GENETICA

=
EREDITATE + VARIABILITATE

EREDITATEA
proprietatea unui individ de a transmite la
urmai caracterele personale precum i cele
ale speciei sale.
Se transmit informaiile pentru realizarea
caracterelor.
Ereditatea = proces informaional care
presupune stocarea, expresia i transmiterea
informaiei necesare pentru realizarea
caracterelor unui individ.
Ereditatea este o FUNCIE.

Substratul molecular al ereditii:

acidul deoxi-ribonucleic (ADN)

3 funcii majore.

deine informaia ereditar .

exprim informaia ereditar .
transmite informaia ereditar .

ADN deine informaia ereditar

macropolimer de nucleotide
codificat - unitate de cod:
CODON (3 nucleotide nvecinate) AMINOACID
GENOM = totalitatea informaiei din ADN.
GENA = unitatea de informaie ereditar

"o gen un caracter "

MUTAIE (modificare a structurii genice)
variant genic normal sau anormal.
Mutaiile = cauze majore de boal sau
predispoziie la boal

U.M.F IAI

STRUCTURA ADN

J.D. WATSON

F. CRICK

1953, Cavendish Lab, Cambridge

n anul 1953, J.D. WATSON

i F. CRICK au propus un
model al structurii ADN:
alctuit din dou catene
polinucleotidice (A, G, T,C),
legate complementar prin
bazele azotate: A-T; G-C,
nfurate ntr-o elice dubl,
rsucit spre dreapta.
-A-T-C-G-C-G-A-T-T-A-C-G-A-T-T-A-G-C-G-C-T-A-A-T-G-C-T-A-

ADN deine informaia ereditar

ADN + proteine cromosomi (= fibre

cromatin)
cromosomi substratul morfologic
ereditii;

de
al

n celulele somatice 46 de cromosomi

(2n= numr diploid);
n celulele sexuale 23 de cromosomi (n=
numr haploid).

cromosom = succesiune caracteristic de

gene

U.M.F IAI

EVOLUIA
TEHNICILOR DE ANALIZ CROMOZOMIAL
(1) TEHNICI DE GENERAIA I
(1956)
- cromozomi uniform
colorai;
- identificare imprecis*
(2) TEHNICI DE GENERAIA II
(1970)
- marcaj n benzi G sau R
cromozomi metafazici
(400 benzi);
- identificare precis

GI

G II

Identificarea
precis a
cromozomilor

U.M.F IAI

TEHNICI DE ANALIZ CROMOZOMIAL

(3) TEHNICI DE
GENERAIA III (1977)
- nalt rezoluie:
cromozomi
pro-matafazici
(550 benzi) sau
profazici
(850 benzi)
- o band = 3-5 Mb

PM

U.M.F IAI

TEHNICI DE ANALIZ CROMOZOMIAL

(v LP)

(4) TEHNICI DE GENERAIA IV

(1991)
- citogenetic molecular
- FISH metafazic
- se pot identifica f. precis
remanierile cromozomiale i
microdeleiile
- FISH interfazic

Trisomie 21

t(1q;2q)

Del 15q

Ce este FISH ?
tehnic de analiz
cromosomic
F
I
S
H

fluorescence
in
situ
hybridization

Tehnic molecular
pentru detecia
anomaliilor cromosomice

Hibridare fluorescent
in situ

Tehnic molecular
pentru localizarea
secvenelor genice

TIPURI DE SONDE FISH

Sond specific
de locus

Sond
centromeric

Sonde
telomerice

Sonde din ADN repetitiv

Sond
pancromosomic

Exemple de sonde

Sond centromeric
(celul interfazic)

Exemple de sonde

Sonde telomerice
(celul metafazic)

Exemple de sonde

Sonde specifice de locus

(preparat prometafazic)

Exemple de sonde

Sond pancromosomic
(preparat prometafazic)

AVANTAJELE TEHNICII FISH

SENSIBILITATE I SPECIFICITATE CRESCUTE
TIMPUL SCURT DE OBINERE A REZULTATELOR DEFINITIVE;
POSIBILITATEA ANALIZEI DE CELULE N DIVIZIUNE SAU
INTERFAZ
REZOLUIE MARE (sonde de pn la 40 kb)

DEZAVANTAJELE TEHNICII FISH

COSTUL RIDICAT AL SONDELOR I REACTIVILOR;

COSTUL RIDICAT AL APARATELOR FOLOSITE
GRADUL NALT DE TEHNICITATE

Sindromul DiGiorge identificarea

microdeletiilor cromosomice
Cromosom 22 anormal

Cromosom 22
normal

U.M.F IAI

STRUCTURA GENEI
GENA = un ansamblu liniar de secvene
nucleotidice de ADN necesar pentru a produce
un produs funcional: un polipeptid sau o
molecul de ARN
Gena este o unitate de transcripie.
Genele :
segmente de ADN,
imprecis delimitate
divizibile = structur discontinu
ocup un locus distinct
19

