada umumnya masa inkubasi
2 sampai 21 hari sebelum gejala Ebola virus yang disebabkan dengue dicatat. Mereka
awalnya bermanifestasi sebagai seperti flu non-spesifik Gejala (malaise, menggigil,
demam) dan cepat berkembang menjadi mual, diare, sesak napas, hipotensi, perdarahan
dan koma [53]. Cedera vaskular karena Kerusakan sel endotel, hepatosit nekrosis yang
disebabkan oleh replikasi virus, gangguan koagulasi, dan sitokin yang tidak terkendali /
sekresi kemokin oleh monosit yang terinfeksi danmakrofag berkontribusi terhadap EBOVdiinduksi syok hemoragik dan akhirnya kematian pasien (Gbr. 2) [36, 51, 54]. Meskipun

Ebola adalah fokus dari banyak mutakhir, terkoordinasi, program penelitian interdisipliner
di seluruh dunia, vaksin yang efektif atau agen obat untuk memerangi patogen
mematikan ini saat ini tidak tersedia untuk digunakan pada manusia. Upaya ini,
bagaimanapun, telah mempercepat identifikasi banyak target molekul baru dan terapi
yang menjanjikan kandidat saat ini dalam pengujian pra-klinis.
2. Vaksin Sasaran: Ebola Protein
Vaksin Ebola pertama terdiri dari seluruh virion tidak aktif oleh panas, formalin, atau
gamma-iradiasi [55, 56], dan sebagian besar tidak efektif pada tikus dan primata nonmanusia. Sejak itu, overekspresi gen yang mengkode Ebola protein virus telah menjadi
pendekatan utama untuk vaksin pembangunan. Alasan di balik strategi ini adalah untuk
mendorong target seluler untuk menghasilkan protein virus yang cukup untuk
memperoleh respon kekebalan ampuh T dan B diperantarai sel yang akan memberi
perlindungan terhadap Ebola (Gbr. 3). Karena Ebola GP dikenal memainkan peran kunci
dalam masuknya virus dan untuk memfasilitasi kematian sel dan permeabilitas pembuluh
darah di tahap terakhir dari infeksi, kebanyakan rekombinan awal platform vaksin
berpusat di sekitar berlebih dari GP sendiri atau dalam kombinasi dengan NP dan VP
lainnya (Gbr. 3). A berbagai vektor virus dan non-virus telah digunakan untuk
memberikan gen untuk antigen tersebut dan mendorong kuat B dan T cell-mediated
respon imun (Tabel 1).
2.1 rekombinan Adenovirus dan Vaksin Ebola Plasmid DNA Berbasis.
Platform vaksin pertama yang berhasil dilindungi NHPs dari infeksi virus Ebola adalah
adenovirus rekombinan serotipe 5 (rAd5) vektor mengekspresikan EBOV GP [57]. A dosis
tunggal intramuskular adenovirus setelah tiga kali berturut-turut dosis priming dari
plasmid encoding DNA EBOV GP dan NP, SUDV GP, dan TAFV GP sepenuhnya dilindungi
primata terhadap tantangan mematikan. kombinasi ini Pendekatan, prime DNA /
meningkatkan rAd5, sangat meningkat beredar anti-GP tingkat antibodi yang dihasilkan
dan terkenal -antigen spesifik CD4? dan CD8? Proliferasi sel T tanggapan dalam kera
cynomolgus. Tingginya tingkat ekspresi transgen dan sifat yang melekat adjuvant dari
kapsid adenovirus sepenuhnya dihargai dalam berikutnya Studi di mana injeksi
intramuscular tunggal virus saja bisa melindungi hewan dari tantangan mematikan [58].
Perbaikan lebih lanjut dari platform vaksin rAd5 berbasis oleh Richardson et al. [59]
melibatkan mengoptimalkan GP ekspresi kaset sehingga lebih antigen diproduksi.
Sebagai Akibatnya, dosis vaksin ini dapat dikurangi 100 kali lipat tanpa mengorbankan
respon imun antigen spesifik.
Pendekatan ini sangat sukses sehingga suntikan intramuscula tunggal vaksin direkayasa
ulang sepenuhnya dilindungi tikus ketika itu diberikan 30 menit setelah terpapar dosis
mematikan EBOV, menunjukkan bahwa platform ini mungkin berguna untuk baik
profilaksis dan pasca-paparan aplikasi. Meskipun hasil yang menjanjikan, kekhawatiran
tetap bahwa vaksin rAd5 berbasis mungkin memiliki utilitas klinis terbatas karena fakta
bahwa sebagian besar dari global populasi memiliki jumlah yang cukup dari anti-AD5
Tangkap di sirkulasi mereka [60, 61]. Di Amerika Serikat, sekitar 30-60% dari populasi
memiliki tingkat terukur antiadenovirus Tangkap beredar, sementara 40-80% dari mereka
di Eropa dan Asia mengandung kadar yang sama Tangkap [62, 63]. Tingkat tertinggi yang
tercatat sampai saat ini ditemukan di Afrika sub-Sahara (80-100% positif) [64].
Meningkatkan dosis vaksinasi dapat menimpa yang sudah ada imunitas (PEI) dan
mencapai ekspresi antigen terkenal. Pendekatan ini, bagaimanapun, tidak diinginkan,
karena dosis tinggi adenovirus partikel dapat memicu berat, beracun respon inflamasi
pada manusia [65]. strategi lain untuk menghindari PEI ke AD5 melibatkan imunisasi

