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Oficina repr
esentativa en Miami
ANALIZADORES
HEMATOLÓGICOS XE-2100
AUTOMATIZADOS
Casos clínicos
SYSMEX CORPORATION
´INDICE
Introducción 3
Patrones anormales 6
Ejemplos de leucocitosis 11
La tinción Giemsa se emplea desde hace más de 100 años. Incluso ya podíamos ver impresiones
claras y nítidas de células sanguíneas, incluyendo neutrófilos y eosinófilos, en el Diario de la
Academia de Tokio, Japón (Journal of the Tokio, Japan Academy), del 15 de junio de 1885 (Era de
Meiji). En estas impresiones notamos la gran minuciosidad con que nuestros predecesores
representaron células sanguíneas, utilizando al máximo los microscopios de baja resolución
disponibles en ese tiempo. Eso me lleva a pensar en el gran progreso que han alcanzado en el
análisis de la sangre las clínicas contemporáneas en relación con esa época.
Hace poco estuve en un curso sobre exámenes de sangre. Para mi sorpresa, muchos encargados
del examen microscópico de muestras están habituados al uso de analizadores automatizados,
aunque existe al mismo tiempo una tendencia a realizar una observación más superficial en el
análisis morfológico y una menos confiable técnica manual para PT en los exámenes de
coagulación. Esto parece constituir una influencia negativa del análisis automático, pues existe el
riesgo de depositar excesiva confianza solamente en la impresión de los resultados del contador
automático.
A diferencia de la Era de Meiji, con los impresionantes cambios ocurridos en el sistema médico
en general, nosotros nos vemos forzados a obtener y evaluar, en el laboratorio, los valores
necesarios para el diagnóstico de múltiples muestras y parámetros en un corto lapso de tiempo.
Los analizadores actuales, construidos sobre una base de software de alta tecnología, nos
permiten no sólo obtener sino también manipular y procesar cantidades enormes de resultados.
Sin embargo, es difícil establecer si toda la información generada retorna al médico. Por ejemplo,
a pesar de que la información numérica -que incluye el conteo completo de células o hemograma
y el diferencial de leucocitos- es transferida por sistema de cómputo a los médicos, pocos
laboratorios transfieren los dispersogramas y los mensajes o señales de avisos a los médicos. Se
presta poca atención a la variedad de información que tienen estos analizadores -que incluye
datos básicos del análisis microscópico-, aun cuando a la luz de su utilidad clínica deberían ser
usados activamente. Tener la mente y la vista entrenados es indispensable para obtener el
máximo provecho de esta información cuando se examina la sangre.
Espero sinceramente que este compendio les resulte útil, si bien es sólo una mínima parte del
esfuerzo diario de los laboratorios de estudio hematológico.
Agosto, 1999
Noriyuki Tatsumi
Profesor,
Departamento de Clínica y Laboratorio Médico,
Escuela de Medicina de la Universidad de Osaka, Osaka (Japón)
3
Parámetros de análisis y esquema del proceso de medición
4
Ejemplo de una muestra normal
(1)
WBC 6.90 [109/L]
RBC 4.64 [1012/L]
HGB 154 [g/L]
HCT 44.0 [%]
MCV 94.8 [fL]
MCH 33.1 [pg]
MCHC 350 [g/L]
PLT 353 [109/L]
RDW-SD 46.0 [fL]
RDW-CV 13.4 [%]
PDW 11.6 [fL]
MPV 10.6 [fL]
P-LCR 30.0 [%]
PCT 0.37 [%]
NEUT 4.19 [109/L] 60.7 [%]
LYMPH 1.54 [109/L] 22.3 [%]
MONO 0.51 [109/L] 7.4 [%]
EO 0.60 [10 /L]
9
8.7 [%]
BASO 0.06 [10 /L]
9
0.9 [%]
NRBC 0.00 [10 /L]
9
0.0 [/100WBC]
RET 1.70 [%] 78.9 [109/L]
IRF 6.7 [%]
LFR 93.3 [%]
MFR 6.1 [%]
HFR 0.6 [%]
(1) Resultados del análisis. (2) Dispersograma del diferencial (DIFF). (3) Dispersograma de leucoci-
tos y basófilos (WBC/BASO). (4) Dispersograma de células mieloides inmaduras (IMI). (5) Dis-
persograma de eritrocitos nucleados (NRBC). (6) Dispersograma de reticulocitos (RET). (7) Dis-
persograma de plaquetas ópticas (PLT-O). (8) Histograma de hematíes o eritrocitos (RBC). (9) His-
tograma de plaquetas (PLT). (10) Sistema de avisos interpretativos de leucocitos (WBC). (11) Sistema
de avisos interpretativos de hematíes y reticulocitos (RBC, RET). (12) Sistema de avisos interpre-
tativos de plaquetas (PLT).
5
Patrones anormales
Ghost
Dispersión lateral Corriente Directa (CD)
WBC Fragment
Fragment
WBC Fragment
Fluorescencia Fluorescencia
6
Blastos (Blasts)
En el dispersograma DIFF, los blastos aparecen en el área indicada como Blasts/Atypical Lympho.
En el dispersograma IMI, los blastos aparecen en el área indicada como Blasts. Por la acción de los lisantes,
los blastos son reducidos a la mitad o a un tercio de su tamaño. Debido a que los blastos poseen un núcleo
condensado, desigual y sólo un pequeño número de gránulos inmaduros, son las células de menor densidad.
