ADN

Grupul de majuscule ADN este binecunoscutul acronim pentru acidul

dezoxiribonucleic.
Noiunea de acid dezoxiribonucleic desemneaz una dintre cele mai complexe
molecule organice, substan care se gsete n fiecare celul a unei fiine vii i care este
esenial pentru identitatea oricrui organism, de la Euglena viridis, micua fiin
unicelular aflat la grania dintre plante i animale, la Homo sapiens sapiens, omul
contemporan. Din punct de vedere chimic, ADN-ul este un acid nucleic. Este o
polinucleotid, adic un compus n structura cruia se repet un set limitat de
macromolecule numite nucleotide; n acest sens, el este definit ca fiind un copolimer
statistic (copolimer = polimer n compoziia cruia se repet mai multe "motive"
(monomeri); n cazul particular al ADN-ului, monomerii sunt nucleotidele; statistic =
monomerii se repet de manier aleatorie n lanul polimer, fr ca ei s fie dispui
alternativ sau dup oricare alt aranjament repetitiv, cum se ntmpl, de exemplu, n
etilen-acetatul de vinil (EVA) sau n acronitril-butadien-stiren (ABS)). Nucleotida ca
unitate de baz a ADN-ului este o macromolecul organic (o N-glicozid) compus (prin
policondensare) dintr-un carbohidrat, adic o glucid (mai exact o monozaharid), de
tipul pentoz (n form furanozic), o baz azotat heterociclic ("inel" sau "ciclu"
aromatic n 6 atomi) de tipul pirimidinei sau o variant a acesteia condensat cu inelul
imidazolic numit purin i un rest de acid fosforic (esterificat cu unul din hidroxilii
pentozei), adic un " grup fosfat ". Pentozele care intr n structura ADN-ului sunt 2dezoxi-D-riboz (pentru acidul nucleic tip ADN) sau D-riboz (pentru acidul nucleic tip
ARN). Dou dintre bazele heterociclice azotate ale ADN-ului sunt purinice (adenina i
guanina), iar alte dou sunt pirimidinice (citozina i timina). n ARN, uracilul nlocuiete
timina. n cadrul elicei caracteristice care sugereaz o scar spiralat, resturile
pirimidinice ale monomerului sunt orientate spre interior, formnd cu resturile purinice
ale celuilalt monomer "treapta" scrii, n timp ce pentozele formeaz braele acesteia, de
la o dubl unitate la alta (adic de la un cuplu purinic-pirimidinic) legtura fiind realizat

www.referat.ro

de gruprile fosfat (prin atomii lor de oxigen). Legturile dintre resturile de purine i
pirimidine sunt de natur molecular i nu chimic, ele fiind legturi de hidrogen.

Introducere
O form simplificat de a vedea lucrurile este:
ADN-ul este "reeta" necesar sintezei de proteine, molecule organice eseniale
organismelor vii;
O secven ADN conine gene, zone care controleaz genele i zone care ori nu au nici o
funcie, ori nc nu le cunoatem rostul;
Acidul dezoxiribonucleic are o structur de dublu helix - forma nu influeneaz funcia, n
esen o "scar" dreapt ar fi identic din punct de vedere funcional, ns dublul helix
economisete spaiu. "Scara" este alctuit din dou lanuri organice elastice ce sunt
conectate prin "trepte".
"Treptele" sunt de fapt doar de patru feluri, unind perechi de baze azotate, ce pot fi patru
tipuri diferite de molecule organice, adenin (notat A), citozin (C), guanin (G) i
timin (T); (FIG. 1)

Replicarea ADN-ului (FIG.1)

