2.

Materiais e mtodos
Para avaliar o estado da qualidade ecolgica (ecos) e desenvolvimento aps o
derramamento de leo, todos os trs componentes ambientais (gua,
sedimentos, organismos) foram estudados. A colheita comeou cerca de um
ms aps o acidente e foi realizado 3 vezes dentro de um perodo de 8 meses
(de Outubro de 2000, Dezembro de 2000 e Maio de 2001).
Um mapa dos locais de amostragem pode ser visto na Fig. 1. Em especial
concentraes de hidrocarbonetos foram medidos na gua, nos sedimentos e
as amijoas (Venus verrucosa) habitando as guas rasas dos habitats da rea
de estudo. Por outro lado, o funcionamento dos ecossistemas bentnicos,
como uma resposta ao estressor, foi seguido pelo estudo detalhado da
estrutura e composio da comunidade empregando largamente utilizados
indicadores ecolgicos.
Em todo o 14 as estaes de amostragem foi escolhida como uma das que no
local do acidente (estao). O resto dos pontos amostrais so distribudas
radialmente em torno do local do acidente em diferentes profundidades
(offshore e estaes costeiras) e com a direo de cinco sites. Trs destes
sites nomeadamente Avlida (AV), Dilesi (D) e Pigadakia em Chalkoutsi (P)
foram severamente atingidas pelo acidente, como evidenciado pelos sinais
aparentes na sua zona costeira. Outro local de amostragem incluiu a boca de
Asopos river (S), que conhecido por ser a principal fonte de poluentes de
origem industrial. UM quinto local de amostragem manteve-se inalterada e foi
selecionado como um local de referncia [Oropos (OU) ]. Na Tabela 1,
apresentamos as caractersticas dos pontos de amostragem e os parmetros
amostrados em cada um dos trs cruzeiros realizados na rea de estudo. A
gua salgada foi coletado em 1 m de profundidade por meio de uma
amostragem de gua dispositivo constitudo por um suporte para garrafa
ponderada com uma cor amarelo-garrafa de vidro (UNESCO,1984). Dissolveudispersos petrleo hidrocarbonetos (DDPH) foram extrados com n-hexano e
determinada por fluorescncia (kexc 310 nm, kemm 360 nm). Os
resultados so expressos em criseno equivalentes.
Superfcie amostras de sedimentos foram coletadas com um grab.
A metodologia analtica para a determinao de hidrocarbonetos totais (THC)
foi baseado no do Comit Olmpico Internacional (COI) sugestes (UNEP,
1992). Resumidamente, as amostras de sedimento foram liofilizados, normas
internas foram adicionados e material orgnico foi extrado em um aparelho de
Soxhlet com uma mistura de diclorometano e metanol 2:1, os extratos foram
saponificados com metanol nonsaponified KOH e o material foi extrado com
hexano-n e limpou-se e fracionados por cromatografia em coluna de slica.

As duas fraes contendo hidrocarbonetos alifticos e hidrocarbonetos

aromticos policclicos (HAP) foram analisados por cromatografia gasosaespectrometria de massa (HP 6890 GC-MS) no modo de verificao completa.
A CP sil8-MS coluna analtica foi utilizada (30 m 0,25 mm, 0,25 pol.lm
espessura do filme) com a seguinte temperatura do forno: 60 C (1 min) a 290
C (15 min) com uma taxa de 15 C/min.

Fig. 1. Localizao dos pontos de amostragem. (triangulo ) As estaes offshore;

(bolinha ) as estaes costeiras.

Organismos marinhos foram coletados por meio de mergulho. Mais

especificamente, os moluscos bivalves Venus verrucosa L. , 1758, que um
molusco comestvel formando extensas das populaes da rea era utilizada
como um bioindicador organismo. O tecido mole foi removido e liofilizados.
Amostras de misturas de 20 corpos-de-prova foram analisados. Os
hidrocarbonetos foram determinados no material seco seguindo o mesmo
procedimento como para as amostras de sedimento.
A amostragem de plataforma continental foi realizado usando um Ponar grab
(0,05 m2, rea de amostragem).
As amostras foram peneiradas in situ com um peneiro de 1 mm de dimetro, e
armazenado em garrafas de plstico com uma soluo de formalina a 4%,
coradas com Rosa de Bengala.
As amostras foram posteriormente classificados no laboratrio, a olho nu ou
estereoscpio, e na maioria das amostras foram identificados at o nvel de

