8/9/2009

Bioaerosol
y Bioaerosols are defined as airborne particles that are living or originate 
from living organisms. Such as metabolites, toxins or fragments of 
microorganisms.

Bacteria, viruses and Fungi

y Bioaerosols are respirable size
Viruses ‐ 0.003 µm
JayachelviBabu Bacteria ‐ 0.5 to 20 µm
Plant pollens ‐ 10  to 100 µm
Molds ‐ 2   to  200µm

Bacteria
y Abundant in the environment and humans.
y More than 150,000 known species of bacteria
y Single‐celled, reproduced by simple cell division called 
binary fission. 
bi  fi i  

1
 8/9/2009

Stained preparation
y Live bacteria do not show much structural detail under the 
light microscope due to lack of contrast, to use staining 
technique to produce colour contrast. 

Staining Technique Mycobacterium tuberculae
y Simple Stains
y Negative staining y Acid fast stain: Ziehl 
y Impregnation method and Neelsen method
y Differential stains  ¾ Strong Carbol fuchsin
Gram stain ¾ 20% Sulphuric acid
Methylene blue or Gentian violet ¾ Methylene Blue (Counter 
Dilute Iodine solution staining)
Acetone (Decolorizing agent
Safranine or Dilute carbol fuchsin

They are divided into two major groups based on their reaction to 
Gram stain, they are Gram positive and Gram negative bacteria 
(basis of cellular, morphological or biochemical characteristics) 

2
 8/9/2009

Shape of Bacteria
y Cocci : Spherical or oval cells
y Bacilli : Rod shaped cells
y Vibrios: Comma shaped, curved rods
y Spirilla: Rigid spiral forms
y Spirocheates: Spira‐coil / chaite‐hair
y Actinomycetes: Branching filamentous bacteria
y Mycoplasma: Cell wall deficient, do not possess a 
stable morphology.

Arrangements
y Cocci:
pairs – Diplococci, Chains – Streptococci
four – Tetrads, Eight – Sarcina, or as grape‐like clusters 
– staphylococci.
h l i
y Bacilli: Diplobacilli, streptobacilli.

3
 8/9/2009

Growth Requirements of Bacteria
y Suitable nutrients: carbon and energy source, nitrogen source,
inorganic salts, organic compounds
Phototrophs – Derive the energy from sunlight
Chemotrophs – Obtain the energy from chemical reaction
Autotrophs – Synthesis all their organic compounds
Heterotrophs – unable to synthesis their own metabolites and
depend on performed organic compounds
Oxygen Requirements of bacteria
y Depending on the influence of oxygen on growth 
and viability, bacteria are divided into two groups.
Aerobic bacteria: Require oxygen for growth.
Anaerobic bacteria: Grow in the absence of 
oxygen (die on exposure to oxygen)
Microaerophilic bacteria: Grow best in the presence 
of a low oxygen tension.

Growth Requirements of Bacteria Molds and Yeasts
y Physical conditions y Fungi are ubiquitous in the environment
‐ carbon dioxide y Saprophytes, meaning that they use dead organic 
‐ temperature material as a source of nutrients for their growth 
and reproduction.
and reproduction
‐ moisture and desiccation
y Several live in the soil and take an active part in the 
‐ hydrogen ion concentration
decomposition of organic material. They are 
‐ light and other radiations generally aerobic.
‐ mechanical stress y Well proliferate in humid indoor environment
y Human commonly exposed to more than 200 
species . 

4
 8/9/2009

Fungi Colonies
y Yeasts are single‐cell organisms that divide by fission 
and budding.
y Molds are multicelled and they propagate by spores.
y Spores differ in form, size and colour.
S  diff  i  f   i   d  l
y They can survive from a few days to several years.

Aspergillus fumigatus
Virus
Spores y A virus is a microscopic infectious agent that can 
(Conidia)
reproduce only inside a host cell. Viruses infect all 
types of organisms from animals and plants, to 
bac
bacteria. Viruses are ubiquitous, as they are found 
e a. uses a e ub qu ous, as ey a e ou d
in almost every ecosystem on Earth. The study of 
viruses is known as virology, and is a branch of 
microbiology.

5
 8/9/2009

Mode of infection
y Not all viruses cause disease, as many viruses reproduce without 
causing any obvious harm to the infected organism.  y Inhalation
y Immune responses can also be produced by vaccines that give lifelong  y Ingestion
immunity to a viral infection. 
y Microorganisms such as bacteria also have defenses against viral  y Dermal exposure
infection.
infection
y Antibiotics have no effect on viruses, but antiviral drugs have been 
developed to treat both life‐threatening and more minor infections.

