1.

Uvod i pozadina

Tipian biosenzor dizajn ukljuuje tri glavna dijela: elemente meta priznanje,
signalnih elemenata, te pojaavanje signala elemente (nije uvijek potrebno)
(McNaught et al 1997).. Meu ove tri komponente, cilj rec-raspoznavanja element
je klju za kontakt, otkriti i prepoznati korisne medicinske signale za daljnju
analizu i dijagnozu. to je jo vanije, pomou funkcionalne biomaterijala kao
elementi za prepoznavanje poboljava osjetljivost, selektivnost, stabilnost i
ivotni vijek senzora. Danas, bioloki inenjering je stvorio razne biomaterijala za
primjenu senzora. Takvi materijali mogu biti prirodne bioloke komponente (kao
to su tkiva, mikroorganizama, organela, stanine receptore, enzimi, antitijela, te
nukleinske kiseline) (Xia et al 2010. godine;, McLaughlin i sur 2010. godine;,. Guo
et al 2010) ili bioloki izvedeni materijali (tzv biomimetike tvari) (Lin et al 2010.;
Huang et al. 2010. godine; Bi i sur. 2006. godine). Na primjer,
dezoksiribonukleinske kiseline (DNK) ili materijala DNA-derived primaju
intenzivnu panju biosenzora aplikacija.

Budui da sama DNK je vrlo selektivan u sparivanja baza interakcija izmeu

komplementarnih sljedova i DNK sadri genetske upute koji se koriste u razvoju i
funkcioniranju svih poznatih ivih organizama, oni su vrijedni za dijagnozu i da su
relativno lako biti posebno otkriven. Kao primjer, jednolanana DNA je
imobiliziran na biosenzornom sonde, gdje se priznate i hibridiziran sa ciljne DNA
sparivanja baza interakciji-ma povrini za oslobaanje signala, a takvi signali su
zabiljeeni i analizirani za dijagnoze, kao to je prikazano u sl. 1. signal moe biti
prijavljen optiki, mehaniki ili elektrokemijski. Na primjer, u optikom metodom,
zlatne nanoestice modificiran jednolanane mijenjaju boju DNA u hibridizaciji
ciljne DNA i imobilizirana DNA (Storhoff et al., 1998). Drugi nairoko koristi
metoda ukljuuje elektrokemijsku detekciju. Zbog elektrokemijskih reakcija (kao
to je oksidacija i redukcija) sadri postupak prebacivanja elektron, takvi postupci
rezultiraju elektrinih signala. Takvi signali mogu se otkriti izravno spremiti skupe
prijenosa signala SYS-tem i poveati osjetljivost dijagnoze. Postoje dva
mehanizma za detekciju: jedno je hibridizacija na bazi detekcija DNA kao to je
gore navedeno, a drugi je enzimatski bazi detekcija DNA. Za enzimsko bazi
otkrivanja DNA, enzime DNA vezane i zatim se u bioloki sustav za prepoznavanje
i promjene u koliini od ovih enzima u korelaciji sa specifinim biolokim
postupcima (kao to je brisanje ili fuzijom ciljne DNA). Na primjer, kada senzor
doivljava specifian proces, razinu enzima bilo poveava ili smanjuje, to je
rezultiralo pojaanje ili smanjenje signala. Postupak Enzimska je visoko specifina
za DNA sekvenciju, to ga ini idealnim za detekciju sparenih, kao to je
prikazano na slici. 2 (Wei et al. 2010).
Tradicionalno, biosenzori DNK bazi ne interakciju s biolokom SYS-va tijekom
procesa otkrivanja i poznati su kao "pasivne" senzora. Obino se koriste za
otkrivanje ciljne molekule u uzorcima prikupljenim od domaina bio-logiki
sustava. Meutim, u kirurkim aplikacija, esto je teko prikupiti uzorke iz
provjerenih organa ili tkiva. Posebno, kirurzi ponekad je potrebno pratiti ciljnih
organa ili tkiva za dijagnozu bolesti ili procijeniti uinkovitost operacije. Na ovaj
nain, "pasivni" DNA-based senzori ne mogu zadovoljiti potrebe

surgicaldiagnosis. Dakle, roman tehnika u nastajanju, in situ biosen-varijablama,

