5/1/2011

KONTROL KUALITAS sediaan RF

1.

PEMERIKSAAN FISIKA
- Konsentrasi radioaktif: Satuan Curie, mCi,Ci atau Bq.
- Alat: Geiger Muller counter dan -scintillation counter.

PEMERIKSAAN KEMURNIAN SEDIAAN RF (lihat gbr)

Kemurnian RN atau Radioisotop : tidak boleh mengandung zat
aktif selain yg tertera pd etiket
Pengotoran RN terjadi krn:
1. Nuclear side reaction , reaksi yg terjadi bersamaan dg
reaksi nuklir utamanya. Misal: Pada pembuatan 198Au
mungkin terjadi reaksi nuklir tambahan y.i 199Au, yg
menjadi pengotor radionukleidik.
2. Sasaran yang tidak murni

2. PEMERIKSAAN KIMIA
UJI KEMURNIAN RADIOKIMIA:
RN HARUS BERADA DLM BTK KIMIA YG
DITENTUKAN, MISAL: Na131I TAK DIKOTORI OLEH
Na131IO3 ATAU Na131O4 dan HIPPURAN-131I TAK
DIKOTORI 131I BEBAS.
PENGOTORAN RADIOKIMIA AKIBAT:
- Pemanasan berlebihan,
- Oksidasi/reduksi,
- Ketidakstabilan zat kimia,
- Self-irradiaton,
- Pengaruh Cara atau Tempat penyimpanan.
CARA PEMERIKSAAN :

2. KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (TLC).

PLAT LAPISAN TIPIS polyethylene
terephtalate DILAPISI SILIKA GEL,
ELUEN METANOL, DIGUNAKAN UTK
MENENTUKAN KEMURNIAN a.l: 99mTcSn-GLUKONAT ATAU 99mTc-SMIKROKOLOID. PENCACAHAN:
KERINGKAN, POTONG, DICACAH dg
FILM X-RAY, intensitas sn RA yg
dipancarkan sebanding dg kehitaman pd
film, diukur dg DENSITOMETER atau
SENY PEWARNA FLUORESENSI (snr
UV)

1. KROMATOGRAFI KERTAS
Utk memeriksa RF a.l: Na131I, Na99mTcO4,
Rose Bengal-131I, 99mTc-Sn-Glukonat.
Dipakai : kertas Whatman no.1, eluen
metanol serta analisator Saluran tunggal
(detektor NaI). Sesudah elusi, dikeringkan
lalu kertas dipotong , dicacah.

3. ELEKTROFORESIS KERTAS.
UNTUK MEMISAHKAN KOMPONEN SENY RF
DLM CAMPURAN,
Al: memisahkan SB DARI RADIOISOTOP
BEBASNYA.
DIPAKAI: KERTAS WHATMAN NO.1, LRT
ELEKTROLIT Na2HPO4 0,05m. LAMA
ELEKTROFORESIS 60 MN, TEGANGAN 350
mV.
Pencacahan = Kromatografi Kertas
4. DIALISIS
DIPAKAI UTK KOLOID, mis: 198Au KOLOID,
198 Au dari Koloid Au
memisahkan free

5/1/2011

DEFINISI
Kemurnian Radionuklida/Radioaktif/Radioisotop:
perbandingan keaktivanRN thd aktivitas total
sumber.
Kemurnian Radiokimia: perbandingan
radioaktivitas RN yg ada disumber dlm bentuk
kimia dg radioaktivitas total RN yg ada pd
sumber.
Kemurnian kimia: perbandingan (%) masa
materi yg ada dlm bentuk yg diberikan, dengan
massa total bahan (materi) yg terkandung dlm
sumber.

Pembawa isotop ( The isotope carrier): isotop

stabil RN yg ditambahkan kedalam sediaan
Radioaktif ( SB atau RF) dan yg ada dlm bentuk
yg sama spt RN.
Radioaktivitas spesifik: perbandingan
radioaktvitas RN dg massa total elemen atau btk
kimia (Chemical form in question).
Konsentrasi radioaktif larutan: perbandingan
radioaktivitas RN dg volume lrt dimana RN
dilarutkan.