espcie. Com base nos resultados quantitativos e qualitativos, foram

calculados os seguintes parmetros biolgicos Ecolgico-: (i) o nmero de
espcies (S), por unidade de amostragem e por estao, (ii) a densidade de
populaes expressa como o nmero de indivduos perm2 (N / m2), (iii) o
ndice de diversidade de comunidade (H) (Shannon e Weaver, 1963) e (iv) o
ndice de uniformidade de distribuio (J0) (Pielou, 1969).
Para acompanhar a reao das comunidades bentnicas para o derramamento
de leo ao longo do tempo, um ndice bitico recm-desenvolvido para habitats
bentnicos fundo macio chamados Bentix foi aplicada aos dados ao longo dos
trs perodos de amostragem na sequncia do acidente.
onde Este ndice baseado nas percentagens relativas de espcies tolerantes
e sensveis plotados na frmula: BENTIX f6 _ %GI 2 _ %GII
%GIIIg=100, onde GI o grupo de espcies sensveis perturbao, GII o
grupo de ordem espcies oportunistas tolerantes e segunda e GIII os primeiros
oportunistas ordem grupo.
O ndice Bentix d um esquema de classificao (Tabela 2) de cinco classes de
estado ecolgico (ECOS) que vo de mal a alta (Simboura e Zenetos, 2002). A
matriz de similaridade foi construdo utilizando a medida de Bray-Curtis de
semelhana e uma anlise de classificao foi realizada com escalonamento
multidimensional no-mtrico (MDS) em log de x+1 transformada dados.
As anlises anteriores foram realizadas utilizando o pacote de software
PRIMER (Clarke e Warwick, 1994)

DISCUSSO
As medidas diretas de poluio por petrleo nas zonas costeiras,tm
demonstrado elevada poluio atmosfrica em Izmit Bay (Gueven et al., 1997)
atribudo aos leos brutos de diferentes origens, considerando que em Istambul
estreito quantidade de leo causado pelo petroleiro Prestige Nassia diminuiu
gradualmente em gua salgada, mas aumento de sedimentos (Guven et al.,
1996).
A partir de resultados de DDPH medidos na gua na rea, evidente que
praticamente no h quantidades significativas de hidrocarbonetos derramados
do acidente se manteve na coluna de gua 1 ms aps o acidente e esta , de
acordo com estudos anteriores, como o caso do Cabo Norte derramamento de
leo em Rhode Island (Reddy e Quinn, 2001).

Em relao ao pico de concentrao do THC em sedimentos, os resultados so

reforados pela relao de resolver/ resolvido compostos (U/R). De acordo com
este critrio(Mazurek e Simoneit, 1984) valores de U=R > 4 sugerem a
presena disseminada de petrleo importantes relacionadas com os resduos.
Na verdade, o maior U/R os valores foram registrados em estaes S (19,6 em
dezembro e 22,8 em Maio) e 3B (17,9 em outubro diminuindo de 11,9 em Maio)
Em mariscos o valor mais alto registrado na estao P em outubro (517,1 lg/g,
U/R: 17,5 foi rapidamente reduzido para valores normais em Dezembro (34,1
gl/g, U/R: 2.6 . ).
Os hidrocarbonetos aromticos policclicos (HAP) medido nos sedimentos e
mariscos ao longo de 8 meses de estudo aps o derramamento de leo, so
geralmente considerados como de baixo e indicam que no h poluio
significativa destes compostos na rea (Baumard et al., 1999; Gogou et al.,
2000; Hatzianestis et al., 2000, 2001). Os HAP com 4-6 anis aromticos foram
predominantes em todas as amostras de sedimento piroltico que sugere uma
importante origem de HAP (Page et al., 1999). Ao contrrio, em mariscos o
petrleo originado compostos (2-3 anis aromticos) (Bence et al., 1996) foram
mais abundantes que piroltico. Esta diferenciao pode ser correlacionado
com a maior solubilidade e menor estabilidade da baixa MW PAH, mas, por
outro lado, poder tambm indicar novas entradas no petrleo da regio.
Resultados semelhantes a nvel organica, tm sido relatados da costa da
Galiza, (NW Espanha) na sequncia do "Mar Egeu" derramamento de leo de
petrleo captao em bivalves foi encontrado para diminuir 3-6 meses aps o
acidente embora incidental aumenta, provavelmente relacionados com a
ressuspenso dos sedimentos poludos por tempestades, foram observados
(Porte et al., 2000). Efeitos do derramamento de leo variam entre os
diferentes ecossistemas e alm disso entre os componentes do mesmo
ecossistema. Assim, o estudo da "Tsesis" derramamento de leo impacto no
ecossistema pelgico no arquiplago sueco, revelou que o zooplncton
biomassa recuperada 5 dentro de poucos dias aps o acidente (Johansson et
al., 1980). A meiofauna foi fortemente afetada, enquanto grande foi o impacto
sobre macrobentos anf e poliquetas (Elmgren et al., 1983).

