AGENDA

1. Examenul direct
2. Hemocultura
3. Antibiograma
4. Alte teste folosite in bolile infectioase bacteriene

 POPULAIA BACTERIAN: multitudinea de indivizi ai

unei specii care locuiesc impreuna

CLONA BACTERIAN: populaia rezultat dintr-o singur

celul prin nmulire vegetativ (colonie bacterian)

TULPINA BACTERIAN: populaia microbian alctuit

din descendenii unei singure izolri n cultur pur

INOCULARE: depunerea unui produs biologic n cultura de

celule, animale de laborator

 NSMNARE: depunerea unui produs biologic pe / n

mediu de cultur
MEDIU DE CULTUR: mediu care asigur nutrienii i

condiiile fizico-chimice necesare creterii i multiplicrii

bacteriene
CULTURA BACTERIAN: totalitatea bacteriilor acumulate

prin multiplicare pe / n mediul de cultur

EXAMENUL DIRECT
= frotiu din diverse produse biologice sau patologice
Coloratie Giemsa
Evidentiaza celularitatea tipul de leucocit
PMN in infectii bacteriene
Limfocite in infectii virale, in TBC, in bruceloza
Eozinofile in boli parazitare

CORP NCURBAT NTR-UN SINGUR PLAN

form de virgul
vibrioni
CORP NCURBAT N MAI MULTE PLANURI
spiral cu spire rigide
spirili
spiral cu spire fine, flexibile
Treponema
Leptospira
Borrelia

Coloratie Gram
Evidentiaza germenii
principala clasificare a acestora depinde de cum se coloreaza

Gram pozitivi

VIOLETI

Gram negativi

ROSII

Diametre egale
Staphylococcus spp.
Streptococcus spp.
Reniformi
Neisseria spp.
Lanceolati
Streptococcus pneumoniae
Ovalari
Enterococcus faecalis

Diplo
Neisseria spp.

Grmezi
Staphylococcus
spp.

Lanturi
Streptococcus
spp.

COCI GRAM POZITIVI

STAFILOCOCI

STREPTOCOCI

COCI GRAM NEGATIVI

meningococ

gonococ

Diplobacili
Klebsiella pneumoniae

Streptobacili
Bacillus anthracis

Aspect litere, chibrituri, palisade

Corynebacterium diphtheriae

BACILI GRAM POZITIVI AEROBI

Antrax
Listeria
Corynebacterium

BACILI GRAM POZITIVI ANAEROBI

CLOSTRIDII
Perfringens
Botulinum
Tetani

BACILI GRAM NEGATIVI

Enterobacterii
Non-fermentativi

VIBRIO

SPIROCHETE
LEPTOSPIRA
TREPONEMA
BORRELIA

Coloratie Zhiel-Neelsen
Evidentiaza bacilii acid-alcoolo rezistenti (BAAR)
Mycobacterium tuberculosis

Coloratie Albastru de Metilen

Evidentiaza germenii care se coloreaza in albastru

CULTURILE
Pe langa examinarea frotiurilor se fac si culturi:
-Pe medii uzuale
-Pe medii speciale

Daca se izoleaza un germene asemanator si pe frotiu, se face

subcultura pe mediu specific

HEMOCULTURA
Locul recoltarii
Nu din vasele femurale
Nu din situsurile de vecinatate unor boli dermatologice
Punctia arteriala nu aduce niciun beneficiu
Volumul de sange recoltat
Depinde de varsta
-La adult 10ml/balon
-La copii 1-10 ml/balon, in functie de varsta copilului
Numar de hemoculturi
Ideal 3 hemoculturi rata de succes 99%

Cand recoltam?
In frison sau in febra

TEHNICA
Nu s-a gasit inca mediul ideal care sa asigure cresterea a cat mai
multor clase de germeni
Important raportul sange:mediu sangele contine substante care
inhiba cresterea bacteriana (fagocite, complement etc)
Dilutia sange:mediu este f importanta pt a putea atenua puterea
inhibitorie a serului. De obicei- 1:5 1:10
Ideal sistemul automat BACTEC/BACTALERT

ANTIBIOGRAMA
Permite clasarea unui germene apartinand unei specii bacteriene intr-una din
categoriile: - sensibil
CMI = concentratia minima inhibitorie
- intermediar
- rezistent
Metoda
difuzimetrica

Metoda semicantitativa
Simpla si ieftina
Nu a fost standardizata pentru anaerobi
Nu poate fi utilizata pentru germeni cu crestere lenta
Se folosesc medii standardizate si discuri impregnate cu AB
Se masoara in mm diametrul de inhibitie, apoi se
verifica rezultatul in tabele standardizate pentru a
interpreta germenele ca S=sensibil
IS= intermediar
R=rezistent

E-TESTUL
Varianta de metoda difuzimetrica ce apreciaza CMI
Foarte eficienta
Utilizata si pentru germeni cu crestere lenta

Pe mediul de geloza unde exista

cultura pura bacteriana, se aplica o
bandeleta cu concentratii
descrescatoare de antibiotic, si se vede
in dreptul carei valori se inregistreaza
inhibarea cresterii bacteriene.
Valoarea obtinuta se aproximeaza cu
CMI-ul germenului

METODA DILUTIILOR

Tehnica laborioasa care permite determinarea CMI=cea mai mica

concentratie de antibiotic pt care nu se evidentiaza crestere bacteriana
Se efectueaza in mediu lichid
Se inoculeaza o cantitate de germeni standardizata in tuburi de bulion
continand concentratii crescatare de antibiotic.
Eprubeta cu cea mai mica concentratie de antibiotic unde nu s-a evidentiat
crestere bacteriana reprezinta eprubeta ce contine AB echivalent de CMI

CMI = 8

Procalcitonina si rolul ei
-Este un peptid precursor al calcitoninei
-La persoana normala are valoare <0,1ng/ml negativa
-La o valoare de peste 2 ng/ml foarte sugestiva pentru sepsisul bacterian
-Variatiile ei sunt foarte rapide si arata evolutia infectiei

Metoda calitativa

Determinare cantitativa a
PCT