UNIVERSIDAD LATINA

DE PANAM
FACULTAD DE
CIENCIAS DE LA
SALUD Dr. WILLIAM C.
GORGAS
LICENCIATURA EN
TECNOLOGA MDICA

PRESENTADO POR:
CINDY IBAEZ
YUZEYMA MANZAN
ORLANDO SNCHEZ
JAISON LOMBARDO

LABORATORIO DE BIOLOGA # 10
ACCIN ENZIMTICA

LABORATORIO DE BIOLOGA # 10
INDICE GENERAL
INTRODUCCIN
OBJETIVOS
MARCO TERICO
PROCEDIMIENTO
DISCUSIN
CUESTINARIO
GLOSARIO
CONCLUSIN
BIBLIOGRAFA

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LABORATORIO DE BIOLOGA # 10

INTRODUCCIN
Las enzimas constituyen la clase de protenas ms amplia y ms altamente
especializada. Catalizan los millares de reacciones qumicas que, colectivamente,
constituyen los intermediarios de las clulas.
La actividad de las enzimas fue reconocida en estudios iniciales de la
digestin en el estmago durante el periodo de1780 y 1825. La primera enzima
aislada fue en forma cristalina pura fue la ureasa, obtenida de los extractos de
Cannavalia enzyformis, por J.B. Summer en 1926, quien demostr que los cristales
se encontraban compuestos por protena, llegando a sugerir que todas las enzimas
eran protenas. Sus puntos de vista no fueron aceptados inmediatamente, sin
embargo y no fue hasta el periodo de 1930, durante el cual J. Northrop aisl las
enzimas digestivas pepsina, tripsina y quimotripsina en forma cristalina, cuando
quedo firmemente establecida la naturaleza proteica de las enzimas.
Las enzimas son catalizadores especficos. Muy a menudo, los grupos
funcionales de la enzima son complementados con cofactores. Hay diversos
factores qumicos que pueden justificar las altas velocidades alcanzadas por las
enzimas en las condiciones de pH y temperatura propias de las clulas. La
complementariedad de la enzima con la geometra del estado de transicin de la
reaccin es la causa ms notable de su poder cataltico.

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OBJETIVOS

Comprobar la reaccin sobre el perxido de hidrgeno por accin de la enzima

catalasa, presente en tejidos animales y vegetales determinando los productos de
reaccin.

Estudiar algunos factores que afectan la actividad enzimtica, como la temperatura,

el pH, la concentracin del sustrato y de la enzima y la presencia de inhibidores.

Confrontar los conocimientos tericos adquiridos en clases con las actividades

experimentales en el laboratorio

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MATERIALES
tubos de ensayo 15 x 125 mm.

Toallas de papel, papel absorbente

Guantes de ltex.

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Dispositivo para bao mara.

Pinzas para tubo de ensayo.

MATERIAL BIOLGICO:
Diversos tejidos de origen animal como: hgado de res y de pollo, sesos de res,
msculo, y tejidos vegetales como: hojas y races, espinacas, etc.

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REACTIVOS:
Solucin de perxido de hidrgeno al 3%.

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PROCEDIMIENTO
1. Se harn cortes de varios tejidos animales y vegetales debiendo anotar
cuidadosamente su origen, evitando tocarlos con las manos porque se pueden
contaminar con las sustancias de la piel del experimentador.

2. Con las pinzas de diseccin toma un fragmento de 1 cm aproximadamente de

cada uno de los tejidos y colcalos en un pedazo de papel absorbente cuidando que
los tejidos no se toquen entre s. Mrcalos para su identificacin.

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3. En otro pedazo de papel toma cortes de tejidos iguales a los primeros, pero que
hayan sido hervidos previamente. Manjalos tambin con las pinzas.

4. En dos tubos de ensayo limpios, coloca 5 ml de solucin de perxido de hidrgeno

al 3%. Toma una porcin de uno de los tejidos hervidos y otro del mismo sin hervir
y colcalos en tubos de ensayo que contengan el perxido.

5. Observa y anota los resultados.

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6. Tomar otro par de tubos y agrgales 5 ml de perxido de hidrgeno al 3% en

cada uno.
10. Se recomienda que los tubos se sujeten con las pinzas para tubo de ensayo,
para evitar la transferencia de calor y por lo tanto la activacin del perxido de
hidrogeno.

