TEETER cn eee Espectroscopia de Absorcao no Ultravioleta e Visivel J,M.G. MARTINHO* +1. ITRODUGAD A adsorgio de radiacao electro magnétia da regio do ulravteta (UV) 1100-400 nm) e visivel (¥s} (400-800 rm) por parte de malécuas, tomas ov ites ests normalmente associada a ran reine sxe electronics, Estas ocorrem quan: incidence 40, por imteracgao aa radiagao electro magnetics com 0 meio absorveate, um ‘electao € promovito dum estado elec lwonico de ba energia para outro de energa mais elevada ‘A quantidade de tue absorvids quando vm foie de rathagio monacto- imética atravessa 0 meio absorvente epende da concentragdo, do coeficien- Fy 1 Eauema do saesses au ocoran gay QUE aresenta a vantagem de vari tne te de absorygo molar da esptcie absor- do un ews de rdagdovecborgndts ede agmente com a concentraglo.percurso vente © do percuso dptica da radiagio "TUB aHecaterumasolga sore gaten econiciente de adcorgao malar. [1], Oestudo da sua vaiaglo com a eon | enteagso permite |) a determinagao atravessar um meio que contém uina Auaniatva de urn grande nimero d= espécie absorvente (11g. 1), devido 23. DESMIOS ALEI DE SEER Substincias quimicas e brolGgicas (a sucessivos processos de absorgo, ele Pevdas p01 I~ disperse Fone titulo de exempta eta-se que mais de Aes nas paredes da célulae a fenéme- el de Beer @ vulgarente usada ‘95% as andes clnicas nas Estados nos de dspersdo [2a para a determinagio de concentragdes ‘Unidos s40 fitas por métodos espectro Considerando apenas os praces- _coeicents de absorgdo malar e mesmo fotométnicos): i) 0 estudo cinetico de s0s de absorgdo 2 inlensidade' do fee percurSos dpticns. A abtengdo de valo- reaogbes lentas em soludo; il) a deter- transmit, | rlacona-se com ado fer res exactos destas grandezas deve ter ‘minagao de eurvas do ttulagdo. Por x ncidema, ly (paralelo © monocromst- em conta 0s desvios a tinearlgade da ‘utr lado, acomplia de espectios de co de comprimento de onda 2), pela lei absorvéncia com a cannentragio. Estes absorgio (epresentag gralica da coe- de Beer {3} ‘esvios ocorrem para concentracces filente de absorgdo molar am undo do superiors a 0.01 M e resutam da varia ‘comprimento de’ onda) sob 3 forma de iy 10-taee (1) go do coefciente de absorgdo molar, alas ov bases do dados ¢ usads para i) rovocada pelas interacgoes entre ieniticagdo ¢ vetlicagao do grau de onde c (mol '*) € @ concentragio da nuvens elecrénicas. A esta concentra juteza de compass: i) calcula da dife- espécie adsorvente,¢ (I mol! cm") o gla, a distacia miéaia entre espacies renga de anergia entre estadoseletrani- coeficiente de absorgio molsr a0 com- _absorventes ¢ préxima de 70.4 0 que Cese omometo dlr da rans. prmato éanda eb (on) opecrso faa spor a initnea de rao O desenvolvimento da espectros- dptice da radiagso mo meio? ‘entre nuvens electronicas. Contudo. copia ve sbsorae UV-Vis tem swe Expermentnene meee sao de deadod exstncade ua tBu consente a0 oogo des itimos anos, ateacoats be dstinoss os cess 0 ext Sendo sthenes rma om mero we reclame inrcges ee ptes Gato Anaea Oemsty,de dos em — T= t0s0¥0 (2) mollcias 1 menores estineas, Em doses 01982] i tues ce ects et ete 6a ee a cues Carinae enor vaaeee seal eee ae eaette Be neva sanen meen | income teu cassen eg aes eens Beara esac Rep rerteiyy pyrene recs Biase ome senda eal GS iocekee enauraseen 2. LELDE BEER adsorvinca 0s desvios & li de Beer provocados or esta dependtacia no sio petceptveis Aintensidade de um tebe de radia -R=~logygT = e()cb (3) para concentragbes inesores 2 0.01%. (20 electromagnstica ¢ atenuada ao senda geralmente ignorados. Outcos‘desvios provocados por limitagdes ins: tados $ muito inferior a diterenga de 0 carbone forma uma igagao Inumentais ser80 abordados na parte aera entve os estados lectonicas (2 dupla (uma de tipo « ® outa