3. PEMERIKSAAN BIOLOGI

PEMERIKSAAN BIOLOGI: sterilitas, pirogen, toksisitas

DILIHAT: Waktu paruh efektif dan waktu paruh biologis
PENENTUAN DOSIS:
1. SENSITIVITAS ALAT PENGUKUR ISOTOP
- Bila efisiensi hanya 50%, minimum Kecepatan
pencacahan yg dpt diterima 111cpm aktivitas
minimum sampel 222cpm (peluruhan /mnt) atau 3,7/dtk
= 10-4 Ci

2. FAKTOR PENGENCERAN.
Misal brt binatang percob 500g, sampel yg diambil 1 ml,
faktor pengenceran 500, minimum count yg diperlukan
dlm sampel= 500 x 10-4Ci. Jika RN hanya terdistribusi
10% dr brt tubuh, maka faktor pengenceran adalah
10%x500= 50

3. FAKTOR PEMBAWA KIMIA

Dipakai utk menentukan AKTIVITAS
SPESIFIK, penambahan zat pembawa
(dingin) dpt menurunkan AKT SPES.
MISAL 10mg sampel Ba14CO3
100cpm,maka Akt Spes=10cpm/mg
BaCO3, CO2 44,7 cpm/mg,
C=164,1cpm/mg.

APLIKASI SEDIAAN RADIOFARMASETIKA

1. APLIKASI

DIAGNOSTIK

Syarat: Dosis rendah, energi foton yg optimal utk memberikan citra

yg baik, Tp minimum, Tb minimum.
Guna : mendeteksi penyakit, lokasi, penyebaran penyakit dlm tubuh.
Contoh:
- Iod radioaktif utk diagnosa kelainan kelenjar tiroid
- VitB12 yg dilabel 57Co atau 58Co utk melihat fungsi dan penyakit
darah
- Vit B12 yg dilabel Co juga utk diagnosa pasien Pernicious anaemia
- Besi radioaktif ( 59Fe atau 55Fe) utk diagnosa anaemia
- Fosfat -32P atau Kromat-51Cr utk pengukuran volume darah
- 76As atau 64Cu utk menentukan lokasi tumor otak.

2. APLIKASI TERAPETIK

UMUMNYA DIPAKAI UNTUK PENGOBATAN TUMOR

- Penyembuhan luka setelah operasi : 60Co atau 137 Cs
- Pemakaian pd kulit dan mata: 32P dan 90Sr.
- Tumor peritonial dan pleural: 198Au-koloid
- Tumor: 192Ir.
- Pengob Polycythemia vera : 32P.
- Chronic granulocytic leukemia: 32P
- Pengob leukemia: 90Y-Edol (N-hidroksi etilen diamin triasetik asid)
- Pengob tumor limpa: 90Y-DTPA (Dietilen triamin penta asetik asid)
- Pengobatn hipertiroid : 131I
- Pengobatan deep scated tumor didada: 131I

5/1/2011

APLIKASI LABORATORIUM
1. RADIO ESEI
A. Digunakan utk mengukur kecepatan proses
biologi:
- a. KECEPATAN TRANSFER ISOTOP
SB DISUNTIKAN KEBAG SISTEM VASKULER DAN
DIHITUNG WAKTU YG DIBUTUHKAN UTK
MENCAPAI ORGAN TUBUH YG DITUJU

- b. KECEPATAN PELURUHAN ISOTOP

KECEPATAN HILANGNYA ISOTOP DR JARINGAN
SETELAH DISUNTIKKAN SEJUMLAH ISOTOP=
KEC SIRKULASI JARINGAN

- c.

KELENJAR TIROID MEMEKATKAN TIROID

ANORGANIK DR DARAH DAN MENGUBAHNYA MENJ
TIROKSIN (HORMON) DG BANTUAN ENZIM
PEROKSIDASE.
JIKA IOD RN DIBERIKAN, SEBAG AKAN DITAHAN
OLEH KELENJAR DAN SISANYA DIEKSKRESIKAN
MELALUI URIN. JUMLAH IOD RN YG DITAHAN
KELENJ: INDEKS FUNGSI TIROID
IODINE UP TAKE normal: 10-40% DLM 24 JAM. BILA
LEBIH 50% HIPERTIROID, KURANG 15%
MYXEDEMA
KELEBIHAN METODA INI: -pengukuran lebih teliti, pasien
tak perlu hadir ketika pegukuran aktivitas.
KELEMAHAN: - pengumpulan urin hrs semuanya,
dilaksanakan pd kondisi fungsi ginjal yg normal.
Pada keadaan Hipofungsi: kurang 30% dr dosis
diekskresikan dlm urin dlm 24 jam, sebaliknya pd
Hiperfungsi, lebih 80% obat dlm urin.