razvijen je za razliite kirurke aplikacije (Leegsma-Vogt i sur 2004;. Wilkins i
Atanasov 1996). Na primjer, biosenzor tehnika, nazvana elektromiografija,
koritena je za analizu i dijagnozu miia ili ivaca fun-ma unutar uvjeta za tijelo
(Hoch i Zieve 2008). Tanke Elektrode su smjetene u mekim tkivima, kako bi se
analizirati i snimanje elektrine aktivnosti u miiima. Drugo podruje gdje
biosenzori su nairoko koristi u kirurkoj dijagnoza je orthope-dics. Telemetrijski
ureaj za ortopedskih implantata je izmiljen za dijagnozu "stvarnom vremenu".
Tipino, telemetrijski sustav s malim implantira trans predajnik koristi beinu
komunikaciju s vanjskim raunalnom sustavu. Podaci se prenose na visoke
frekvencije ili radio-frekvencija impulsa, kao to je prikazano na slici. 3 (Drr i sur
1999;. Graichen i Bergmann 1991; Graichen et al 1999).. Uglavnom, poluvodi
mjernih instrumenata su smjeteni na unutarnjem obodu vrata ortopedskih
implantata upljine. Mali okvirnu antenu izvan implantata (pacemaker-se napaja
preko i tvori jednu antenu petlje izvan Ti na jednom kraju implantata) se koristi za
prijenos radio-frekvencija impulsa na antenu vanjsku primatelja. Radiofrekvencija primatelj vanjski ureaj (Teleport, kao to je prikazano na slici. 3) je
spojen na mikro analizu izmjerenih napona. Konano, raunalni softver
interpretira podatke poslane od mikrokontrolera za prikaz komponenti uitati u
realnom vremenu. Osim toga, istraivai su usmjereni na koritenje Biosenzori
DNA-based brzo otkriti tumorske stanice ili markera raka u krvi ili tkiva (de la
Escosura-Muiz i sur 2009;. Henry et al 2009).. Najvanije, implantirati biosenzor
je ve devel-razvijene za dijagnozu raka u tkivima (Daniel et al. 2009).

Sl. 2 elektrokemijski senzori temeljeni DNA nanotehnologija za protein analita. (A)

Izravna detekcija nakon procesa enzimske specifine DNA. (B) Detekcija
extralabeled reporter nakon SPE-potre- DNA enzimatskim postupkom
(prilagoena i ponovo nacrtano s Wei i sur. (2010))
Meutim, kako biti uspjean biosenzor za kirurku dijagnostiku, glavni izazov je
priznanje meta materijal senzora. Prije svega, dijagnoza sredstva (na primjer,
DNA) mora biti imobiliziran na biosenzora s funkciju i stabilnosti. Ovisno o
materijalu aplikacija i senzora, razliiti pristupi su razvijeni sintetizirati i
funkcionaliziranje DNA na biosenzora.

Sl. 3. Blok dijagram implantira telemetrijskom sistemu za mjerenje optereenja

implantata (prilagoena iz Graichen et al., (2007))

794 DNA-based Nanotehnologija biosenzori za kirurgiju Dijagnoza

Ova tema je naglaeno u sekte. 2. ovog poglavlja. Osim toga, za implantaciju

biosenzora u ambulantama, kontinuirana briga je biokompatibilnost od senzora
materijala (Vaddiraju i sur. 2010.). Bio inkompatibilan senzora moe rezultirati u
aktivaciji imunolokog sustava, kroninu upalu i formiranja granulacijskog tkiva.
Takve reakcije dovesti do oteenja tkiva domaina, kao i uvelike smanjiti vijek
trajanja i tonost senzora. Da bi prevladali taj jaz, znanstvenici namjeravaju

spojiti nanotehnologiju s Bio-ininjering znanja za proizvodnju novih materijala

izvedeno iz DNA s izvrsnim biokompatibilnosti i multifunkcionalnosti. Ova tema je
dis-razmatralo u sekte. 3. Dakle, sljedee poglavlje je ispunjen s dvije vrste mateMaterijali za biosenzora primjene: prirodna DNA i materijala izvedeno iz DNA,
istiui nain za borbu protiv aktualnih izazova i ilustrirajui buduim izgledima
DNK bazi nanotehnologije biosenzora za kirurke aplikacije.

2. Prirodni DNA za Biosenzori

DNA je poznat kao vanog genetskog materijala za sve organizme, jer je u stanju
kriati sa svojim besplatne sekvenci u vrlo selektivan nain; to je ujedno i
prednost DNA-based biosenzora. Zbog raznih kombinacija etiri razliita
nukleotida, postoje brojni sljedovi DNA. Za funkcionaliziranje DNA za biosenzora
aplikacija, dva koraka su bitne: sinteza i imobilizacija DNK. Kasnije u ovom
poglavlju, i koraci su detaljni.