de tp0 «) ceferente 4 nstrumentacao. iferenga de eneigia entre niveis rota- coma axigénie. A haagso c € assequre conais da order de 10 om''<>0.13 da por dois electdes (um do domo de kimot"), a banda de absorgdo cortes: _cartono e autre do sfomo de oxigen) ‘4.ESPECTHOS ELECTRONICOS Dondente a uma tansigéo electronica € que vo acupar uma orbital molecuiar composta de um “quase continuo” de figante (de mais taxa eneria do que as Os espectros de absorgéo no UV- transigdes. Em solugdo, as diferengas _cortespondentes orbitals atémicas) Vis de gases monoatémicos a baixa _energia entre estados rotovibracionals _resultante da coalescéncia directa das Dressao So espectros de riscas, sao ainda menores do que as observa- orbs atémicas Mbridas so, gags fauarto os especttos moleculares Sio das no estado gas0so, devido as interac- x # assegurad por dois eectrbes nua espertios de bandas. Tal esuta do facto ges solutosoWente, orbital molecular igante,resultante da ‘oe as molecuias possuirem, para além ‘Aintensidade de absoreio. medida coaleseéncia lateral das orotats atom 8 onerga electronica, energiaviracio- pelo maior Qu menor valor de €. aepen- aS 2p, dos somos de cabono & oxge nal @ fotacional. enguanto os alomos de da secgdo recta de captura de um nia. OS dows pares de elects em orb ‘apenas passuem energia electroica. O foto pea espécie absorvene, ito & da tls sp, do atoma de oxigénio no par hagrams eergétice de uma molécula no probabilidade da transigdo electronica cipam na ligagHo, pelo que ocupam orb estado gasoso€ bastante mais complexo que & ditada pelo valor do momento tals moleculares nao ligantes. n, com 4a que o dear atom (fig. 2) pois eaga dipolar de transigdo. Transigdes com energia semeltante a das coresponden: estado electronica molecular tem associ- valores de «>10 mot'om” siofranea- tes orbitas atémicss O diagrama de aos vires estados vibracionais rota- mente permitidas. enquanto valores de © ives de energi que inclu as rttas, ‘sionals << 103 Imol-'em* inaicam transigees _antlgantes a” e x” (de maior enecgia proibidas [4] do que as cortespondentes orbilas até ‘micas, pelo que ndo partcipam na liga fo), mostra que a tansigéo de menor E 4.1 Transigtes electrénicas lenergia corresponde 2 passagem dum o grupo carbonito electro da orbital m para a orbital x” (wansiggo nn") Uma vez que a absorpio de ratia- fo UV-Vis por uma espécieabsorvente Conduz a promogdo de um electrdo de uma orbital para outa de maror energi 25 transig6es electibnicas podem ser ‘walitativamente previstas @ partir do iagrama de orbitais maleculares. 0 ‘spectro de absorgdo de molécuas com lexas pode. em geral. ser interpretado com base nos especttos dos seus gru pos croméforas. desde que estes este ‘ane canon fam separados pelo menos por uma liga ‘80 simples. A tRlo de exemplo, apre- qua 2 Osram sane se ances mies sentase na fig. 3 0 dlagrama de orbitas | ea att ‘moleculares de um crombtoro caracte Fistico,o grupo carbonlo (-6=0) (45). | Oa too ete acre mottoeatanacna-peoue fom Oamoummacmumereeon: fae apes en eu a (4) onde t 8a constarte de Panck, ca velo cidade da luz no vacuo @ h 0 compri- mento de ana da raiagdo incidents, As transigdes molecules ocorrem. a tam- perature ambiente, do primetro nivel ‘nbracional do estado alectdnico funds- ‘mental para véris niveis rotowibracio. nais dos diferentes estados excitados. Como a aiferenca de energia entre 0s ives rotoviacionais dos estados exci Orbital moteculs Orbiteis preamehidas isolados] oo EJ : aset corer 90 ulavileta @ ise, desde [FeSON(,0}* ¢acanopentzacuoteto ‘ot a om sumtin eee Aue exsta deslocatzagao dos electrs (I), que vesuta ta wantertcia de ‘onsctn ape ite como sucede, por exempo, nos com ele doo tcianat para oo fr ~ ostos aromatics. Exstem compostos co. qe € teduido ao fer0s0.A esp cmt