dengan langka serotipe adenovirus, karena anti-AD5 Tangkap tidak sepenuhnya silang
bereaksi dengan dan menetralisir virus ini [66-69]. Platform vaksin menggunakan virus ini
telah sebagian dilindungi tikus dan NHPs dengan PEI ke AD5 dari mematikan Tantangan
(Tabel 1) [66]. Administrasi mukosa rAd5 juga telah ditunjukkan untuk menghindari
netralisasi virus dengan anti-AD5 Tangkap dalam sirkulasi. Meskipun rute ini imunisasi
umumnya menyebabkan antigenspecific sistemik lebih rendah Respon sel T, T
menginduksi lokal yang kuat dan B respon sel tidak terganggu oleh PEI yang memberikan
perlindungan penuh dalam tikus dan NHP model penyakit [60, 61]. Baru-baru ini, fase I
percobaan klinis yang dilakukan dengan 31 sehat orang dewasa menunjukkan bahwa
vaksin Ebola rAd5 berbasis adalah mampu merangsang-antigen spesifik sel T dan
antibodi tanggapan tanpa efek samping terkenal; Namun, sebelum paparan adenovirus
melakukan kompromi imunogenisitas vaksin saat itu diberikan oleh intramuskular injeksi
[70].
2.2 Hidup Atenuasi Virus Berbasis Vaksin Ebola.
Platform lain vaksin menjanjikan melibatkan penggunaan hidup dilemahkan virus
rekombinan bantalan GP Ebola (Gambar. 3). Salah satu calon tertentu, sebuah vesikular
rekombinan virus stomatitis (VSV) dimana tipe liar permukaan VSV glikoprotein diganti
dengan EBOV GP, menunjukkan kinetika pertumbuhan dilemahkan dan tropisme dari
EBOV in vitro [71]. Dosis tunggal virus yang diberikan oleh intramuskular, intranasal, atau
oral benar-benar dilindungi tikus, marmut, dan NHPs dari tantangan mematikan dengan
tidak adanya gejala klinis atau diukur viremia (Tabel 1) [72-78]. Sebaliknya, pemberian
dari gamma-iradiasi, bentuk aktif dari virus tidak melindungi hewan, menunjukkan bahwa
replikasi adalah penting komponen potensi vaksin ini [79]. Ini vektor adalah pilihan terapi
yang menjanjikan untuk pasca-paparan terapi, karena dosis intraperitoneal tunggal
diberikan 24 jam setelah infeksi Ebola yang mematikan tikus sepenuhnya dilindungi [75,
76, 80]. Lima puluh persen dari marmut juga selamat mematikan tantangan ketika diberi
vektor dalam cara yang sama 24 jam setelah paparan [80]. Lima puluh persen hidup juga
mencatat ketika kera rhesus diberi vektor 20-30 menit setelah tantangan mematikan.
Hewan ini memang mengembangkan terkenal tanda-tanda klinis penyakit (demam,
lymphocytopenia) pada hari 6 namun memiliki tingkat rendah viremia serum, yang
diselesaikan 10 hari kemudian. Tingginya kadar-GP spesifik immunoglobulin (Ig) -G NAB
dan tanggapan IgM relatif rendah juga ditemukan dalam serum selamat. Meskipun lebih
dari 80 NHPs telah diberikan ini Platform vaksin tanpa toksisitas terkenal [73], kemajuan
konstruk berbasis VSV ke klinik telah dibatasi oleh kekhawatiran tentang keamanannya.
Untuk mengatasi masalah ini, vektor pertama kali dievaluasi pada tikus kekebalandikompromikan kurang B dan sel T fungsional [77] dan NHPs terinfeksi simian / human
immunodeficiency virus (SHIV) [81]. Administrasi vektor non-obesitas diabetes / parah
dikombinasikan immunodeficiency (NOD-SCID) tikus dengan dosis yang 10 kali yang
sebelumnya diberikan kepada tikus yang sehat adalah ditoleransi dengan baik [77].
Empat dari enam divaksinasi SHIV terinfeksi NHPs selamat Ebola tantangan tanpa vaksindiinduksi toksisitas meskipun fakta bahwa dosis yang relatif tinggi Vaksin [1 9 107 plak
unit pembentuk (PFU)] diberikan untuk masing-masing hewan [81]. Dalam upaya untuk
mengatasi masalah terkait dengan neurotoksisitas dari vektor VSV di sehat subyek, 21
NHPs diberi baik tipe liar VSV atau VSVs rekombinan yang mengandung baik EBOV atau
Marburg GP pada permukaan melalui suntikan intrathalamic [82]. Hasil dari penelitian ini
jelas menunjukkan bahwa rekombinan VSV vektor kekurangan sifat neurovirulence terkait
dengan virus tipe liar. Pengamatan penting yang dilakukan selama ini penelitian adalah
bahwa meskipun hewan yang diberikan rekombinan yang VSV vektor tidak menimbulkan
neurovirulence terkenal di seluruh program studi tersebut, virus rekombinan terdeteksi di
penyeka mukosa, menunjukkan bahwa hal itu bisa meninggalkan sistem saraf pusat oleh
mekanisme yang tidak diketahui. Vaksin ini pertama kali digunakan pada manusia ketika

laboratorium ilmuwan yang bekerja dengan Ebola di laboratorium BSL-4 adalah terpapar
melalui disengaja jarum suntik [83]. Vaksin diberikan 48 jam setelah paparan. Pasien
dikembangkan demam ringan dan mialgia 12 jam setelah injeksi. laboratorium lain
parameter (kimia darah, koagulasi, dan hematologi) tetap normal. Meskipun pelindung
kemanjuran vaksin tidak dapat ditentukan dalam kasus ini karena infeksi Ebola tidak
dapat dikonfirmasi melalui pengujian serologis, ilmuwan tetap sehat sampai saat ini.
Rekombinan parainfluenza manusia virus 3 (HPIV3) mengekspresikan EBOV GP sendiri
(HPIV3 / EboGP) atau bersama-sama dengan nukleoprotein (HPIV3 / EboGP-NP) juga telah
dikembangkan sebagai platform vaksin hidup yang dilemahkan. masing-masing
konstruksi ini telah diberikan perlindungan lengkap di guinea babi dan NHPs setelah EBOV
tantangan (Tabel 1) [84-86]. Sama seperti adenovirus, HPIV3 adalah pernapasan umum
virus, membuat PEI untuk vektor pada manusia keterbatasan utama platform ini. Untuk
mengatasi masalah ini, Bukreyev et al. [87] mengembangkan HPIV3 vektor chimeric
mengekspresikan EBOV GP sebagai protein permukaan tunggal untuk menghindari
dampak PEI pada potensi vaksin. Vektor ini, HPIV3 / DFHN / EboGP, tahan terhadap
Tangkap-HPIV3 spesifik in vitro dan intranasal dosis tunggal (4 9 106 PFU) dilindungi
kelinci percobaan dari infeksi EBOV. Studi tambahan di hewan diberi vaksin di hadapan
PEI ke HPIV3 dan evaluasi toksisitas vaksin di NHPs adalah diperlukan untuk
mengevaluasi utilitas klinis platform ini lebih tepatnya.