GLOSARIO DE PARÁMETROS
HCT: Hematocrito
WBC: Leucocitos MCV: Volumen corpuscular medio
Baso%: Porcentaje de basófilos RDW-SD: Distribución del ancho de la curva de
Baso#: Número de basófilos eritrocitos DS
NRBC: Hematíes nucleados RDW-CV: Distribución del ancho de la curva de
Lymph: Linfocitos eritrocitos CV
Neut: Neutrófilos PLT-I: Plaqueta obtenida por impedancia
Mono: Monocitos PCT: Platocrito
Eo: Eosinófilos PDW : Distribución del ancho de la curva de
RET: Reticulocitos plaquetas
PLT-O: Plaquetas ópticas MPV: Volumen plaquetario medio
HFR: Porcentaje de fluorescencia alta P-LCR: Porcentaje de plaquetas grandes
MFR: Porcentaje de fluorescencia media MCH: Hemoglobina corpuscular media
LFR: Porcentaje de fluorescencia baja MCHC: Concentración de hemoglobina
IRF: Fracción de reticulocitos inmaduros corpuscular media
HPC#: Número absoluto de células HGB: Hemoglobina
pluripotenciales hematopoyéticas Método SLS (Lauril sulfato sódico)
HPC%: Porcentaje de células pluripotenciales Ghost: Fantasma(s), residuo celular después
hematopoyéticas de la lisis de eritrocitos
RBC: Hematíes o eritrocitos Fragment: Fragmento(s)
7
Lista de mensajes interpretativos
Ítem Canal de análisis Parámetro clave Fórmula o regla para la generación de avisos
<Anormal>
WBC Abn Scattergram WBC/BASO, DIFF Dispersograma Determinado de los dispersogramas WBC/BASO y DIFF
NRBC Abn Scattergram NRBC Dispersograma Determinado del dispersograma NRBC
9
Neutropenia NEUT#, NEUT% NEUT# < 1.00 x 10 /L (o % ajustado)
9
Neutrophilia NEUT#, NEUT% NEUT# > 11.00 x 10 /L (o % ajustado)
9
Lymphopenia LYMPH#, LYMPH% LYMPH# < 0.80 x 10 /L (o % ajustado)
9
Lymphocytosis LYMPH#, LYMPH% LYMPH# > 4.00x 10 /L (o % ajustado)
9
Monocytosis MONO#, MONO% MONO# > 1.00 x 10 /L (o % ajustado)
WBC (Leucocitos )
9
Eosinophilia EO#, EO% EOS# > 0.70 x 10 /L (o % ajustado)
9
Basophilia BASO#, BASO% BASO# > 0.20 x 10 /L (o % ajustado)
9
Leukocytopenia WBC WBC < 2.50 x 10 /L
9
Leukocytosis WBC WBC >18.00 x 10 /L
NRBC present NRBC NRBC% NRBC% > 0.02
<Sospecha>
Blasts? DIFF/IMI Dispersograma Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI
Immature Gran? DIFF/IMI Dispersograma Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI
Left Shift? DIFF/IMI Dispersograma Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI
Atypical Lympho? DIFF/IMI Dispersograma Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI
Abn Lympho/L-Blasts? DIFF/IMI Dispersograma Determinado de los dispersogramas DIFF e IMI
NRBC? DIFF Dispersograma Determinado del dispersograma DIFF
RBC Lyse resistance WBC.D vs. WBC Diferencia en el conteo de WBC en los dispersogramas
WBC/BASO y DIFF
<Anormal>
RBC Abn Distribution RBC RL, RU, MP, aviso DW Determinación de valores por cómputo y comparación
de los tamaños de ítems
Dimorphic Population RBC Aviso MP de valores Evaluación basada en la forma del pico y la diferencia
(histograma) entre el pico y la base del histograma
RET Abn Scattergram RET Dispersograma Determinado del dispersograma RET
9
Reticulocytosis RET#, RET% RET% > 0.05 o RET# > 200 x 10 /L
Anisocytosis RDW-SD, RDW-CV RDW-SD > 65fL o RDW-CV > 0.20
Microcytosis MCV MCV < 70 fL
RBC (Hematíes)
PLT Abn Distribution PLT PDW, PL(%), PU(%), PMFV, Determinación de valores por cómputo y comparación
PLT, P-LCR, MPV, PU de los tamaños de ítems
9
Thrombocytopenia PLT PLT < 60 x10 /L
9
Thrombocytosis PLT PLT > 600 x 10 /L
<Sospecha>
PLT Clumps? DIFF, IMI, NRBC Dispersograma Determinado de los dispersogramas DIFF, IMI y NRBC
PLT Clumps (S)? PLT PDW, PL(%), PU(%), PMFV, Determinación de valores por cómputo y comparación
PLT, P-LCR, MPV, PU de los tamaños de ítems
Nota 1) Los límites de los mensajes anormales que están basados en números pueden ser modificados por el usuario.
Nota 2) Las reglas y las fórmulas están sujetas a cambios para mejorarlas.
RL: Posición del discriminador inferior de los hematíes.
RU: Posición del discriminador superior de los hematíes.
PL: Posición del discriminador inferior de las plaquetas.
PU: Posición del discriminador superior de las plaquetas.
PL(%): Porcentaje en el cual el discriminador inferior cruza la curva de las plaquetas, asumiendo que el pico de esta curva es el 100%.
PU(%): Porcentaje en el cual el discriminador superior cruza la curva de las plaquetas, asumiendo que el pico de esta curva es el 100%.
Aviso MP: Aviso generado cuando el histograma de hematíes tiene múltiples picos.
Aviso DW: Aviso generado cuando RDW-SD no puede ser analizado.