isn seuetie'| tent] orginicas. nomeadamente coranes. be elecroncamenteexcada rea ran “ se am om bandas de asorgao x -» x* damente para o estado fundamental ay rin toda 2 regio do shel af 29 regeneand ocomplexo nla Jee ctf mete | intrevermeino proeimo. ks tansiges 1 -» x* distinguem-se das tansigdes ‘> x* por responderem de modo dife- _§, INSTRUMENTAGKO ‘ete &polandage do solvente, Em geal solventes polares estabilizam mais 2 §.1 Especrofelémetres convencionsis. cottital x* do que 2 orbital x. observan |do--se um desvio da band x -» x* pare Os equipamentos de medida de ‘monores energias (deslocamento para 0 absorvéneia (ou transmitincia) desi ‘vetmelna) com o aumento da polanidade _gnam-se por espectrofotémetros ou pot (fo solvents, Transigdes nr a* $6 cor fotbmettas, conforme tennam ov nao Fem 09 ultravioleta para um admero possiblidade oe fazer o varimento de muito reduzido de compostos (ina = comprimentos de onda (obtengao do 227mm, € ~ 800 Imo" emt parao _espectro de absorgao). Um fotometro (CH),N: Ayay= 215M, f =600 — (espectrototémetr) de absorgao& basi- limoi-‘cmr* para 0 CHyN) [1]. Estas camente consttuido por uma fonte ds transigGes respondem a polardade do sol-_radiagdo continua, um selector de com vente do mesmo modo que as transigdes _primentos de onda (ros ou monaco 11 x*, peo queso cic de cstingur _-mador), 0 porta-amostras. um detector estas por estudos sovatocrémicas. de radiagd (fotomutiicado, bate ce Na tabela 1 resumem-se algumas _fotodiados) e um medidor de coment. A rasowics «CaS Hagen Benes ume —_propriedades de grupos cromolécos fig. § mostra as conliguragdes bésicas tes om motonas opancas ebak- caracersticns (grupo carbonilo,carbo- para fotGmelras de feixe simples e de oa ilo, nitroso. ete) que permitem inter- ete dup. - ______pretaroespectro de absargao de muitas Nos equipamentos de feixe substances. duplo mede-se dvectamente a absor Esta transigdo acorre no uitravole vencia (transmitincia), enquanto nos '3 i.» 270im), Sendo 0 valor exacto da 4.3. Absorgdo de complexos metdlicos de feie simples. reaizam-se medidas sua energia denendente do salvente sequenciais da intensidae do feixe teto soliatocrémico). Solventes pola- Na regido UV-Vis, e mesma no incidente (usando uma célula com 0 Fes estabilizam mais as orbitais nao inravermelho préximo, absorvem tam- _solvente) edo fee ransmitigo (usa. ligantesn do que as oritais antiigantes pdm muttos complexas metdiens {7).0s do uma célula com a amostral. Os 1", provocando 0 deslocamento das espectros de absaredo dos complex0s de a bandas para mares energs (Gesioca- _tantanideese actinieos sdo constiuidos figuas tnomaruamne moomannnn ‘mento para 0 azul) Este tipo de ransi- por bandas mutoesretascaratersticas Sys se ao lo € também responsivel pela absor- dos elementos centrals. sendo pouco {40 no UY de anies morginios (nitre- _afetadas plo tipo de igendo e solvent Yo, nitta, et.), com relevancia em Tal resulta do facto de as transigdes elec Quimica Araitiea Alimentar (6), Outras tronicas envalyerem elects em sub lransi-gbes, asociadas 4 promogio de camadas iemas, que se encontam pro tom electrdo da orbital ligante para a tegdos pelos electdes das camadas alec orbital antiigante x* (ransigd0 x + rongasexterioces. Por sev ado, os com '").0U 8 promogdo de um electrdo da plexos dos metas de transgdo apresen bial n para orital o*(ransigéo m+ tam espectros de bandas mals laras, que 0), correm neste tipo de cromoforas @ $40 fortemente afectadas pelo tipo de também apresentar bandas de transterén 1 de carga, resutantes da transerénea 4.2. Compostos com transigdes ‘e um elecrao do grupo doador para o ont en a" no UV-Vis, ‘grupo acetate. Um exemple tipice & 2 ‘anda de absorgto do complexo de Fe(t) As transigdes x + x* podem com 80 Uiacianato (SCR’).equipamentos