METABOLIC PROCESSES AND ISOTOP

CONCENTRATION
1. PENGGUNAAN RN UTK MENENTUKAN FUNGSI
JARINGAN TUBUH, misal: 131I untuk meneliti
FUNGSI KELENJAR TIROID y.i:
* KECEPATAN DEPOSISI IODIN DLM DIDALAM
KELENJAR
* TOTAL AKUMULASI IOD DIDALAM KELENJAR
DLM WAKTU TTT
*PELEPASAN HORMON TIROID

Thyroid clearance test: Kecepatan pelepasan

131I

dlm plasma.
Cara: Sejumlah kecil RN diberikan iv, selama 30
menit kecepatan up take diukur. Pada waktu
ekskresi 131I dlm urin diukur.
Iod yg dikumpulkan oleh tiroid/mnt dibagi dg
kons rata2 131I dlm plasma thyroid clearance
(ml) permenit.
Pd kead normal= 25ml/mnt, hipertiroid
250ml/mn, hipotiroid hanya 2 ml/mnt

5/1/2011

2. DETEKSI Pernicious anemia ( The Schilling test).

- DIGUNAKAN 60Co-LABELLED VITAMIN B12
- UTK MENGURANGI DOSIS RADIASI DIPAKAI 57Co DAN 58Co.
3. METABOLISME BESI.
- BESI PLASMA DILABEL DG 59Fe FERO SULFAT DIPAKAI UTK
EVALUASI KINETIKA METABOLISME BESI.

- PARAMETER YG DIUKUR:
- waktu paruh pengeluaran besi plasma,
- volume plasma,
- hematokrit,
- vol darah,
- besi pd sel darah merah,
- pengeluaran besi per harinya (kec perubahan dan transport
plasma besi),
- pembentukan Hb perhari,
- prosen penggantian Hb per hari

B. METODE RADIOESEI dalam

KEDOKTERAN
a. ANALISIS AKTIVASI:
1. Isotope dilution.
Digunakan untuk: PENGUKURAN VOL
DARAH.
Radioiodinated HAS (iv), setelah 10 mnt
aktivitas diukur kembali setelah dilakukan
pengenceran darah.
Vol sel darah merah dan plasma berhub dg vol
darah dg pheripheral venous hematocrit.
RBC (vol sel drh merah) juga dpt ditentukan dg
menggunakan sel yg dilabel dg 51Cr (natrium
kromat).

2. Analisis radiometrik.
a. Digunakan utk pengukuran konsentrasi
kalsium dlm serum dg lrt 14C-asam oksalat
berlebih
Sesudah terjd pengendapan Ca-oksalat,
radioaktivitas endapan diukur kembali.
b. 82Br digunakan utk penentuan a. sitrat
dalam serum.

P=non Rad, P*= radioaktif; P dan P* dpt berupa: viamin, obat, dll yg akan
ditentukan konsentrasinya, Q=zat pengikat dan dpt berupa ion-change
resin, protein, antibodi, dll yg sudah ttt konsentrasinya.
Jika kons P meningkat, maka PQ bertambah P* menurun, kons SubsP
dpt ditentukan sbg fungsi dr B (bound),F(free) atau T (total)
P= F(B,F) dan P= F (B,T) atau P= F (F,T).
Jika ikatan P dg B tak spesifik, substrat hrs dimurnikan seblm analisis.
RIA.
Immune system : suatu contoh Substrat yg memp derajat spesifisitas yg
sangat tinggi dan dikenal sbg RIA yi reaksi antigen-antibodi.
Substrat yg bukan antigenik hrs dikonjugasi dg protein disbt Hapten.