2.3 Perspektif Masa Depan: Pembangunan Vaksin

Meskipun banyak platform vaksin yang sedang dikembangkan telah sepenuhnya
dilindungi NHPs terhadap mematikan Ebola infeksi dan beberapa uji klinis telah
masuk [70], masing-masing mengandung urutan antigen untuk satu spesies
Ebola. Karena setiap spesies Ebola adalah antigen yang berbeda [88, 89],
pengembangan vaksin multivalent mampu berunding perlindungan terhadap
beberapa spesies yang berbeda dari Ebola akan praktis, karena wabah sporadis
dan sulit untuk memprediksi. Sementara vektor rAd5 berbasis mengekspresikan
baik SUDV dan EBOV GP dan beberapa VSVbased berbeda vektor
mengungkapkan dokter dari SUDV, EBOV dan Virus Marburg (MARV) telah
dibangun, mereka memiliki berhasil melindungi sejumlah hewan setelah
Tantangan mematikan dengan beberapa spesies Ebola yang berbeda [90- 92].
Pendekatan multivalent ini saat ini sangat tenaga kerja intensif dan dibatasi oleh
kapasitas kloning rekombinan vektor virus. Pengembangan antigen mosaik yang
mengandung fragmen protein pengakuan sel-T potensial epitop dari beberapa
spesies Ebola mungkin baik Strategi alternatif untuk mengatasi masalah ini.
Konsep ini baru-baru ini digambarkan dengan virus rekombinan vektor
mengekspresikan protein mosaik multivalent yang bisa memperoleh kuat-antigen
spesifik CD8? Respon sel T terhadap beberapa antigen Model [93-95]. Meskipun
pelindung kemanjuran strategi ini belum ditunjukkan dalam model penyakit
menular, studi terbaru yang menyoroti pentingnya CD8? Respon sel T dalam
berunding perlindungan kekebalan terhadap infeksi EBOV mendukung NHPs
pendekatan ini untuk pengembangan multivalen Ebola vaksin [96, 97]. Sebagai
teknologi untuk produksi proteinbased vaksin berlangsung, produksi skala besar
ini antigen baru dalam kombinasi dengan perancah imunisasi untuk
memudahkan pemurnian dan meningkatkan respon imun akan mungkin, karena
baru-baru ini ditunjukkan dengan produksi dari Ebola GP vaksin kompleks imun
yang kuat di Nicotiana benthamiana [98].

3 Pengembangan Novel Anti-Viral Perawatan Moleculesas untuk Ebola Infeksi.

Meskipun Ebola telah diidentifikasi sebagai penyebab banyak wabah mematikan
demam berdarah selama lebih dari tiga dekade, pilihan pengobatan saat ini bagi
individu yang terinfeksi terbatas. Pendekatan kasar seperti administrasi sembuh
serum dari korban yang terinfeksi [99] atau kuda imunoglobulin anti-Ebola
dengan IFN [100] memiliki telah berhasil digunakan untuk mengurangi keparahan
infeksi (Gambar. 4a). Meskipun setiap orang yang menerima persiapan ini
selamat, mekanisme perlindungan tidak jelas, karena komposisi masing-masing
produk adalah kompleks dan satu komponen tertentu tidak bisa reproducibly
dikaitkan dengan kelangsungan hidup. Sebagai contoh, pada awalnya berpikir
bahwa antiEbola IgG bertanggung jawab untuk melindungi delapan pasien
dengan demam berdarah Ebola yang selamat setelah mereka diberi darah utuh
diketahui mengandung anti-EBOV Antibodi IgG [101]. Sementara hubungan ini
tampaknya logis dan mudah, belum berhasil direproduksi di laboratorium
terkontrol. Dalam penelitian yang dilakukan oleh Jahrling et al., kera rhesus naif
diberikan sembuh-fase seluruh darah dari tiga kera yang selamat infeksi EBOV
mengembangkan serum terkenal antiEBOV Titer antibodi IgG [102]. Ini,
bagaimanapun, tidak cukup untuk mengendalikan replikasi virus, dan penyakit
dalam ini hewan berkembang dengan cara yang sama dengan yang terlihat pada
kera yang tidak diobati. Khasiat yang sangat ditandai manusia anti-EBOV antibodi
monoklonal (KZ52) telah dievaluasi pada marmut dan NHPs (Tabel 2, 3) [103].
Meskipun antibodi ini memiliki dilaporkan 50% penghambatan Konsentrasi (IC50)
dari 0,5-2 lg / mL in vitro dan in vivo, pemberian dosis 25 mg / kg 1 jam setelah
EBOV Tantangan diberikan perlindungan hanya parsial (9 dari 15) di kelinci
percobaan. Persiapan ini juga gagal mengendalikan virus replikasi dan
melindungi NHPs dengan dosis 50 mg / kg [103]. Studi molekuler tambahan rinci
mengungkapkan monoklonal yang antibodi berinteraksi dengan GP Ebola di situs
yang berbeda, dan kombinasi isolat monoklonal adalah paling efektif untuk
aplikasi tantangan sebelum dan sesudah [104-107]. Setelah itu jelas bahwa
transfer langsung kekebalan dari korban yang terinfeksi adalah tidak dapat
diandalkan pendekatan untuk memerangi infeksi Ebola, multicenter besar proyek
penelitian kolaboratif yang diprakarsai untuk layar perpustakaan senyawa
ditandai dengan baik dan baru untuk mengidentifikasi target seluler dan
molekuler yang berhubungan dengan virus masuk dan replikasi. Senyawa yang
saat ini telah dievaluasi pada hewan pengerat dan NHPs dirangkum dalam Tabel
2 dan 3.
3.1 Inhibitor Kecil-Molekul Virus Masuk dan endosomal Escape.
Masuknya virus merupakan langkah penting dalam siklus hidup virus dan sering
menjadi target yang menarik untuk terapi, karena penghambatan ini blok proses
replikasi pada tahap awal, secara signifikan mengurangi kesempatan bagi virus
untuk berkembang dan mengembangkan resistensi obat. Skrining berbasis sel
tinggi-throughput (HTS) tes dilakukan bersama-sama dengan rekombinan EBOV
mengekspresikan protein fluorescent atau recombinan pseudotyped virus hijau
dilapisi dengan GP EBOV yang tidak membutuhkan tingkat tinggi penahanan
telah digunakan untuk mengidentifikasi protein yang memediasi masuknya