de feixe duplo utilizam dois feos de tz, um que passa numa cla com a amostrae outro numa clu la com a solvent, sendo os dois sinais ttatados electronicamente, de modo a ootersirectamente a absorvencia (trans mitineia) (0s lotémetras S30 muita mais bars tos do que 0s espectrtotémetros, mas rnéo permtem a abtengdo de espectos ‘Contudo, lag sina-udo , em geal, boa, deco a0 uso de fitos de banda a a, sendo mesmo possivel usa fotes de ragiagio de faca mtensidade (mpadas de filamento de tungsténio), bem como detectors e orcuitos de medida baraos. De entre 05 espectrototometros, merece reale a "velha” Spectronic 20 uj langamentoremonta 20s aos $0, € ‘que ainda hoje. numa versao metnoada, tem grande populatdade no ensino @ na indstra. Este espectrofctémetro de fixe simples wsa uma timpada de famento de tungsténo(340-25000m) e wn fotomult- pleador sesivel na gama de 340-626nm, © gual pode ser substtudo por um outro, sensivel no vermet at aos 800m. (Os espctofotimetros mas dispen siosos so de fee dupo,vtlzam duas fomtes de radar (émpadas de tungst- io @ de devi}, monocromador dupe, detectres e excites elderrices soft cadas, com exoeertes razbes siralruido. Estes espectofolometos tm resales a ordem de O:1Am e permit 0 trazado de espectros de absorgao na gama de ‘80am a 98Ciam (0 uso de detetores de subite de chumbo permite estender 2 {gama de compriments de onda a ita vermelto} &componante de uz paresta¢ cetalmente inferior 0.001% caintensda «i do fete ncdete em toda a gama de comprimentos de ond Em meados dos anos 70, fram introd 20s 05 espectrofoté: metros com detectores aseadas em bateris de fotociogos. — Neste tipo de es- pectrofotometios 2 rad gto dispersa$ anaisa 4a por uma nbatoria de fotodibdas sensiveis a ‘amas estes de ene 193, estando-se, assim, 0 ‘atriento mecinico 40 espacto, Estes especto fotémetres tornaram-se ‘muito populares. por permitirem a aquisigao figura 6 Ean ours oo spate vee tama roxootn de um especiro (200nm a 800m) em menos de 0.15. A sua principal imitagao reside na resolugdo especial qu, tpica mente @ da ordem de 2m 5.2. Expectrootémetros fleacisteos AA determinaeto de espectros de amostras sas e solugées turas® por ‘métodas convencionais¢ dict. devido 2 Interterdncia da luz dispesa e retectia. Na espectrascopia fotoacistice sao detects sinas fotoacustcns gerados ela espécie asorvente, quando dlssina a energia de excitaggo sob 2 forma de calor. A dssipag de calor provém dos processos de desactivagdo nao raciat "7, que envolve a conwersdo da ener ‘ia electronica da especie inicialmente ‘xcitada em enegiatranslacionale roto vibracional das moléculas vizinnas. A ‘expansio do meio, devia a0 aumento a temperatura, gera um sina fotoacs ico, desde que 0 fexe de exctagao soja ‘mogulado em frequencia da rego das ‘ondas acistcas. Na figura 7 representese o diapre ‘ma de blocos de um espectratotometre fotoacisticn, composto por um fixe de Iz modutada, uma celulefoteacistica onde so geradas as ondas sonoras e 0 etector (um simples microfone) que produz um sinaleéctico, que & depois mplicadoe registado. ‘A intensidade do sinal fotoacist co, em condigbas experimentas adegua as, depende nearmente da densidade Optica, a = ¢c, obtonde-sa diectamente (0 espectro de absoredo a0 fazer 0 var mento dos corprimentos de anda de exctagio. 