2.1 Sinteza DNK

Za upravljanje strukturu (sekvenci) definiranih nukleinskih kiselina koji se koriste

u biosenzora, nukleinske kiseline se mogu dobiti cijepanjem veze dueg
segmentima, ali su sada uobiajeno sintetizirati kemijski polimerizacije
pojedinanih nucle-oktreotidom prekursora. Sinteza kemijskih oligonukleotid se
provodi od 3 do 5 smjeru, suprotno enzimskoj sintezi. Sinteza poinje od
vrstog sup-port koji se zatim obrauje korak-po-korak dodavanja nukleotidnih
ostataka do 5 -kraj za produenje oligonukleotidne lanca dok se eljeni slijed je
bio sagraen. Ovdje ope DNA / RNA synthesizer se uzeti kao primjer. Kruti nosai
su nukleozida fosforamidat (polazni nukleotidnog ostatka) spojen na staklo s
kontroliranim pora preko vezne ugljika; oni kraj gore sa dimetiltriptamin (DMT),
skupina koja je bitna za lanac istezanja. Slijedei dodatak svake nukleotidne
ostatak se naziva sintetikim ciklus (Sl. 4), koji se sastoji od etiri osnovna
reakcija:

Jedan korak, deblokiranje podataka: zatitna skupina labilne kiseline DMT ukloni s
kiselinom, kao to je trikloroctena kiselina ili dikloroctena kiselina, u inertnom
otapalu (dichlo-romethane ili toluenu) i ispere se, to je rezultiralo u 5 slobodna
hidroksilna skupina spreman spojka.
Drugi korak, vezanja: nukleozid fosforamidit pomijea s kiselim katalizatorom
azola, 1H-tetrazol, 4,5-dicyanoimidazole, 2-ethylthiotetrazole ili druge aktivatori,
dovede u kontakt s oligonukleotidnom prekursora ija 5 hidroksilne skupine
nezatien. Reakcija spajanja omoguava spajanje ulaznih nukleozida
fosforamidat do oligonukleotidnih prekursore koji su vezani na vrstu podlogu,
rezultiralo je jedan nukleotidni izduena fosfit triestera. To povezivanje zahtijeva
vrlo bezvodnim uvjetima i esto deava u bezvodnom acetonitrilu, to je inertno
polarno otapalo. Konani pranje uklanja neprikljuene reagensa i nusproizvoda.

Trei korak, pokrovni sloj: nakon reakcije povezivanja, jo uvijek postoji mali dio
vrste potpore vezanog 5 hidroksilnih skupina nazonih. Kako bi se sprijeilo
izduivanje neeljenih sekvenci, te besplatne 5 hidroksilne skupine trebaju biti
trajno blokiran. Ova reakcija se obavlja tretiranjem vrstog nosaa sa octenim
anhidridom / piridinom u tetrahidrofuranu (THF) da bi se acetilacija produkata
hidroksilne skupine.

etvrti korak, oksidacija: fosfit triester generirana u stupnju vezivanja koji nije
Natu-skupu oblikovan s ogranienom stabilnosti uz uvjet sljedei
oligonukleotidnom istezanja. Oksidacija se postie obradom kruti nosa vezani
oligonucle-oktreotidom s jodnom vodom i piridinom u THF. Rezultat je da se
transformirati fosfit tromjeseja u fosfatni tromjeseja ija oksidacijsko stanje je
isti kao i nativni DNA.

Na kraju, nakon koraka sinteze i korake proiavanja, dobiva se namijenjen slijed

DNA.

Sl. 4 Ope DNA sintetiki ciklus

814 DNA-based Nanotehnologija biosenzori za kirurgiju Dijagnoza

2.2 Imobilizacija DNK

Tako, imobilizirati DNA u razliitim materijalima je kljuni parametar za

proizvodnju DNA biosenzora. Materijali koji podravaju sekvence DNA u
biosenzora esto nazivaju pretvornika. Trenutno, postoje tri osnovne vrste
imobilizacije koje su u irokoj uporabi: adsorpcija, avidin-biotin kompleksiranja i
kovalentno vezanje (Pividori et al 2000)..

2.2.1 DNA Imobilizacija adsorpcijom

Adsorpcija je najuobiajenija metoda meu ta tri gore spomenute imobilizirati

nukleinskih kiselina na sonde povrine. Ne zahtijeva reagense ili posebnih
sljedova nukleinskih kiselina, a afinitet izmeu DNA i sonde povrine potrebno.
Pogodni materijali za ovu vrstu imobilizacije su polistiren, metalnih oksida (kao
to su aluminijev oksid, paladij oksid), najlonske MEM-branes i ugljik / ugljik paste
pretvornika (Wang et al. 1996a, b, c).