Cele patru baze (A, C, T i G) nu se pot combina dect ntr-un anumit mod, adenina doar
cu timina (A + T sau T + A), i respectiv citozina doar cu guanina (G + C sau C + G); cu
alte cuvinte, o baz de tip A -- n orice parte a lanului s-ar afla -- nu se poate combina
dect cu o baz de tip T; n mod similar, G nu se poate combina dect cu C;
Ordinea conteaz: A + T nu este acelai lucru cu T + A; vezi codul genetic care e preluat
de la ARN.
Avnd n vedere c nu exist dect cele patru combinaii posibile, se poate alege o "parte"
convenional a dublei elici pentru notaie;
Secvena de baze este forma canonic a informaiei, nu este nevoie de nimic mai mult
pentru a descrie n mod complet o secven ADN;
Duplicarea unei secvene se produce prin "desfacerea" secvenei "de-a lungul" ei
("treptele" se dezintegreaz) prin reacii chimice relativ triviale; astfel rezult dou
jumti de secven, ambele fiind scufundate ntr-o "sup" de baze. Cum fiecare baz nu
se poate combina dect cu perechea ei predeterminat, rezultatul final const din dou
secvene ADN identice, n afar de cazul c apar mutaii;
Trei perechi de baze azotate formeaz n mod normal un codon. Acest codon codific un
aminoacid. Mai muli codoni la un loc codific o protein.
Mutaiile nu sunt altceva dect imperfeciuni n acest proces chimic: o baz este n mod
accidental ignorat ("srit"), introdus sau copiat imperfect, sau lanul este tiat prea
devreme sau i se adaug baze la capete; toate mutaiile posibile nu sunt dect combinaii
formate din aceste "operaii" de baz.
Mutaiile genetice sunt practic alterarea unei pri din informaia aflat n molecula ADN.
Este suficient ca, de exemplu, s se tearg doar o pereche de baze azotate, pentru ca
toat funcia genei pe care eventual se afl s fie abolit. Dac este tears o pereche de
baze azotate, codonul din care fcea parte aceasta va codifica alt aminoacid, care va

codifica alt protein, fapt ce, n cele din urm (aa se ntmpl probabil cel mai adesea,
ns nu n mod obligatoriu), poate s-i altereze acesteia din urm funcia biologic.
Mutaiile pot avea trei feluri de efecte: negative, pozitive sau neutre (nu influeneaz nici
n bine nici n ru).
Aceste mutaii sunt provocate de nite factori mutageni (radiaiile cosmice, substane
chimice etc.)
Mutaiile genetice pot fi i induse de ctre oamenii de specialitate. De exemplu, la plante
pentru ca geneticienii s le poat muta genetic, ei obin protoplati (celule care nu au
perete celular, ci doar membran). Obinerea protoplatilor se poate face pe dou ci, prin
disecia peretelui celular, sau cu ajutorul unor substane chimice.
ADN-ul se gsete practic n orice celul (de la organisme unicelulare cum ar fi
bacteriile, protozoarele pn la organismele pluricelulare (fungi, animale sau vegetale),
precum i, n structura intern a unor virusuri. Structura ADN-ului este unic nu numai
pentru o specie anume ci i pentru orice individ al oricrei specii animale sau vegetale.
Mrimea ADN-ului celular, ca i aceea a patrimoniului genetic, nu d dect destul de
aproximativ informaii despre complexitatea organismului, astfel nct omul are un
patrimoniu genetic mai redus cantitativ dect al altor specii, mai puin "complexe".

Istoricul descoperirii ADN-ului

Structura ADN-ului a fost decodificat la nceputul anilor 1950. Americanul James D.
Watson i britanicul Francis Crick sunt cotai ca fiind cei care au descifrat primii structura
de dubl spiral a ADN-ului (DNA, deoxyribonucleic acid, n limba englez). Conform
propriilor afirmaii, saltul calitativ al descifrrii "secretului vieii," s-ar fi produs n ziua
de 23 februarie 1953.
Aflai n competiie contra cronometru cu alte echipe, mult mai celebre i mult mai bine
dotate, aa cum a fost cea a chimistului american Linus Pauling, laureat al premiului

Nobel pentru chimie n 1954, aparentul "cuplu ciudat" a nvins tocmai datorit
orizontului lor intelectual foarte larg n care operau, a solidei i variatei lor pregtiri
interdisciplinare precum i a minilor lor flexibile i deschise oricrei ipoteze
confirmabile de ctre realitate.
Este demn de remarcat faptul c impecabilele imagini luate unor molecule "iluminate"
prin difracia razelor X de ctre Rosalind Franklin, specialist n fotografii de difracie
create cu raze X, a fcut pe Watson i Crick s ntrevad structura de dubl elice a ADNului. Colegul acesteia, Maurice Wilkins, a contribuit de asemenea decisiv la luarea unor
fotografii edificatoare.
Din pcate Franklin a murit de cancer n 1958, n vrst de numai 37 de ani, foarte
probabil fiind inta a prea multe iradieri. Cum premiul Nobel nu se d post-mortem, n
1962, doar Watson, Crick i Wilkins au fost rspltii cu aceasta prestigioas cunun de
lauri tiinific mult-dorit de ctre toi savanii din lume.

