13.5.

10 Evaluasi Parameter Kinetic dan Yield dalam Kultur

Chemostat
Dalam chemostat steady state dengan feed steril dan sel mati yang
diabaikan, laju pertumbuhan spesifik sama dengan tingkat pengenceran D.
Hubungan ini berguna untuk menentukan kinetik dan hasil parameter dalam kultur
sel. Laju pertumbuhan dapat menggunakan pemodelan Monod kinetika, untuk
kultur chemostat, Persamaan. (11.60) menjadi:

Dimana max adalah laju pertumbuhan spesifik maksimum, Ks adalah substrat

konstan dan s adalah konsentrasi substrat steady state dalam reaktor. Persamaan.
Micheles-Menten (13.89) adalah persamaan analog matematis untuk kinetika
enzim. Jika diukur pada tingkat pengenceran berbagai teknik yang dijelaskan
dalam Bagian 11.4 untuk menentukan Vmax dan Km dapat diterapkan untuk evaluasi
max / Ks. Gabungan persamaan (13.89) yang mengikuti persamaan linear yang
dapat digunakan untuk Lineweaver-Burk, Eadie-Hofstee dan plot Langmuir,
menjadi:

Pers. 13.90 dan 13.91

Pers. 13.92
Sebagai contoh, menurut Persamaan. (13.90), max dan Ks dapat ditentukan
dari kemiringan dan intercept dari sebidang 1 / D vs1 /s . Komentar yang dibuat di
Bagian 11.4.2-11.4.4 sekitar distorsi kesalahan eksperimental berlaku juga untuk
Pers (13.90) - (13,92). Operasi Chemostat ini juga baik untuk menentukan benar
hasil dan koefisien pemeliharaan kultur sel. Sebuah Ekspresi berkaitan parameter
ini dengan laju pertumbuhan spesifik diberikan oleh Persamaan (11.81) Dalam
kultur chemostat dengan = D, Persamaan (11.81) menjadi:

Pers. 13.93
Dimana Y'xs adalah yield biomassa dari substrat, YXS adalah hasil
sebenarnya biomassa dari substrat dan ms adalah koefisien pemeliharaan. Oleh
karena itu, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 13.34, sebidang 1/Yxs versus
1 / D memberikan garis lurus dengan kemiringan ms dan intersep l / Yxs. Dalam
chemostat dengan pakan steril, yang diamati biomassa hasil dari substrat Yxs
diperoleh sebagai berikut:

Pers (13.94)
Dimana x dan s adalah kondisi mapan sel dan konsentrasi substrat, masingmasing, dan si adalah konsentrasi substrat inlet.

13.6 Sterilisasi
Fermentasi komersial biasanya memerlukan ribuan liter medium cair dan
jutaan liter udara. untuk proses dioperasikan dengan kultur axenic, bahan baku
harus disediakan bebas dari organisme mencemari. Dari semua tersedia metode
untuk sterilisasi termasuk perawatan kimia, paparan ultraviolet, gamma dan
radiasi sinar-X, sonikasi, filtrasi dan pemanasan, hanya dua yang terakhir
digunakan dalam operasi skala besar. Aspek desain dan konstruksi fermentor
untuk operasi aseptik dianggap dalam Bagian 13.3.1 dan 13.3.2. Di sini, kami
mempertimbangkan desain sterilisasi sistem untuk cairan dan gas.
13.6.1 Batch Panas Sterilisasi Cairan

Gambar 13.34 Grafis Penentuan Koefisien pemeliharaan ms dan YXS yield biomass
sebenarnya menggunakan data dari kultur chemostat.
Medium cair paling sering disterilkan dalam batch dalam Vessel dimana ia
akan digunakan. Cairan dipanaskan pada temperatur sterilisasi dengan membalut
uap ke dalam gulungan atau jaket Vessel, secara alternatif, uap ditiupkan langsung
ke medium, atau Vessel dipanaskan secara elektrik. Jika uap langsung injeksi
digunakan, penghalau harus dibuat untuk pengenceran media oleh kondensat yang
biasanya menambah 10-20% ke volume cairan; kualitas steam juga harus cukup
tinggi untuk menghindari kontaminasi media dengan ion logam atau organik.

