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OBJETIVOS:
Determinar parmetros cinticos de una cepa de Aspergillus kawachi,
creciendo en medio lquido.
Establecer los perfiles de actividad amiloltica producida durante el cultivo.
Relacionar los perfiles de actividad enzimtica que produce la cepa con la
curva de crecimiento.
Datos de la prctica obtenidos a diferentes tiempos
M.
Cultivo
Almidn
(liq)
Almidn
(liq)
Almidn
(liq)
Almidn
(liq)
Almidn
(liq)
Almidn
(liq)
Almidn
(liq)
de
M.O.
A.
kawachi
A.
kawachi
A.
kawachi
A.
kawachi
A.
kawachi
A.
kawachi
A.
kawachi
Hr.
de
cultiv
o
0
Tara
papel
plato
P seco
total
P
seco
muestra
P
seco
(g/l)
1,151
1,153
0,002
0,025
1,149
1,153
0,004
0,050
20
1,149
1,206
0,057
0,712
27
1,147
1,256
0,109
1,363
44
1,151
1,296
0,145
1,813
46
1,142
1,295
0,153
1,913
52
1,143
1,303
0,16
2,000
CURVA DE CRECIMIENTO
Con los datos de la tabla anterior podemos graficar la curva de crecimiento
Horas
cultivo
0
5
20
27
44
46
52
de P
seco
(g/l)
ln X
3,6888794
0,025
5
2,9957322
0,050
7
0,3389753
0,712
7
0,3093212
1,363
5
0,5947071
1,813
1
0,6484112
1,913
9
0,6931471
2,000
8
Practica de Laboratorio N 1
1
0
Ln X
-1
-2
Polynomial ()
-3
-4
tiempo
Horas de cultivo
0
5
20
27
ln X
-3,68887945
-2,99573227
-0,33897537
0,30932125
pte ()
tg
0,1546
4,483
1/hr
hr
1
0
Ln X
-1
20
25
30
-2
Linear ()
-3
-4
tiempo
AZUCARES TOTALES
Con los datos de las muestras patrn se construye la curva de calibracin para
evaluar el contenido de azucares totales.
Curva de calibracin
Concentracin
(ppm)
0
25
75
Absorbanci
a
0,497
0,667
0,955
Practica de Laboratorio N 1
100
150
200
1,045
1,154
1,369
1.500
R ==0.97
f(x)
0x + 0.56
1.000
absorvancia
0.500
Linear ()
Linear ()
0.000
0
50
100
150
200
250
conc.
Muestras
de
Absorbancia
1,921
2,778
3,801
1,604
0,937
0,92
Az.
Total Az.
(ppm)
(g/l)
3229,05
3,23
5269,52
5,27
7705,24
7,71
2474,29
2,47
886,19
0,89
845,71
0,85
Total
10.00
8.00
6.00
az. total
4.00
2.00
0.00
0 5 101520253035404550
tiempo
Practica de Laboratorio N 1
Concentracin
(ppm)
0
100
200
400
500
600
700
800
900
1000
Absorbancia
-0,008
-0,001
0,011
0,042
0,057
0,064
0,08
0,095
0,107
0,123
0.15
0.1
absorvancia
f(x) = 0x - 0.01
R = 1
0.05
Linear ()
0
-0.05
200
400
600
800
1000
1200
conc.
Muestra
Debe hacerse un pasaje de unidad en las concentraciones, de ppm a g/l.
Horas
cultivo
0
5
20
27
44
46
de Absorbanci
a
-0,003
-0,007
0,024
0,015
0,009
0,006
Az.
Reductor Az.
Reductor
(ppm)
(g/l)
465
0,465
265
0,265
1815
1,815
1365
1,365
1065
1,065
915
0,915
2
1.5
az. reductores
1
0.5
0
0
10 15 20 25 30 35 40 45 50
tiempo
Practica de Laboratorio N 1
Lo que en realidad ocurre es que aumenta glucosa porque la enzima degrada el
almidn, quedando solo glucosa, luego las clulas empiezan a consumir glucosa y
por eso disminuye.
Absorbancia
0,102
0,13
0,159
0,213
0,256
0,263
0,294
0,339
0,395
0,423
0.6
0.4
absorvancia
f(x) = 0x + 0.1
R = 0.99
0.2
Linear ()
0
0
500
1000
conc.
Muestras
1 UE = 1 mmol Glu/minuto
Horas
cultivo
0
5
20
27
44
46
de
Abs
0,154
0,164
0,729
0,323
0,17
0,181
Conc. (ppm)
143,25
168,25
1580,75
565,75
183,25
210,75
UE
3,18
3,74
35,13
12,57
4,07
4,68
Practica de Laboratorio N 1
40.00
35.00
30.00
25.00
UE
20.00
15.00
10.00
5.00
0.00
0
10 15 20 25 30 35 40 45 50
tiempo
RENDIMIENTOS OBTENIDOS:
Se tomaron como valores finales aquellos que correspondan a los 27 min, ya que es
donde estn los valores de mximo.
Xf-Xi= 1,363g/l 0,025g/l = 1,338g/l
-(Sf-Si)= -(2,47g/l 3,23g/l) = 0,75g/l
Pf-Pi= 0,566g/l 0,14g/l = 0,42g/l
Entonces:
Yx/s = X/S= 1,77
Yp/s = P/S = 0,56
Practica de Laboratorio N 1
CONCLUSION