filovirus [108]. Pendekatan ini, digunakan dalam kombinasi dengan analisis

struktural Ebola GP, telah menyebabkan penemuan beberapa molekul kecil yang
mungkin berguna untuk terapi demam berdarah EBOV. Sebuah turunan
benzodiazepin (senyawa 7) diidentifikasi dari HTS perpustakaan molekul baru
sebagai senyawa yang bisa mencegah infeksi manusia rekombinan
immunodeficiency virus (HIV) pseudotyped dengan EBOV GP (HIV / EBOV-GP)
[109]. Analisis komputasi dari struktur kristal EBOV GP kemudian digunakan
untuk menentukan bagaimana senyawa 7 berinteraksi dengan virus. Hasil dari
penelitian ini menunjukkan bahwa senyawa 7 bisa muat dalam saku hidrofobik
antara GP1 dan GP2 subunit dengan cara yang dapat mengganggu masuknya
virus (Gambar. 4a). Ebola juga harus erat berinteraksi dengan beberapa host
protein untuk endosomal melarikan diri, replikasi, perakitan, tunas, dan rilis
proses. HTS juga mengidentifikasi senyawa yang berasal dari adamantane
benzylpiperazine diamide (2 - ((3r, 5r, 7R) -adamantan-1-il) -N- (2- (4benzylpiperazin-1-il) -2-oxoethyl) asetamida), yang dikenal sebagai senyawa
3.47, yang menghambat EBOV infeksi in vivo [110]. Studi Biokimia
mengungkapkan bahwa molekul ini mengikat Niemann-Pick C1 (NPC1), protein
transporter kolesterol bertanggung jawab untuk menghilangkan kolesterol dari
akhir-endosomes / lisosom dan kolesterol homeostasis intraseluler [111]. Analisis
lebih lanjut dengan ini dan senyawa kimia lain yang sejenis mengungkapkan
bahwa protein ini, yang menengahi kondisi neurodegenerative menghancurkan,
penyakit Niemann-Pick Type C, juga berperan dalam EBOV masuk [112, 113].
Dengan cara yang sama, upaya untuk mengkarakterisasi EBOV-tuan interaksi
protein mengidentifikasi dua molekul baru-EBOV D-peptida konjugasi fragmen
dikristalisasi (Fc) wilayah dari IgG1 antibodi manusia dan endosome menargetkan
C-peptida yang berasal dari penduduk asli C-terminal repeat heptad daerah EBOV
GP2 terkonjugasi dengan urutan yang kaya arginin HIV-1 transaktivator dari
transkripsi (Tat) -sebagai kandidat yang menjanjikan untuk mencegah virus rilis
dari endosome (Gbr. 4b) [114]. di sebuah agak cara yang berlawanan, Spurgers
et al. [115] diidentifikasi beberapa protein tuan rumah [termasuk heat shock
70kDa protein 5 (HSPA5) dan protein ribosom L18 (RPL18)] oleh cairan
kromatografi terkait tandem spektrometri massa yang yang penting dalam
replikasi Ebola, dan dikonfirmasi temuan mereka dengan menggunakan urutan
siRNA untuk menargetkan tuan ekspresi protein. Berbagai PI juga telah dievaluasi
sebagai senyawa anti-virus yang potensial untuk EBOV. strategi ini didasarkan
pada kenyataan bahwa EBOV GP diproses oleh protease-cathepsin endosomal
sistein, catb, dan CatL [116-118]. Penambahan inhibitor protease sistein E64 dan
CA074 dalam media kultur efektif diblokir seluler cathepsins dan ditekan replikasi
EBOV dan virus diinduksi efek sitopatik in vitro [117]. senyawa ini juga
menunjukkan aktivitas anti-virus terhadap banyak lainnya virus (Marburg,
demam Rift Valley, Lassa) in vitro dan tikus dilindungi dari tantangan dengan
EBOV mouse diadaptasi ketika diberikan sebagai profilaksis (80%) atau terapi
pasca-paparan (50%) (Gambar. 4b).