Sebuah tipe profil temperatur-waktu untuk batch sterilisasi ditunjukkan pada

Gambar 13.35 (a). Tergantung pada tingkat perpindahan panas dari uap atau
elemen listrik, meningkatkan suhu media di fermentor besar bisa mendapatkan
period waktu yang signifikan. Setelah Holding atau sterilisasi suhu tercapai, suhu
tetap konstan untuk periode waktu thd. Cooling water di kumparan atau jaket dari
fermentor kemudian digunakan untuk mengurangi nilai suhu medium yang
diminta. Untuk pengoperasian sistem sterilisasi batch, kita harus dapat
memperkirakan waktu holding yang dibutuhkan untuk mencapai tingkat
kerusakan sel yang diinginkan. Serta menghancurkan kontaminan organisme,
sterilisasi panas juga menghancurkan nutrisi dalam media. Untuk meminimalkan
kerugian ini, waktu holding pada suhu tertinggi sterilisasi harus disimpan
sesingkat mungkin.
Kematian sel terjadi setiap saat selama sterilisasi batch, termasuk
pemanasan dan pendinginan-up-down periode. Waktu holding thd dapat
diminimalkan dengan memperhatikan kerusakan sel akun selama periode ini. Mari
kita menunjukkan jumlah kontaminan hadir dalam media baku N0. Seperti yang
ditunjukkan pada Gambar 13.35 (b).
Gambar 13.35 (a) Variasi suhu dengan waktu untuk Batch sterilisasi
medium cair. (b) Penurunan jumlah sel yang layak selama sterilisasi batch.

Periode pemanasan jumlah ini berkurang menjadi N 1. Pada akhir

penyimpanan period, jumlah sel adalah N2, jumlah final setelah pendinginan
adalah Nf. Idealnya, Nf adalah nol, pada akhir sterilisasi siklus kita ingin tidak
memiliki adanya kontaminan. Namun, karena sterilitas mutlak akan membutuhkan
waktu sterilisasi yang lama, secara teori mungkin untuk dicapai. Biasanya, tingkat
kontaminasi target dinyatakan sebagai sebagian kecil dari sel, yang terkait dengan
kemungkinan kontaminasi. Sebagai contoh, kita bisa bertujuan untuk nilai Nf dari
10-3; ini berarti kita menerima risiko bahwa satu batch pada tahun 1000 tidak akan
menjadi steril pada akhir proses. Jika N0 dan Nf diketahui, kita dapat menentukan
waktu penyimpanan diperlukan untuk mengurangi jumlah sel dari N 1 sampai N2
dengan mempertimbangkan kinetika kematian sel.
Tingkat sterilisasi panas diatur oleh persamaan untuk kematian termal
diuraikan dalam Bagian 11.14. Dari Persamaan. (11.86) untuk orde pertama
kematian kinetika, dalam wadah batch dimana kematian sel adalah satu-satunya
proses yang mempengaruhi jumlah sel yang layak:

Dimana Nis adalah jumlah sel yang layak, t adalah waktu dan kd adalah spesifik
kematian konstan. Persamaan. (13.95) berlaku untuk setiap tahap batch Sterilisasi
siklus: pemanasan, holding dan pendinginan. Namun, karena kd merupakan fungsi
kuat dari temperatur, integrasi langsung dari Pers. (13.95) hanya berlaku ketika
suhu konstan, yaitu selama periode Holding . Hasilnya adalah:

Atau

Dimana thd adalah waktu holding, N1 adalah jumlah sel layak pada awal
holding, dan N2 adalah jumlah sel yang layak di akhir Holding, kd dievaluasi
sebagai fungsi temperature menggunakan persamaan Arrhenius:
k d = Ae-Ed/RT

(11.46)

Dimana A adalah konstanta Arrhenius atau faktor frekuensi, E d adalah

energy aktivasi untuk kematian sel termal, R adalah gas ideal konstan dan T
adalah suhu mutlak dan Tis adalah suhu absolut. Untuk menggunakan Persamaan.
(13.97) kita harus tahu N1 dan N2. Angka angka ditentukan dengan
mempertimbangkan tingkat kematian sel selama periode pemanasan dan
pendinginan ketika suhu tidak konstan. Persamaan Menggabungkan (13,95) dan
(11,46) memberikan:

Integrasi Persamaan. (13,98) memberikan untuk periode pemanasan:

Gambar 13.36 Generalised temperatur-waktu profil untuk pemanasan dan

pendinginan tahap dari siklus sterilisasi batch. (Dari FH Deindoerfer dan AE
Humphrey, 1959, metode Analytical untuk menghitung waktu sterilisasi panas.
Appl. Microbiol. 7, 256-264,)

Persamaan 13.99 untuk period pemanasan dan 13.100 untuk period

pendinginan
Dimana t1 adalah waktu di akhir pemanasan, t 2 adalah waktu di akhir holding dan
tf adalah waktu di akhir pendinginan. Kita tidak bias melengkapi integrasi
persamaan ini sampai kita tahu bagaimana suhu bervariasi dengan waktu selama
pemanasan dan pendinginan. Sebagaimana diuraikan dalam Bab 6, unsteady state
profil temperature selama pemanasan dan pendinginan dapat ditentukan dari panas
sifat transfer dari sistem. Bentuk umum dari persamaan ini ditunjukkan pada
Gambar 13.36 dan Tabel 13.3. Menerapkan ekspresi yang tepat untuk Tin
Persamaan

(13.9.9) dari Tabel 13.3 memungkinkan kita untuk mengevaluasi

jumlah sel N1 di awal dari penyimpanan period. Demikian pula, menggantikan T

dalam Pers. (13.100) untuk pendinginan memberikan N2 pada akhir penyimpanan
period. Penggunaan nilai-nilai yang dihasilkan untuk N1 dan N2 pada Persamaan.
(13.97) menyempurnakan perhitungan waktu holding-time.
Biasanya, kematian sel bawah sekitar 100C minimal, namun, ketika
pemanasan dan pendinginan yang relatif lambat, suhu tetap dekat dengan
maksimum untuk cukup periode waktu dan, seperti yang ditunjukkan pada
Gambar 13.35 (b), jumlah sel dapat dikurangi secara signifikan di luar
penyimpanan

period. Biasanya, periode holding adalah dari urutan menit

sedangkan pemanasan dan pendinginan dari volume cairan yang besar

berlangsung berjam-jam. Contoh desain perhitungan untuk sterilisasi batch yang
diberikan oleh Aiba, Humphrey dan Millis [40] dan Richards [41]. Prosedur
desain yang diuraikan dalam bagian ini berlaku untuk Batch sterilisasi media saat

suhu seragam seluruh Vessel. Namun, jika cairan mengandung kontaminan

partikel dalam bentuk flocs atau pelet, temperature gradien dapat berkembang.
Karena perpindahan panas dalam padat partikel lebih lambat dari dalam cairan,
suhu di pusat zat padat akan lebih rendah dibandingkan dalam cairan untuk
beberapa proporsi dari waktu sterilisasi. Sebagai hasilnya, sel yang mati di dalam
partikel ini tidak seefektif dalam cairan. Selama waktu holding diperlukan untuk
merawat fase padat substrat dan media mengandung partikel.
Ketika sterilisasi panas ditingkatkan untuk volume yang lebih besar, lebih
lama waktu perawatanyang diperlukan untuk mencapai sterilisasi yang sama Hasil
pada suhu penyimpanan yang sama. Untuk mendium mentah yang diberikan,
jumlah awal organisme N0 secara langsung sebanding dengan volume cairan,
karena itu, untuk mendapatkanTabel 13.3 Persamaan Umum untuk suhu sebagai fungsi waktu selama pemanasan
dan pendinginan periode batch sterilisasi

Gambar 13,37 peralatan sterilisasi Kontinyu: (a) uap injeksi kontinyu

dengan flash pendinginan, (b) perpindahan panas menggunakan penukar
panas.

-Np akhir yang sama lebih banyak sel harus dihancurkan. Skala-up juga
mempengaruhi suhu-waktu profil untuk pemanasan dan pendinginan. Transfer
panas tergantung pada karakteristik peralatan yang digunakan, pemanasan dan
pendinginan dari volume yang lebih besar biasanya mengambil lebih banyak
waktu. Peningkatan suhu yang selama pemanasan dan pendinginan yang merusak
vitamin, protein, dan gula dalam solusi nutrisi dan mengurangi kualitas medium
[42]. Karena itu perlu untuk menahan volume besar medium untuk waktu yang
cukup lama, masalah ini diperparah dengan skala-up.
13.6.2 Sterilisasi Panas Kontinyu pada Cairan