2. RADIO IMMUNO ASSAY (RIA)

Komponen utama: Obat yg dilabel dg RN yg sesuai, Antibodi
spesifik utk obat, Sampel yg dperiksa.
OBAT* + OBAT + ANTIBODI (AB) (OBAT)*-AB + OBAT-AB

Kompleks obat-antibodi hrs dipisahkan dr obat bebas pd tahap akhir

pemeriksaan. Jumlah antiserum (yg mengandung antibodi) dan obat
berlabel dipilih sedemikian shg RN terbagi sama antara fraksi yg
terikat dan yg bebas.

Obat dr sampel akan bersaing dg obat

berlabel pd posisi pengikatan pd antibodi.
Setelah inkubasi, fase terikat dan fase
bebas dipisahkan, Radioaktivitas masing-2
fase dpt diukur.
Setiap pemeriksaan harus ada standard,
dilakukan 2 x (duplo)

5/1/2011

METODA PEMISAHAN
1. ADSORPSI OBAT BEBAS:
Senyawa yg digunakan adl karbon dilapis dg dekstran,
butiran kertas saring berpori.
2. PENGENDAPAN KOMPLEKS OBAT-ANTIBODI:
Amonium sulfat, antibodi ganda, polietilen glikol.
3. IMOBILISASI ANTIBODI
- Obat-antibodi terikat sec kovalen pd dinding tabung
plastik atau partikel padat atau batang pengaduk. Setelah
inkubasi, kompleks obat-antibodi tetap terikat pd tabung
atau partikel.
- Obat bebas dpt dihilangkan, lalu fase padat dicuci.
- Obat berlabel yg terikat dpt dihitung jml nya sec langsung
mis dg mengukur emisi gama atau bila OIA dg cara
mengurai obat berlabel yg terikat, larutkan kembali dlm lrt
kemudian diukur signal optiknya (Lihat gambar)

4. PARTIKEL MAGNETIK
- Pemisahan dpt dicapai menggunakan Ab
terikat pd partikel magnetik.
- Metode ini hanya dpt digunakan pd
fluoroimmunoassay.
- Dipakai 1,1-karbonilimidazol untuk
mengkopel/mengikat antibodi pada
selulosa mikrokristalin.

2. RADIO ISOTOP YG DIPAKAI DLM RIA

RN YG SERING DIPAKAI :

TRITIUM (3H), KARBON-14 (14C) DAN

IOD-125 (125I).
PRODUKSI OBAT DG 3H DAN 14C DPT DILAKUKAN
SEC SINTESA BIASA, UNTUK TRITIUM DPT JUGA DG
HIDROGENASI MOL ATAU PERTUKARAN DG AIR
BERLABEL (T2O).
PEMERIKSAAN SB TRITIUM LEBIH UMUM DRPD C14, KRN TRITIUM LEBIH SENSITIF.
PADA PARAQUAT DILABEL DG C-14 KRN SANGAT
BERGUNA PD KASUS DARURAT, DITERIMA
KETELITIANNYA WALAU WAKTU PENGHITUNGAN
AMAT PENDEK ( 1 MENIT).

3. PENGUKURAN RADIO AKTIF

125I

BIASA DIMASUKKAN DLM MOL PD POSISI

ORTO THD GUGUS FENOL ATAU JIKA
KESULITAN MEMAKAI DERIVAT, MISAL:
DIGOKSIN DIGANTI DIGOKSIN-TIROSIN (
IOD MASUK PD POSISI ORTO DR GGS
TIROSIL)
IODINASI DILAKUKAN DLM LRT NaI
RADIOAKTIF DLM LRT DAPAR FOSFAT YG
MENGANDUNG KLORAMINA. OBAT
BERLABEL DIPISAHKAN DR CAMPURAN DG
GEL FILTRASI, KROMATOGRAFI ADSORPSI
ATAU ELEKTROFORESIS.

A. LIQUID SCINTILLATION RADIOAKTIF

Radioisotop diletakkan pd campuran sintilasi, kmd
emisi cahaya tampak diukur. Vial-2 baru berisi
campuran sintilasi diperlukan utk tiap pengukuran.
B. -COUNTING
Umumnya dilakukan pd campuran sintilasi kristal.
Vial berisi RN diletakkan langsung pd alat hitung
(COUNTER) dan dihitung untuk periode waktu
tertentu.
Radiasi hanya bisa diukur dg sintilasi cair,
sedangkan radiasi dpt diukur baik dengan sintilasi
kristal maupun cair.