3.2 Senyawa yang Block Virus Replikasi

Selama bertahun-tahun, ribavirin-obat anti-virus umum yang mengacaukan

replikasi banyak virus RNA seperti influenza dan polio dengan mendorong mutasi
pada virus Genom dengan peningkatan kejadian ('' kesalahan bencana '') dan
melalui kontribusi lainnya mekanisme-telah digunakan untuk mengobati demam
berdarah [119]. Meskipun sukses di mengurangi demam berdarah yang timbul
dari arenaviruses dan virus bunya [120, 121], ribavirin tidak menguasai Replikasi
EBOV dan gagal melindungi hewan dari mematikan Tantangan. Sebuah alternatif
untuk pendekatan ini adalah untuk memblokir virus transkripsi dan / atau
replikasi dengan oligonukleotida antisense yang melengkapi urutan di EBOV yang
genom atau dalam kompleks RNA polimerase (Gambar. 4c) [122, 123]. Geisbert
et al. [123] Sirnas telah mengidentifikasi yang mengikat secara khusus untuk
urutan dalam EBOV yang polimerase L (EK-1), VP24 (VP-24-1160), dan VP35 (VP35-855) daerah. Ketika senyawa ini digabungkan dan dirumuskan sebagai
partikel asam lemak nukleat yang stabil (SNALPs; LNP / siRNA: TKM-Ebola) dan
diberikan kepada NHPs di empat dosis terpisah dari 2 mg / kg setiap intravena,
66% dari populasi selamat tantangan mematikan dengan EBOV (Tabel 3). Sebuah
rejimen tujuh dosis efektif menghentikan virus replikasi, dengan peningkatan
moderat dalam aspartat serum tingkat aminotransferase yang dicatat. Semua
hewan yang diberikan ini rejimen selamat tantangan. Dalam pendekatan yang
sama, c-Abl1 dan tirosin terkait kinase, diketahui mempengaruhi replikasi virus
DNA tertentu dan bakteri, dievaluasi untuk peran mereka dalam replikasi EBOV.
Serangkaian membungkam studi mengungkapkan bahwa fosforilasi dari protein
VP40 oleh c-Abl1 diperlukan untuk transportasi kompleks nukleokapsid ke
membran sel dan pelepasan virion lengkap dari sel [124]. Pemblokiran proses ini
dengan senyawa yang telah disetujui untuk pengobatan leukemia pada manusia,
seperti imatinib (Gleevec) dan nilotinib (Tasigna), yang menargetkan enzim ini,
secara signifikan membatasi jumlah menular Ebola virion dirilis pada medium
kultur (Gambar. 4c) [124]. Penggunaan senyawa yang menargetkan produk gen
tuan rumah lebih dari virus itu sendiri dalam model yang lebih besar dari infeksi
Ebola dapat efektif mencegah perkembangan resistan terhadap obat melarikan
diri mutan dari waktu ke waktu. Platform lain terapi yang menjanjikan di
mencegah
replikasi
EBOV
melibatkan
penggunaan
thirdgeneration
oligonukleotida antisense sintetis, phosphorodiamidate oligomer morfolino
(PMOS), yang RNase H kompeten, dan terjemahan penangkapan dan mRNA
pengolahan melalui halangan sterik [125]. Molekul-molekul ini, di mana cincin
ribosa diganti dengan sixmembered cincin morfolina dan fosfodiester tradisional
obligasi
diganti
dengan
hubungan
phosphorodiamidate,
menunjukkan
peningkatan kelarutan dan lebih kimiawi stabil dalam cairan biologis dan selama
penyimpanan sehubungan dengan rekan-rekan generasi pertama mereka [126].
beberapa baru-baru ini laporan telah menunjukkan bahwa molekul ini bisa terapi
yang berharga untuk infeksi filovirus [115, 127- 129]. Administrasi bermuatan
positif EBOV khusus PMOS (AVI-6002) menargetkan urutan mRNA dalam VP24
dan VP35 daerah 30-60 menit setelah tantangan ditekan replikasi virus dan
inflamasi selanjutnya tanggapan, dan sepenuhnya dilindungi lima dari delapan
kera (Gambar 4c., Tabel 3) [130]. Administrasi pasca-paparan Marburg virusspesifik PMOS (AVI-6003) menargetkan MARV VP24, VP35, dan protein L juga
sepenuhnya dilindungi NHPs dari tantangan mematikan [130]. Meskipun New

Investigational Aplikasi narkoba pada file dengan US Food dan Drug

Administration dan fase I uji klinis di kemajuan untuk mengevaluasi keamanan
senyawa ini [126], studi tambahan harus dilakukan secara akurat menentukan
kerangka waktu di mana mereka menawarkan pasca-paparan perlindungan
sebelum mereka dapat digunakan dalam pasca-paparan terapi rejimen. Sistem
penyaringan throughput tinggi juga telah membantu dalam mengidentifikasi tiga
inhibitor molekul kecil dari EBOV Infeksi: FGI-103 [131], FGI-104 [132], dan FGI106 [133]. Senyawa ini telah memberikan perlindungan 80-100% pada tikus
ditantang dengan EBOV (Tabel 2). meskipun mekanisme aktivitas anti-virus FGI103 dan FGI-104 tidak sepenuhnya dipahami, aktivitas yang luas dari FGI-106
terhadap Ebola, Marburg, demam Rift Valley, Dengue, HIV, dan virus hepatitis C
menunjukkan bahwa ini Senyawa menargetkan jalur seluler tuan rumah yang
terlibat dalam dan umum untuk replikasi banyak virus yang berbeda.
3.3 Senyawa untuk Gejala Ebola Infeksi: modulator inflamasi.
Sampai saat ini, strain non-disesuaikan dari EBOV telah ditemukan menginduksi
demam berdarah hanya pada manusia dan non-manusia primata [41, 134-136].
Meskipun spesies-spesifik ini Pembatasan telah bermasalah, karena strain
disesuaikan adalah diperlukan untuk penyakit pemodelan pada hewan pengerat
[137], studi dilakukan pada tikus telah penting dalam mengidentifikasi cara untuk
meningkatkan respon imun dan replikasi blok virus. Sebagai contoh, NOD-SCID,
KO IFN-a / b reseptor, dan tikus kekebalan kompeten diobati dengan anti-tikus
IFNa / b antibodi menyerah non-disesuaikan (tipe liar) EBOV Infeksi [138]. Dalam
serangkaian terpisah dari penelitian, pengobatan dengan s-adenosyl-homosistein
(SAH) inhibitor hidrolase 3-deazaneplanocin A (c3-NPCA) [139] dan karbosiklik 3deazaadenosine (Ca-c3 Ado) [140], yang menghambat replikasi dari virus
berbagai DNA dan RNA, sepenuhnya dilindungi tikus kekebalan kompeten selama
infeksi mematikan dengan mouse diadaptasi-EBOV (Tabel 2). penyelidikan lebih
lanjut mengungkapkan bahwa efek perlindungan bisa benar-benar dihilangkan
dengan co-administrasi SAH inhibitor hidrolase dan anti-tikus IFN-a / b antibodi
[138]. meskipun hasil ini sangat menyarankan bahwa perlawanan dan / atau
kerentanan untuk tipe liar infeksi EBOV dimediasi oleh tipe I interferon respon,
kembali penyegaran anti-virus respon dengan cara ini belum terapi efektif dalam
kera rhesus [141], Punt [142], dan Monyet hijau Afrika [143]. Hal ini bisa
diperbaiki oleh menggunakan spesies-spesifik interferon. Evaluasi ini lebih lanjut
Pendekatan belum dilakukan. Dalam upaya terakhir untuk mengidentifikasi terapi
baru untuk mengobati dan mengurangi gejala patologis yang berhubungan
dengan demam filovirus hemoragik, senyawa NSC62914, sebuah antioksidan
yang bertindak sebagai scavenger oksigen reaktif spesies (ROS), ditemukan
untuk menghambat replikasi EBOV, Marburg, Lassa, dan Rift Valley Fever virus in
vitro [144]. Meskipun peran ROS dalam patogenesis Infeksi filovirus saat ini tidak
dipahami, senyawa ini tikus dilindungi dari tantangan mematikan dengan EBOV
(Tabel 2). Ini adalah penting, mengingat bahwa lain yang dikenal antioksidan
tidak berdampak pada infeksi EBOV. Saya T juga menunjukkan bahwa NSC62914
dan senyawa lain dengan sifat antioksidan dapat mempertahankan sinyal sel lain
jalur umum untuk banyak virus yang ditangkap selama Infeksi EBOV. 3.4
Senyawa untuk Gejala Ebola Infeksi: Modulator koagulasi Kelebihan produksi