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11. Armar el calormetro como lo muestra la figura y colocar en el 10 ml de perxido
de hidrgeno al 3% en la cmara de reaccin, moja el bulbo del termmetro y psalo
a travs del tapn horadado, el bulbo del termmetro debe tocar el lquido.
12. Anota la temperatura inicial. Una vez que se ha determinado la temperatura
inicial del perxido de hidrgeno, en el calormetro, introduce dos gotas de extracto
de hgado. Inserta el tapn en su lugar sin que quede apretado, para permitir el
escape de cualquier gas que se genere.

13. Anota los cambios de temperatura de la cmara de reaccin cada 30 segundos,

hasta un periodo de 5 minutos y repite este procedimiento dos veces ms con
perxido de hidrgeno fresco y ms extracto de hgado.

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14. Calcula el promedio de las mediciones de temperatura para cada intervalo de
30 segundos anotando los resultados. Posteriormente realiza una grfica con los
resultados, en el eje de las x tiempo en segundos y en el eje de las Y temperatura
en C.

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MARCO TEORICO
LAS ENZIMAS SON CATALIZADORES EFICACES Y MUY ESPECFICOS
Las enzimas que catalizan la conversin de uno o ms compuestos (sustratos)
hacia uno o ms compuestos diferentes (productos) aumentan los ndices de la
reaccin no catalizada correspondiente por factores de al menos 106. Al igual que
todos los catalizadores, las enzimas no se consumen ni se alteran de manera
permanente como consecuencia de su participacin en una reaccin. Adems de
ser muy eficientes, las enzimas tambin son catalizadores en extremo selectivos. Al
contrario de casi todos los catalizadores usados en qumica sinttica, las enzimas
son especficas tanto para el tipo de reaccin catalizada como para un sustrato
nico o un pequeo conjunto de sustratos estrechamente relacionados. Las
enzimas tambin son catalizadores estereoespecficos y de manera tpica catalizan
reacciones de slo un estereoismero de un compuesto dado (p. ej., azcares D,
mas no L; aminocidos de L pero no D). Dado que se unen a sustratos por medio
de al menos tres puntos de fijacin, las enzimas incluso pueden convertir sus
tratos no quirales en productos quirales.
LAS ENZIMAS SE CLASIFICAN POR EL TIPO DE REACCIN
Los nombres de uso frecuente para casi todas las enzimas describen el tipo de
reaccin catalizada, seguido por el sufijo -asa. As, por ejemplo, las
deshidrogenasas eliminan tomos de hidrgeno, las proteasas hidrolizan protenas
y las isomerasas catalizan reordenamientos de la configuracin. Los modificadores
pueden preceder o seguir al nombre para indicar el sustrato (xantina oxidasa), la
fuente de la enzima (ribonucleasa pancretica), su regulacin (lipasa sensible a
hormona) o una caracterstica de su mecanismo de accin (cistena proteasa).
Cuando es necesario, se aaden designaciones alfanumricas para identificar
mltiples formas de una enzima. A fin de resolver estas dificultades, la International
Union of Biochemists (IUB) cre un sistema de nomenclatura de enzimas sin
ambigedad en el cual cada enzima tiene un nombre y nmero de cdigo singular
que identifican el tipo de reaccin catalizada y los sustratos comprendidos; as, las
enzimas se agrupan en seis clases:
1. Oxidorreductasas (catalizan oxidaciones y reducciones).
2. Transferasas (catalizan la transferencia de porciones, como grupos glucosilo,
metilo o fosforilo).
3. Hidrolasas (catalizan la divisin hidroltica de CC, CO, CN y otros enlaces).

