ZAT WARNA

& PEWARNAAN

MIKROTEKNIK HEWAN 1
 ZAT WARNA
 SENYAWA ORGANIK YG KOMPLEKS
 MEMPUNYAI PEMBAWAAN KHUSUS
 YAKNI, WARNA YG DAPAT
DIPERTAHANKAN DI DALAM
JARINGAN
 ZAT WARNA TERDIRI ATAS
Auxochrome & Chromophore

2
 ZAT WARNA
 CHROMOPHERE
senyawa kimia yg memberikan warna (ttp.
Bukanlah mrpk zat warna)
bila dicelup ke dalam pelarut chromophere
jaringan kembali tidak berwarna

 AUXOCHROME
chromophore a/ dapat tetap terikat di dalam
jaringan bila ada radikel yg mengikatnyaradikel
auxochrome yg paling pentingNH2 & OH

3
STRUKTUR SEL & AFINITASNYA
THD ZAT WARNA
 TERNYATA BHW MATERI 2 PENYUSUN SEL
MEMP. SIFAT ASAM / BASA YG BERBEDA-
BEDA
 HAL INI MENYEBABKAN REAKSI
PENYERAPAN ZAT WARNA BERBEDA
 KRN ZAT WARNA SENDIRI MEMP. SIFAT
ASAM / BASA YG BERBEDA
Mitokhondria (sifat asam) MENYERAP ZAT
WARNA YG BERSIFAT BASA dan
sebaliknya
4
 PENGGOLONGAN ZAT
WARNA
 MENURUT SIFAT : z.w. asam & z.w. basa
 MENURUT ASAL : z.w.alami & z.w. sintesis
 MENURUT KEMAMPUAN MEWARNAI
JARINGAN : z.w. substantif & z.w. ajective
 MENURUT STRUKTUR KIMIA :
** z.w. triphenyl methane
** z.w. xanthene
** z.w. thiazine
** z.w. azine
** z.w. azo
** z.w. nitro 5
 PENGGOLONGAN CARA
PEWARNAAN
 BDSK JUMLAH ZAT YG DGNK
pewarnaan tunggal; pewarnaan rangkap
dua; p. rangkap tiga; p. rangkap empat
 BDSK PENGARUH ZAT WARNA THD
BAHAN pengaruh EFEKTIF; pengaruh
DIFFUS
 BDSK CARA PEMBERIAN Z.W
simultan; suksedan
 BDSK TEBAL TIPIS Z.W pewarnaan
progressif; p. regressif
6
 KLASIFIKASI ZAT WARNA
 MENURUT SIFAT
(1) z.w. ASAM : garam-garam dr asam-
asam pembawa warna dg radikel basa yg
tidak berwarnasebag.besar adl garm-
garam Na/Potassium (K)
Exp : Acid Fuchsin, Eosin dll

(2) z.w. BASA : sebagian besar chloride /

sulphate basa organik
Exp : Hematoxylin; Basic fuchsin dll
7
 KLASIFIKASI ZAT WARNA
 BDSK ASAL
(1) z.w. ALAMI : z.w. yg diperoleh dr
tumbuhan/hewan
Exp :Hematoxylin Hematoxylon
camphechianum, L (1918)
Carmineberasal dr hewan Coccus cacti
(hanya yg betina)/insecta; hidup pd tanaman
cactusOpuntia coccinelifera

(2) z.w. SINTESIS : z.w. yg dibuat di pabrik

Exp : basic fuchsin, dibuat dari Anilline yg
dicampur dg paratoluidin 8
 MENURUT
KEMAMPUAN MEWARNA
JARINGAN
 z.w. SUBSTANTIF
z.w.apabila diberikan pd jaringan dapat
langsung mewarnai dg baik
Exp : Neutral Red, Jannus Green B, dll
u/ sel-sel hidup (exp. Epitel mukosa pipi)
 z.w. AJECTIVE
z.w. yg dpt mewarnai jaringan dg baik bila
diberikan pertolongan suatu MORDANT,
substansi yg dpt memfiksir / mengikat z.w.
sebelumnya yg diberikan pd jaringan yg
diwarnai
9
bdsk STRUKTUR KIMIA
 Golongan TRIPHENYL METHANE
-bersifat basa : basic fuchsin, crystal
violet; methyl green; Anillin blue
-bersifat asam : acid fuchsin; light
green; fast green; methyline blue
-basa mewarnai khromatin
-asam mewarnai sitoplasma