Elektrokemijski adsorpcija na lijepljenje povrina ugljika je jedan od najeih

naina imobilizacije DNA. Postoji mnogo izvjetaja za izmjenu ili jednolananih
DNA (ssDNA) ili dvaput zavojnice DNA (dsDNA) preko potencijal primjenjuje na
ugljen paste elektroda ili screen tiskane ugljinog trakastih elektroda (Wang et al
1996b, c;. Wang et al. 1997a, b). Za ssDNA, napon (nasuprot Ag / AgCl referentna
elektroda) na sonde ugljinog primjenjuje se za par minuta kao prethodne
obrade. Ovom prethodnom obradom poveava hrapavost te hidrofilnost povrine
ugljika (Wang et al 1996a;,. Wang et al 1997b). Nakon toga, elektrokemijska
adsorpcija ssDNA se provodi mijeanjem otopine na ugljenu povrinama na
potencijal za odreeno vrijeme koje ovisi io DNA sekvence i na koncentracija-tion.
Pozitivan naboj na ugljika povrina e poboljati stabilnost DNA sonde Immobilized preko elektrostatskog privlaenja. U isto vrijeme, kao elektrostatskog
privlaenja poveava usmjerenje poravnanja DNA sonde, tako da se negativni
nabijene hidrofilni eer-fosfatne okosnice DNA sonde moe orijentirati u ugljika
povrine, pri emu osnovni dio usmjerava prema otopine lako hibridizirana sa
meta (Ronkainen sur 2010. godine;. Palecek et al, 1998;,. Marrazza et al, 1999),
kao to je prikazano na slici. 5. Krianje rezultirat e selektivno priznavanje i
proizvodnje biolokih signala za daljnju dijagnostiku.

Za dsDNA, bez hibridizacija se dogaa za vrijeme apsorpcije i otkrivanja proprocesu, tako dsDNA elektrokemijski adsorpcijski probe su prikladni za ne-DNA
ana-lytes, koji se moe vezati za dsDNA; one ukljuuju i neutralna i
nonelectroactive analita. Double-zavojnice DNA sonde su lake montirati na
elektrodama (manje orien-osigurae zahtjevi), a zbog nedostatka potrebe za
hibridizaciju, oni obino imaju due ivote nego ssDNA sondi (Wang i sur. 1997b).

Osim elektrokemijskih adsorpcije, fiziki adsorpcija se takoer koristi u DNK

senzora. Ukratko, DNA biosenzora se dobiva uranjanjem u ugljik-staklenom
elektrodom u otopinu dsDNA izlazna elektroda da se osui (Oliveira Brett i sur.,
1997., 1998).
Ovaj senzor moe koristiti u preconcentrating nitroimidazol ili mitoksantron na
povrinu te da bi se prouavao mehanizam interakcije ovih reakcija na lijek s
dsDNA od diferencijalnog impulsa, kao to su kvadratnog vala va. Druga metoda
fizikalne dsDNA adsorpcije koristi staklastu ugljini disk. Elektrode DNA
modificirani pripravljaju isparavanjem malom volumenu otopine DNA povrinama.
Detekcija duplex je napravljen sa elektroaktivnih pokazatelja (Cu (fen) 22 + i Cu(TAAB) 2+) ciklikih voltametrijskim analizu preconcentrated elektroaktivnih
indikator (Labuda i sur., 1999.).

Iako Adsorpcija je jednostavan i brzi postupak za imobilizaciju DNA, glavni

nedostatak ovog postupka je labilna veza izmeu materijala i DNA. Kao rezultat
toga, DNA se moe odvojiti od povrine sonde u uvjetima hybrid-tnom, to
uzrokuje nisku uinkovitost hibridizacije. Tako, su razvijeni postupci koji se
oslanjaju na veze, izmeu DNA i sonde povrine.

2.2.2 DNA Imobilizacija po Protein kompleksiranja

Avidin ili streptavidin-biotin kompleksa je iroko primjenjuje u podruju DNA

biosenzornom zbog njihove visoke stabilnosti i visoku selektivnost (Sl. 6). avidin i
streptavidin su tetramer proteina (70 kDa) koji ukljuuju etiri identine vezna
mjesta. Biotin je mala molekula koja se specifino vee avidinom ili
streptavidinom (Ka = 1 1015 L / mol). Dakle, ovaj obvezujui uinak ima slinu
energetsku korist obveznice Cova-posudio, pa je vrlo stabilna i moe se ukloniti
samo pod najekstremnijim uvjetima. Takve robustan obveznice ine kompleks
nepromijenjen ak iu ekstremnim vrijednostima pH, relativne visoke temperature,
organskih otapala i sredstva za denaturirajuih.