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4. Liasas (catalizan la divisin de CC, CO, CN y otros enlaces mediante
eliminacin de tomo, dejando dobles enlaces).
5. Isomerasas (catalizan cambios geomtricos o estructurales dentro de una
molcula).
6. Ligasas (catalizan la unin de dos molculas acopladas a la hidrlisis de ATP). A
pesar de la claridad del sistema de la IUB, los nombres son largos y hasta cierto
punto engorrosos, de modo que en general se sigue haciendo referencia a las
enzimas por su nombre tradicional, aunque a veces ambiguo. La designacin de la
IUB para la hexocinasa ilustra tanto la claridad de su sistema como sus
complejidades: el nombre que la IUB da a la hexocinasa es ATP:D-hexosa
6-fosfotransferasa; el cual identifica a la hexocinasa como un miembro de la clase
2 (transferasas), subclase 7 (transferencia de un grupo fosforilo), subclase 1 (el
alcohol es el aceptor del fosforilo), y hexosa6 indica que el alcohol fosforilado est
en el carbono seis de una hexosa. Sin embargo, se le sigue llamando hexocinasa.
LOS GRUPOS PROSTTICOS, LOS COFACTORES Y LAS COENZIMAS
TIENEN FUNCIONES IMPORTANTES EN LA CATLISIS
Muchas enzimas contienen pequeas molculas no protenicas y iones metlicos
que participan de manera directa en la unin de sustrato o catlisis. Denominados
grupos prostticos, cofactores y coenzimas, stos extienden el repertorio de
capacidades catalticas ms all de las proporcionadas por el nmero limitado de
grupos funcionales presentes en las cadenas laterales aminoacilo de pptidos.
Los grupos prostticos estn estrechamente integrados en la estructura de una
enzima Los grupos prostticos se distinguen por su incorporacin estrecha y estable
hacia la estructura de una
protena mediante fuerzas
covalentes o no covalentes.
Los ejemplos son fosfato
de
piridoxal,
flavina
mononucletido
(FMN),
flavina
adenina
dinucletido
(FAD),
pirofosfato de tiamina,
biotina
y
los
iones
metlicos de Co, Cu, Mg,
Mn y Zn. Los metales son
los grupos prostticos ms
comunes. Cerca de un
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tercio de todas las enzimas que contienen iones metlicos unidos de manera
estrecha se llama metaloenzimas. Los iones metlicos que participan en reacciones
redox por lo general forman complejos con grupos prostticos como el hem o
agrupaciones de hierroazufre. Los metales tambin pueden facilitar la unin y
orientacin de sustratos, la formacin de enlaces covalentes con intermediarios de
reaccin (CO2+ en la coenzima B12), o interactuar con sustratos para hacerlos ms
electroflicos (con pocos electrones) o nucleoflicos (ricos en electrones).
Los cofactores se asocian de manera reversible con enzimas o sustratos Los
cofactores desempean funciones similares a las de grupos prostticos, pero se
unen de una manera transitoria y disociable a la enzima o a un sustrato como ATP.
Por ende, al contrario de los grupos prostticos asociados de manera estable, para
que ocurra catlisis debe haber cofactores en el medio que rodea a la enzima. Los
cofactores ms comunes tambin son iones metlicos. Las enzimas que requieren
un cofactor ion metlico se llaman enzimas activa- das por metal para distinguirlas
de las metaloenzimas para las cuales los iones metlicos sirven como grupos
prostticos.
Las coenzimas sirven como transbordadores de sustrato Las coenzimas sirven
como transbordadores o agentes de transferencia de grupo reciclables, que
transportan muchos sustratos desde su punto de generacin hacia su punto de
utilizacin. La asociacin con la coenzima tambin estabiliza sustratos como tomos
de hidrgeno o iones hidrido que son inestables en el ambiente acuoso de la clula.
Otras porciones qumicas transportadas por coenzimas son grupos metilo (folatos),
grupos acilo (coenzima A) y oligosacridos (dolicol).
Muchas coenzimas, cofactores y grupos prostticos son derivados de vitamina B
Las vitaminas B hidrosolubles proporcionan componentes importantes de muchas
coenzimas. Varias coenzimas contienen, adems, las porciones adenina, ribosa y
fosforilo de monofosfato de adenosina (AMP) o difosfato de adenosina (ADP).