0 sinal fotoacistico 6 gerado unicamente pelas espécies que absor vem a radiagdo de excitagdo, pelo que no é alectado pea uz dispersa @ reflect, Faw 7. Ema Sas vn 5.3, Limitagbesinstrumentais A radiagdo eletromagnétice usa dia nos espectrometios e espectrotats metros & polcromitica, pois provém da selecogda por fitros ou monocromador a radiagdo emitida por uma timpada de espectro continuo. Estes seleccio: nam uma banda de radiagio mais ou menos estreita em energas, detande ainda passar luz parasita com ener ia muito diferente da radiagao seecer nada, 5.4. Importiacia da monoeromaticidade © uso de raciagdo policromatica provoca devi le de Ber, poss coe clonte de absorgio mola, e.depende do comprimenta de onda da radiagao, Na figura 8 apesentam se wes situages para luz compost de 2 comprimentos de onda, vericando-se um aumento do desi pra ‘grandes aiterengas entre os valores 6o cooiciente de absoreao molar Figuts 8. He do uso 8 eougeo aserana 1a lesmelitigs bor dos eomgrimentae de vagray De mogo a aiminuir a intuéncia da Dolcromaticidade na determinagao de sbsorvénois, estas devem, sempre que ossival, ser efectuadas na regiao da bards de absoreao onde as variagaes com o comprimento ae onda sejam ‘ninivas. Na tigura 9 observa-se que, no caso de uma banda de absorgio larga 38 apsorvécias no maumo de absorcao (reoio A) seguem ale de Beer, enquan tore zona lateral da banda (regio B) os esuis sao sgnicalive. Sou a Bier aaaetentn a2 Este problema ¢ imporante quan 0 se usam ftometrs (espectrafotome- os) baratos. ave nao permite a selec (0 de uma banda estreita de comp menos de onda. Por outro laa, a ‘monocromaticidade do teixe de lu ‘eterminada peas fendas de entrada € ‘aida do marocromador, limita também a resolugao do espectro de absorcao. A ‘gua 10 Wusrea pera ve vesolugdo de um espectro com o aumento da largara se bands do monocromador ane Para resolver uma tana de absor (80 6 necessério que a argura de banda do manocromador sea inferior a 10% da largura da banda de absorgio, Esta con Aigdo pode ser impraticave, poss 2 di rigdo da largurs das fendas do mano ‘cromadorreduz a intensidade do texe. 0 ‘Que provoca a diminuigao aa 13280 sinalruido. 5.3.2 Lozparasita Na presenga de luz paras (uz de comprimento de onda diferente do selec ‘ionado). a absorvncia, Ap, @ dada por ntl log Tei, ch onde |, @ 2 imensidade de tz parasit Como 3 intensidate do fexe transmtido 6 inferior & do fexe incidente (icy) @ diminui com a concenragao, a campo nente de luz parasta provoca desvios ‘agativos 8 le de Beer tig. 1), Figura 1h fee sa ust on aga 2 abovkesce astnetsto 0 oeservolimenta da espectras copia de absorgio UV-Vis est em gra: ‘de medida, assovado as suas aplicagoes analticas. Substincias muito variagas, {que vio desde os melas 20s térmacos, si0 doseadas por absorcdo UV-Vis. Veriticou-se nas ltimos anos um aumento do interesse em processos de doseamento de substincias oeganicas, em especial as ae inieresse Diligco. A ar do desenvolvimento de novos mt: dos de doseamento, também 0 tata mento de dados foi sigifcatvamente relorado. Merecem especial eleréncie 105 mélodos de ajuste. em que sio dete: minadas simultaneamente diferentes substincas, usando absorvinoas a vt: 0s comprimantos de onda. Neste tipo de andlise€. em gera,ncorporada a infor ragao das dervadas de vires ordens ‘do especro de ansorgdo, que permitem uma melhor selectividade (2). Estes métodos, que também possipilitam umentar a sensblidade das determina (08S. 56 se tornaram praticos com 0 vento dos espectrototimetras de bate ‘a d2 diodos, & com 2 vulgarizagio & expansdo dos metas clcuo runuocrara 1.0.8 Stoog DW West. J Holler Fun amenity of hosltcs Chmsty 8 8 Sunde Clee Pobang New vam 8 2.1.6 vgs How Ar Che 986 5-6 Stony An! om 26195) 28 8) 61 I Better Sos 4 Cem kee 67980 757 4a) RC Denney, R Stay, vile an ‘awe Secret ea Ve Sore es are 1868.9) Wt, On They ‘opiates of trance Specnscopy Wiley New Yor. 162 6) C18 Ra. Ute ant tle Secescpy: Crome Apes. ed 8, Boros Lana 1875 5 HH te 9 L Buontge M Denn, J Che Fae 4419657) 388 GML. 5 Gana, Meco names ar Anse ce Stsctes, 2 ecg. Fnsaese ‘aust Genes Uses, “990 1 A Cohan, A Warsen PL Gas. Sie rman: Cen, 2 4. Hey Rew Vo. 1967 6 a) Reserva, A Cham 4 97) S08 BNA mein A! 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