U.M.F IAI

STRUCTURA UNEI GENE CARE CODIFIC PROTEINE

prezint o regiune central, transcris integral n ARN
mesager precursor, numit "cadrul de lectur" al
informaiei genetice necesar pentru sinteza proteinei;
flancat de dou pri laterale, ne transcrise, cu rolul de a
regla expresia genei

20

U.M.F IAI

ANATOMIA UNEI GENE CARE CODIFIC PROTEINE

1.1.REGIUNEA CENTRAL
transcris integral n ARN
mesager precursor (ORF*);
alternana de secvene
codante = exoni i
necodante = introni
ncepe cu:
- situsul de iniiere al
transcripiei (SIR sau
INR) i
- regiunea netrasnlat
5UTR ce conine i
codonul iniiator ATG

Situs de
iniiere al
transcripiei
codon iniiator

5-CCAGCCATG-3
21
* ORF=

open Reading Frame

U.M.F IAI

REGIUNEA CENTRAL A GENEI

EXONII
secvene transcrise
n pre ARNm i
pstrate n ARNm
matur.
Regiuni codante pt
anumite pri din
protein = domenii.

22

U.M.F IAI

REGIUNEA CENTRAL A GENEI

INTRONII
Secvene necodante
Transcrise iniial n preARNm
i apoi decupate precis i
ndeprtate din ARNm
matur, alctuit numai din
asamblarea exonilor
(matisare)
ncep cu 5 GT i sfresc
cu AG 3 semnale pentru
decuparea precis*.
23

U.M.F IAI

REGIUNEA CENTRAL A GENEI

Regiunea central se
termin cu o secven
3UTR necodant ce
conine:
Unul din codonii stop (TAA;
TAG, TGA)
Situsul de terminare al
transcripiei (AATAAA)
Situsul de poliadenilare
locul de desprindere a
moleculei de ARNm sintetizat
i adugare unui segment
poliadenilic (rol n stabilitatea
i transportul ei din nucleu)

24

U.M.F IAI

ANATOMIA UNEI GENE CARE CODIFIC

PROTEINE

1.2. REGIUNILE
LATERALE
Flancheaz regiunea
central (ORF)
Netranscrise
Rol de reglare a
transcripiei
25

U.M.F IAI

METODE DE CLONARE I ANALIZ A

GENELOR
Dup 1970 s-au descoperit:
enzimele de restricie, veritabile "bisturie" genetice,
cu ajutorul crora a devenit posibil secionarea ADN
i izolarea genelor*.
tehnici de amplificare unui fragment specific de
ADN = clonarea genelor (celular sau acelular
PCR)**.
tehnici de analiz i secveniere
26

U.M.F IAI

TEHNOLOGIA ADN
a inaugurat era ingineriei
moleculare cu multiple i
importante aplicaii practice:
analiza structurii, cartografierii
lu funciei genelor;
elucidarea patogeniei bolilor
genetice i dobndite (infecii,
cancere);
diagnosticul bolilor:
preimplantator, prenatal,
presimptomatic;
biosinteza unor molecule
terapeutice (insulin, hormon de
cretere, eritropoietin etc)
tratamentul bolilor genetice i
terapia genic
27

U.M.F IAI

1. CLONAREA ADN
Clonarea ADN este amplificarea selectiv a unei
gene sau fragment de ADN prin multiple runde de
replicare care vor produce un numr mare de copii a
fragmentului respectiv, ce vor permit analiza structurii i
funciei sale.
2 tipuri majore de clonare:
Celular, in vivo, utilizeaz mecanismul natural de replicare
a unor fragmente de ADN obinute prin diferite metode i
introduse cu ajutorul unor vectori (plasmide, bacteriofagi,
cromozomi artificiali) n celule gazd (bacterii, levuri)
Acelular, in vitro, folosind o reacie de plomerizare n lan
(PCR)
28

U.M.F IAI

1.1. OBINEREA UNOR GENE SAU

FRAGMENTE DE ADN

Trei metode:
(1). Secionarea ADN
genomic, cu ajutorul
enzimelor de restricie;
Enzimele de restricie (Pr.
Nobel, 1978) recunosc i taie
ADN la nivelul unor secvene
nucleotidice specifice
(situsuri de restricie)
producnd fragmente de ADN
cu capete adezive.
29

U.M.F IAI

OBINEREA UNOR GENE SAU FRAGMENTE DE ADN

(2). Obinerea de ADN

complementar unei
molecule de ARNm, cu
ajutorul transcriptazei
inverse
Transcriptaza invers (Pr.
Nobel, 1975) sintetizeaz o
caten de ADNc pe baza unei
molecule de ARNm extras din
celule.
30

U.M.F IAI

OBINEREA UNOR GENE SAU FRAGMENTE DE ADN

(3). Sinteza artificial (chimic)

a unor fragmente de ADN
prin polmerizarea dezoxiribonucleotidelor ntr-o ordine
determinat anterior (de ex.,
pe baza secvenei de
aminoacizi i codului genetic).
Fragmentele de ADN vor fi
utilizate ca sonde sau amorse n
alte tehnici.
31

U.M.F IAI

1.2. CLONAREA ADN N CELULE

Clonarea ADN in vivo utilizeaz
mecanismul natural de replicare
al ADN n celule a unor segmente
de ADN introduse n celule cu
ajutorul unor vectori
formarea ADN recombinant,
prin ataarea in vitro a
fragmentelor de ADN uman la
"un vector sau replicon "
capabil de replicare
independent;
transferarea moleculelor de
ADN recombinant n celule
gazd, n care vectorul
recombinant se replic
independent de cromosomul
celulei gazd;
amplificarea sau producerea de
clone celulare multiple.
izolarea clonelor de ADN
recombinant.