ARN

ARN - acidul ribonucleic. Precum ADN, este un polinucleotid. Un nucleotid este

format dintr-o baz azotat (A,T,G,U,C - n cazul ARN U inlocuieste T), riboz, i un
fosfat.

www.referat.ro

Este alctuit dintr-un singur lan polinucleotidic i are n general o structur cu o singur
caten.
Este un complex macromolecular, structural i funcional, similar n anumite privine
ADN-ului. ARN-ul rezult din polimerizarea unor ribonucleotide, care determin
formarea unor lanuri lungi, monocatenare (structura primar).

Pe anumite poriuni monocatena de ARN se poate rsuci n jurul ei, determinand aparitia
unei structuri duble ntre secvenele complementare de baze (structura secundar).
Polimerizarea implic patru tipuri de ribonucleotide legate mpreun prin legturi
fosfodiesterice n poziiile 3-5. Componentul pentozic al ARN-ului este riboza, iar
bazele azotate sunt: adenina, guanina, citozina i uracilul. Exist doua clase de ARN i
anume: ARN genetic, care controleaz ereditatea la unii virusi, i ARN non-genetic care
este implicat n sinteza substanelor proteice.
Exist trei tipuri de acid ribonucleic celular prezente n toate celulele i care, avnd
structuri i funcii diferite, joac un rol esenial n biosinteza proteinelor. Aceste tipuri
sunt: acidul ribonucleic mesager - ARNm, acidul ribonucleic solubil sau de transfer ARNs sau ARNt i acidul ribonucleic ribozomal - ARNr.
In celule se gsete o mare cantitate de ARNr (80-90% din ARN-ul celular), ARNt n
proporie de 10-15% i o cantitate mica de ARNm (mai puin de 5%).
Tipuri de ARN:
-ARN mesager;
-ARN viral;
-ARNt de transport;
-ARN ribozomal;
-ARN recombinant.

Sinteza
ARN-ul este sintetizat ntr-un proces numit i transcriptie. n acest proces, secvenele
ADN sunt copiate de enzime (ARN polimeraz), pentru a produce ARN complementar.
Enzima are rolul de a desface dublul helix al ADN-ului, fiecare jumtate fiind
transcripionat. Sinteza ARN-ului (transcripia) se realizeaz pe baza complementaritii

bazelor azotate ca i n cazul replicaiei ADN-ului. Cele dou catene ale macromoleculei
de ADN se despart, pe intervalul care urmeaz a fi transcris, numai c de data aceasta va
aciona ARN polimeraza. Acum se va transcrie numai una din catenele moleculei de
ADN. Catena de ADN care funcioneaz ca matri pentru sinteza ARN-ului se numete
caten sens. Nucleotidele libere care se vor alinia pe baza complementaritii vor conine
riboza. n dreptul adeninei de pe catena matri se va ataa uracilul n catena nou
sintetizat.
Polimerizarea de ribonucleotide n transcripie se desfoar n acelai sens ca reacia de
polimerizare a dezoxiribonucleotidelor din cadrul replicaiei ADN-ului i anume de la 5'
la 3'. ARN-ul avnd o molecula monocatenar, frecvena erorilor este mult mai mare
decat la ADN,replicndu-se cu o fidelitate mult mai redus, deoarece in cazul ARN-ului
nu exist un proces de reparare, iar frecvena mare a erorilor duce la o mare variabilitate
genetic.