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LA CATLISIS OCURRE EN EL SITIO ACTIVO
Una importante informacin de principios del siglo xx acerca de la catlisis
enzimtica provino de la observacin de que la presencia de sustratos hace a las
enzimas ms resistentes a los efectos desnaturalizantes de las temperaturas altas.
Dicha observacin llev a Emil
Fischer a proponer que las enzimas y
sus sustratos interactan para formar
un complejo de enzima-sustrato (ES)
cuya estabilidad trmica fue mayor
que la de la enzima en s. Este
conocimiento impact de manera
profunda sobre la comprensin tanto
de la naturaleza qumica como de la
conducta cintica de la catlisis
enzimtica. Fischer razon que la
especificidad en extremo alta con la
cual las enzimas reconocen sus
sustratos cuando forman un complejo
ES era anloga a la manera en la cual
una cerradura mecnica distingue la
llave apropiada. Esta cerradura enzimtica recibe el nombre de sitio activo. En casi
todas las enzimas dicho sitio adopta la forma de una hendidura o bolsa sobre la
superficie de la enzima o, para algunas enzimas multimricas, en la interfaz entre
subunidades. Como su nombre lo indica, el sitio activo es mucho ms que tan slo
un sitio de reconocimiento para
sustratos que se unen. Proporciona un
ambiente tridimensional que protege a
los sustratos contra solvente y facilita
la catlisis. Tambin se une a
cualesquiera cofactores y grupos
prostticos que la catlisis pudiera
requerir. Dentro del sitio activo, las
molculas de sustrato estn alineadas
en estrecha proximidad y en
orientacin ptima a los grupos
funcionales de residuos peptidilo
aminoacilo, cofactores y grupos
prostticos que se encargan de
catalizar su transformacin qumica
hacia productos
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LAS ENZIMAS EMPLEAN MLTIPLES MECANISMOS PARA FACILITAR LA
CATLISIS
Las enzimas usan diversas combinaciones de cuatro mecanismos generales para
lograr notorio aumento cataltico de los ndices de reacciones qumicas.
Catlisis por proximidad: Para que las molculas reaccionen, deben acercarse
hasta ubicarse dentro de la distancia formadora de enlace de otra. Mientras ms
alta sea su concentracin, con mayor frecuencia se encontrarn una con otra y
mayor ser el ndice de su reaccin. Cuando una enzima se une a molculas de
sustrato en su sitio activo, crea una regin de concentracin local alta de sustrato.
Este ambiente tambin orienta las molculas de sustrato de manera espacial en una
posicin ideal para que interacten, lo que origina aumentos del ndice de al menos mil veces.
Catlisis acidobsica: Los grupos funcionales ionizables de cadenas laterales
aminoacilo y (cuando estn presentes) de grupos prostticos, contribuyen a la
catlisis al interactuar como cidos o bases. La catlisis acidobsica puede ser
especfica o general; por especfica se alude a protones (H3O+) o iones OH. En
la catlisis especfica para cido o especfica para base, el ndice de reaccin es
sensible a cambios de la concentracin de protones, pero independiente de las
concentraciones de otros cidos (donadores de protn) o bases (aceptores de
protn) presentes en solucin o en el sitio activo. Se dice que las reacciones cuyos
ndices muestran capacidad de respuesta a todos los cidos o bases presentes,
estn sujetas a catlisis por cido general o por base general.
Catlisis por tensin: Las enzimas que catalizan reacciones -lticas que
comprenden la ro- tura de un enlace covalente tpicamente se unen a sus sustratos
en una conformacin muy desfavorable para el enlace que sufrir la divisin. Tal
conformacin imita la del intermediario de estado de transicin, especie transitoria
que representa la transicin o el pun- to medio en la transformacin de sustratos en
productos. La tensin resultante estira o deforma el enlace al cual se dirige, esto lo
debilita y lo hace ms vulnerable a divisin. Linus Pauling, laureado con el premio
Nobel, fue el primero en sugerir una funcin para la estabilizacin de estado de
transicin como un mecanismo general mediante el cual las enzimas aceleran los
ndices de reacciones qumicas. Los qumicos a menudo aprovechan el
conocimiento del estado de transicin de una reaccin catalizada por enzima para

