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PRUEBAS SEROLOGICAS

Las pruebas serológicas son forma de


evaluación relativas , que detectan
concentraciones de inmunoglobulinas .
Se detectan en diferentes enfermedades :
hepatitis , sífilis , chagas etc.
Toda prueba Dx. Posee dos características :
La sensibilidad y la especificidad .
Sífilis
Enfermedad sistémica contagiosa causada por
la espiroqueta Treponema pallidum y
caracterizada por fases clínicas secuenciales y
años de latencia .
Se clasifica en adquirida y congénita
 Sífilis adquirida : Etapas
Fase primaria : Chancro; linfoadenopatía
regional .
Continuación
Fase secundaria : diversas lesiones dermatológicas que
imitan a varios trastornos , por ejemplo ; exantema
cutáneo , erociones de las mucosas , alopecia y otras
muchas manifestaciones .
Fase latente : ( asintomático )
Fase tardía o terciaria . ( sintomática no contagiosa ) :
S. terciaria benigna , S. cardiovascular y neurosífilis
.
 Sífilis congénita : Precoz sintomática observada en
lactantes de hasta 2 años . Tardía : observada en
épocas posteriores de la vida : dientes de
Hutchinson , cicatrices de queratitis intersticial .
Diagnóstico
Pruebas serológicas para sífilis : Existen
pruebas treponémicas y no treponémicas
P. No treponémicas : determinan anticuerpos
reagínicos que se detectan con un antígeno
a base de cardiolipina lecitina y colesterol
altamente purificado .. Son relativamente
específicas , no son exclusivas para la sífilis
.
Continuación …
 VDRL: Venereal Disease Research Laboratory .
Prueba de floculación , en la que los anticuerpos
reagínicos presentes en el suero del paciente
reaccionan visiblemente con cardiolipina .
Numerosos procesos pueden aumentar las reaginas
séricas e inducir positividad del VDRL
Los resultados se informan como positivos
débilmente positivos y negativos
Continuación …
RPR : Rapid plasma reagin . Prueba de floculación
macroscópica .
Esta prueba es más sensible pero menos específica .
Utilizada para detección y cuantificación de
reagina .
Se aplica para la selección rápida de pacientes de los
que se sospecha que tienen sífilis .
Para la revisión de la respuesta inmunológica al
tratamiento .
Pruebas Treponemicas
El antígeno utilizado es Treponema pallidum ,
su finalidad es detectar anticuerpos
antitreponémicos específicos que aparecen
en infecciones como : Sífilis , frambesia ,
tienen mayor especificidad , confirman
datos obtenidos en pruebas no treponémicas
, estas pruebas son complejas y costosas .
TPI, FTA-Abs , TPHA .
SALMONELLOSIS
Los 2,200 serotipos conocidos de Salmonella
se pueden agregar en 1) adaptados al
huésped humano 2) adaptados a huéspedes
no humanos o 3) no adaptados a huéspedes
específicos . El primer grupo comprende S.
typhi y S. paratyphi A, B y C que sólo son
patógenos para humanos y causan de modo
habitual fiebre entérica
FIEBRE TIFOIDEA
Enfermedad sistémica causada por S. typhi y
caracterizada por fiebre, postración , dolor
abdominal y exantema de color rosado .
Los m.o penetran en el cuerpo a través del T.
G. y llega al torrente sanguíneo por canales
linfáticos . Se produce inflamación
linfocitica en el ileon y colon dentro de la
lámina propia y las placas de Peyer .
Continuación
El diagnostico se basa en el aislamiento
de bacilos tifoideos mediante cultivo ,
pero el cuadro clínico y las anomalías
hematológicas pueden sugerir el Dx.
Los bacilos tifoideos se suelen aislar en
cultivo de sangre o médula ósea sólo
durante las dos primeras semanas de
enfermedad , mientras que los cultivos
de heces son en general positivos
durante la tercera a quinta
ANTIGENOS FEBRILES (WIDAL )
 Anticuerpos de clase IgM e IgA frente a
antígeno somático “0” son los primeros
en aparecer elevandose hasta 1/400 .Se
detectan por aglutinación mediante la
reacción de Gruber-Widal , títulos bajos
1/100 aunque inespecíficos también
tienen valor .
 Ap. Contra el antígeno flagelar suelen
aparecer al 10 día .
TORCH
Prueba sanguínea que detecta ciertas infecciones
presentes en el recién nacido , nos referimos a :
Toxoplasma , Rubéola Citomegalovirus y Herpes
simple .
Las razones para su realización son determinar
infecciones congénitas a través de la placenta que
pueden llevar a malformaciones , retraso en el
crecimiento y problemas neurológicos .
También se hace necesario evaluar a la madre para
interpretar las pruebas del recién nacido .
TOXOPLASMOSIS
Infección por T. gondii , que causa toda una gama de
manifestaciones desde linfadenopatía benigna
asintomática hasta enfermedad del SNC en
potencia letal , coriorretinitis y retraso mental .
El feto en desarrollo y los pacientes
inmunodeprimidos experimentan riesgo especial
de enfermedad grave .
La ingestión de ooquistes procedentes de los
excrementos de los gatos representan el modo más
común de contagio oral , también ocurre al comer
carne poco cocida que contiene quistes tisulares .
Toxoplasmosis
 La determinación de Ig M específica es la que
resuelve más dudas en el embarazo .
 Títulos menores de 1:16 indican que
probablemente nunca ha habido una infección .
Títulos de 1:16 a 1:256 probable infección previa
Títulos de 1:1024 infección activa de toxoplasma
 La detección de títulos anti-Toxoplasma gondii en
LCR también pueden ser diagnóstico .
Rubéola
 Los anticuerpos pueden cuantificarse mediante
inmunofluorescencia o mediante ELISA ,
importante el Dx. de esta infección durante el
embarazo pues se asocia al desarrollo de
malformaciones . Se debe valorar Ig. M.
 Títulos iguales o superiores a 1/64 de IF. o de 50-
200 unidades ELISA indican buena protección .
Citomegalovirus
El diagnóstico de la infección por (CMV)suele
realizarse mediante la demostración de Ap. clase
IgM , a través de las pruebas de Elisa o
evidenciando una seroconversión .
Infecciones por Herpesvirus
Se pueden cuantificar los niveles de anticuerpos
contra los distintos tipos de herpesvirus .El virus
del herpes simples subtipo 1 y 2 es una causa poco
frecuente , pero muy grave de encefalitis , es de
gran utilidad la demostración de antígeno en tejido
cerebral por inmunofluorescencia e
inmunoperoxidasa .
 Legionelosis
 La técnica SEROLÓGICA más utilizada es la IFI
pero también técnicas de ELISA y de
microaglutinación.