32

U.M.F IAI

1.3. CLONAREA ACELULAR A ADN (metoda PCR)

Folosete tehnica "polymerase
chain reaction" (PCR) (Mullis i
Smith; Premiul Nobel, 1993)
se poate amplifica selectiv o
secven scurt de ADN sau ARN.
Amplificarea se realizeaz pe baza
principiului extensiei unei amorse
("primer").
PCR este o reacie n lan deoarece
catenele de ADN nou sintetizate
vor aciona ca matrie pentru
sinteza ADN n ciclurile urmtoare.
Amplificarea este considerabil (de
miliarde de ori) i rapid (n cteva
ore), fiind integral automatizat.

33

U.M.F IAI

2. METODE DE ANALIZ A ACIZILOR NUCLEICI

n medicina practic analiza direct a genei sau

produselor sale este folosit pentru:
studiul patologiei moleculare;
diagnosticul genotipic prenatal sau presimptomatic al
unor boli, chiar i atunci cnd gena i efectele ei nu sunt
cunoscute sau nu sunt evidente;
recunoaterea unei infecii virale.
34

U.M.F IAI

METODE DE ANALIZ A ACIZILOR NUCLEICI:

PRINCIPII

Pentru a identifica o gen este necesar o

sond genotipic adecvat care s permit:

fie recunoaterea genei (sonde directe)

fie recunoaterea unor markeri genotipici (secvene
necodante) situai n vecintatea genei (sonde
indirecte).

Aceast recunoatere se realizeaz pe principiul

hibridizrii moleculare a acizilor nucleici.
35

U.M.F IAI

METODE DE ANALIZ A ACIZILOR NUCLEICI:

TEHNICI
a).Analiza ADN genomic uman
prin metoda de transfer
Southern
b). Analiza cu sonde oligonucleotidice specifice unei
alele (ASO) (dot blot).
c). Analiza ARNm prin Northern
blot.
d). Analiza proteinelor prin
Western blot.
e) Secvenierea unor gene

36

ADN exprim informaia ereditar

Transcripie + Translaie
Transcripie
- copierea informaiei
genetice corespunztoare unei gene
molecul de ARNm (mesager):
Translaie decodificarea informaiei
genetice dintr-o molecul de ARNm
secven peptidic

A.CONINUTUL GENETICII UMANE

GENETICA TIINA EREDITII I VARIABILITII
ADN transmite informaia ereditar

Replicarea ADN + diviziunea celulei

Replicare - autocopierea informaiei genetice din toate
moleculele de ADN 2 molecule noi de ADN:
Semiconservativ;
Asincron;
Foarte precis;

Diviziune procesul de mprire total i egal a

informaiei genetice dintr-o celul 2 celule fiice
identice (mitoz) sau nu (meioz) cu celula de origine

VARIABILITATEA

fenomenele care produc diferenele

genetice dintre indivizii unei populaii,
precum i ntre populaii diferite .
3 surse de variabilitate:
Recombinrile genetice fenomene normale n
meioz i fecundare.
Mutaiile genetice fenomene anormale n cursul
diviziunilor celulare;
Migraiile populaionale

VARIABILITATEA

fiecare individ are o

structur genetic unic i
specific.

Mutaiile
Nenaturale,
permanente (),
ereditare

Mutaiile:
modificri
n secvena
Consecine:
sau aranjarea
fr efect,
nucleotidelor (secvenelor)
variaii fenotipice
din ADN
normale,
boal.

Clasificarea mutaiilor
Mrimea materialului genetic:
M. genice
(10-6/locus)
M. cromozomiale
(anom. structur)
(10-6/diviz. cel)
M. genomice
(anom. numr)
(10-2/diviz. cel)

Cauz:
M. Spontane (majoritatea)
erori de replicare a
ADN
erori de recombinare
(CO inegal)
erori de distribuie
(nedisjuncie)
M. induse de ag.mutageni

Tipul de celul afectat:

M. germinale ereditare
M. somatice clone an.
ne-ereditare

Consecine fenotipice
M. germinale:
M. patogene
M. neutre
M. benefice

M. somatice clone cancer,

mbtrnire

MUTATIILE GENICE

MUTAIILE GENICE
MG = modificri ale secvenei nucleotidice sau
aranjrii ADN unei gene variante alelice
gena N

m1
m2
m3

Clasificarea mutaiilor genice

dup mecanism:
modificarea secvenei N:
substituii = nlocuirea unei perechi
de baze (pb).
deleii = pierderea unei/unor pb
inserii= introducerea unei/unor pb
modificarea aranjrii N:
recombinri omoloage nealelice
deleie / duplicaie segmente ADN
amplificarea repetiiilor trinucleotidice

A
T

MPERECEHERE
GREIT

Substituii nucleotidice
prin erori de replicare a
ADN

T A

T G

MUTAIE

Mecanismele reparare a leziunilor ADN

Erorile de mperechere au o frecven mare, de
~1:10.000 (10-4).