Impacto

insignificante tem sido demonstrado sobre as comunidades de peixes em um

manguezal nas pradarias de ecossistema em Austrlia do Sul (Connolly e

Jones, 1996).
Na rea de estudo, efeitos graves na plataforma continental foram registrados
em sites da lama nas imediaes do naufrgio onde estrutura bentnica
diminuiu consideravelmente durante o primeiro ms, mas recuperado logo em
seguida. Os dados histricos do local do acidente revelaram uma queda
acentuada do nmero de espcies de uma mdia de 23 (perodo de 1996:
Simboura et al., 1998) para 8 espcie/0,05 m2. Isso foi devido ao
desaparecimento de taxa sensveis como os equinodermos e alguns
crustceos. Equinodermes, que so uma componente importante da plataforma
continental tendem a ser muito sensvel a vrios tipos de poluio marinha leo
includo. A resposta de algumas espcies tem sido estudada em experimentos
de laboratrio, mesocosmos e no campo, e um ensaio com potenciais de
estresse bactrias simbiontes de equinodermos tem sido proposto para
detectar poluio por petrleo (Newton e McKenzie,1995).
Mudanas de longo prazo (1977- 1996) em uma areia fina comunidade revelou
que a reconstruo da comunidade podem ter mais de 10 anos (Dauvin, 1998).
Diferente foi a reao do raso estaes com mais grossa nos sedimentos.
Assim, a areno-lodoso comunidades foram afetadas diferentemente segundo a
correntes e distncia do derramamento de leo e no recuperar totalmente 8
meses aps o naufrgio. Indicativo da distino entre vrias perturbaes
causa o fato de que a estao de Asopos river (S) embora agrupadas no
mesmo lado da parcela como o resto das estaes mais raso distingui-los
dos. A sobreposio do MDS parcela do sedimento THC e PAH valores mostra
uma desproporcionada agregao de poluentes neste site em comparao com
o resto das estaes costeiras que deve ser associado com o fluvial. Conforme
discutido no resultados de mtodos univariados moderada do estado da
qualidade ecolgica de ecossistemas bentnicos na zona da foz do rio Asopos
que atribuda a origem fluvial e salinidade flutuao, ainda mais dramtica
por influncia do derramamento de leo.
importante ressaltar que, tanto no mais profundo, bem como as estaes

as estaes costeiras do sedimento PAH os valores foram maiores no terceiro

perodo de amostragem (P3 e D3) e (A3, 2A3, 1A3) em comparao com o
primeiro perodo de amostragem (tempo 1). Em relao a estaes costeiras
este fato refora os resultados do ndice Bentix mtodo, que mostrou que as
comunidades reagiram com uma demora de 8 meses aps o acidente
incidncia com uma deteriorao da qualidade ecolgica o estado em Maio.
No geral, os resultados da avaliao intercalar as alteraes a diferentes
componentes do ecossistema sugerem que: o derramamento de leo um
importante fator de perturbao que determina o agrupamento das estaes
mais profundo na rea de estudo. A nvel comunitrio, o derrame afetou
diretamente do local do acidente e a estao vizinha 3A no sentido leste,
alcanando plena recuperao no local do acidente 6 meses mais tarde. Todas
as outras reas foram afetadas pelo derramamento posterior por meio de
transporte de poluentes, as ondas e as correntes para oeste e para o litoral
e a recuperao no foi evidenciado no perodo de 6 meses.
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