5/1/2011

KEUNTUNGAN PENGGUNAAN EMITTER

PENGUKURAN SINAR DG SINTILASI-KRISTAL LEBIH

MURAH & CEPAT
2.
EKSTRAKSI DAN PEMURNIAN SAMPEL MENGANDUNG IOD
TIDAK DIPERLUKAN, KRN SNR DPT MENEMBUS LRT
BERWARNA DAN JARINGAN HALUS/LEMBUT DG
KEHILANGAN ENERGI YG DPT DIABAIKAN (PD PEMANCAR
LRT SINTILASI HRS JERNIH).
3.
AKTIVITAS SPES LEBIH TINGGI DPT DIPEROLEH DG LABEL
125I SHG WAKTU PENGHITUNGAN DPT DIKURANGI MISAL DR
20 MNT MENJADI 1 MNT.
NOTE:
- AKTIVITAS SPESIFIK= RADIOAKTIVITAS PER UNIT MASSA OBAT
MISALNYA MBq/g dimana 1 Bq= 1 disintegrasi/detik = 2,7 x 10 11 Ci.
- Sebanyak 5000 atom utk 14C, 100 atom dr 3H dan 1 atom dr 125I
dibutuhkan utk menghasilkan jumlah disintegrasi/ menit.
Perbedaan ini krn beda waktu paruhnya.
1.

KEUNTUNGAN PENGGUNAAN PEMANCAR :

1. PENGGUNAAN LEBIH LAMA
2. BAHAYA RADIASI DG AKTIV SPES RENDAH
ADALAH MINIMAL.
3. 3H DAN 14C DPT BERCAMPUR DLM MOL OBAT
TANPA MENGUBAH SUSUNAN MOL AKAN
MENGIKAT ANTIBODI DG CARA YG SAMA DG
OBAT TANPA LABEL
4. RN DPT MASUK DLM MOL SELAMA PRODUKSI,
MENCEGAH PENGUBAHAN LANJUT YG DPT
MERUSAK.

ENZYME IMMUNO ASSAY (EIA)

OPTICAL IMMUNO ASSAY (OIA)

KEUNTUNGAN OIA dibanding RIA

- PEREAKSI YG DIGUNAKAN STABIL
- PEMERIKSAAN YG HOMOGEN MUDAH DILAKUKAN
- BERBAGAI LABEL DPT DIGUNAKAN: enzim, fluoroscen,
chemiluminescent.
- SHEF LIFE DR SB TAK TERBATAS
- WAKTU PENGUKURAN PENDEK
- AUTOMATISASI PENUH.
- TAK DIPERLUKAN PEMISAHAN
- TAK DIPERLUKAN TINDAK PENGAMANAN.
- KETEPATAN YG TINGGI
- SENSITIVITAS 1 ng/ml (RIA 1pg/ml)
UNTUK SENSITIVITAS TINGGI: DILAKUKAN PEMISAHAN
ANTARA OBAT TERIKAT DG OBAT BEBAS

KOMPONEN UTAMA:
- 1. OBAT BERLABEL DG ENZIM SPESIFIK
- 2. ANTIBODI SPESIFIK BAGI OBAT TSB.
- 3. SUBSTRAT YG MAMPU MENGHASILKAN SINAR
OPTIK YG DAPAT
DIUKUR , JIKA DIKATALISIS
- 4. SAMPEL YG DIPERIKSA
- JIKA OBAT YG DILABEL DG ENZIM DIIKAT
ANTIBODI, AKTIVITAS ENZIM DIHALANGI ATAU
DIREDUKSI
- OBAT DLM SAMPEL MELEPAS SEBAG OBAT
BERLABEL ENZIM DR ANTIBODI MENGAKTIFKAN
ENZIM BEREAKSI DG SUBSTRAT MENGUBAH
SFT OPTIKNYA (SERAPAN UV, KEKERUHAN DSB)
SEBANDING DG AKTIV ENZIM

- PERUB AKTIFITAS ENZIM DAN PERUB

SIGNAL OPTIK SEBANDING DG JUML OBAT
YG DITAMBAHKAN PD KOMPLEKS OBATENZIM-ANTIBODI.
- SIGNAL OPTIK DIPERBESAR KRN
PELEPASAN ENZIM MENGKATALISIS
KONVERSI PERUB SEJUMLAH SUBSTRAT
- EIA DPT DGUNK PD PENGUKURAN
KINETIKA KECEP PERUB SUBSTRAT