Deposition of Microorganisms Inhalation
y Respiratory infections such 
1: Nasopharynx or Head as influenza and 
Deposition > 20 µm tuberculosis are 
transmitted by inhalation 
2: Larynx, Trachea, Bronchi p g
of the pathogens.
Deposition < 20 µm
y Pathogens resistant to 
drying may remain viable 
in the dust and act as 
3: Bronchioles and Alveoli source of infection.
Deposition < 1 - 4 µm

6
 8/9/2009

Ingestion Dermal exposure
y Intestinal infections are generally acquired by the  y Pathogens directly enters in to the tissues of the 
ingestion of food or drink contaminated by  host.
pathogens y Tetanus spores implanted in deep wounds
y Waterborne (Cholera)
b ( h l ) y Rabies virus deposited subcutaneously by dog bite
y Food borne (Salmonella, food poisoning) y Unsterile syringes and surgical equipments
y Hand borne /Finger borne (Not only mouth, but  y HIV, Hepatitis B transmitted through transfusion 
also enter through the nose and eyes)  of infected blood.

Pathogenisity Exotoxins
y Pathogenisity refers to the ability of a microbe to  y Exotoxins are generally formed by gram positive bacteria.
produce diseases or tissue injury. y Exotoxins are heat labile proteins and diffuse readily in to 
the surrounding medium.
y Toxigenisity: Bacteria produce two types of toxins 
T i i i  B i   d       f  i   y Most poisonous substances, one mg of tetanus or 
Most poisonous substances  one mg of tetanus or 
botulinum toxins sufficient to kill more than one million 
exotoxins and endotoxins.
guinea pigs and it has been estimated that 3 kg of 
botulinum toxins can kill all the inhabitants of the world.

7
 8/9/2009

Endotoxins Mycotoxins
y Endotoxins are heat stable lipopolysaccharides (LPS) which  y Mycotoxins: During the nutrient degradation process, molds release 
form an integral part of the cell wall of gram negative  secondary metabolites called mycotoxins that they used as a defense 
bacteria. against other microorganisms including other molds.
y Administration of small quantities  of endotoxins in 
susceptible animals causes an elevation of body 
ibl   i l       l i   f b d   y Mycotoxins are nonvolatile compounds and will be found in the air.
M t i     l til   d   d  ill b  f d i  th   i
temperature manifested within 15 minutes and lasting for 
several hours y It cause Skin and mucous membrane irritation, immunosuppression, 
y Intravenous injection of large doses of endotoxins and  dizziness, nausea, headache and neuropsychological effects. 
massive gram negative septicemias cause endotoxic shock 
marked by fever, leucopenia, thrombocytopenia,  y Some mycotoxins such as aflatoxin are considered carcinogenic; the 
significant fall in blood pressure, circulatory collapse and  ingestion of aflotoxin ia a known cause of liver cancer.
bloody diarrhea leading to death. 

Sterilization and Disinfection
y Sterilization is defined as the process by which an  y Bactericidal agents or Germicides are those which are 
article, surface or medium is freed of all living  able to kill bacteria
microorganisms either in the vegetative or spore  y Decontamination refers to the process of rendering an 
sstate.
a e. article or area free of danger from contaminants, 
article or area free of danger from contaminants  
y Disinfection means the destruction or removal of  including microbial, chemical, radioactive and other 
all pathogenic organisms, or organisms capable of  hazards.
giving rise to infection.
y Antisepsis is used to prevention of infection, 
usually by inhibiting the growth of bacteria in 
wounds or tissues.

8

Physical Agents
y Sunlight  y Sunlight posses appreciable bactericidal activity and
y Drying
y Dry heat: Flaming, incineration, hot air
y Moist heat: Pasteurization, boiling, steam under normal 
M i t h t  P t i ti  b ili   t   d   l  y The action primarily due to its content of ultraviolet
pressure, steam under pressure.
y Filtration: Candles, asbestos pads, membranes
y Radiation
y Ultrasonic and sonic vibration.
Drying
y Moisture is essential for growth of bacteria
y Drying in air has deleterious effect on many bacteria
y Spores are unaffected by drying.
8/9/2009
Sunlight
 
plays an important role in the spontaneous 
sterilization that occurs under natural conditions.
 
and heat rays.
Heat
Dry Heat
y Flaming: Inoculating loop or wire, the tip of forceps and 
searing spatulas are held in a Bunsen flame till they 
become red hot.
y Incineration: This is an excellent method for safely 
destroying materials such as contaminated cloth, animal 
carcasses, and pathological materials.
y Hot air oven: This is the most widely used method of 
sterilization by dry heat. A holding period of 160º C. for one 
hr. is used to sterilize glassware, forceps, scissors, scalpels, 
all glass syringes, swabs.
9
 8/9/2009