8
Pantalla de resultados y su interpretación
Casos en los cuales no aparecen datos en la pantalla
Los mensajes que se muestran en el Categoría En pantalla Interpretación
cuadro son generados cuando apare-
Imposible [-----] El análisis no puede ser realizado debido a que la separación del
cen hallazgos anormales que son in- de analizar diferencial o la autodiscriminación no es posible.
terpretados por el instrumento como Fuera de [++++] El límite de los rangos mostrados ha sido excedido.
error de muestreo (sampling error), rango
error de análisis (analysis error), datos Baja Cuando se detecta una anormalidad en una muestra, esto indica
confiabilidad [*] que los datos no son confiables. (Los resultados pueden ser
fuera de rango (over range), baja con- de datos revisados en el banco de datos).
fiabilidad (low reliability), etc. Error de [----] Los datos no pueden ser obtenidos debido a una falla mecánica.
análisis
• En el caso de WBC<0.10 x 109/L, los datos del diferencial de cinco partes no son emitidos.
• En el caso de WBC<1.00 x 109/L, aparece un asterisco (*) a la derecha del resultado del diferencial de cinco partes, lo
que indica baja confiabilidad.
RBC RET#
RET# RET%
HCT IRF PDW
MCV HGB LFR MPV
MCH MCH RDW RDW MFR PLT PLCR
WBC NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC MCHC MCHC SD CV HFR PLT-O PCT
WBC Abn Scattergram
1)Lymph, Mono -- -- --
2)Neut, Eo -- --
3)Mono, Neut -- --
4)Lymph, Neut -- --
5)Lymph, Baso (DIFF) -- --
6)Mono, Eo -- -- --
7)Ghost, Baso (DIFF) -- -- -- --
8)Ghost, Lymph -- -- -- --
9)Ghost, Neut -- -- -- --
10)Ghost, NLME * * * * * * *
11)BASO, NLME -- --
NRBC Abn Scatergram *
NRBC present * * * * *
Blasts? * * *
Immature Gran? * * *
Left Shift? * *
Atypical Lympho? * * *
Abn Lympho/L-Blasts? * * *
NRBC? * * * * *
RBC Lyse resistance * * * * * *
RBC Abn Distribution
1)MP-Flag * -- --
2)RDW-SD abnormality * -- *
3)Other * * *
Dimorphic Population -- --
RET Abn Scattergram *
RBC Agglutination? *
Turbidity/ HGB Interference? *
Iron Deficiency?
PLT Abn Scattergram * *
PLT Abn Distribution
1)PDW abnormality * --
2) Other * *
PLT Clumps? * * * * * * * *
PLT Clumps(S)? * * * * * * * *
9
Casos en los cuales no aparecen los mensajes interpretativos (IP)
1. Si los parámetros requeridos para la determinación del mensaje (IP) no pueden ser
calculados, aparece la señal (----) o (++++).
2. Cuando el conteo absoluto de leucocitos (WBC#) es menor que 0.50 x 109/L, no se
determinan mensajes de sospecha para los leucocitos.
3. Cuando el conteo absoluto de leucocitos (RBC#) es menor que 0.50 x 1012/L, no se
determinarán mensajes interpretativos de hematíes, excepto RBC Abn Distribution.
4. En las muestras medidas en modos especiales, tales como control de calidad.
Otros
(&) : Indica que los datos fueron corregidos debido a alguna interferencia, como
hematíes nucleados (NRBC) o fragmentos de eritrocitos (RBC).
WBC& : Indica que los resultados fueron corregidos por el conteo de hematíes
nucleados (NRBC), detectados en el canal NRBC.
LYMPH#& : Indica que el número de linfocitos (LYMPH#) fue corregido por el número de
hematíes nucleados (NRBC#), detectado en el canal NRBC.
LYMPH%& : Indica que el porcentaje de linfocitos (LYMPH%) fue corregido por el número
de hematíes nucleados (NRBC#), detectado en el canal NRBC.
PLT& : Indica que los resultados reportados son las plaquetas ópticas PLT-O, debido a
que los resultados del método de impedancia no son confiables.
(@) : Indica que los resultados están fuera de los límites de linearidad.
10
Ejemplos de leucocitosis
Neutrofilia 12
Linfocitosis 13
Monocitosis 14
Eosinofilia 15
Basofilia 16
11
Ejemplos de leucocitosis
Neutrofilia
Observaciones
Este es un caso de neutrofilia donde el conteo manual dio un resultado de 94.5% y el XE-2100 de
93.2%. En el dispersograma DIFF aparecen muchos puntos azules en el área de neutrófilos (in-
dicado por ) típico de neutrofilia. Debido a que el porcentaje de bandas es de 6.5%, pero menor
que 0.9 x 109/L, no aparece el mensaje “Left Shift?”. En este caso no se notan agregados de pla-
quetas, pero sí plaquetas grandes. En consecuencia, aparece el mensaje “PLT Clumps?”.
12
Ejemplos de leucocitosis
Linfocitosis
Observaciones
Este es un caso de linfocitosis donde el conteo manual dio un resultado de 93.5% y el XE-2100 de
94.7%. En el dispersograma DIFF aparecen muchos puntos rosados en el área de linfocitos (indicado
por ), indicativo de linfocitosis.
13
Ejemplos de leucocitosis
Monocitosis
Observaciones
En este caso se midió una cantidad de monocitos de 17.5% por método manual y 18.7% por el
XE-2100. En el dispersograma DIFF aparecen muchos puntos verdes en el área de monocitos (in-
dicado por ), indicativo de monocitosis.
Los puntos están ubicados por encima del área de neutrófilos (indicado por ) en el disper-
sograma DIFF. Esto sugiere la presencia de granulocitos inmaduros (IG), lo cual es corroborado
por la presencia de puntos rojos en el dispersograma IMI. En la pantalla de investigación (re-
search) del XE-2100 se obtuvo 3.5% de granulocitos inmaduros, resultado similar a los 3.5% de
mielocitos y 0.5% de metamielocitos medidos por el método manual.