Rata mutaiilor este meninut la un nivel sczut (10-10)

prin intervenia unor mecanisme de recunoatere i
reparare a leziunilor (controlul calitii ADN).
Aciunea lor este cuplat cu mecanismele de control a
progresiei prin ciclul celular i cu apoptoza.
G1 Go reparare G1 sau apoptoz
NU au o eficien absolut; n final, se produce o mutaie
nou la fiecare replicare / diviziune celular .

RECOMBINAREA GENIC ABERANT

(recombinare omoloag nealelic)
Are loc n profaza meiozei I:
- mperecherea (sinapsa)
greit ntre regiuni
omoloage (secvene de ADN
identice sau cvasiidentice;
ex., R1 ~ R2) dar nealelice;
- CO schimb inegal ntre
crz. omologi deleii,
duplicaii, inversii a unor
segmente mari

Sinaps greit
CO inegal

Duplicaie

2.1. SUBSTITUIA NUCLEOTIDIC

Substituie = nlocuirea unui singur nucleotid (i

deci a unei pb) = mutaie punctiform.
S = cel mai frecvent tip de mutaie ntlnit la om.

a).Substituia nucleotidic:
localizare intragenic
ADN

N
(1)
(2) (3)
TTT TTC CTT ATT

n EXONI:
a). Codon sens
(1) codon sens sinonim
protein N
(silent m.)
ARNm
(2) alt codon sens AA1 AA2
AAA AAG GAA UAA
protein An
(missens m.)
(3) codon nonsens prematur
protein An scurtat (instabil)
Pr
(non-sens m.)
..liz... ...liz... ..glu.. ..STOP..
b). Codon nonsens
codon sens protein An
alungit
alt codon nonsens protein N

Substituia nucleotidic: localizare

intragenic

n INTRONI:
Anulare situsuri de decupare (splice site mutations)
5GT---------AG3
GT

Exon 1

AG

Intron 1

GC

GT

Exon 2

AG

AG

Intron 2

GT

Exon 1 (exon 1 + intron 1 + exon 2)

Exon 3

AG

Intron 2

Exon 3

Mutaie la nivelul secvenei dinucleotidice GT

GT

Exon 1

AT

GT

Intron 1 (intron 1 + exon 2 + intron 2)

Mutaie la nivelul secvenei dinucleotidice AG

AG

Exon 3

Substituia nucleotidic: localizare intragenic

n SECVENELE DE
REGLARE

reg 5 - promotor
modificri cantitative ale
sintezei proteinelor
reg 3 anomalii de
poliadenilare ARNm
instabil

DELEII I INSERII MICI

Del /Ins - care NU sunt multiplu de 3 nucleotide
decalarea (defazarea) cadrului de lectur al genei (m.
frameshift) schimbarea secvenei AA n aval de del/ins

Del /Ins a 3 nucleotide / multiplu de 3 1-n aminoacizi

EXPANSIUNEA INSTABIL
A REPETIIILOR TRINUCLEOTIDICE
Tip nou de mutaii instabile sau dinamice diferit de
mutaiile clasice= permanente i stabile
Se produc n genomul uman n regiuni cu repetiii
trinucleotidice:
dispuse n tandem: CGG CGG CGG
polimorfice (ntr-un numr diferit la persoanele normale); ex
CGG = 6-50 repetiii.
situate n diferite segmente ale genei (promotor; exoni; introni);
ex. CGG n regiune promotor a genei FMR1 (Xq27.3 n situsul
fragil FRAXA)
inerte funcional (CGG=6-50 fenotip normal)
instabilitate intergeneraional (meiotic)

Expansiunea instabil a repetiiilor

trinucleotidice
instabilitatea intergeneraional (meiotic):
Pe msur ce gena trece prin meioz de la o generaie la alta
nr. repetiiilor trinucleotidice crete progresiv dar moderat;
se produce o premutaie (pt CGG = 60-200 repetiii) normal
mecanism: glisare sau derapare replicativ

Cnd se ajunge la un prag critic (ex. pt CGG = 230 repetiii)

blocarea expresiei genei mutaie boal
boli prin mutaii dinamice (expansiunea trinucleotidelor):
Sdr. X fragil (prin expansiunea CGG) retard mintal legat de X
Boala Huntington (prin expansiunea CAG) boal neurologic
degenerativ
Distrofia miotonic (prin expansiunea CTG) afeciune
neuromuscular

EFECTELE FENOTIPICE ALE

MUTAIILOR GENICE PATOGENE
1.
2.

3.

4.