 El título diagnóstico para una sola determinación


ha de ser mayor o igual a 1/256 y si se trata de dos
determinaciones seriadas se requiere un aumento
de 4 veces el título inicial que como mínimo debe
ser mayor o igual a 1/128.
Leishmaniasis
El diagnóstico serológico resulta útil en la
leishmaniasis visceral .La técnica más útil
parece ser la inmunofluorescencia
indirecta .
Se considera diagnóstica la existencia de
seroconversión . Si se dispone de un solo
suero títulos mayores o iguales a 1/64
apoya el diagnóstico si se trata de zonas no
endémicas .
leptospirosis
 Zoonosis que afecta a animales domésticos y salvajes varía
desde una infección inaparente hasta la enfermedad fatal .
 Existe un estado de portador en donde los animales
eliminan leptospiras con la orina durante meses
 Las infecciones humanas se adquiere por contacto con la
orina o tejidos de un animal infectado o en forma indirecta
por contacto con agua o tierras contaminadas .
 Puede ser una enfermedad laboral pero también se
adquiere de modo accidental durante actividades
recreativas ( al nadar en aguas contaminadas )
Leptospirosis
El método diagnóstico más utilizado es el que
consiste en la aglutinación macroscópica en
suspensión de leptospiras vivas y lectura
microscópica en fondo oscuro .
Con una sola muestra se precisa un título de
1/300 - 1/500 para poder considerarlo como
significativo .
Sarampión
El diagnóstico serológico se basa en la
demostración de la seroconversión o
presencia de la IgM específica .Los títulos
máximos se obtienen dos semanas después
del comienzo del exantema cuatro semanas
después de la inmunización .Luego
descienden a los seis meses siguientes , para
mantenerse posteriormente más o menos
estables .
Triquinosis
El diagnóstico serológico se basa en una
técnica de floculación. Títulos >a 1/5 son
significativos pero con esta técnica hay que
tener presente que la detección de Ap no es
posible hasta tres o cuatro semanas después
de la infección , aunque después persisten
dosificables durante años .
Ultimamente se está utilizando un técnica
ELISA más sensible y precoz .
Yersiniasis
La prueba serológica más empleada es la
aglutinación , exigiéndose títulos mayores o
iguales a 1/160 .