Sterilisasi kontinyu, khususnya suhu tinggi, waktu proses pendek, secara

signifikan dapat mengurangi kerusakan untuk bahan medium sementara mencapai
terjadi kehancuran sel tingkat tinggi. Keuntungan lainnya termasuk uap economy
yang membaik dan skala-up yang lebih dapat diandalkan. Jumlah steam
diperlukan untuk sterilisasi Kontinyu adalah 20-25% yang digunakan dalam
proses batch, waktu yang dibutuhkan juga berkurang secara signifikan karena

pemanasan dan pendinginan yang hampir seketika. Properti khas konfigurasi

untuk sterilisasi kontinyu ditunjukkan pada Gambar 13.37. Pada Gambar 13.37
(a), media baku memasuki sistem adalah pertama pra-dipanaskan oleh panas,
media steril dalam penukar panas, ini pada economy-steam dibutuhkan kecocokan
untuk pemanasan dan mendinginkan media steril. Uap ini kemudian disuntikkan
langsung ke dalam media ketika mengalir melalui pipa, yang suhu cair naik
hampir seketika ke diinginkan suhu sterilisasi. Waktu paparan suhu ini tergantung
pada panjang pipa di bagian holding dari steriliser. Setelah sterilisasi, media
didinginkan langsung oleh lewat melalui katup ekspansi ke dalam ruang vakum;
pendinginan lebih lanjut terjadi dalam penukar panas di mana sisa Panas
digunakan untuk pra-api Medium masuk. Gambar 13.37 (b) menunjukkan skema
sterilisasi alternatif yang didasarkan pada pertukaran panas antara uap dan
medium. Media mentah dipanaskan terlebih dahulu dengan, media steril panas di
dalam Heat Exchanger kemudian dibawa ke sterilisasi Suhu oleh pertukaran
panas lanjut dengan uap. Suhu sterilisasi dipertahankan di bagian holding sebelum
dikurangi dengan suhu fermentasi oleh panas pertukaran dengan media yang
masuk. Sistem pertukaran panas yang lebih mahal untuk dibuat dibandingkan
perangkat injeksi; pengotoran permukaan internal juga mengurangi efisiensi
perpindahan panas antara pembersihan. Di sisi lain, kerugian terkait dengan
injeksi uap adalah dilusion medium oleh kondensat, timbul busa dari injeksi uap
langsung juga dapat menyebabkan masalah dengan pengoperasian pendingin
flash. Sebagaimana ditunjukkan dalam Gambar 13.38, tingkat pemanasan dan
pendinginan dalam sterilisasi kontinyu jauh lebih cepat daripada di batch; sesuai,
dalam desain berkelanjutan, kontribusi sterilisers kematian sel luar dari
penyimpanan period umumnya diabaikan.
Sebuah kinerja yang mempengaruhi variabel penting kontinyu sterilisers
adalah sifat dari aliran fluida dalam sistem. Idealnya, semua cairan memasuki
peralatan pada suatu saat tertentu harus menghabiskan waktu yang sama di
steriliser dan keluar dari sistem di saat yang sama, kecuali jika ini terjadi kita tidak

dapat sepenuhnya mengontrol waktu dihabiskan di steriliser oleh semua elemen

fluida. Tidak ada pencampuran harusGambar 13.39 distribusi Velocity untuk aliran dalam pipa. (a) Dalam aliran
plug, kecepatan fluida adalah sama di seluruh diameter pipa seperti yang
ditunjukkan oleh panah dengan panjang yang sama. (b) Dalam fullydeveloped
turbulen aliran, distribusi kecepatan pendekatan yang aliran pasang, namun ada
pengurangan beberapa kecepatan aliran pada dinding. (c) Dalam aliran laminar,
ada kontinyu peningkatan kecepatan dari dinding ke pusat tabung.

Gambar 13.40 Korelasi untuk menentukan axialdispersion yang koefisien aliran

pipa turbulen. Re adalah Reynolds nomor, D adalah diameter pipa, u adalah
kecepatan fluida rata-rata linier, adalah densitas fluida, adalah viskositas
fluida, dan adalah axial dispersion koefisien. Data diukur dengan
menggunakan cairan tunggal dalam: () pipa lurus, () pipa dengan tikungan, ()
artificially roughened pipa, dan () Curved pipa (Dari O. Levenspiel 1958

Pencampuran Longitudinal pcairan mengalir dalam pipa melingkar. Ind Eng.