14
Ejemplos de leucocitosis
Eosinofilia
Observaciones
En este caso se midió una cantidad de eosinófilos de 78.5% por método manual y 81.8% por el
XE-2100. En el dispersograma DIFF aparecen puntos rojos en el área de eosinófilos (indicado
por ), indicativo de eosinofilia.
En el canal DIFF del XE-2100, la unión específica de un ácido orgánico presente en el
STROMATOLYSER-4DS con los gránulos de los eosinófilos, aumenta la intensidad de dispersión
de luz lateral, lo cual permite distinguir entre neutrófilos y eosinófilos.
15
Ejemplos de leucocitosis
Basofilia
Observaciones
En este caso se midió una cantidad de basófilos de 13.5% por método manual y 13.4% por el XE-2100.
En el dispersograma WBC/BASO aparecen grupos de puntos negros en el área de basófilos (indicado
por ), indicativo de basofilia.
En el dispersograma DIFF aparece una mancha azul (indicado por ) en el área rodeada de linfocitos,
neutrófilos y área de fantasmas. Esto indica el área de basófilos en el dispersograma DIFF.
16
Casos de celulas
´ inmaduras de tipo mieloide
Mielofibrosis 28
17
Casos de células inmaduras de tipo mieloide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, los puntos se extienden desde el área de linfocitos y monocitos hacia
zonas de mayor fluorescencia lateral (indicado por ), lo que sugiere la aparición de blastos.
En el dispersograma IMI aparecen muchos puntos rojos en la zona donde la radiofrecuencia (RF)
es baja (indicado por ), lo que sugiere la presencia de blastos (77.5% medido por el método ma-
nual de conteo diferencial).
18
Hallazgos clínicos
En marzo de 1999, un paciente visitó al médico debido a que sufría de fiebre y dolor anal. Al
observarse leucocitosis y presencia de blastos, el paciente fue derivado a nuestro
departamento. En el momento de la admisión, tenía un valor de proteína C reactiva (PCR) de
0.18g/L y una temperatura de 39-40 °C. Los resultados de rayos X y tomografía computarizada
de tórax revelaron neumonía y se observó un absceso anal. En consecuencia, se inició una
terapia con antibióticos. Para la leucemia se ordenó una terapia combinada de Idarubicina y
Citarabina desde el 26 de mayo hasta el 15 de junio, seguido de Citarabina y Daunorubicina.
No se consiguió remisión completa.
(x 1000)
Observaciones
(x 1000) Este es un caso diagnosticado como
LMA-M1. En sangre periférica se en-
contró un 77.5% de blastos tipo I (tama-
ño pequeño, citoplasma angosto, cario-
tipo anormal). Se observó una reacción
leve a la peroxidasa.
19
Casos de células inmaduras de tipo mieloide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, los puntos se extienden desde el área de linfocitos y monocitos hacia
zonas de mayor fluorescencia lateral (indicado por ). El diferencial de leucocitos no puede ser
determinado.
Este es un caso de 95% de blastos medidos por el método manual. Los puntos rojos están
ampliamente distribuidos en el dispersograma IMI, lo que sugiere la presencia de gran cantidad
de blastos.
20
Hallazgos clínicos
Un paciente con malestar general desde mayo de 1999, visitó al médico en junio de ese año.
Debido a que los resultados del laboratorio indicaron leucocitos 28.5 x 109/L (blastos 97.0%),
hemoglobina 84g/L, plaquetas 10 x 109/L y LDH 1,361 IU/L, el paciente fue derivado a nuestro
departamento. Se le diagnosticó LMA-M1 por medio de una punción de médula ósea
realizada el 30 de junio.
Observaciones
La estructura nuclear es fina. Algunas
células tienen uno o dos nucléolos y la
mayoría de ellos son indiferenciados. El
núcleo posee una hendidura en la parte
central. El citoplasma se coloreó azul con
ligera turbidez. El porcentaje de blastos ti-
po I es del 95%. La reacción a la peroxida-
sa fue de nula a moderada.
(x 1000)
Tinción May-Giemsa
(x 1000)
21
Casos de células inmaduras de tipo mieloide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, los puntos se extienden desde el área de linfocitos y monocitos
hacia zonas de intensa fluorescencia lateral (indicado por ). El diferencial de leucocitos
no puede ser determinado.
En el dispersograma IMI aparecen muchos puntos rojos en el área donde la radiofrecuencia
es muy débil (indicado por ). Esto sugiere que los blastos (90% medido por el diferencial
manual) están distribuidos en esa área.
22
Hallazgos clínicos
El 6 de junio de 1999, un paciente presentó dolor en la rodilla derecha y en la articulación de
la cadera, lo que le impedía caminar. El paciente visitó al ortopedista el 7 de junio y se le ad-
ministraron antibióticos, pero los síntomas persistieron. El 9 de junio, visitó el Departamento
de Ortopedia del Hospital T. El hemograma indicó leucocitos 25.7 x 109/L (blastos 95%),
hemoglobina 117g/L y plaquetas 70 x 109/L, por lo que el paciente fue derivado a nuestro
hospital.
Observaciones
Este es un caso de inicio de una LMA-M1. Los
blastos tipo I (coloreados en gris azulado, con
estructura nuclear fina y un gran citoplasma)
comprenden el 90%. Se observó reacción a
la peroxidasa de nula a débil.