Moist heat Moist heat
Temperature below 100ºC (Pasteurization of    milk) y Steam at atmospheric pressure (100ºc):
A single exposure of ninety minutes usually ensures sterilization 
The milk is heated at either 63ºc for 30 min. (the holder  but for media containing sugars or gelatin an exposure of 100ºc for 20 
method) or 72ºc for 15‐20 seconds (the flash process)  minutes on these successive days is used. This is known as 
followed by cooling quickly to 13
followed by cooling quickly to 13ºc or lower. 
c or lower.  “Tyndallisation” or intermittent sterilization.
y Steam under pressure:
Nonsporing pathogens such as mycobacteria, brucellae,  Sterilization by steam under pressure is carried out at 
and slmonella are destroyed. temperature between 108ºc and 147ºc. by using thee appropriate 
temperature and time, a variety of material such as dressings, 
instruments, laboratory ware, media ans pharmaceutical products can 
Temperature at 100ºC be sterilized.
Boiling: Vegetative bacteria are killed almost immediately at 
90‐100ºc

Filtration Radiation
Filtration helps to remove bacteria from heat labile liquids  Nonionising radiation:
such as sera and solutions of sugars or antibiotics used for  y Infrared radiation is used for rapid mass 
preparation of culture media.
sterilization of prepacked items such as syringes 
Candle filters
and catheters
d h
Asbestos filters
y Ultraviolet radiation is used for disinfecting 
Sintered glass filters
enclosed areas such as entryways, operation 
Membrane filters
theaters and laboratories.

10
 8/9/2009

Radiation Chemicals
Ionizing radiation: y Alcohols: ethyl, isopropyl, trichlorobutanol
y X‐rays, gamma rays and cosmic rays are highly lethal to DNA and other  y Aldehydes: Formaldehyde, glutarldehyde
vital constituents. y Dyes
y commercial plants use gamma radiation for sterilizing items like  y Halogens
H l
plastics, syringes, swabs, catheters, animal feeds, cardboards, oils, 
greases, fabrics, and metal foils. y Phenols
y Surface‐active agents
y High energy electron radiation as a method of sterilization is not 
widely used in medicine. y Metallic salts
y Gases: ethylene oxide, formaldehyde, beta propiolactone.

Prominent Bioaerosols Commonly found Outdoor Sources of Bioaerosol

• in the workplace
• in residential houses • Wind action on soil, agitation of open water, and raindrop impaction are
major sources of bioaerosols.
• in medical facilities
• Farming of land.
• in manufacturing operations in which metalworking fluids are used
• Other farming activities, cattle, swine animal houses will generate
• in animal-hair processing facilities
bioaerosols.
• in
i dairy
d i facilities
f iliti
• Wastewater/sewage treatment.
• in food processing plants
• Food processing plants, particularly of dairy products can generate higher
• livestock farming and animal houses levels of bioaerosols.
• in sites of sludge application
• in recycling or composting plants
• in sanitary landfills
• in sewage plants

11
 8/9/2009

Indoor Sources of Bioaerosol
BIOAEROSOLS & HEALTH EFFECTS
• Many indoor areas are associated with bioaerosol problems.

• In all food processing plants, hygiene requires that levels of airborne

microorganisms are kept as low as possible.
• Hospitals and health care facilities are not only sources of a variety of
y Sick building syndrome‐specific building related 
organisms, but require that patients are not exposed to any of them. symptoms & nonspecific building related illnesses  .
 &  ifi  b ildi   l d ill   
• The presence of undesirable bioaerosols is often associated with sick
building syndrome, being one of a number of factors which contribute to
building related illness.
• HVAC systems –ventilation systems

Building related illness Building related symptom
y Infection (viral ,legionellosis, tuberculosis)
y Syndrome related to exposure to  y Nonspecific symptoms (eye ,nose, throat 
chemical/physical agent (CO poisoning,dermatitis  irritation,headache,fatigue ) cannot  be associated 
from glass fibres)
f l fb ) with a well defined cause but appears to be  linked to 
the time spent in the building. 
y Immunologically mediated (rhinitis, asthma, 
sinusitis)
y Inhalation fever associated with exposure to 
biological agent (humidifier fever/Pontiac fever)

12
 8/9/2009

Health effects contd
y Hypersensitivity Diseases: exposure to antigens 
which stimulate
y Rhinitis & sinusitis: associated with conjunctivitis
y Asthma: chest tightness, wheezing ,cough
A th   h t ti ht   h i   h
y Hypersensitivity pneumonitis:acute/ chronic
y Inhalation Fever: Humidifier fever‐flu like illness 
related to endotoxins/ Legionnaires disease & 
Pontiac fever.
y Infections
Thank you

13