Tetravalentni vezanja streptavidin biotin omoguuje openiti postupak za gradnju

DNA obloenih elektroda, pri emu se povrinski vezani avidin je spojen s
biotiniliranim oligonukleotida. Nakon toga slijedi avidin tretman blokirati bilo
adsorpciju DNA na povrini materijala (ili proteina koji daju glavu biotin vani).
Inherentna Vodena stabilnost avidin-biotin kompleks ini sustav jednostavan za
rukovanje. Zbog prisutnosti velikog proteinskog sloja, moda postoji neki
nespecifini interakcije blokirati vezna DNA-DNA (Pividori i sur 2000;. Marrazza et
al 1999).. Iako je obino takva blokada ne bi statistiki znaajno-otkrivanje
uinka, zbog izuzetno visoke selektivnosti hibridizacije, vie eljeni i izravan
pristup ispitivano je i DNA imobilizacije: kovalentnim vezama obveznica.

Sl. 6. DNA imobilizacije ukljuuje avidin-biotin kompleksiranja. (A) avidin

adsorpcija na grafitne elektrode. (B) Kompleksiranje izmeu avidin biotinilirani
DNA sondom. (C) Krianjem avidin-biotin probe ciljnom DNK. (D) Prijenos signala
pomou elek-troactive indikator hibridizacije preconcentrated u dsDNA (preuzeta
iz Pividori i sur. (2000))
2.2.3 DNA Imobilizacija kovalentnim

vezanost kovalentna veza je vrlo stabilan imobilizacija modifikacija materijala s

obino jednostavne strukture i mehanizama. To se moe osigurati stabilne veze
koji omoguava poveanje hibridizacije puta. Osim toga, kemijski veznici e
osigurati fleksibilnije strukture koje omoguuju promjene konformacije bez
gubitka nukleinske kiseline.

Godine 1993., prvi modifikacija je razvijen za instalaciju kovalentnu vezu na

staklastom povrinom ugljika (Millan i sur 1992;. Millan i Mikkelsen 1993). U tom
sluaju, elektrode-trode elektrokemijski se oksidira u kiseloj otopini generirati
karboksilnu kiselinu na ugljenu povrinama. Nakon ispiranja, karbodiimid 1- (3dimetilaminopropil) -3-etil-karbodiimid (EDC) i N-hidro-xysulfosuccinimide (NHS)
se ispare na povrinama. Aktivirani elektroda je zatim izloen malim volumenom
ssDNA, a ponovno se ostavi da se osui. Ovi koraci doputeno samo
deoksiguanozin Resi-zbog ssDNA imobiliziran na ugljikov povrini (Sl. 7). Nekoliko

godina kasnije, slian postupak izmjena je razvijen za izmjenu ugljika paste

elektrode u rinfuzi bilo octadecylamine ili stearinska kiselina (Mikkelsen 1996;.
Millan i sur 1994). Osim toga, znanstvenici su razvili vezu amino-DNA obveznica
na promjene grafitne povrine (Sl. 8) (Liu i sur. 1996).

Osim materijala na bazi ugljika, DNA se takoer moe imobilizirati na anorganske

povrine (Hashimoto et al, 1994,, Yang et al., 1997; Sun et al. 1998). Na primjer,
zbog visokog afiniteta zlata na tioalkoholu, znanstvenici pokuavaju napraviti
tiolne-nukleinske kiseline samostalno sastaviti sa zlatnim povrinama. Self-skupi
aminoetantopl

-modified zlatne nanoestice uspjeno su povezani s ssDNA.

tovie, ssDNA se dodaje nakon generiranja tiolne-derivat monosloj postii
precizniji nain za kontrolu obuhvata zlata povrina. Takve metode uvelike
smanjiti nespecifini DNA adsorpcija (Herne i Tarlov 1997;. elik et al 1998). Za
polimerne pretvornika, ova metodologija koritena je za pripravljanje
imobiliziranih DNA sonde elektrokemijski pomou izravnog kopolimerizacijom
pirola i oligonucle-otides nosi pirola skupinu (Livache et al., 1994). Postupak
ukljuuje direktan elektrokemijski kopolimerizacijom pirola i ssDNA s pirolnom
skupinom uveo fosforamidat kemije na njihov 5 kraju. Konano, pirol skupina
kovalentno vezana na sintetski ssDNA.

U saetku, adsorpcija je metoda brza, jednostavna i jeftina za imobilizaciju DNA

na biosenzora. Nasuprot tome, kovalentno vezanje obino treba vie koraka za
izgradnju kemijske veze, ali to je vrlo tailorable metoda, koja se moe povezati s
razliitim materijalima. Stoga, ovisno o specifinoj primjeni, razliite metode za
DNA imobilizacije.