faktor jaringan pro-koagulan selama Infeksi Ebola memfasilitasi gangguan

pembekuan yang maju kegagalan multi-organ, sering ditandai dengan penurunan
beredar protein C [145]. Dengan demikian, merangsang koagulasi melalui jalur
faktor jaringan dengan pemberian faktor VIIA / faktor jaringan inhibitor
[rekombinan nematoda antikoagulan c2 protein (rNAPc2)] [146] atau dengan
mengaktifkan alami antikoagulan protein C jalur dengan rekombinan manusia
protein diaktifkan C (rhAPC) [147] yang logis pilihan dalam desain yang
mendukung terapi pasca-paparan rejimen. Masing-masing senyawa ini secara
signifikan penurunan produksi sitokin pro-inflamasi dan memperpanjang waktu
yang berarti mati terhadap nontreated kontrol dalam model hewan infeksi (Tabel
3). Meskipun hasil yang menjanjikan, penggunaan rutin agen ini pada manusia
telah terhalang oleh laporan yang saling bertentangan dari Tahap II uji coba yang
dirancang untuk mengevaluasi efikasi klinis mereka untuk pengobatan syok
septik [148, 149] dan selanjutnya penarikan salah satu produk dari pasar AS
[150].
4 Arah Masa Depan: Pengembangan Kecil-Molekul Terapi untuk Ebola Infeksi
Meskipun ada kebutuhan yang jelas untuk rejimen yang efektif untuk
pencegahan dan perlindungan terhadap Ebola-dimediasi hemoragik demam,
banyak rintangan yang signifikan telah membatasi kemampuan kandidat yang
menjanjikan untuk menjangkau mereka yang membutuhkan mereka. Salah satu
alasan utama untuk kemajuan sederhana dibuat di daerah ini selama dua dekade
terakhir adalah kenyataan bahwa bermakna '' bukti-of-prinsip '' studi hanya dapat
ditangani di maksimum-containment BSL-4 laboratorium. penting kemajuan
dalam pengembangan high-throughput sistem yang memungkinkan skrining
cepat potensi anti-virus Senyawa pada tingkat penahanan yang jauh lebih rendah
(BSL-2) dan penggunaan teknologi RNA gangguan untuk mengkonfirmasi Temuan
ini telah menyebabkan penemuan beberapa Novel senyawa yang telah
menunjukkan efektivitas perlindungan di model hewan infeksi (Tabel 2, 3) [123,
128, 130, 131]. Karena pendekatan ini akan secara signifikan mempercepat
penemuan terapi baru untuk memerangi Ebola, itu juga akan meningkatkan
kebutuhan untuk studi pada hewan model yang lebih besar, seperti Data yang
diperoleh dari tikus mungkin tidak secara akurat mencerminkan respon
farmakologi dan toksikologi manusia.
Sebagian besar baru-baru ini ditemukan terapi molekul kecil untuk mengobati
demam berdarah filovirus terbatas serum paruh dan bioavailabilitas miskin di
jaringan target, membuat administrasi jumlah berlebihan besar Senyawa dalam
beberapa dosis rejimen yang diperlukan untuk mencapai efek terapi yang optimal
[115, 127, 128, 130, 131, 144]. Hal ini juga menetapkan bahwa potensi setiap
terapi atau vaksin sangat dipengaruhi oleh fisik stabilitas senyawa aktif dan
pengiriman yang dipilih sistem. Paruh dan bioavailabilitas dapat sangat
diperpanjang melalui formulasi yang mempertahankan struktur integritas agen
obat dan melindunginya dari nucleases dan enzim degradatif lainnya in vivo dan
selama jangka panjang Penyimpanan [151, 152]. Dengan demikian,
memfokuskan upaya dalam pembangunan formulasi baru yang dapat
menstabilkan atau mengubah konformasi fisik dari senyawa ini menjanjikan akan
menjadi penting untuk meningkatkan efektivitas dan mengurangi toksisitas