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disear y crear inhibidores de
enzima ms eficaces, llamados
anlogos de estado de transicin,
como farmacforos potenciales.
Catlisis covalente El proceso de
catlisis covalente comprende la
formacin de un enlace covalente
entre la enzima y uno o ms
sustratos. La enzima modificada
despus se convierte en un reactivo.
La catlisis covalente introduce una
nueva va de reaccin cuya energa
de activacin es ms baja y, por
ende, es ms rpida que la va de
reaccin en solucin homognea.
Sin embargo, la modificacin
qumica de la enzima es transitoria; en el momento en que se completa la reaccin,
la enzima vuelve a su estado no modificado original. De este modo, su funcin
permanece cataltica. La catlisis covalente se observa con particular frecuencia
entre enzimas que catalizan reacciones de transferencia de grupo. Los residuos
sobre la enzima que participa en la catlisis covalente por lo general son cistena o
serina y, en ocasiones, histidina. La catlisis covalente a menudo sigue un
mecanismo de ping-pong: uno en donde el primer sustrato es unido y su producto
se libera antes de la unin del segundo sustrato
LOS SUSTRATOS INDUCEN CAMBIOS CONFORMACIONALES EN ENZIMAS
Si bien el modelo de cerradura y llave de Fischer permiti comprender la
especificidad extrema de interacciones entre enzima y sustrato, la rigidez implcita
del sitio activo de la enzima no explic los cambios dinmicos que acompaan a la
catlisis. Esta desventaja fue abordada por el modelo de adaptacin inducida de
Daniel Koshland, que declara que cuando los sustratos se aproximan y se unen a
una enzima, inducen un cambio conformacional, una modificacin anloga a colocar
una mano (sustrato) dentro de un guante (enzima). Un corolario es que la enzima
induce cambios recprocos en sus sustratos y aprovecha la energa de unin para
facilitar la transformacin de sustratos en productos. El modelo de adaptacin
inducida se ha confirmado de manera amplia por medio de estudios biofsicos de
movimiento de enzimas durante unin a sustrato.

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EL ANLISIS DE CIERTAS ENZIMAS AYUDA AL DIAGNSTICO
El anlisis de enzimas en el plasma sanguneo ha desempeado una funcin
fundamental en el diagnstico de varios procesos morbosos. Muchas enzimas son
constituyentes funcionales de la sangre; entre algunos ejemplos estn
seudocolinesterasa, lipoprotena lipasa, as como componentes de la cascada de
eventos en la coagulacin de la sangre y la disolucin de cogulo. Otras enzimas
se liberan hacia el plasma despus de muerte o lesin celular; si bien estas ltimas
no desempean una funcin fisiolgica en el plasma, su aparicin o sus
concentraciones son de utilidad en el diagnstico y el pronstico de enfermedades
y lesiones que afectan tejidos especficos. Despus de lesin, la concentracin
plasmtica de una enzima liberada puede aumentar en etapas tempranas o tardas,
y declinar de manera rpida o con lentitud. Las protenas del citoplasma tienden a
aparecer con mayor rapidez que las de organelos subcelulares. La rapidez con la
cual las enzimas y otras protenas son eliminadas del plasma vara con su
susceptibilidad a protelisis y permeabilidad a travs de los glomrulos renales. El
anlisis cuantitativo de la actividad de las enzimas o de otras protenas liberadas
por lo general en plasma o suero, aunque tambin en orina o en diversas clulas
proporciona informacin respecto del diagnstico, el pronstico y la respuesta al
tratamiento. En el anlisis de la actividad enzimtica de manera caracterstica se
emplean valoraciones cinticas estndar de ndices de reaccin inicial. De manera
alternativa, las radioinmunovaloraciones (RIA) proporcionan cuantificacin de la
cantidad absoluta de una enzima o de protena no cataltica. Las enzimas ayudan
al diagnstico de infarto de miocardio (MI) Una enzima til para enzimologa
diagnstica debe ser hasta cierto punto especfica para el tejido u rgano bajo
estudio, aparecer en el plasma u otro lquido en un momento til para el diagnstico
(la ventana diagnstica) y prestarse a la valoracin automatizada. Las enzimas
que se utilizan para confirmar un MI ilustran el concepto de una ventana
diagnstica y proporcionan una perspectiva histrica sobre el uso de diferentes
enzimas para este propsito. La deteccin de una enzima debe ser posible en el
transcurso de algunas horas, luego de un MI para confirmar un diagnstico
preliminar y permitir el inicio de terapia apropiada. De este modo, las enzimas que
slo aparecen en el plasma 12 h o ms despus de lesin, tienen utilidad limitada.
Las primeras enzimas usadas para diagnosticar MI fueron la aspartato
aminotransferasa (AST), alanina aminotransferasa (ALT) y lactato deshidrogenasa
(LDH). Sin embargo, la AST y la ALT resultaron no ser las idneas, puesto que
aparecen en el plasma con relativa lentitud y no son especficas para el msculo
cardiaco.
Hoy, en casi todos los laboratorios clnicos para el diagnstico de MI, la CK se ha
complementado mediante la troponina. Sin embargo, dado que la CK-MB tambin
se libera en el momento de lesin de msculo estriado, la valoracin de las
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concentraciones plasmticas de CK an se usa para evaluar trastornos del msculo
estriado, como distrofia muscular de Duchenne. La troponina es un complejo de tres
protenas comprendidas en la contraccin muscular en los msculos estriado y
cardiaco, no as en el msculo liso. La medicin inmunolgica de las
concentraciones plasmticas de troponinas cardiacas I y T proporciona indicadores
sensibles y especficos de dao del msculo cardiaco. Las concentraciones de
troponina aumentan 2 a 6 h despus de un MI y permanecen elevadas durante 4 a
10 das. Adems del MI, otro tipo de dao del msculo cardiaco tambin aumenta
las concentraciones sricas de troponina. As que las troponinas cardiacas sirven
como un marcador de todo el dao del msculo cardiaco. La bsqueda de
marcadores adicionales para enfermedad cardiaca como albmina modificada
por isquemia y la evaluacin simultnea de un espectro de marcadores diagnsticos
por medio de protemica an es un rea activa de investigacin clnica. Tambin
es factible emplear enzimas en el laboratorio clnico como herramientas para
determinar la concentracin de metabolitos crticos; por ejemplo, la glucosa oxidasa
suele utilizarse para medir la concentracin plasmtica de glucosa. Cada vez con
mayor frecuencia se emplean enzimas como recursos para el tratamiento de lesin
y enfermedad. El activador del plasmingeno hstico (tPA) o la estreptocinasa se
usan en el tratamiento de MI agudo, mientras que la tripsina ha sido utilizada en el
tratamiento de fibrosis qustica.