(x 1000)
Tinción May-Giemsa
(x 1000)
23
Casos de células inmaduras de tipo mieloide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, los puntos en las áreas de los linfocitos y monocitos (indicado por )
forman una agrupación amplia. El diferencial de leucocitos no puede ser determinado.
En el dispersograma IMI se encuentran muchos puntos rojos (indicado por ). Esto indica que
blastos, promielocitos y mielocitos (90%, 3% y 1%, respectivamente, determinados por el método
manual) están distribuidos en esta área.
En el dispersograma NRBC se observan puntos rosados (indicado por ), lo cual sugiere la pre-
sencia de hematíes nucleados.
24
Hallazgos clínicos
En abril de 1999, un paciente visitó al médico porque tenía algunos nódulos linfáticos
inflamados en la región inguinal. La evaluación clínica reveló un conteo de leucocitos de
3.9 x 109/L (blastos 32%) hemoglobina 80g/L, plaquetas 73 x 109/L y LDH 622 IU/L. Por lo tan-
to, el paciente fue derivado a nuestro departamento.
Al paciente se le diagnosticó LMA-(M2) por medio de una punción de médula ósea efectua-
da el 27 de mayo.
Observaciones
En este caso se encuentran mezclados blastos tipo I (con relación núcleo/citoplasma muy
alta y el citoplasma angosto), vistos en la figura de la izquierda, y blastos tipo II (con
citoplasma ancho y maduro, con gránulos poco distinguibles o distinguibles), los cuales
se ven en las dos primeras figuras. Este es un caso de primera aparición de LMA-M2.
En la figura de la derecha vemos una reacción a la tinción o coloración con peroxidasa
fuerte.
25
Casos de células inmaduras de tipo mieloide
Observaciones
En el dispersograma DIFF no puede determinarse el límite entre linfocitos y monocitos (indicado
por ), lo que sugiere la presencia de blastos. Se encuentran puntos por encima de la zona de
monocitos (indicado por ), lo cual sugiere la aparición de linfocitos atípicos.
Este es un caso de 17.5% de blastos, 3.5% de mielocitos y 1.0% de metamielocitos medidos por el
método manual. Estas células están presentes en el área de puntos rojos en el dispersograma IMI
(indicado por ).
26
Hallazgos clínicos
Un paciente presentó dolor de cuello a fines de enero de 1998. El hemograma reveló pan-
citopenia el 24 de febrero, mientras que el 28 de febrero la punción de médula ósea reveló la
presencia de blastos, por lo que fue derivado a nuestro departamento. Debido a que una
segunda punción reveló un 18.2% de blastos y 3 líneas de malformación, el paciente fue diag-
nosticado como una osteomielodisplasia. Se le administró en dos oportunidades Citarabina
y G-CSF, pero no hubo remisión. Al paciente se le estuvo administrando Etoposida oral y se
le puso bajo seguimiento como paciente ambulatorio.
Observaciones
Este es un caso de síndrome mielodisplásico con anemia refractaria con excesivos blastos
en transformación o SMD (AREB-t), en el cual se encontró un 17.5% de blastos (la relación
núcleo/citoplasma es alta, el citoplasma presenta color gris azulado y se encuentran grá-
nulos azurófilos). Se observan plaquetas y bandas gigantes.
27
Casos de células inmaduras de tipo mieloide
Mielofibrosis
Observaciones
En el dispersograma DIFF aparecen puntos azules distribuidos por encima del área de neutrófilos
(indicado por ). Esto sugiere la presencia de granulocitos inmaduros, lo que es avalado por el hecho
de que aparecen puntos rojos en el dispersograma IMI.
En el dispersograma NRBC aparecen puntos rosados (indicado por ), lo que sugiere la presencia de
hematíes nucleados (NRBC). Los hematíes nucleados medidos por el método manual arrojaron un
resultado de 5 por cada 200 leucocitos, similar al obtenido por el XE-2100 de 3.6 hematíes nucleados
por cada 100 leucocitos.
28
Hallazgos clínicos
A un paciente se le diagnosticó una mielofibrosis en 1991. El 8 de mayo de 1998, el paciente
fue admitido en el Departamento de Radiología con una hipertensión portal complicada por
várices en el esófago y por várices gástricas. Se cree que la razón de las várices fue el au-
mento del flujo sanguíneo en la vena lienal a raíz de la esplenomegalia. El 5 de junio de 1998
se realizó una embolización de la arteria esplénica.
Observaciones
Se observó un aumento de mie-
loblastos y leucocitos segmen-
tados en sangre periférica, ade-
más de un incremento de basó-
filos y plaquetas. Se notó la pre-
sencia de micromegacariocitos
y eritroblastos.
(x 1000) (x 1000)
29
Principio del XE-2100 (1)
Citometría de flujo por láser semiconductor
El XE-2100 ilumina la muestra mediante un rayo láser semiconductor y clasifica las
células por medio de tres señales que estas producen: luz dispersa frontal, luz dispersa
lateral y fluorescencia lateral. La intensidad de la luz dispersa frontal indica el volumen
celular; la luz dispersa lateral, el contenido interno celular, como núcleo y gránulos; y la
fluorescencia lateral, la cantidad de ADN y ARN presente.
30
Casos de células inmaduras de tipo linfoide
31
Casos de células inmaduras de tipo linfoide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, los puntos en las áreas de linfocitos y monocitos forman un solo grupo
(indicado por ). Esto sugiere que los blastos (93% según el método manual) aparecen en esta área.
En el área donde la fluorescencia lateral es más fuerte, se encuentran puntos (indicado por ) que
sugieren la presencia de linfocitos atípicos.
En el dispersograma IMI aparecen puntos rojos que sugieren la presencia de blastos.