10
bdsk STRUKTUR KIMIA
 Golongan XANTHENE
Exp : Eosin-Ydgnk sbg counterstain
biasanya u/hematoxylin Ehrlich & Meyer
-sifat asammewarnai sitoplasma
-konsentrasi lemah (0,1%), bisa aquosa
maupun spirituosabila kuat menghilangkan
warna basa sebelumnya
-mrpk zat warna fluorescent
11
 bdsk STRUKTUR KIMIA
 Golongan THIAZINE
Exp : Thionine (awalan Thi menunjuk adanya sulphur)
- dalam industri tekstilmewarna katuntanin sbg
mordant
-dalam sitologimewarnai khromatin
Exp : Toluidin bluebersifat metachromatis, bila u/
mewarnai jaringana/ menimbulkan bbrp macam warna
pd jaringan tersebut
-chromatin biru; mucus; substansi dasar dr kartilago, &
granula Mast cellaspek merah

12
bdsk STRUKTUR KIMIA
 Lanjutan golongan THIAZINE
 Exp : Methyline blue
basapewarna darah Eosin
Methylin blue (pewarna May
Gruunwald)
-sifat Polychromatis z.w. yg dapat
berubah warnanya menjadi warna lain
secara spontan

13
bdsk STRUKTUR KIMIA
 Golongan AZINE
Exp :
-safraninu/ mewarnai khromatin, trtm
kromosom
-Neutral redu/ mempelajari sel hidupdaya
penetrasi cepat, mudah & sgt toksik
-Jannus green-Bz.w.vital, afinitas besar thd
mitokhondria sel hidup

14
bdsk STRUKTUR KIMIA
 Golongan A Z O
Exp :
- Orange-G sifat asam, sbg counterstain /
imbanganorange-G, chromatophore 2 R; Xylidine
ponceau; Bourdeaux red (semua mono azo); &
Biebrich Scarlet (dis azo)
- Trypan blue, trypan red, vital red & Tris azo
(chlorazol black – E) sgt baik u/ mempelajari sel-
sel dr sistem Reticulo endothelial)
- yang sifat basa : Jannus green-B & Bismarck
Brown-Y

15
bdsk STRUKTUR KIMIA

 Golongan NITRO
Exp : Picric acidselain fungsi sbg z.w.
juga sbg fiksatif / dan diferensiator
juga sbg counterstain u/ z.w. carmine

16
Penggolongan CARA PEWARNAAN

 BDSK JUMLAH ZAT YG DGNK

a. Pewarna Tunggal
Exp : Gentiane violet u/ melihat adanya
polysacharid, Sulphate ester & hyaluronic
acid
(metode Kiyoshi Harada (Gurr, 1960)

b. Pewarna Rangkap dua

Exp : Ehrlich’s Hematoxylin-Eosin
Harris Hematoxylin-Eosin
17
Penggolongan CARA PEWARNAAN

 Pewarnaan Rangkap Tiga

Exp : Mallory Triple Stain (Orange – G;
Acid Fuchsin; Anniline Blue)
ditambah mordant PMA (Phospho
Molibdic Acid)/PTA, Phospho Tuncstic
Acid
 Pewarnaan Rangkap empat
jarang dgnk dalam jaringan
Kornhauser’s Quadraple Stain
18
Bdsk PENGARUH Z.W. THD
BAHAN YG DIWARNAI
 PEWARNAAN EFEKTIF
z.w.mempengaruhi satu / bbrp bagian
jaringan saja / salah satu bagian dr sel
Exp : Toluidin Bluejaringan mesenterium,
terpulas jelasgranula Mast cell nya
 PEWARNAAN DIFFUS
z.w. memulas seluruh jaringan, hampir semua
z.w. diffus sifatnya
Exp : Eosinmewarnai seluruh
sel/jaringaninti & sitoplasmanya; hanya
penyerapannya sj yg tdk sama
19
 Bdsk CARA PEMBERIAN
Z.W
 PEWARNAAN SIMULTAN
dua macam z.w. / lebih dbrk scr bersama-sama dlm
satu waktu
Exp : Mallory tdd Orange – G & Anniline blue aksi
keduanya berlangsung sama-sama dalam satu waktu

 PEWARNAAN SUKSEDAN
Exp : Hematoxylin – Eosinbergantian satu persatu
diberikanada masa pencucian sendiri-sendiri

20
Bdsk TEBAL TIPIS
PEMBERIAN
 PEWARNAAN PROGRESSIF
pemberian z.w. pd jaringan sangat
tipisshg warna tepat, diperoleh
setelah menggunakan waktu yg lama

 PERWARNAAN REGRESSIF
pemberian z.w. sekalian tebalsedikit
demi sedikit ditipiskan, mgnk
defferensiator dg proses diferensiasi
21