ADN i ARN
ARN-ul, spre deosebire de ADN, care are dezoxiriboz, conine n structura sa riboz;
La ARN, baza uracil nlocuiete timin;
ARN-ul este mai mic dect ADN-ul ( 200-4000 nucleotide n comparaie cu peste 1
milion de nucleotide la ADN)

Istoria descoperirii ARN-ului

In 1958 cercetarile efectuate de E wolkin si L Astrahan pe Escherichia coli au pus in
evidenta existenta unui acid ribonucleic denumit mesager. Cercetarea acizilor nucleici are
nceputurile in secolul XIX cnd F Miescher (un elveian de origine german) a studiat
purionul la diferite persoane i a descoperit c n nucleul celulelor respective se afl o

substan pe care el o numete nuclein. Mai trziu n 1889 Altmann separ din nuclein
acidul fosforic dar i o component organic.

Markeri Genetici
Markerii moleculari pun n eviden diferenele dintre secvenele nucleotidice,
marcnd totodat prezena unei anumite gene n ADN-ul extras de la diferii
indivizi. Formarea sau dispariia unui marker molecular este determinat de
modificarea unei singure nucleotide dintr-o gen sau chiar de la nivelul ADN-ului
repetitiv.
Markerii genetici evidentiaz orice diferen genotipic sau fenotipic
specific unui individ, care se transmite n descenden, sunt de fapt alele mutante
care pot fii urmrite de-a lungul generaiilor.
2.3 TIPURI DE MARKERI GENETICI
2.3.1 Markerii morfologici
Markerii morfologici controleaz caractere morfologice uor de evideniat,
controlate genetic de ctre o singur gen.
2.3.2 Markerii biochimici
Controleaz nsuiri biochimice care sunt controlate de mai multe gene i se
bazeaz pe proprietatea proteinelor de a fi separate prin electroforez
2.2.3 Markerii moleculari
Markerii moleculari evideniaz polimorfismul la nivelul ADN-ului nuclear i
citoplasmatic.
2.4 IMPORTANTA MARKERILOR MOLECULARI
Caracteristicile markerilor moleculari permit procesul de identificare, selecie i
clonare a genelor de interes, precum i observarea naturii informaionale a
materialului analizat.
2.5 UTILIZAREA MARKERILOR MOLECULARI

Cele mai importante utilizri ale markerilor sunt:

Stabilirea variabilitii genetice i caracterizarea coleciilor de

germoplasm;
Amprentarea genetic a varietilor, identificarea i accelerarea dezvoltrii
indivizilor care combin alelele favorabile, contribuind la performanele
presupuse
ale hibrizilor

Estimarea distanelor genetice ntre populaii, i producerea de semine;

Detecia QTL(qualitative trait loci ) i monogene;

Puritatea i stabilitatea seminelor i a materialului vegetal;

Identificarea de secvene utile, gene candidat etc. 2.5.1.

Microsatelitii (SSR)
Disponibilitatea unei largi game de tehnici de marcare molecular a condus
la studii comparative ntre ele, (POWELL et al., 1996). Dintre toate acestea,
markerii SSR au ctigat considerabil importan n genetica i ameliorarea
plantelor ca urmare avnd multe atribute de dorit, inclusiv disponibilitate,
natura multialelic, motenire codominant, reproductibilitate, abunden
relativ, acoperire extins a genomul (inclusiv la nivelul organelelor),
locaie specific pe cromozom, posibilitatea automatizrii i detalii n
genotipizare (PARIDA et al., 2009a)
2.5.1.1 Evolutia microsatelitilor: mecanismele de
mutatie si de variatie SSR
Evoluia SSR, adic orice modificare, cretere sau descretere a numrului
de repetri, este asociat cu rata de mutaie. Geneza microsateliilor este un
proces evolutiv dinamic care s-a dovedit a fi extrem de complex
(ELLEGREN, 2004).
2.5.1.2. Dezvoltarea markerilor microsateliti
n ciuda aplicabilitii largi a markerilor SSR n genetica plantelor,
dezvoltarea lor rmne o mare problem la majoritatea speciilor mai ales n
cazul culturilor minore. Acest lucru se datoreaz faptului c markerii SSR
ar trebui s fie izolai de novo la majoritatea speciilor.