En este caso se encontró un eritrocito nucleado por cada 200 leucocitos, según el método manual. En
el dispersograma NRBC aparecen puntos rosados (indicado por ), lo que demuestra que incluso en
las muestras con un pequeño número de hematíes nucleados la detección es sensible.
32
Hallazgos clínicos
Un paciente experimentó pérdida de apetito desde fines de julio de 1999 y desarrolló un
estado febril a principios de agosto, que duró aproximadamente dos días. El paciente visitó
a su médico el 15 de agosto y el examen de sangre reveló leucocitos 101.6 x 109/L,
hemoglobina 64g/L y plaquetas 10 x 109/L. Debido a estos hallazgos, el paciente fue remiti-
do a nuestro hospital.
Observaciones
Este es un caso de diagnóstico nuevo
de LLA-L1. Los blastos constituyen un
93% de las células. Son de tamaño pe-
queño, con alto porcentaje de
núcleo/citoplasma (N/C), poco cito-
plasma y de cariotipo extremadamen-
te anormal, pues presenta lobulación
y reacción peroxidasa negativa.
(x 1000)
Tinción May-Giemsa
(x 1000)
33
Casos de células inmaduras de tipo linfoide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, el límite entre las áreas de monocitos y linfocitos es indistinguible (in-
dicado por ). Además, en el dispersograma IMI no hay puntos rojos que denotarían la presencia
de células inmaduras. Estos resultados sugieren la presencia de linfoblastos.
En el dispersograma NRBC hay puntos rosados (indicado por ), que sugieren la presencia de
hematíes nucleados.
34
Hallazgos clínicos
Un paciente, con malestar general y síntomas de resfrío común, visitó al médico en junio de
1999. Se notó la presencia de leucocitosis, anemia y trombocitopenia. Debido a que en el
diferencial de leucocitos se encontraron blastos, el paciente fue remitido a nuestro
departamento.
(x 1000) (x 1000)
Observaciones
A este paciente se le diagnosticó por primera vez LLA-L1. Los blastos constituyen un
96% de las células. Son de tamaño pequeño, alto porcentaje de núcleo/citoplasma (N/C)
con un solo nucléolo o con nucléolos indistinguibles y peroxidasa negativa.
35
Casos de células inmaduras de tipo linfoide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, los puntos en las áreas que ocupan los linfocitos y monocitos forman
un solo grupo (indicado por ). El diferencial de leucocitos no pudo ser determinado.
En el dispersograma IMI se ven puntos rojos (indicado por ). Esto sugiere la presencia de
granulocitos inmaduros en esta área, los cuales fueron observados en el diferencial manual.
En este caso se encontró, por el método manual, 6 eritrocitos nucleados por cada 200 leucocitos.
En el dispersograma NRBC se observan puntos rosados (indicado por ). El conteo de hematíes
nucleados detectados por el XE-2100 es de 0.5 por cada 100 leucocitos.
36
Hallazgos clínicos
Un paciente, cuyo principal síntoma era la inflamación de un ganglio linfático cervical, visi-
tó nuestro departamento en mayo de 1999. Algunos de los resultados obtenidos fueron
leucocitos 40.9 x 109/L (blastos 85%), hematíes 3.71 x 1012/L, hemoglobina 109g/L y plaquetas
159 x 109/L. A este paciente se le diagnosticó LLA(L2) mediante una punción de médula ósea.
(x 1000)
37
Casos de células inmaduras de tipo linfoide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, el límite entre las áreas de monocitos y linfocitos es indistinguible (indicado
por ). Esto sugiere que los blastos (observados con el método manual) están presentes en esta área.
Los pocos puntos rojos presentes en el dispersograma IMI (indicado por ) sugieren la presencia de
unos pocos granulocitos inmaduros.
38
Hallazgos clínicos
Un paciente que presentaba malestar general visitó al médico en febrero de 1996. Se notó la
presencia de trombocitopenia, leucocitosis y blastos, por lo que fue remitido a nuestro
departamento. En respuesta a la quimioterapia se produjo una total remisión. En enero de
1997 se le realizó un trasplante alogénico de médula ósea, pero el paciente tuvo una recaída
en mayo de 1998. Se obtuvo remisión otra vez en respuesta a la terapia de inducción de re-
remisión. Se produjo recurrencia nuevamente en mayo de 1999. Se le dio una dosis media
de Citarabina que no produjo resultado. Desde el 21 de julio se le comenzó a tratar con
terapia combinada de Citarabina, Enocitabina, Etoposida, Vindesina y Vinblastina.
Tinción May-Giemsa
Observaciones
Este es un caso de recurrencia de LLA-L2. Los
blastos constituyen el 28.5% (presentan alto
porcentaje núcleo/citoplasma, muy poco
citoplasma y algunos núcleos lobulados).
(x 1000)
Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa
(x 1000) (x 1000)
39
Casos de células inmaduras de tipo linfoide
Observaciones
En el dispersograma DIFF, el límite entre las áreas de linfocitos y monocitos es indistinguible (indicado
por ). Además, ningún granulocito inmaduro aparece en el dispersograma IMI. Estos resultados su-
gieren la aparición de linfocitos anormales.
40
Hallazgos clínicos
Un paciente visitó el departamento de medicina general de nuestro hospital en abril de 1996,
debido a un dolor en el hipocondrio izquierdo y progresivo dolor de espalda. Aunque el
conteo de leucocitos fue de 8 x 109/L, se observaron en el conteo diferencial un 55% de lin-
focitos y 8% de linfocitos atípicos, por lo que se le realizó una punción de la médula ósea.