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GLOSARIO

ACTIVIDAD ESPECIFICA: Nmero de unidades de enzima por miligramo de

protena. Medida de la pureza de la enzima y llega a ser mxima y se
mantiene constante cuando la enzima se halla en estado puro.

APOENZIMA: Protena parte del sistema enzimtico responsable de sus

especificidad

CENTRO ACTIVO: regin tridimensional a la que se une el sustrato, y los

cofactores, si participan, formada por una composicin de grupos funcionales
que determinan la afinidad, la especificidad y la capacidad de transformacin
qumica del sustrato por la enzima.

CENTRO ALOSTERICO: Es el centro de unin para el modulador y es

altamente especfico para el mencionado metabolito.

COCIENTE Kcat/ Km: Equivale a una constante cintica aparente de

segundo orden para la reaccin entre la enzima libre y el sustrato libre.
Tambin denominada constante de especificidad, permite comparar el
grado discriminacin de una enzima por sustratos diferentes que pueden
competir.

COENZIMA: Molcula orgnica compleja localizada en la enzima que se

necesita para comenzar la actividad. Cofactor orgnico requerido para la
actividad de ciertas enzimas y que, con frecuencia contiene una vitamina
como elemento estructural.

COFACTOR: Sustancia inorgnica u orgnica de bajo peso molecular, cuya

presencia es necesaria para actividad de una enzima, pero no sufre una
alteracin permanente en la reaccin. La mayor parte de las coenzimas
derivan metablicamente de las vitaminas. Puede ser un metal como Mg, Mn,
Zn o Fe. Estable frente al calor.
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COMPLEMENTARIEDAD GEOMETRICA: Establecida entre enzima y

sustrato y determina el nmero y la direccionalidad de estos enlaces y, en
ltima instancia, es la causa de la especificidad y la afinidad de la unin.