mereka karena mereka maju ke klinik. Memasukkan formulasi ini ke dalam

platform pengiriman yang tepat maka akan bergerak mereka menuju rejimen
dosis tunggal yang mudah untuk mengelola dalam wabah dan pasca-paparan
skenario. Beberapa kebanyakan strategi formulasi yang relevan / pengiriman
untuk novel Ebola terapi dibahas secara rinci di bawah ini dan memiliki aplikasi
untuk kedua molekul kecil dan platform vaksin.
4.1 Formulasi Pengembangan: mukoadesif / Penyerapan Enhancer. Agen
mukoadhesif membawa molekul terapi ke kontak dekat dengan permukaan sel
mukosa dan memperpanjang waktu tinggal mereka di sepanjang permukaan
saluran napas, mulut rongga, pencernaan dan saluran genitourinari, dan kulit
[153]. Mereka juga menekan pembersihan mukosiliar (PKS) proses yang cepat
menghilangkan partikel asing dari daerah ini [154]. Senyawa mukoadhesif dapat
dibagi menjadi tiga kategori [155]. Kelompok pertama meliputi polimer hidrofilik
seperti
natrium
alginat,
natrium
karboksimetilselulosa,
hidroksipropil
metilselulosa, dan Carbopol yang dapat membentuk ikatan hidrogen kovalen
dengan Lapisan lendir [156]. Kelompok kedua terdiri dari kation polimer seperti
kitosan dan sintetis polimetakrilat yang berinteraksi dengan bermuatan negatif
musin melalui pembentukan ikatan ionik atau hidrogen. Kelompok ketiga adalah
terdiri dari polimer thiolated, atau thiomers, bentuk yang ikatan kovalen dengan
kelompok sulfhidril bebas di musin [157]. Para thiomers yang saat ini
mucoadhesives terkuat tersedia untuk pengiriman obat untuk mukosa
permukaan [158]. Sementara mucoadhesives jelas memfasilitasi kontak langsung
dengan permukaan mukosa, sebagian besar tapi tidak semua relatif miskin di
mendapatkan molekul terapi seluruh epitel yang mendasari monolayer sel, yang
kedap untuk sebagian besar senyawa dengan tidak adanya transporter tertentu.
Dengan demikian, mucoadhesives sering dipasangkan dengan enhancer
penyerapan, senyawa yang lembut melemahkan membran sel atau mengendur
persimpangan ketat untuk memungkinkan agen obat menjadi diserap melalui
transelular atau paracellular jalur [159]. Contoh peningkat penyerapan yang
biasa digunakan dalam formulasi terapi disetujui untuk digunakan manusia
termasuk karbohidrat, surfaktan, garam empedu dan turunannya, fosfolipid,
siklodekstrin, dan poli (etilena) glikol [160]. Sel menembus peptida, berasal dari
HIV-1 Tat protein [161] dan Drosophila melanogaster Antennapedia homeodomain
(penetratin) [162], juga telah digunakan untuk meningkatkan ambilan molekul
besar. Meskipun mekanisme yang tepat dimana mereka mengerahkan mereka
Efek ini tidak dipahami dengan jelas, beberapa belakangan in vivo Studi
menunjukkan bahwa molekul-molekul baru dapat meningkatkan pengiriman
siRNA molekul dengan toksisitas minimal [163].
4.2 Perumusan Pembangunan : Carriers Lipid berbasis: Liposom adalah vesikel
yang terdiri dari lipid atau fosfolipid bilayers dengan inti berair. Tergantung pada
manufaktur Proses, partikel-partikel ini terdiri dari satu (uni-pipih) atau beberapa
konsentris (multi-pipih) lipid bilayers dan berbagai ukuran dari 50 sampai 2.000
nm [164]. lipid misel adalah struktur monolayer terdiri dari poli (etilena) glikol
(PEG) -conjugated fosfolipid yang selfassemble spontan pada konsentrasi di atas
kritis konsentrasi misel (CMC) dalam larutan air [165]. di partikel yang relatif kecil

(7-35 nm), hidrofobik yang rantai asil dari lipid membentuk inti misel, sedangkan
kutub kelompok kepala membentuk korona hidrofilik luar.
Nanopartikel lipid padat terdiri dari emulsi lipid sub-mikron berukuran dimana
lipid cairan (minyak) telah digantikan oleh lipid padat terdispersi dalam larutan
surfaktan berair [166]. masing-masing sistem ini menggunakan fosfolipid,
trigliserida, dan kolesterol diderivatisasi atau diekstrak dari sumber-sumber alam
yang biokompatibel dan biodegradable in vivo [167]. dari jumlah tersebut sistem,
liposom telah menjadi yang paling banyak dipelajari, dengan lebih dari 40 tahun
penelitian didokumentasikan menggambarkan mereka kesesuaian sebagai
pembawa untuk hidrofilik dan hidrofobik kecil molekul dan antigen vaksin. Studi
awal mengevaluasi kemampuan formulasi liposom untuk meningkatkan
penyerapan obat mengungkapkan bahwa partikel yang efisien diambil oleh
retikuloendotelial Sistem (RES), sehingga membuat mereka kandidat yang cocok
untuk pengembangan vaksin [168, 169]. Sejak itu, liposomeantigen persiapan
telah terbukti menginduksi T helper (Th) -1- dan Th2-jenis tanggapan
sehubungan dengan komposisi lipid [170, 171]. Liposom telah ditemukan cukup
serbaguna untuk pengembangan vaksin dalam komposisi lipid dapat dengan
mudah disesuaikan dengan jenis respon imun diinginkan, mereka yang
kompatibel dengan sebagian besar adjuvan, dan mereka dapat menampung
antigen dari berbagai ukuran [172, 173]. Mereka juga berfungsi sebagai platform
untuk virosomes yang dapat digunakan untuk imunisasi atau obat penargetan
[174, 175]. Sementara penyerapan melekat liposom dalam RES adalah sangat
dihormati dalam bidang vaksin, itu tidak diterima bagi sebagian besar terapi
molekul kecil, karena mereka dengan cepat dibersihkan dari peredaran sebelum
mereka bisa mengerahkan efek terapeutik mereka. Pengembangan '' siluman ''
liposom, di mana PEG dan polimer biokompatibel lainnya telah ditempatkan pada
permukaan liposom untuk mencegah pengakuan oleh opsonins, telah sangat
mengurangi penyerapan oleh RES dan menghasilkan rumusan liposomal pertama
menjadi disetujui untuk penggunaan klinis di Amerika Serikat dan Eropa [164,
176]. Pendirian polimer ini menjadi persiapan liposom juga telah manfaat
tambahan dalam bahwa mereka memungkinkan untuk lampiran kimia beragam
ligan untuk mengarahkan liposome dari RES ke organ tertentu dan jenis sel [164,
167, 177].
4.3 Perumusan Pembangunan: biokompatibel polimer Persiapan liposom dibatasi
oleh miskin fisik dan stabilitas kimia dalam cairan biologis dan seperti yang
dirumuskan produk pada suhu kamar. Manufaktur skala besar produk ini juga
sulit, dengan batch-ke-batch reproduktifitas menjadi keprihatinan yang signifikan
[178]. untuk mengatasi masalah ini, '' jebakan dan enkapsulasi '' metode untuk
menanamkan molekul kecil, protein, dan peptida dalam nanopartikel yang
terbuat dari polimer biodegradable dikembangkan dan telah banyak digunakan
untuk beberapa dekade di bidang ilmu farmasi [179]. ini persiapan
memungkinkan rilis terus menerus senyawa lebih waktu yang lama untuk
memperbaiki paruh obat dengan profil bioavailabilitas miskin [180, 181]. mereka
juga meminimalkan biaya keseluruhan permukaan senyawa terapeutik dan
mendorong interaksi dengan jaringan target dan organ untuk meningkatkan profil
bioavailabilitas [182]. banyak alami terjadi polimer seperti alginat, kitosan,