3 izvedeno iz DNA Materijali za Biosenzori

Da bi dobili bolju biokompatibilnost i polivalentnu za kirurku dijagnostiku,

istraivai su inenjering molekula za izgradnju nove DNA-analogne materijale na
temelju DNA strukture. Na primjer, od napredaka u nanotehnologiji, A prom-tivno
biomaterial je nastao nedavno, to je bioinspired, self-skupi nanomaterial. Takvi
materijali imaju odline bioloka svojstva i lako se inenjer za specifine potrebe.
Kao jedan od mnogih primjera, rozeta nanocjevice (RNTs, sl. 9) su novi
biomimetike strukture sami se spajaju izvedeno iz DNA, iji je osnovni gradbeni
blokovi gvanin (G) i citozin (C) DNA parova baza koje se mogu skrutnuti u
viskozne gel (Chun et al 2004, 2005;. Fenniri et al 2001).. G ^ C heteroaromatski
bicikliki baza posjeduje Waston-Crick donatorskih-donor- akceptori svojstva
gvanin i primaoca-primaoc-donator citozina. G ^ C podvrgava hijerarhijsku
postupak Samosastavljanje pod fiziolokim uvjetima, ime se dobije esterolani
supermacrocycle formiranjem 18 vodikovih veza.

Zbog elektrostatskih sila, bazne slaganje interakcije, te hidrofobnih utjecaja,

rozete formiraju stabilnu hrpu s unutarnjom kanal 11 u promjeru. Boni
aminokiselinski lanac (lizin) odabran je uvesti kiralnosti i povrinske kemije na
RNTs. Vano je, lizin boni lanac (s amino skupinom i karboksilne skupine) prua
mogunost funkcionaliziranje razne peptida ili proteina na RNTs za enzimsku
prepoznavanja. Osim toga, neki mali bioaktivne molekule mogu biti zarobljeni u
unutarnjem kanalu RNTs pomou vodikovih veza. Ovo je jo jedan izbor za
detekciju malih molekula koriste RNTs. Osim toga, RNTs imaju izvrsna svojstva
cytocompatibility, pogodna da se ugraditi u tkivo kojem je za niz primjena
senzora.

Dakle, RNTs ne samo da imaju self-montae i svojstva samospoznaja (kao to je

DNA parova baza), ali takoer imaju vie funkcija, kao to su poveanje
viskoznosti, kad se zagrije na niske temperature (40-60 C) i bitak u mogunosti
to povezivanje s visokim gustoa peptidima ili enzima (Zhang i sur. 2009).
tovie, RNTs su Biocom-kompatibilni su s tkivima, jer oni mogu oponaati
nanostrukture kolagenskih i con-nective tkiva za stvaranje povrine okolinu koja
poboljava proteina (poput kolagena i fibronektina) adsorpcija, kao i poboljava
adheziju i buduih-daljnjih funkcija (Chun sur 2004;.. Fenniri i sur 2001; Fine et al
2009).. RNTs predvia se da e posluiti kao roman, vienamjenske implantata
materijala za biosenzora. Osim toga, u vivo studije toksinosti pokazuju da RNTs
moe sniziti upalnih odgovora od ugljikovih nanocjevice u istoj dozi (Journeay et
al., 2008).

Prethodna studija je dodatno naglaeno metodu inenjer RNTs s drugim

materijalima (Chen i sur. 2010a). Alginat gelovi, pomijeana sa polivinil alkohol i
polietilen glikol, su electrospun s RNTs. Prijenos elektrona MICROS-kopija (TEM)
oslikavanje ovog materijala jasno pokazuje brazde odgovara RNTs na electrospun
vlakana (strelice, sl. 10a). Nasuprot tome, hidrogela kompoziti bez RNTs (Sl. 10b)
su bezlini. Ovi opaanja ukazivala da RNTs se moe ponaati kao novi
nanoscaffolding na povrini hidrogela vlakana s mogunou izlaganja bioaktivne
funkcionalne grupe (na primjer, amino grupe) na okolna tkiva. tovie, nakon to
electrospinning, lizin poboni lanci RNTs obiljeene su s fluorescentnom sondom
da bi za vizualizaciju distribucije RNT u hidrogel kompozita. Fluorescentne
mikroskopije slike (Sl. 10c) je pokazala da RNTs su prisutni na povrini electrospun
vlakana, ali ne i duboko u vlakna. Nasuprot tome, electrospinning vlakna bez
RNTs (Sl. 10d), nije bilo znaajne fluorescenciju. Vanije, ti rezultati potvruju
pristupanost amino skupina iz RNTs na povrini hidrogela vlakana od znaaja za
biosenzora aplikacije.