El porcentaje de linfocitos maduros aumentó notablemente a 91.2% y el marcador
de superficie CD19 también aumentó a 67.4%. Este caso fue diagnosticado como LLC.
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Este es un caso de LLC. Los linfocitos maduros son bastante dominantes. Se
observan unos pocos prolinfocitos (alto porcentaje de núcleo/citoplasma y
nucléolos distinguibles).
41
Principio del XE-2100 (2)
Un surfactante provoca lisis completa de eritrocitos y plaquetas, mientras que los leuco-
citos son parcialmente lisados. Un segundo reactivo tiñe los ácidos nucleicos. Este canal
diferencia los leucocitos en cuatro tipos.
Un surfactante en el STROMATOLYSER-4DL causa lisis o destrucción de leucocitos y pla-
quetas, provocando al mismo tiempo pequeñas aberturas en la membrana de los leuco-
citos. Un colorante polimetino en el STROMATOLYSER-4DS migra hacia el leucocito dañado
y se une a los ácidos nucleicos y a los organelos citoplasmáticos. Cuando las células son
expuestas a la luz del láser de 633nm, la intensidad de la fluorescencia es proporcional al
contenido del ácido nucleico. Un ácido orgánico en el STROMATOLYSER-4DL se une espe-
cíficamente a los gránulos de los eosinófilos, lo cual permite diferenciarlos de los neutró-
filos mediante una señal más alta de luz lateral dispersa.
42
Cambios en los resultados durante la terapia
43
Cambios en los resultados durante la terapia
Hallazgos clínicos
En marzo de 1999, un paciente visitó al médico a causa de fiebre y dolor anal. En el frotis se observó
leucocitosis y blastos, por lo que el paciente fue remitido a nuestro departamento. En el momento de la
admisión, el paciente tenía un valor proteína C reactiva (PCR) de 0.18g/L y una temperatura de 39-40 ºC.
Los resultados de las radiografías y un TC de tórax revelaron neumonía, y se observó un absceso anal.
Consecuentemente, se inició una terapia con antibióticos. Para la leucemia, se le administró una terapia
combinada de Idarubicina y Citarabina desde el 26 de mayo hasta el 15 de junio, seguida por Dauno-
rubicina y Citarabina. No se obtuvo una remisión completa.
9 9
(x 10 /L) (x 10 /L)
Discusión
(1) Junio 7, 1999
44
Cambios en los resultados durante la terapia
45
Cambios en los resultados durante la terapia
En el dispersograma DIFF, los puntos en el área de linfocitos y en el área en que la fluorescencia lateral
es fuerte forman un solo grupo (indicado por ). Esto sugiere la presencia de blastos, lo que es
respaldado por el hallazgo de puntos rojos en el área donde la radiofrecuencia es más baja (indicado
por ) en el dispersograma IMI. Estos datos son similares a los obtenidos el 14 de junio.
46
Cambios en los resultados durante la terapia
Hallazgos clínicos
Una mujer de 57 años presentó distensión abdominal el 26 de abril de 1999. Al mismo tiempo, ex-
perimentaba pérdida del apetito y de peso. Ella visitó el Departamento de Medicina Interna en nuestro
hospital el 31 de mayo. Los hallazgos en los exámenes incluyeron leucocitos 180.3 x 109/L, LDH 1,530 IU/L,
los cuales eran mucho más altos que lo normal; por lo tanto, la paciente fue remitida al Departamento de
Hematología. Mediante punción en la médula ósea y examen de cromosomas (ph1 positivo) se le
diagnosticó LMC.
(x 109/L) LEUCOCITOS
LEUCOCITOS
Discusión
Este es un caso de LMC en el que el conteo leucocitario es más de 200 x 109 /L. En el dispersograma
DIFF no se pueden clasificar los leucocitos. En el dispersograma IMI, numerosos puntos rojos están
distribuidos a través de todo el gráfico, lo que sugiere la presencia de muchos granulocitos inmaduros.
47
Cambios en los resultados durante la terapia
El conteo de leucocitos disminuye a la mitad de los datos medidos el 11 de junio como respuesta
a la terapia con Hidroxi Carbamida, Ranimustine y otras. Pero aún es más de 100 x 109/L.
48
Cambios en los resultados durante la terapia
El conteo de leucocitos ha aumentado nuevamente. Los puntos rojos en el dispersograma IMI han
aumentado también. Estos resultados sugieren una recurrencia.
* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.
49
PRINCIPIO DEL XE-2100 (3)
En este canal, el XE-2100 usa señales frontales y laterales de luz dispersa. Un reactivo
acídico produce lisis y reducción del tamaño de los hematíes y las plaquetas. Este reac-
tivo reduce también los leucocitos, dejando solamente los núcleos. Los basófilos perma-
necen casi en su estado original. El conteo total de leucocitos y de basófilos son obteni-
dos a través de este canal.
El surfactante STROMATOLYSER-FB produce, por su acción lisante, fantasmas de hema-
tíes y de plaquetas reduciendo los leucocitos sólo a sus núcleos, con excepción de los
basófilos. Las diferencias volumétricas resultantes entre los basófilos y otras células son
analizadas usando la información de señales de luz dispersa lateral y luz dispersa
frontal.
La intensidad de la luz dispersa frontal indica el volumen de las células, mientras que la
luz dispersa lateral representa la complejidad de los residuos celulares. Los basófilos
aparecen como una población separada. Los núcleos también están separados de los
fantasmas. El conteo total de leucocitos es la suma de los núcleos y basófilos. Los
hematíes nucleados están incluidos en este conteo.