Pierderea (total/parial) a funciei(activitii) genei

- n majoritatea bolilor recesive (bolnavii = homozigoi)
Ctigul de funcie
- creterea nivelului de expresie a proteinei
- ex., activarea permanent a unui receptor n absena ligandului
Achiziia unor proprieti noi a proteinei mutante
- ex., deficit n alfa-1 antitripsin varianta 1 AT Pittsburg nu
mai acioneaz ca o anti- elastaz ci ca un inhibitor al coagulrii.
Expresia inadecvat a genei ca timp i loc
- ex., persistena ereditar a Hb fetale
- oncogenele

MUTAIE GENIC

Mutaie n regiune reglatoare

Mutaie n regiune codant

Protein anormal

Protein normal
Scderea cantitii de protein dac
aceasta este instabil
Cantitate sczut

MECANISM PATOGENIC
Cantitate crescut
Pierdere de funcie (cel mai
frecvent)
Ctig de funcie (rareori)

Proprieti noi (rareori)

Corelaii dintre genotip i fenotip

o gen o boal
n unele boli (ex., sicklemia) mutaia este unic la toi bolnavii
manifestare identic a bolii;
n alte boli bolnavii au mutaii diferite n aceeai gen
graviti dfierite.

o gen mai multe boli

Mutaii diferite n gena RET b. Hirschprung (megacolon
congenital); cancer ereditar tiroid + suprarenale (sdr. MEN)
Mutaii diferite a genei beta-globin sicklemia (AR); betatalasmia (AR); methemoglobinopatia (AD)

mai multe gene o boal

B. Hirschprung mutaii gene RET sau ECE1 sau EDN3

Mutaiile genice
cauz major de boal
sau de
predispoziie la mbolnvire

Genetica - DISCIPLIN CLINIC

Genetica uman genetica medical
relaia ereditate boal - importana mutaiilor
n producerea bolilor sau predispoziiei la boli.
Genetica medical - specialitate distinct:
diagnosticul i ngrijirea pacienilor cu boli genetice;
ngrijirea familiilor bolnavilor prin:

sfat genetic,
diagnostic prenatal,
screening neonatal
diagnostic presimptomatic.

Importan n asistena medical a populaiei

pstrarea strii de sntate a generaiilor
viitoare.

U.M.F IAI

BOLILE GENETICE
Boal = orice alterare major a structurii
i/sau funciei normale a organismului.
Cauze : factori de mediu (f.m.) factori
genetici (f.g.) (mutaii);
Clasificare etiologic:
boli genetice

f.g.

boli multifactoriale

f.g + f.m.

boli ecologice (negenetice)

f.m.
61

Noiuni generale BOLI GENETICE

Bolile genetice probleme de sntate public:

sunt frecvente - inciden global 5-8% la nou-nscui;

sunt numeroase - 10.000 de afeciuni;
sunt grave - cauz major de mortalitate;
nu se vindec spontan;
beneficiaz de msuri de profilaxie (primar sau
secundar) prin:
identificarea persoanelor afectate i a riscului de recuren al
afeciunii - anamnez familial i sfat genetic;
depistarea precoce a persoanelor cu risc - diagnostic prenatal,
screening neonatal i presimptomatic

intereseaz bolnavul, familia acestuia i societatea [14]

Noiuni generale BOLI GENETICE

Tipuri de boli genetice:

boli cromosomice
boli monogenice;
boli mitocondriale - mutaia ADN-ului mitocondrial
60 de afeciuni rare cu transmitere matriliniar;

boli multifactoriale - produse prin interaciunea complex a factorilor

genetici (mutaii la nivelul mai multor gene) cu factorii nefavorabili de
mediu
ereditatea determin predispoziia genetic;
reprezentate de malformaii congenitale izolate i bolile comune ale
adultului;
inciden 5% din populaie;
risc 3-20% dependent de numrul de persoane afectate din familie;

boli prin mutaii somatice

mutaiiile somatice intervin n patogenia cancerului, bolilor autoimune,
senescenei;
au caracter clonal;
nu se transmit la descendeni

U.M.F IAI

Bolile cromozomiale (B.crz.)

B. crz. - produse de anomalii n numrul sau structura
cromozomilor:
vizibile (!) la microscop (inclusiv prin FISH), deci 4 Mb.
Ex. sdr. Down (trisomia 21); sdr. Turner (monosomia X);
sdr. Velo-Cardio-Facial (del 22q11).

NU sunt ereditare (rare excepii).

Frecvena anomaliilor cromozomiale:
gamei (brbai/femei normale i fertile): 10 % (spermatozoizi)
25 % (ovule)
embrioni (std. preimplantator)
25 %
embrioni 5-8 spt (avorturi spontane) 50 60 %
nou-nscui mori
10%
nou-nscui vii
0,7 1 % (>1:140)
64

U.M.F IAI

Anomaliile cromozomiale consecine

fenotipice
48 % = anomalii crz. neechilibrate (~1:300 nn)
trisomii / monosomii complete sau pariale
anomalii de dozaj genic ( segm.crz./gene N)
fenotip anormal: ACM RM (~600 entiti)
52 % = anomalii crz. echilibrate (~1:250 persoane N !!!)
(t; ins; inv;)
fenotip normal;
tulburri de reproducere: sterilitate, avorturi spontane,
nn mori, nn vii plurimalformai.
Anomaliile cromozomiale sunt principalele cauze ale malformaiilor
congenitale multiple, retardului mental, tulburrilor pubertare sau
de reproducere (sterilitate, avorturi spontane, nou-nscui mori).