Nadalje, istraivanja su naglasili potencijal RNTs sluiti kao bio-mimetiki

nanoprobe za primjenu senzora. Slika 11a prikazuje da HA kristali brzo formira na
RNTs smjesi s CaCl2 i Na2HPO4 otopine tijekom 2 minute i redovito su poravnati
na RNTs u uzorak slian uzorak HA / kolagen u kostima. Slika 11b pokazuje
nasumino nagomilani ha na reetke bez RNTs (Zhang i sur. 2008). Ne samo za
keramiku, ali metala takoer je pronaeno da jedrom RNTs. Naime, AU

nanoestice formirane su bili gotovo monodispersed nakupine esticama zlata

(1,4-1,5 nm) Smjeten u depove na RNT povrini
(Chhabra et al. 2010). Dakle, RNTs su vrlo obeavajui materijal DNK-izvedeni za
biosenzora i treba dodatno istraiti u tom kontekstu.

Osim RNTs, jo molekula DNA izvedeno je oligonukleotid triplex tvorbu (TfO).

Inae, DNA je nainjena od dvije nukleotidne ice. Meutim, u drugoj metodi,
triplex nukleinske kiseline moe se dobiti kroz interakciju specifian za slijed
izmeu jednolananog homopyrimidine i homopurine TfO (Chen et al 2010b;.
Duca et al 2008.). U ovoj strategiji Tfo vee na veinu utor ciljnog duplex na nain
specifian za slijed preko vodikove veze izmeu svojih baza i izloenim
skupinama na dupleks parova baza, generiranje baze trojke (Sl. 12). Tfo je bio u
sreditu razmatranja-moi interesa zbog moguih primjena u razvoju novih
molekularne biologije alata, kao i dijagnostikih sredstava (Duca i sur 2008;.
Igoucheva i sur 2004;. Buchini i Leumann 2003).

Vana primjena Tfo kao biosenzornom materijal je priznanje nukleinskih kiselina.

Velika prednost je u tome da se stvaranje pirimidin triplex ovisi o pH. Dakle,
priznanje Tfo je vrlo osjetljiva na kiselost okolia i takav proces nije skladan.
Triplexes moe se koristiti za odabir slijed DNA koji sadri oligopurine /
oligopyrimidine sekvenci u smjesi duplex DNA (Duca et al 2008, Ji, i Smith, 1993).
Prethodne studije su shvatili ovu ideju vezivanjem Tfo za magnetske sonde. U
prisutnosti smjese parova (kao to su plazmidi) sekvence mogu tvoriti trostruku
uzvojnicu moe selektivno recog-i priznaju unutar bakterijskog lizata (Ito et al,
1992,. Schluep i Cooney 1998).

U drugoj studiji, TFOs su kombinirani sa zlatnim nanoestice otkrivanja DNA

pomou promjene boje. Ukratko, pro-sintetizira TFOs su adsorbira na zlatnim
nanoesticama kako bi se sprijeilo pojedine crveno zlatne nanoestice od
formiranja plave agregaciju pod uvjetima visokog ionske jakosti zbog niske
stabilnosti konstrukcije Triplex. Meutim, uvoenje trostruke vezivo / induktor
stabilizira trostruke tvorbu putem vodikovih veza Hoogsteen tipa. Dakle, tripleks
nee biti u mogunosti da se veu i stabilizirati pojedinane crvene zlatne
nanoestice, to je rezultiralo u ljubiasto-plavim zlato nanoestica agregate (Sl.
13 (Chen i sur. 2010b)).

Ukratko, materijal DNK-izvedeni su se pojavili za biosenzora aplikacija. Oni obino

predstaviti jedinstvene osobine, kao to su izvrsne biokompatibilnosti (kao RNTs) i
visoku osjetljivost za prepoznavanje biomolekule (poput Tfo). Stoga, na temelju
nanotehnologije i bioinenjeringa, materijali DNK-izvedeni su izvrsne kandidate za
novu generaciju biosenzora uinkovitiji za dijagnozu.

4 Perspektive i zakljuci

Prije toga, biosenzori su uspjeno koristi samo u laboratorijske analize, ali danas,
potreba za biosenzora za in situ dijagnoze ubrzano raste. Posebno, zbog visoke
selektivnosti, osjetljivost i openito dobrog biokompatibilnosti, biosenzori DNAbased imaju svijetlu budunost za kirurke aplikacije. Du ove staze,
vienamjenski materijali i kompozitne strukture su budunost biosenzora DNAbased. Idealno biosenzor ne samo da treba zavriti namijenjenu funkcionalnogtion (prepoznavanje i otkrivanje), ali isto tako treba da posjeduju druge
pogodnosti (kao to su oslobaanje lijeka, mehanike podrke, genska terapija,
biokompatibilnost, itd) (Menard-Moyon et al. 2010; Ainslie i Desai 2008; Wadhwa
et al 2006)..