CONSTANTE DE VELOCIDAD: En relacin con las reacciones qumicas,

una constante que relacione la velocidad de una reaccin concreta con las
concentraciones de sustratos

ENERGA DE ACTIVACIN: Cantidad de energa (expresada en caloras)

necesaria para que todas las molculas de un mol, a una temperatura
determinada puedan alcanzar dicho reactivo.

ENZIMA: Catalizadores especficos y potentes que posibilitan la

coexistencia de un elevado nmero de reacciones qumica dentro de la
clula. En la mayora de los casos son de naturaleza proteica pero se
conocen algunas que son RNA

ENZIMAS ALOSTERICOS: Enzimas cuya actividad cataltica viene

modulada por la captacin de un metabolito especfico, que se fija en un lugar
distinto del centro cataltico, se denomina tambin enzimas reguladoras.

ENZIMA REGULADOR (ALOSTERICO): Enzima que ejerce una funcin

reguladora, por su capacidad de experimentar cambios de sus actividad
cataltica, al captar un metabolito modulador especifico

ESTADO DE TRANSICIN: Estado rico en energa de las molculas

interactuantes, en la cima de la barrera de activacin. Velocidad de reaccin
qumica es proporcional a la concentracin de las especies del estado de
transicin. La temperatura y catalizador aumenta la velocidad de la reaccin.

GRUPO PROSTETICO: Cofactor unido ntimamente a la porcin proteica de

la enzima.

HIDROLASAS (ENZIMAS): Reacciones de hidrlisis. Aaden agua a travs

de los enlaces, hidrolizndolos.
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ISOENZIMAS O ISOZIMAS: Formas diferentes pero relacionadas de una

enzima que catalizan la misma reaccin. A menudo difieren tan solo en unas
pocas sustituciones de aminocidos. Formas mltiples de una enzima que
interfieren en su afinidad por el sustrato o en su actividad mxima.

ISOMERASAS (ENZIMAS): Reacciones de isomerizacin.

LIASAS (ENZIMAS): Adicin de dobles enlaces. Aaden agua, amoniaco o

dixido de carbono a travs de enlaces dobles, o remueve estos elementos
para producir enlaces dobles.

LIGASAS (ENZIMAS): Formacin de enlaces con ATP.

SITIO ACTIVO: Lugar de una molcula enzimtica al que se une el sustrato

y donde se facilita la reaccin, a menudo es hendidura o bolsillo situado en
la superficie de la enzima.

OXIDO-REDUCTASAS: Reacciones de trasferencia electrnica. Actan

sobre muchos grupos qumicos para aadir o retirar tomos de hidrogeno.

pH PTIMO: pH al cual la actividad es mxima por encima o por debajo de

este pH la actividad desciende, pH en el cual la enzima muestra su mxima
actividad cataltica.

RESIDUOS CATALITICOS: Residuos que participan directamente en la

formacin y la ruptura de enlaces qumicos.

SUSTRATO: Sustancia sobre la que se acta. Compuesto sobre el que acta

una enzima de un modo especifico.

TRANSFERASAS (ENZIMAS): Trasferencia de grupos funcionales entre

molculas aceptoras y donadoras. Las cinasas son transferasas especiales
que regulan el metabolismo al transferir fosfatos desde el ATP a otras
molculas.

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LABORATORIO DE BIOLOGA # 10

VELOCIDAD INICIAL: cuando la cantidad de sustrato es aun insignificante

en relacin con el total presente en la mezcla. Se acepta como velocidad
inicial la determinada antes que el consumo de sustrato haya alcanzado el
20% del total originalmente presente.

