Izolacija rutina iz bazginog cvijeta

Drogu Sambuci flos ine osueni cvjetovi bazge Sambucus nigra L. iz porodice
Caprifoliaceae. Droga sadri oko 2 % flavonoida meu kojima je najvie rutina. Takoer
sadri fenolne kiseline, triterpenske i sterolne spojeve, eterino ulje, sluz, trjeslovine i
polisaharide.

Rutin je glikozid koji se sastoji od aglikona kvercetina i disaharida rutinoze (ramnoza +

glukoza) vezane preko hidroksilne skupine na C-3. Ekstrakcija se provodi metanolom uz
zagrijavanje. Rutin se iz ekstrakta odjeljuje metodom preparative tankoslojne kromatografije
koristei silikagel kao adsorbens (nepokretna faza) i smjesu otapala etilacetat-mravlja
kiselina-voda u volumnim omjerima 9:1:1 (pokretna faza). Identitet izoliranog rutina potvrdi
se UV-Vis spektrofotometrijom.

RUTIN (kvercetin-3-ramnozid)

Postupak
Priprema ekstrakta. 3 g bazgina cvijeta ekstrahira se 15 minuta s 40 mL metanola na vodenoj
kupelji uz povratno hladilo i nakon toga filtrira. Filtrat se upari pomou rotacijskog vakuumuparivaa, a suhi ostatak otopi se u 3 mL metanola i zatim filtrira.
Odjeljivanje rutina preprativnom tankoslojnom kromatografijom. Ekstrakt se 4-5 puta
nanosi u jednu liniju na gotovu plou silikagela (20 x 20 cm) pomou naprave za linijsko
nanoenje. Uz liniju ekstrakta na startu nanese se u toku 10 L poredbene otopine (0,05 %tna metanolna otopina rutina). Ploa se kratko sui na zraku i potom stavlja u zasienu
komoru za razvijanje s 50 mL pokretne faze. Nakon to otapalo prijee put od 15-ak cm,
ploa se izvadi iz komore i osui u digestoru.
Promatranjem kromatograma pod UV lampom pri 365 nm, laboratorijskom iglom obiljei se
tamna zona koja prema Rf-vrijednosti (oko 0,3) odgovara poredbenoj supstanciji. Obiljeeni
sloj adsorbensa patulom se sastrue na papir, prenese u Erlenmayerovu tikvicu i eluira s 5
mL metanola, uz mukanje i blago zagrijavanje u trajanju od 3 minute. Adsorbens se odvoji
filtriranjem.
Nepokretna faza: Kieselgel 60 F254
Pokterna faza: etilacetat-mravlja kiselina-voda 8:1:1 (V/V/V)
Detekcija: 365 nm

Identifikacija rutina. Potvrda identiteta rutina provodi se UV-Vis spektrofotometrijom.

3 mL filtrata razrijedi se metanolom u odmjernoj tikvici od 10,0 mL. Otopini rutina snimi se
spektar u rasponu od 200 nm do 500 nm. Dobiveni UV-Vis spektar usporedi se s poredbenim
spektrom rutina.