65

U.M.F IAI

Bolile monogenice (B. MG)

B. MG - produse de mutaia unei alele (A/n) sau
ambelor alele (a/a) ale unei gene nucleare cu efect
major protein anormal.
B. MG - se pot transmite ereditar, n succesiunea
generaiilor : AD, AR, LX boli mendeliene.
- ex., AD (An) : hipercolesterolemia familial, ADPKD;
- ex., AR (aa) : fibroza chistic (mucoviscidoza); sicklemia;
- ex., LX (XaY): hemofilia.

Indexate i descrise m catalogul Mendelian Inheritance of Man

edt. Victor McKusick (ed.12, 1998; versiunea online = OMIM,
actualizat permanent)
www.ncbi.nlm.nih.gov/omim
Ex., Cystic fibrosis OMIM # 219700

National Center for Biotechnology

Information ; National Library of
Medecine ; National Institut of Health

66

Noiuni generale
Dominant autosomale

Dominant legat de crs. X

An

An

AA, An

XAXA, XAXn

nn

XnXn

XAY
XnY

BOLI MONOGENICE
Recesiv autosomale

Recesiv legat de crs. X

Na

Na

aa

XaXa

NN, Na

XNXN ,XNXa

XaY
XNY

Noiuni generale BOLI

GENETICE
Boli moleculare
boli monogenice la care se cunoate complet
mecanismul patogenic: mutaia genic, proteina
anormal, modificrile fenotipice (simptomatologie);
1500 afeciuni;
clasificare:
deficite enzimatice;
boli anomalii ale proteinelor de transport;
boli prin anomalii ale proteinelor structurale;
boli prin anomalii ale proteinelor implicate n comunicarea
intercelular;
boli prin anomalii ale preteinelor implicate n homeostazie
[14];

Boli monogenice - noiuni generale

transmiterea monogenic = cel mai simplu mod de
transmitere recunoatere uoar
numeroase dificulti de diagnostic i evaluare a
riscului de recuren variabilitatea expresiei
fenotipic a mutaiilor (interrelaii genice i
influena factori de mediu):

penetrana incomplet,
expresivitatea variabil,
specificitatea de organ,
pleiotropia,
eterogenitatea genetic
consanguinitatea.

Boli monogenice - noiuni generale

PENETRANA INCOMPLET
Penetrana noiune cantitativ valabil n bolile dominante:
frecvena manifestrii genei mutante (numrul bolnavilor), n raport cu
numrul total de purttori ai genei anormale (AA, An).

n unele boli dominant autosomale unii heterozigoi (An) sunt aparent

sntoi, gena A nefiind manifest, situaie caracteristic penetranei
incomplete posibilitatea transmiterii mutaiei descendeni (An) cu
manifestri complete transmitere dominant neregulat (similar
transmiterii recesive).
Riscurile de recuren dificil de evaluat, deoarece un individ aparent
sntos heterozigot poate transmite mutaia la copii, care, ns, pot
manifesta boala.
La riscul obinut pe baza legilor lui Mendel se nmulete valoarea
penetranei incomplete, rezultnd un risc mai mic dect cel teoretic
pentru o boal dominant.

Boli monogenice - noiuni generale

EXPRESIVITATEA VARIABIL

Expresivitatea variabil noiune cantitativ = manifestarea clinic a

anomaliei genetice cu grade diferite de intensitate, n aceeai familie sau
n familii diferite.
Diverse aspecte:
grade diferite de severitate la membrii aceleiai familii sau n familii diferite polidactilie unilateral, bilateral, la mini, la picioare sau la toate membrele.
forme tipice de boal sau forme incomplete, cu manifestri reduse boli
dominante determinate de gene cu efect pleiotrop (sindrom Marfan):
corelaie cu vrsta de debut a bolii anticipaie (manifestarea bolii la vrste
din ce n ce mai tinere n generaii succesive - de exemplu coreea Huntington).
Predominana sau limitarea la unul dintre sexe apare n unele boli dominant
autosomale.
hemocromatoza are o frecven de zece ori mai mare la brbai dect la femei,
explicaia fiind aportul alimentar mai redus n fier i pierderile menstruale prezente
la femei.
aplazia emailului dentar sau cderea precoce a dinilor sunt ntlnite mai frecvent la
femei.
limitarea la un sex survine atunci cnd organul int este prezent doar la unul dintre
cele dou sexe (de exemplu, sindromul Morris se manifest clinic doar la subiecii
de sex masculin).