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DISCUSIN
Pudimos comprobar que el perxido de hidrgeno efectivamente es descompuesto
por la catalasa liberando oxgeno ya que al hacer nuestro experimento pudimos
observar la reaccin por medio de burbujas (demostrndonos el oxgeno liberado).
La enzima catalasa transforma rpidamente el perxido de hidrgeno en agua y
oxgeno. Al momento de macerar el hgado y suministrarle el agua oxigenada
(H2O2) pudimos observar en cuestin de segundos que esto es efectivamente
verdico ya que, como habamos mencionado anteriormente, se observan burbujas
indicndonos la presencia de agua y la liberacin de oxgeno.
La desnaturalizacin de las protenas que no es otra cosa que quitarle las
propiedades a las enzimas, en este caso siendo protenas del hgado, esta
desnaturalizacin se lleva a cabo por cambios ambientales, en este caso, al
momento de la coccin del hgado dando lugar a la descomposicin de las enzimas.
Esto lo pudimos comprobar al momento de poner el pedazo de hgado en el
recipiente con agua oxigenada ya que no observamos ningn cambio en ste
porque no haba presencia de enzimas.
1.
De descomposicin: 2H2O2
2H2O + O2 Esto es porque el perxido de
hidrgeno da lugar a la formacin de agua y la liberacin de oxgeno en estado
gaseoso. La liberacin del Oxgeno, es notable a la vista cuando se comienza a
producir un burbujeo al contacto del agua oxigenada con el hgado de pollo.
2.
Irreversible: 2H2O2
2H2O + O2 La reaccin es irreversible porque los
productos que se obtienen, al pertenecer a las reacciones del metabolismo, son
utilizadas prcticamente al instante, como productos de nuevas reacciones. En
nuestro dispositivo, el oxgeno liberado, se desplazaba por completo hacia el otro
recipiente, evitando as que volviera a formarse perxido de hidrgeno una vez ms.
La enzima catalasa produce una velocidad mxima con el perxido de hidrgeno
haciendo que la reaccin se acelere.

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CUESTIONARIO
1) Cul es el cambio total de temperatura que tuvo lugar en la cmara de reaccin?
5C
2) Cul es la fuente del calor determinado en este experimento?
La reaccin del H2O2 con la Catalasa es una reaccin que libera calor (Reaccin
exotrmica).
3) Si la catalasa es una enzima que rompe el perxido de hidrgeno formando
oxgeno y agua, De qu manera se muestra en nuestro experimento la presencia
o ausencia de catalasa en los tejidos?
La presencia de burbujas indica que la reaccin qumica de descomposicin del
perxido de hidrogeno en agua y oxigeno es positiva.
4) De los tejidos experimentados, Cul de ellos es el ms activo?, Cules el
menos activo?
El ms activo es el hgado de res y los menos activos los tejidos vegetales. Los
tejidos hervidos no presentaron actividad.
5) Qu se puede inferir de los resultados obtenidos, sobre la actividad de la
catalasa en los tejidos hervidos y sin hervir?
Los tejidos previamente hervidos demuestran que la accin del calor sobre ellos
afecto el estado natural de las enzimas presentes, lo que llamamos comnmente
desnaturalizacin enzimtica.
6) Frecuentemente se utiliza perxido de hidrgeno como antisptico y se observa
que al aplicarlo a una herida se produce burbujeo, Qu es lo que indica este
hecho?
Indica la presencia de Catalasa en los tejidos en donde se aplica el Perxido de
Hidrogeno.

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CONCLUSIN
El Metabolismo puede dividirse en anabolismo y catabolismo, y la reaccin que se
llev a cabo en esta prctica, es un claro ejemplo del catabolismo ya que se
descompone el perxido de hidrgeno en agua y oxgeno. Esta reaccin es
exergnica pues libera ms energa de la que se absorbe. En el experimento puede
comprobarse porque, en el frasco donde se pone el hgado y el agua oxigenada
puede percibirse un aumento de temperatura.
Finalmente, gracias a este experimento, podemos comprobar que, de acuerdo a lo
que hemos tratado en clase sobre las enzimas, son stas las que se encargan de
acelerar vertiginosamente la velocidad de una reaccin y adems tienen la
caracterstica de poseer una estricta especificidad, pues la catalasa reacciona
exclusivamente con el perxido de hidrgeno.

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BIBLIOGRAFA
Bohinsk, C. (1991) a. Bioqumica. Mxico: Addison Wesley. pp. 174-181.
Bohinsk, C (1991) b. Capitulo 5: Enzimas en Bioqumica (5ta, ed.)
Mxico: Addison Wesley Longman
BIOLOGIA. CONCEPTOS Y RELACIONES / 3 ED.
MITCHELL, LAWRENCE G.
CAMPBELL, NEIL A.
Editorial: PEARSON
ISBN: 9684444133

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