Chem. 50, 343-346.)

-terjadi pada tabung, jika cairan dekat pintu masuk pipa campuran dengan cairan
depan itu, ada risiko bahwa kontaminan akan ditransfer ke outlet steriliser
tersebut. Jenis aliran di pipa di mana ada tidak pencampuran atau variasi dalam
cairan kecepatan disebut plugflow seperti yang sudah dijelaskan dalam Bagian
13.5.8 untuk plug flow reaktor. Plug flow adalah pola aliran yang ideal, dalam
kenyataannya, elemen fluida dalam pipa memiliki berbagai kecepatan yang
berbeda. Seperti diilustrasikan dalam Gambar 13.39, arus cenderung lebih cepat
melalui pusat tabung dari dekat dinding. Namun, plug flow didekat pipa di
bilangan Reynolds bergolak (lihat Bagian 7.2.2) di atas sekitar 2x10 4, operasi pada
Reynolds number tinggi meminimalkan pencampuran cairan dan variasi
kecepatan. Perilaku pnyimpangan dari plug flow ditandai oleh derajat dispersi
aksial dalam sistem, yaitu sejauh mana pencampuran terjadi sepanjang atau sumbu
pipa. Axial disperse adalah faktor penting yang mempengaruhi desain sterilisers
kontinyu. Kepentingan relatif dari dispersi aksial dan aliran massal di transfer
materi melalui pipa diwakili oleh variabel berdimensi menelepon nomor Peclet.

Pe mana adalah jumlah Peclet, u adalah cairan linear rata-rata kecepatan, L adalah
panjang pipa dan adalah aksial-dispersi koefisien. Untuk aliran plug yang
sempurna, adalah nol dan Pe adalah infinitel) besar, dalam prakteknya, jumlah
Peclet antara 3 dan 600 yang khas. Nilai untuk sistem tertentu tergantung pada
Reynolds number dan geometri pipa; korelasi dari engineering literature untuk
mengevaluasi ditunjukkan pada Gambar 13.40. Setelah nomor Peclet telah
dihitung dari Persamaan. (13,101), tingkat kerusakan sel dalam steriliser dapat
terkait dengan kematian spesifik konstan kd menggunakan Gambar 13.41. di
Gambar 13.41, N1 adalah jumlah sel layak memasuki sistem, N2 adalah jumlah sel
yang hilang, Pe adalah Peclet yang Jumlah seperti yang didefinisikan oleh
Persamaan. (13,101), dan Da adalah nomor tidak berdimensi lainnya disebut
Damkiihler Number:

Dimana kd adalah kematian spesifik konstan, L adalah panjang holding pipa dan u
adalah kecepatan rata-rata cairan linear. Makin kecil nilainya N2 / Nl, semakin
besar tingkat kerusakan sel. Gambar 13.41 menunjukkan bahwa, pada setiap suhu
sterilisasi yang diberikan menentukan nilai kd dan Da, kinerja steriliser yang
menurun secara signifikan karena jumlah Peclet menurun. Desain perhitungan
untuk steriliser kontinu diilustrasikan dalam Contoh 13.8.
Contoh 13,8 Menjaga Suhu dalam Steriliser Kontinyu
Media pada tingkat aliran 2 m

h-1 yang akan disterilkan dengan

pertukaran panas dengan uap dalam steriliser berkelanjutan. Cairan berisi bakteri
spora pada konsentrasi 5 x 1012 m-3, energi aktivasi dan Arrhenius konstan untuk

penghancuran termal ini kontaminan adalah 283 kJ gmol -1 dan 5,7 x 10 39 h-1,
masing-masing. Sebuah risiko kontaminasi satu organisme hidup setiap 60 hari
hari dianggap diterima. Pipa steriliser memiliki diameter dalam 0,1 m, panjang
bagian penyimpanan 24 m. Kepadatan medium adalah 1000 kg m -3 dan viskositas
adalah 3,6 kg m-1 h - 1. Apa suhu sterilisasi diperlukan?
Solusi:
Tingkat yang diinginkan dari kerusakan sel dievaluasi menggunakan dasar 60
hari. Mengabaikan setiap kematian sel dalam pemanasan dan pendinginan bagian,
jumlah sel memasuki bagian holding lebih dari 60 d adalah:

N1 = 2m3 h - 1 (5 x 1012 m-3).