5/1/2011

FLUORO IMMUNO ASSAY ( FIA )

TEKNIK IMUNOESEI YG MENGGUNAKAN
PERUBAHAN SIFAT FLUORESENSI
MOLEKUL UTK MENETAPKAN KONSENT
OBAT
PELABELAN OBAT DG MOL TSB MENCEGAH
BAHAYA BEKERJA DG RN (AMAN).
FIA MEMBERIKAN SENSITIVITAS YG LEBIH
BAIK DIBANDING EIA.
FIA DPT HOMOGEN MAUPUN HETEROGEN.

PEMILIHAN fluorophore MEMP EFEK YG

MEMPENGARUHI SENSITIVITAS
PEMERIKSAAN DAN TERGANTUNG DR
KONDISI PEMERIKSAAN.
Fluorohore YG IDEAL HRS MEMILIKI :
1. PERPINDAHAN Stokes YG BESAR,
2. MUDAH DIBEDAKAN DG fluorofor
ENDOGEN
3. MAMPU MENGIKAT DG MUDAH OBAT

HOMOGENOUS FLUOROIMMUNOASSAY (HOFIA)

Digunakan enzim utk melepaskan fluorofor

dr mol obat yg dilabel.
Diperlukan :
1. Obat dilabel dg fluorogen -galaktosilumbeliferon (substrat dr enzim).
2. Antibodi spesifik untuk obat
3. Enzim -galaktosidase
4. sampel yg akan diperiksa.

FLUOROSENCE POLARIZATION IMMUNOASSAY (FPIA)

Mekanisme : lihat Gambar.

Enzim tak dapat mempengaruhi obat
berlabel krn terikat dg antibodi.
Obat dlm sampel bersaing dg obat
berlabel utk mengikat antibodi, obat
berlabel yg bebas akan akan dihidrolisis
oleh enzim.
Intensitas fluorosensi sebanding dg jumlah
obat yg ada dlm sampel

Memanfaatkan perbedaan rotasi dr obat

berlabel yg terikat dan obat berlabel yg bebas.
Sinar Polarisasi pd mol berlabel fluorofor
menghasilkan emisi dr cahaya bidang
meningkatkan intensitas emisi cahaya
polarisasi.
Apabila obat berlabel berotasi selama waktu
antara absorbsi dan emisi cahaya, jumlah
cahaya polarisasi yg diemisikan utk tiap bidang
akan berkurang. Ikatan mol ke antibodi
mengurangi rotasi dan akan meningkatkan
intensitas emisi cahaya polarisasi pd bidang
tertentu.

5/1/2011

HETEROGENOUS FLUOROIMMUOASSAY
(HEFIA)
Pemeriksaan ini memerlukan : alat polarisasi yg
terhubung dg Fluorometer ( tdr dr filter polarisasi cairkristal yg mampu mengukur cahaya yg diemisikan pd 2
bidang yg letaknya 900 satu sama lain.
Polarisasi = chy polarisasi vertikal - chy polarisasi
horizontal /
chy polarisasi vertikal + chy polarisasi horizontal.

Polarisasi berbanding langsung dg jumlah obat berlabel

yg terikat, dan berbanding terbalik dg jumlah obat yg
ada.
Untuk mengatasi adanya gangguan ltr belakang dr
obat lain dan mol enzim endogen, hrs dipilih Kondisi
pemeriksaan yg hati2 dan sampel biologis yg encer.

MENGGUNAKAN PEMERIKSAAN PARTIKEL

MAGNETIK (gambar
MENGGUNAKAN OBAT BERLABEL
fluorophore , SEBUAH ANTIBODI TERIKAT PD
PARTIKEL MAGNETIK DAN SAMPEL YG
AKAN DIPERIKSA.
OBAT DLM SAMPEL AKAN BERSAING DG
OBAT BERLABEL UTK MENGIKAT ANTIBODI.
OBAT YG TERIKAT ANTIBODI AKAN
DIPISAHKAN DR OBAT BEBAS
MENGGUNAKAN MEDAN MAGNET.