Es posible la existencia de falsos positivos


en las infecciones por distintos tipos de
Yersinia , así como Francisella tularensis
Vibrio cholerae y también Salmonella.
Enfermedad de Lyme
La detección de anticuerpos específicos por
inmunofluorescencia indirecta frente al
agente responsable de la enfermedad de
Lyme “ Borrelia burgdorferi es una técnica
útil para el diagnóstico de esta enfermedad .
Los anticuerpos IgM alcanzan su máximo
entre la tercera y sexta semana después del
comienzo de la enfermedad , mientras que la
IgG aumenta más lentamente existiendo una
tasa mayor meses más tarde coincidiendo con
la aparición de artritis.
Fiebre botonosa mediterránea
El diagnóstico se realiza por :
Pruebas de Fijación de complemento : 1/20
Microaglutinación !/160
IFI : !/40 .
Estas pruebas suelen positivizarse entre 7 y 15
días de iniciada la enfermedad .
La inmunofluorescencia indirecta suele dar
falsos positivos con Rickettsia mooseri.
AMEBIASIS
El diagnóstico serológico es de mucha utilidad en esta
patología sobre todo en las formas extraintetinales. La
técnica más útil parece ser la hemaaglutinación pasiva .

Se consideran títulos significativos los mayores o iguales


a 1/ 256, sobre todo en zonas no endémicas .
BRUCELOSIS

El diagnóstico serológico práctico de la brucelosis se


basa en las pruebas de seroaglutinación , de Coombs-
antibrucela y de Rosa de Bengala
HCG Latex :Test de Embarazo
 Hormona producida por el tejido
placentario de la mujer embarazada.
 Excretada en sangre y orina durante el
embarazo puede detectarse entre el 7 al 10
día de la concepción
 Los niveles continúan elevándose hasta
100,000 - 3 000 000 mUI/L.al término del
primer trimestre del embarazo .
HIDATIDOSIS
 Zoonosis que tiene como agente etiológico la
forma larvaria de Equinococcus granulosus .
 Causa : perros infectados en zonas endémicas .
Deficiente control veterinario en camales .
 Manifestaciones clínicas : pulmones, hepática ,
óseo , SNC, corazón , riñones cerebro
 Diagnostico de laboratorio : Inmunoserològico
 Punción de quiste contraindicado .
PRUEBA DE DOBLE DIFUSION
Arco 5 .
 Reacción de precipitación antígeno
anticuerpo en un medio semisólido que
consiste en detectar en el suero de un
paciente Anticuerpos contra el Antìgeno del
Arco 5 , mediante la identidad
inmunológica con un suero control positivo
 Precipitación
 Unión de antígeno – anticuerpo complejo al
principio soluble . Se aglomeran formando
redes si la relación es óptima precipitan por
el alto peso molecular alcanzado .
 Visualizándose bandas o líneas de
precipitación
Materiales y Reactivos utilizados
para la prueba
 Caja con los reactivos .
 Suero control.
 Antígeno hidatídico y diluyente.
 Placa con agar noble.
 Saca bocados de acero: 10, 6, 1 mm
 Suero del paciente.
GUIA DE LECTURA

Ag4
Sp1 Sp2
Sc3

1.- Suero en estudio (resultado positivo)


2.-Suero en estudio (resultado negativo)
3.- Suero control positivo (a Ag del arco 5)
4.- Antigeno
El que no entiende una
mirada tampoco entenderá
una larga explicación …
GRACIAS

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