gelatin, albumin, pullulan, gliadin, dan dekstran telah fokus banyak penelitian
perintis mengevaluasi sistem carrier ini vaksin dan pengiriman obat [179].
polimer sintetis seperti poli (kaprolakton), poli (metil akrilat), dan poli (asam
laktat-co-glikolat) kurang imunogenik dibandingkan yang tercantum di atas.
Nanopartikel yang terdiri dari polimer ini dalam berbagai kombinasi dan berat
molekul dapat disusun secara sangat direproduksi. Polimer ini, poli (laktat-coglikolat asam) (PLGA) telah dipelajari dan ditandai secara luas dan disetujui oleh
AS FDA dan Badan Obat Eropa (EMA) di berbagai sistem pengiriman obat untuk
digunakan pada manusia [183]. seperti operator liposom, protein, antibodi, dan
lainnya diketahui ligan dapat ditempatkan pada permukaan partikel-partikel ini
mengarahkan mereka ke target fisiologis tertentu. studi terbaru telah dijelaskan
metode di mana molekul menargetkan dapat tercetak langsung dalam matriks
polimer untuk meminimalkan perlu modifikasi kompleks tambahan permukaan
partikel ini sekali senyawa terapeutik tertanam di dalamnya [184, 185].
Kemajuan dalam kimia polimer memiliki juga memfasilitasi pengembangan ''
pintar '' partikel mampu memberikan muatan terapi mereka dalam menanggapi
perubahan suhu, kandungan oksigen, pH, dan cahaya, yang mungkin berguna
dalam pengembangan masa depan terapi untuk mengobati demam berdarah
Ebola [186-188].
5 Kesimpulan
Dari apa yang telah kita dirangkum di sini, jelas bahwa pengembangan vaksin
yang efektif terhadap Ebola memiliki berkembang lebih jauh dari upaya untuk
mengidentifikasi molekul kecil terapi untuk mengobati infeksi. Meskipun
beberapa vaksin platform telah memasuki tahap awal uji klinis, umur panjang
respon kekebalan yang ditimbulkan oleh masing-masing tidak sepenuhnya
ditandai. Ini adalah beberapa kekhawatiran, karena Program imunisasi berulang
untuk Ebola hemorrhagic demam tampak realistis dan mahal, mengingat bahwa
beban penyakit saat ini terbatas pada wilayah tertentu dari dunia. Meskipun
berkorelasi tepat perlindungan Ebola pada manusia terus menjadi isu
perdebatan, sistem Pendekatan vaksinologi menggunakan microarray, massa
proteomik berbasis spektrometri, metabolomik, dan komputasi pemodelan akan
menentukan respon imun diperlukan untuk perlindungan. Data yang diperoleh
dari jenis Studi juga akan memungkinkan untuk perbaikan lebih lanjut saat ini
576 JH Choi, platform MA Croylevaccine dengan formulasi khusus membina jenis
respon imun yang tahan lama. Hal ini juga Penting untuk dicatat bahwa sebagian
besar potensi pasca-paparan perawatan yang dijelaskan di atas telah
menunjukkan keberhasilan pelindung pada hewan diperlakukan segera (30-60
menit) setelah terpapar Ebola. Ini adalah praktis sehubungan dengan wabah
alami, di mana individu yang terinfeksi tidak akan mencari pengobatan untuk
hari. Studi mengevaluasi profil ekspresi gen selama Infeksi Ebola aktif akan
menjadi alat yang berharga dalam mengembangkan perawatan pasca-paparan
bagi mereka yang telah berkembang penyakit gejala; Namun, fasilitas,
pendanaan, dan reagen untuk mendukung mereka sangat terbatas. Meskipun
penemuan terapi molekul kecil untuk tempur Ebola demam berdarah telah
tertinggal bahwa pengembangan vaksin, upaya terakhir untuk mengembangkan
tinggi-throughput sistem penyaringan yang tidak memerlukan penggunaan

fasilitas maksimum penahanan akan menumbuhkan eksponensial meningkat

dalam penemuan dan pengembangan baru terapi untuk Ebola-dimediasi dan
lainnya hemoragik demam dalam 5 tahun ke depan. Kecenderungan ini dapat
kembali memperkuat bunga dan pendanaan untuk mendukung pengujian klinis
yang sangat senyawa terapi yang menjanjikan dan memantapkan rencana untuk
bagaimana vaksin yang diberikan atau terapi akan digunakan setelah itu
berlisensi, serta untuk infrastruktur yang dibutuhkan untuk mengirimkannya ke
daerah di mana paling diperlukan.