.. HEFIA

OBAT BEBAS (berlabel dan yg tidak berlabel)

DLM CAIRAN SUPERNATAN DIDEKANTASI
LALU DIBUANG.
OBAT DIENCERKAN DG BUFER,
DISUSPENSIKAN KEMBALI UTK
MEMISAHKAN OBAT TERIKAT DR ATIBODI,
ANTIBODI KMD DISEDIMENTASI MENGG
MEDAN MAGNET DAN FLUORESENSI
CAIRAN SUPERNATAN DITETAPKAN.
INTENSITAS FLUOROSENSI BERBANDING
TERBALIK DG JUMLAH OBAT DLM SAMPEL.

PEMISAHAN OBAT TERIKAT DAN OBAT

BEBAS MENGGUNAKAN ANTIBODI YG
TERIKAT PD PARTIKEL MAGNETIK.
UNTUK MENGHINDARI PROSES
SENTRIFUGASI AKAN LEBIH CEPAT SERTA
DPT DLAKUKAN PENGUKURAN LANGSUNG
DR FLUOROSENSI DLM CAIRAN
SUPERNATAN (CAIRAN INDUK) DG CARA
SEDIMENTASI ANTIBODI PD DASAR
TABUNG. PERCOBAAN DG MENGGUNAKAN
MEDAN MAGNET.
CARA PENGENDAPAN LAIN: PENGENDAPAN
DG AMONIUM SULFAT DAN PENGIKATAN
ANTIBODI KE BUTIR2 SELULOSE

KEUNTUNGAN FIA:
1. tersedia banyak tipe pemeriksaan dg fluorophore
berbeda panj gelomb eksitasi dan emisi,
2. alat sederhana,
3. ketepatan pengukuran signal tinggi,
4. sensitivitas tinggi,
5. pereaksi murah dan stabil,
6. dpt digunakan utk sistem homogen dan heterogen.
KELEMAHAN FIA:
Gangguan dr fluorophore endogen,
Penurunan signal,
Ikatan yg tidak spesifik

5/1/2011

LUMINESCENE IMMUNOASSAY (LIA)

IMMUNO ASSAY YG TELAH DIKEMBANGKAN MENGGUNAKAN
OBAT DILABEL DG SENYAWA YG MEMANCARKAN CAHAYA (
LUMINESENSI) JIKA DIAKTIFKAN.
PRINSIP DASAR SAMA DG FLUOROIMMUNO ASSAY.
PENGGUNAAN LABEL LUMINESEN ADA KEUNTUNGANNYA,yi:
TIDAK PERLU CAHAYA PD SISTEM SHG MENINGKATKAN
SENSITIVITAS.
CAHAYA YG DIHASILKAN SEC KIMIA OLEH MOL-2 SPT
LUMINOL DIIKUTI OLEH PERLAKUAN DG PEROKSIDA ATAU
SEC ENZIMATIK DR LUSIFERON SETELAH REAKSI DG
LUSIFERASE.
ADA 2 TIPE REAKSI: KOPLING MOL LUMINESEN PD OBAT YG
SAMA DG PROSEDUR CARA PELABELAN DG FLUORESEN.

SOAL-SOAL.
1. Apa yg disebut kontrol kualitas dan mengapa perlu dilakukan
untuk sediaan radiofarmaka.
2. Apa definisi Kemurnian Radionuklida, beri contoh. Apakah 99Mo
dalam seny berlabel (SB) 99mTc masuk dlm ketidak murnian RN atau
Radiokimia?. Terangkan bagaimana ketidak murnian RN dpt
diestimasi.
3. Apa definisi ketidakmurnian Radiokimia dr RF, dr mana asal
ketidak murnian itu?. Ceritakan metoda utk menentukan ketidak
murnian radiokimia dr RF.
4. Ada 3 jenis radioaktif Seny Berlabel 99mTc.?. Dari mana asal
mereka.?.
5. Terangkan cara mendeteksi RF dg 99mTc memakai metoda ITLC
6. Terangkan metoda utk sterilisasi dan tes kesterilan.
7. Apa pirogen dan bgmn simtomnya.?. Terangkan tes dg kelinci
dan tes LAL utk pirogen.
8. Apa LD50,30 dr suatu RF, dan bgmn cara menentukan sec
kuantitatif.?.