Chương 4

KẾT QUẢ
Thí nghiêm 1: Khảo sát thăm dò thành phần của môi trường: trấu, cám và cơ chất cảm ứng
Cố định môi trường nuôi cấy ở pH 5, độ ẩm 60%, nhiệt độ 30 0C và bổ sung 2% muối
(NH4)2SO4.
Sau thời gian nuôi cấy 3 ngày sẽ thu mẫu đo hoạt tính enzyme.
Thay đổi tỷ lệ giữa cám, trấu và cơ chất cảm ứng (CMC) theo tỷ lệ (%) như sau:

Cám 25 30 40 50 60 70 75 80

Trấu 74 75 69 70 59 60 49 50 39 40 29 30 24 25 19 20

CMC 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0

Kí
A1 B1 A2 B2 A3 B3 A4 B4 A5 B5 A6 B6 A7 B7 A8 B8
hiệu

BẢNG 1: Kết quả phân tích hoạt tính enzyme endoglucanase

Hoạt tính enzyme (U/g)
Môi trường
Lần 1 Lần 2 Trung bình
A1 1.51 1.78 1.645
A2 2.39 3.35 2.87
A3 5.47 4.17 4.82
A4 4.79 7.32 6.055
A5 3.35 4.45 3.9
A6 9.58 9.79 9.685
A7 13.69 14.64 14.165
A8 10.95 12.32 11.635
B1 1.78 2.6 2.19
B2 2.87 2.94 2.905
B3 2.6 3.7 3.15
B4 2.74 3.49 3.115
B5 6.02 7.87 6.945
B6 9.79 8.62 9.205
B7 10.2 12.73 11.465
B8 9.58 12.8 11.19
Từ kết quả trên qua phân tích thống kê ANOVA với mức ý nghĩa 5% cho thấy mẫu A7 có
thành phần môi trường 75%cám +24%trấu + 1%CMC cho hoạt tính cao nhất (14.165U/g)
Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của điều kiện nuôi cấy đến sản lượng enzyme
endoglucanase thu được
- Độ ẩm: chọn độ ẩm môi trường nuôi cấy là 60%
- Thời gian nuôi: D1= 2, D2= 3 và D3= 4 ngày
- pH: E1= 4,5; E2= 5,0; E3= 5,5
- Ủ mốc ở 3 khoảng nhiệt độ ký hiệu: F1= 25, F2= 30 và F3= 350C
+ Thu nhận sản phẩm enzyme
Kết thúc thời gian nuôi lấy mẫu xay mịn, cho nước vào, ly tâm thu được dịch enzyme
+ Chỉ tiêu theo dõi
Lượng enzyme tạo thành bằng cách đem cân lượng enzyme thu được.
Hoạt độ enzyme thu được bằng cách xác định hoạt độ enzyme.
Bảng 2: Kết quả phân tích hoạt tính enzyme ở thí nghiệm 2
Hoạt tính enzyme endoglucanase(U/g)
Điều kiện môi trường
Ngày
Nhiệt độ pH 2 3 4
4 0.67 0.56 0.78
25 4.5 2.12 2.03 1.52
5 2.96 4.67 1.39
5.5 2.13 2.39 1.51
4 2.77 3.14 3.57
30 4.5 11.72 9.84 6.99
5 10.36 13.65 8.19
5.5 5.16 7.54 5.54
4 2.59 2.79 2.89
35 4.5 5.57 8.11 5.62
5 6.15 10.27 6.03
5.5 3.52 9.14 5.62
 16

14

12
4
10
4.5
Hoạt tính
(U/g)

8 5
5.5
6

0
2 3 4 2 3 4 2 3 4
25oC 30oC 35oC Ngày-Nhiệt độ

Đồ thị biểu diễn hoạt tính Cellulase theo ngày và nhiệt độ

Từ kết quả trên qua phân tích thống kê ANOVA với mức ý nghĩa 5% cho thấy mẫu
D3E5F30 ( điều kiện 3 ngày, pH 5, nhiệt độ 300C) cho hoạt tính cao nhất (13.65U/g)