Boli monogenice - noiuni generale

SPECIFICITATEA DE ORGAN
noiune calitativ tipul i localizarea
efectelor fenotipice ale genei mutante.
boli dominante care afecteaz mai multe
organe sau esuturi.
boala Rendu-Osler (angiomatoza hemoragic
ereditar) hemoragii n diferite organe prin
ruperea unor hemangioame.

Boli monogenice - noiuni generale

PLEIOTROPIA

efecte fenotipice distincte n esuturi

diferite, datorite aceleiai mutaii.
sindromul Marfan mutaie dominant la
nivelul genei fibrilinei anomalii:
scheletice,
oculare
cardiovasculare.

Boli monogenice - noiuni generale

ETEROGENITATEA GENETIC
apariia de consecine fenotipice identice sau similare
generate de mutaii diferite n aceeai gen ( E alelic) sau
n gene diferite (E de locus).
eterogenitate alelic mucoviscidoz 700 de mutaii
n gena canalului transmembranar pentru ionul de clor
(CFTR).
eterogenitate de locus retinopatia pigmentar
transmitere dominant autosomal, recesiv autosomal sau
recesiv legat de cromosomul X diagnostic clinic
insuficient pentru evaluarea riscului de recuren
analiza arborelui genealogic al familiei.

U.M.F IAI

BG sunt determinate de mutaii germinale

sau somatice
Metode de identificare a mutaiilor :
directe (DIAGNOSTIC GENOTIPIC)

prin analiza ADN,

prin analiza cromozomilor;

indirecte

prin studiul efectelor primare (protein anormal)

sau efectelor secundare
(la nivel celular)

75

U.M.F IAI

Mutaiile genice au 3 categorii de efecte:

(ex., sicklemia)
MUTAIE GENIC
Gena -globin

Efecte teriare
Efect primar
Protein anormal

Efect secundar la nivel

(semne i simptome)

celular: hematii n secer

anemie
Hemoliz
splenomegalie
Ocluzie capilar
microinfarcte

Hb S

76

U.M.F IAI

PRINCIPALELE DIRECII
DE PROFILAXIE A BOLILOR GENETICE
1. PROFILAXIA PRIMAR = evitarea APARIIEI bolilor genetice.
(a). Prevenirea PRODUCERII i/sau TRANSMITERII MUTAIILOR.
(b) Prevenirea APARIIEI BOLII la persoanele sntoase dar cu
PREDISPOZIIE GENETIC la boal.
2. PROFILAXIA SECUNDAR = DEPISTAREA PRECOCE a bolii
(c) Prevenirea NATERII unui copil cu genotip anormal la
cuplurile cu risc genetic crescut.
(d) Prevenirea MANIFESTRILOR bolilor genetice sau ale
COMPLICAIILOR lor la un copil nscut cu o boal genetic.
4 DIRECII DE PROFILAXIE, fiecare cu
mai multe ACIUNI

U.M.F IAI

PROFILAXIA PRIMAR:
Prevenirea PRODUCERII MUTAIILOR.
Prevenirea PRODUCERII MUTAIILOR:
1. Cunoaterea i evitarea agenilor mutageni*.
Majoritatea mutaiilor sunt spontane,
prin erori de replicare / distribuie frecvena lor crete cu vrsta
2.

Reducerea vrstei reproductive:

femei sub 35 - 38 ani risc copii cu s. Down;
brbai sub 45 ani risc copii mutaii genice (ex.
neurofibromatoza 1; acondroplazia).

U.M.F IAI

Prevenirea TRANSMITERII MUTAIILOR.

Prevenirea TRANSMITERII MUTAIILOR la descendeni, prin:

1.

sfat genetic determinarea riscului genetic;

2.

diagnostic pre-simptomatic (naintea reproducerii) la purttorii

sntoi de mutaii dominante care se manifest clinic tardiv (ex.
ADPKD= boala polichistic renal a adultului cu transmitere AD);

3.

depistarea heterozigoilor sntoi (purttori de mutaii

recesive) Na + Na = 25% copii bolnavi;

4.

evitarea cstoriilor consanguine cresc frecvena ntlnirii

heterozigoilor.

U.M.F IAI

PROFILAXIA SECUNDAR:
DEPISTAREA PRECOCE A BOLII

Prevenirea NATERII unui copil cu genotip anormal

la cuplurile cu risc genetic crescut, prin adoptarea unei
opiuni reproductive:
1. contracepia voluntar (temporar/definitiv)
adopie
2. fecundare in vitro (FIV) donatori de gamei,
3. diagnostic preimplantator,
4. screening i diagnostic prenatal.

U.M.F IAI

PROFILAXIA SECUNDAR: DEPISTAREA PRECOCE A BOLII

Prevenirea MANIFESTRILOR sau ale COMPLICAIILOR bolii la

un copil nscut cu o boal genetic, prin:
1.

2.
3.

screening neonatal depistarea precoce a nou-nscuilor

cu genotip anormal dar fr semne clinice de boal n
perioada neonatal (ex., fenilcetonurie);
diagnostic postnatal precoce;
diagnostic pre-simptomatic.