. (60 hari) = 1,44 x 1016.

N2, jumlah diterima dari sel meninggalkan selama periode ini adalah 1. Oleh
karena itu:

= -6.9x10 -17
Kecepatan linear u di dalam steriliser adalah sama dengan laju aliran

volumetrik dibagi dengan luas penampang pipa:

Untuk menghitung Pe pertama-tama kita harus menentukan Dz

menggunakan Gambar 13.40:

Untuk Re = 7,07 x 103 kita dapat menentukan Dz dari Gambar 13.40 baik
menggunakan kurva eksperimental atau teoritis. Mari kita pilih kurva
eksperimental karena hal ini memberikan nilai yang lebih besar dari Dz dan nilai
Pe yang lebih kecil; desain steriliser dengan demikian akan lebih konservatif.
Oleh karena itu, D z / uD = 0,65;
D z = 0,65 (254,6 m h -1) (0,1 m) = 16,6 m2 h -1.
Dari Persamaan. (13,101):

Menggunakan Gambar 13.41, kita dapat menentukan nilai kd untuk

tingkat yang diinginkan dari kerusakan sel. Da esuai dengan N2/N1 = 6,9 x 10-17
dan Pe=368 adalah sekitar 42. Oleh karena itu:

Suhu sterilisasi dapat dievaluasi setelah menata ulang persamaan. (11.46).

Membagi kedua sisi dengan A dan mengambil logaritma natural, sehingga:

Ed = 283 kJgmo1-1 = 283 x 103Jgmol-l; A = 5,7 x 1039 jam-1, dari Tabel 2.5, R gas
ideal konstan 8,3144 J K-1 gmol-1. Oleh karena itu:

Menggunakan konversi antara K dan C diberikan dalam Persamaan.

(2.24), T = 125 C

Pemanasan dan pendinginan di sterilisers Kontinyu begitu cepat yang

dalam perhitungan desain mereka dianggap seketika. Sementara mengurangi
kerusakan nutrisi, fitur ini proses dapat menyebabkan masalah jika ada padatan
hadir dalam media. Selama pemanasan, suhu pada inti padat partikel tetap lebih
rendah daripada di media. Karena waktu kontak yang sangat singkat di sterilisers
kontinyu dibandingkan dengan sistem batch, ada risiko besar bahwa partikel tidak
akan disterilkan. Oleh karena itu penting bahwa media baku diklarifikasi sebanyak
mungkin sebelum memasuki sterilizer kontinyu.
13.6.3 Sterilisasi Penyaringan pada Cairan
Kadang-kadang, media fermentasi atau bahan-bahan yang dipilih adalah
disterilkan dengan filtrasi dari pada panas. Sebagai contoh, media yang
mengandung komponen panas labil seperti enzim dan serum mudah dihancurkan
oleh panas dan harus disterilkan oleh cara lain. Biasanya, membran digunakan
untuk sterilisasi penyaring dari cairan yang terbuat dari ester selulosa atau polimer
lain dan memiliki pori-pori antara 0,2 dan 0,45 m di diameter. Membrane sendiri
harus disterilkan sebelum digunakan, biasanya dengan uap. Sebagai media
dilewatkan melalui saringan, bakteri dan partikel lain dengan dimensi lebih besar
dari ukuran pori yang disaring keluar dan dikumpulak pada permukaan membran.
Ukuran pori kecil yang digunakan dalam filtrasi cair berarti bahwa membrane
dapat segera diblokir kecuali media adalah pra-filtered untuk menghapus partikel
besar. Untuk mencapai tingkat aliran tinggi, besar luas permukaan yang

diperlukan. Filtrasi cair umumnya tidak efektif atau dapat diandalkan sebagai
sterilisasi panas. Virus dan Mycoplasma dapat lewat melalui filter membran,
perawatan juga harus diambil untuk mencegah lubang atau robekan di membran.
Biasanya, filter-disterilkan media diinkubasi selama periode waktu sebelum
digunakan untuk menguji kestrerilannya.
13.6.4 Sterilisasi Udara
Jumlah sel mikroba di udara adalah antara 103-104 m