50
Casos de células de apariencia específica
Muestra infantil 56
Linfoma blástico NK 58
51
Casos de células de apariencia específica
Observaciones
En el dispersograma DIFF aparecen puntos rosados en el área donde la fluorescencia es fuerte
(indicado por ), lo que sugiere la presencia de linfocitos atípicos. Se observaron linfocitos atípicos
(6%) en el frotis, lo que concuerda con los mensajes de sospecha generados por el XE-2100.
52
Hallazgos clínicos
Un paciente que tenía un poco de fiebre y crecimiento sistemático de los nódulos linfáticos,
visitó al médico en octubre de 1999. Debido a que el conteo de linfocitos, la proteína total y
la γ globulina habían aumentado, el paciente fue remitido a nuestro departamento. El
resultado de los exámenes reveló leucocitos 12.6 x 109/L (linfocitos atípicos 10%), hematíes
3.70 x 1012/L,hemoglobina 106g/L, plaquetas 177 x 109 /L, proteína total 96g/L y porcentaje de γ
globulina del 48.9%. A este paciente se le diagnosticó un linfoma célula T angioinmu-
noblástico mediante una biopsia en el nódulo linfático derecho, la que se efectuó el 4 de
noviembre de ese año.
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Se encontraron linfocitos atípicos de Downey tipo I (con citoplasma teñido de azul
oscuro). La estructura nuclear es áspera y algunos linfocitos atípicos presentan lo-
bulación nuclear. Los hematíes se presentan en forma de rollos.
53
Casos de células de apariencia específica
Observaciones
En el dispersograma NRBC aparecen puntos rosados (indicado por ), lo que sugiere la presencia de
hematíes nucleados. El resultado obtenido por el XE-2100 es 9.1 hematíes nucleados por cada 100
leucocitos, similar a los datos obtenidos con el método manual.
En el dispersograma RET, puntos en el área de fluorescencia baja y hematíes maduros forman un grupo
redondo (indicado por ). Este tipo de dispersograma se presenta muy pocas veces.
54
Hallazgos clínicos
A una paciente se le diagnosticó una enfermedad de células falciformes cuando tenía tres
años de edad. En su segundo parto fue internada en el Departamento de Obstetricia y Gi-
necología de nuestro hospital. Los exámenes del 26 de octubre de 1999 revelaron leucocitos
11.1 x 109/L, hematíes 1.78 x 1012/L, hemoglobina 86g/L, Hematocrito 18.6%, plaquetas
379 x 109/L, T-Bil 27 µ mol/L, LDH 1,197 IU/L, AST 75 IU/L y ALT 24 IU/L.
Fotografía de microscopía
electrónica
Observaciones
Este es un caso de enfermedad de células fal-
ciformes. Se encontraron numerosos eritro-
blastos y poiquilocitos con forma falciforme, los
que se confirmaron como células falciformes en
la prueba para la determinación de anemia
falciforme.
(x 2000)
Fotografía de microscopía de fase de
contraste
Tinción May-Giemsa (Análisis de anemia falciforme)
(x 1000) (x 400)
55
Casos de células de apariencia específica
Muestra infantil
Observaciones
En el dispersograma DIFF, todas las células se agrupan generalmente en la región donde la sensibilidad
a la fluorescencia es menor. Este patrón se considera característico de la sangre de los niños.
Los puntos rojos difusos en el dispersograma IMI (indicado por ) sugiere la presencia de granulocitos
inmaduros. Se considera que los mielocitos (0.5% según el método manual) están distribuidos en esta
área.
Este caso presenta 4 hematíes nucleados por cada 200 leucocitos, según el método manual. En el dis-
persograma NRBC, los puntos rosados (indicado por ) sugieren la aparición de hematíes nucleados.
56
Información obtenida del análisis del frotis
(x 1000)
(x 1000)
57
Casos de células de apariencia específica
Linfoma blástico NK
Observaciones
En el dispersograma DIFF, hay puntos que se extienden incluso por encima del área de neutrófilos
(indicado por ). Esto sugiere la presencia de granulocitos inmaduros. Los datos obtenidos según el
método de conteo manual (2.5% de mielocitos + 0.5% de metamielocitos) son similares a los datos de
2.2% de granulocitos inmaduros obtenidos en la pantalla de investigación del XE-2100. Linfocitos
atípicos (28.5% según el método de conteo manual) se ubican entre las áreas de linfocitos y monocitos
(indicado por ). Por lo tanto, estos dos tipos de células no pueden ser clasificadas.
En el dispersograma IMI aparecen puntos rojos (indicado por ). Esto indica la presencia de mielocitos
y metamielocitos (observados en el método manual) en esta área.
58
Hallazgos clínicos
Un paciente visitó el Departamento de Dermatología de nuestro hospital a causa de un tumor
sistémico múltiple (diámetro de 1-5 cm) en abril de 1999. A este paciente se le diagnosticó un
linfoma maligno mediante una biopsia del tumor. Los resultados del examen realizado el 10
de junio revelaron leucocitos 11.2 x 109/L (linfoma atípico 23%), LDH 691 IU/L y sIL 2R 3.625
U/L. El análisis del frotis de sangre periférica mostró que este caso era un linfoma blástico de
linfocitos tipo NK.
Observaciones
Se observan linfocitos atípicos grandes cuya
estructura nuclear es áspera. También se
observan células (con baja lobulización
nuclear) que son clasificadas como linfocitos
anormales.
(x 1000)
Tinción May-Giemsa
(x 1000)
59
Principio del XE-2100 (4)
Tinción
Hematíes
60
La intención de los mensajes generados por este instrumento se limita
a la identificación de muestras que contengan células anormales,
sujetas a revisión por personal de laboratorio calificado.
SYSMEX CORPORATION
División Científica