U.M.F IAI

SCREENINGUL BOLILOR GENETICE

1. DEFINIIE, PRINCIPII, CLASIFICARE.

Screeningul genetic:

identificarea PREZUMTIV ntr-o populaie a unei boli sau a

unui genotip anormal ne manifest clinic,

prin aplicarea unor proceduri simple, rapide, ieftine i cu

acuratee ridicat,

n scopul SORTRII persoanelor aparent sntoase care

probabil AU boala de cele care probabil NU au boala.

U.M.F IAI

SCREENINGUL

BOLILOR GENETICE PRINCIPII:

Testele de screening :

NU

PUN DIAGNOSTICUL de boal

ci IDENTIFIC un grup populaional, la care vor trebui fcute
ALTE TESTE DIAGNOSTICE.

OBIECTIVE - printr-o intervenie precoce adecvat:

procesele patologice s fie prevenite (dgn+trtm);
sau persoanele implicate s ia o decizie reproductiv informat.

U.M.F IAI

TIPURI DE SCREENING GENETIC

1. Screeningul populaional:

prenatal
: DTN, sdr. Down .a;
neonatal
: fenilcetonurie; hipotiroidie congenital, .a.
postnatal
: purttori sntoi de mutaii:
- heterozigoi (Na sau X NX a) pentru o boal recesiv frecvent
(talasemie, fibroz chistic; distrofie muscular Duchenne, etc);
- n viitorul apropiat determinarea susceptibilitii individual
la boli comune (medicin predictiv).

U.M.F IAI

SCREENINGUL

BOLILOR GENETICE :
CLASIFICARE

2. Screening familial:
depistarea precoce a bolii la rudelor gr.I II sntoase ale
bolnavului, pentru a preveni boala sau pentru a lua o decizie
reproductiv informat.

4 tipuri:

presimptomatic (ADPKD; hipercolesterolemie familial, boal

Huntington; cancer sn sau colon);
purttorii sntoi de an. cromozomiale echilibrate;
heterozigoii n boli recesive (fibroza chistic; distrofia muscular
Duchenne);
premutaii (n sdr. X fragil i alte boli prin mutaii dinamice) .

U.M.F IAI

STRATEGII DE TERAPIE A BOLILOR GENETICE

1.
2.
3.
4.
5.

Tratament simptomatic;
tratament patogenic;
terapie de substituie;
terapie celular;
terapie genic:
de nlocuire a genei mutante,
de blocare a expresiei genei mutante.

U.M.F IAI

STRATEGII DE TERAPIE A BOLILOR GENETICE

1. Tratamentul simptomatic = metode de tratament care

acioneaz la nivelul fenotipului:

metode educaionale prevenirea unor factori declanatori ai bolii,

metode farmacologice combaterea unor manifestri / complicaii,
intervenii chirurgicale corecia malformaiilor congenitale.

U.M.F IAI

STRATEGII DE TERAPIE A BOLILOR GENETICE

2. Tratamentul patogenic = tratamentul tulburrilor

metabolice sau biochimice asociate bolilor genetice
Metode farmacologice sau nutriionale ce urmresc:
restricia substratului (ex., fenilalanin n PKU),
utilizarea unor ci metabolice alternative pentru ndeprtarea
metaboliilor toxici (ex., allopurinolul n gut),
utilizarea unor inhibitori metabolici (ex., statinele n
hipercolesterolemia familial),
nlocuirea produsului deficitar (ex., tiroxina n hipotiroidie).

U.M.F IAI

STRATEGII DE TERAPIE A BOLILOR GENETICE

3. Metode de tratament care acioneaz la nivelul proteinei

deficitare
Terapia de substituie: ex, factorul VIII n hemofilia A; enzime n
boli lizozomale.

4. Terapia celular:
- transplante de organe,
- implantarea unor celule difereniate sau celule stem.

U.M.F IAI

STRATEGII DE TERAPIE A BOLILOR GENETICE

5. Terapia genic
Terapia genic const n MODIFICAREA GENETIC a celulelor bolnavului
prin transferul ADN (gene, fragmente de gene, oligonucleotide) sau ARN
(oligonucleotide anisens),
cu ajutorul unui vector.

U.M.F IAI

STRATEGII DE TERAPIE A BOLILOR GENETICE

Terapia genic somatic:

Introducerea unei gene n celulele somatice prin:
manipularea celulelor proprii ale pacientului n afara
organismului (terapie ex vivo),
tratarea celulelelor fr ndeprtarea lor din organism
(terapie in vivo).

U.M.F IAI

STRATEGII DE TERAPIE A BOLILOR GENETICE

Terapia genic somatic:

Din punct de vedere al scopului urmrit, se pot deosebi :

terapia genic de NLOCUIRE (numit i terapia genic clasic) transferul n celulele somatice a unei gene normale
corespunztoare genei mutante
cu ajutorul unui vector viral sau non-viral;
terapia genic de BLOCARE a expresiei genei cu ajutorul uno
oligonucleotide anti-sens,
ribozime
ARN interferent