-3

[40]. Filtrasi adalah

metode yang paling umum untuk mensterilkan udara dalam skala besar bioproces,
sterilisasi panas gas secara ekonomis tidak praktis. Depth Filters yang terdiri dari
compacted beds atau bantalan dari bahan berserat seperti glass wool telah
digunakan secara luas dalam industri fermentasi. Jarak antara serat dalam filter
mendalam biasanya 2-10 m, sekitar 10 kali lebih besar dari dimensi bakteri dan
spora yang akan dikeluarkan. Air-borne partikel menembus bed untuk berbagai
kedalaman sebelum perjalanan mereka melalui filter yang sesuai; kedalaman
media filter yang diperlukan untuk menghasilkan udara yang cukup.
Kualitas tergantung pada laju alir operasi dan tingkat kontaminasi yang
masuk. Sel dikumpulkan dalam kedalaman filter oleh kombinasi impaksi,
intersepsi, efek elektrostatik, dan, untuk partikel lebih kecil dari sekitar 1,0 m,
difusi ke serat. Kedalaman filter tidak bekerja dengan baik jika ada fluktuasi besar
dalam laju aliran atau jika udara basah, kondensasi cairan dalam filter
meningkatkan penurunan tekanan, menyebabkan penyaluran dari aliran gas, dan
menyediakan jalur bagi organisme untuk tumbuh melalui bed. Semakin, filter
kedalaman Medium diganti untuk industry aplikasi oleh filter cartridge membran.
Filter ini menggunakan uap-sterilisable polimer membran yang bertindak sebagai
Cace filter menjebak kontaminan seperti pada saringan. Filter membrane cartridge
biasanya mengandung filter, lipit hidrofobik dengan kecil dan seragam pori-pori
berukuran 0,45 m atau kurang dengan diameter. Sifat hidrofobik permukaan
meminimalkan masalah dengan pembasahan saringan Medium kan konfigurasi
lipit memungkinkan daerah filtrasi tinggi untuk dikemas ke dalam volume kartrid
kecil. Pra-filter yang dibangun ke dalam cartridge atau up-stream mengurangi

fouling dari membran dengan menghapus partikel besar, minyak, tetesan air dan
busa dari gas yang masuk. Filter juga digunakan untuk mensterilkan limbah gas
meninggalkan fermentor. Dalam aplikasi ini, tujuannya adalah untuk mencegah
pelepasan ke atmosfer dari setiap mikroorganisme entrained dalam aerosol dalam
headspace reaktor. Konsentrasi sel dalam fermentor off-gas beberapa kali lebih
besar daripada di udara. Containment sangat penting ketika organisme digunakan
dalam fermentasi berpotensi membahayakan personil pabrik atau lingkungan
hidup; perusahaan yang beroperasi dengan fermentasi patogen atau rekombinan
strain yang diperlukan oleh peraturan berwenang untuk mencegah melarikan diri
dari sel.
13.7 Ringkasan dari Bab 13
Bab 13 berisi berbagai informasi kualitatif dan kuantitatif tentang desain
dan operasi bioreaktor. Setelah mempelajari bab ini, Anda harus:
(i)

Dapat menilai secara umum efek reaksi rekayasa biaya produksi total

(ii)

Bioprocessing;
Familiar dengan berbagai konfigurasi bioreaktor selain standar tangki
pengaduk, termasuk bubble-column, airlift, packed-bead, fluidised-bed

(iii)

and trickle-bed designsu;

Memahami konstruksi aspek dari konstruksi bioreactor, terutama yang

(iv)

ditujukan untuk memelihara kondisi aseptic;

Familiar dengan pengukuran yang digunakan dalam pemantauan
fermentasi dan masalah yang terkait dengan kurangnya on-line metode

(v)
(vi)
(vii)

untuk parameter fermentasi yang penting;

Familiar dengan pendekatan dan modern untuk fermentasi kontrol;
Dapat memprediksi waktu reaksi untuk enzim dan sel reaksi;
Dapat memprediksi kinerja fed-batch reactor yang dioperasikan di

(viii)

bawah kondisi quasi-steady state ;

Dapat memprediksi dan membandingkan kinerja reactor continuous

(ix)

stir-tank dan reactor continous plug-flow;

Tahu bagaimana menggunakan data chemostat kondisi steady-state
untuk menentukan kinetik dan yield parameter untuk kultur sel;

(x)

Tahu bagaimana sistem batch dan kontinyu sistem dirancang untuk

panas sterilisasi medium cair dan metode untuk Filter sterilisasi
fermentasi gas.