Uzmi trenutno razvijenu senzor kosti za primjer. Implantirajua 9-kanalni

implantat / biosenzor sustav je studirao in vivo za mjerenje optereenja za
ortopedskih implantata (Graichen i sur. 2007). Kratko eksperimenta, Ti legure
(Ti4Al6V) je koriten za vrata i stabljike, kobalt-krom-molibden (CoCrMo) za vrsto
ugraenim glave i politetereterketon (PEEK) u poklopcu na donjem kraju stabljike
(Sl. 14). est mjernih instrumenata i odailja sklop je smjeten unutar grla
upljine unutarnjeg promjera 9,5 mm. Sekundarni napajanje zavojnice (30 mm
duine, promjer 6 mm) se kombinira s AC-DC krug i fiksne
u drugoj upljini na donjem kraju stabljike. U otkloniti opskrbni naponi napajanja
su povezani s odailjaa kruga po dva kabela kroz vjebe. Jo jedan par kabela
spojili dva-lead feed kroz na sredini donje eone ploe do odailjaa. Antena
petlje za prijenos signala koja se sastoji od niobija ice. ica je elektronskim
snopom zavareni od mehanikih nasipa dobi od PEEK kapu i gornji i donji zavrne
povrine implantata takoer zavarena. Ovo je sasvim novi dizajn inkorporirati
biosenzora u normalnu orto-Pedic implantata. Znaajna prednost ovog kompozitni
sustav je da senzor moe biti smjeten u tijelo pacijenta. Dakle, "real time"
mjerenje implantata perfor-Mance moe se postii senzora. U usporedbi s
tradicionalnim metodama, kao to su radiograma (X-zrake), takvi rezultati
biosenzor sustava moe detektirati implantata u sluaju kvara zastupljene ranije i
bre. To bi takoer dovesti do manje zraenja za pacijente i toniju dijagnozu za
kirurga.

U budunosti, vie funkcija moe se dodati u takvim sustavima. Na primjer, RNTs

se moe ugraditi na implantatima za poboljanje biokompatibilnost, dok Tfo moe
biti imobiliziran na povrini implantata za prepoznavanje odreenih biomarkera i
analize stanica diferencijacije, funkcije i apoptoze predvidjeti ishod implantata
prije kliniki simptomi povrinu. Nadalje, kontrolirani naina otputanja lijek
takoer mogu biti ukljueni. Provodljivog polimera, kao polipirol, moe oblagati
implantata i ugraen lijekovima. Sa elektrine stimulacije, molekularni lanci
polipirol razbiti i moe otpustiti ugraen lijekove (Ainslie i Desai 2008; Wadhwa et
al 2006).. Osobito, kontroliranjem struje u implantat, brzina oslobaanja lijeka se
moe podeavati. Na taj nain, dijagnoza i lijeenje implantata mogu provesti
istovremeno kroz takve nove DNA-based nanotehnologiji biosenzora.

U zakljuku, DNA ili materijala DNA-derived su vrlo obeavajui za biosenzor

aplikacija za poboljanje njihove bioloke kompatibilnosti, selektivnost i
osjetljivost senzora, te u kombinaciji s drugim funkcijama (kao to su oslobaanje
lijeka i genske terapije) pruanja ranije, u stvarnom vremenu dijagnozu i lijeenje.
Reference

Ainslie KM, Desai TA. Microfabricated implantati za primjenu u terapijskom

dostava, inenjerstvo tkiva i biosensing. Lab Chip. 2008. godine; 8 (11): 18641878.

Bi H, Meng S, Li Y, Guo K, Chen Y, Kong J, Yang P, Zhong W, Liu B. Nanoenje PEG

na PMMA Microchannel povrinu kako bi se smanjili nespecifine apsorpcije. Lab
Chip. 2006; 6 (6): 769-75.

Buchini S, Leumann CJ. Nedavna poboljanja u antigen tehnologije. Curr Opin

Chem Biol. 2003; 7: 717-26.

Chen Y, Bilgen B, Pareta RA, Myles AJ, Fenniri H, Ciombor DM, Aaron RK, Webster
TJ. Self-skupi rozeta nanocijevi / hidrogel kompoziti za inenjering hrskavice tkiva.
Tkivo Eng Dio C metode. 2010a. EPub ispred ispis.

Chen C, Song G, Yang X, Ren J, Qu X. Zlatna nanoestica-based strategija za

oznaku-free i Colo-rimetric projekcijom DNA pleks veziva. Biochimie. 2010b 92
(10): 1416-1421.