Ao del Centenario de Machu Picchu para el mundo

Instituto Superior Tecnolgico Daniel A. Carrin

ESPECIALIDAD LABORATORIO CLNICO
CURSO : INSTRUMENTACION DE LABORATORIO

DOCENTE

Lic. ORTEGA GLORIA

ALUMNA

GARCIA TRINIDAD, FIORELLA

CICLO

III

SECCION

3ML21

TURNO

MAANA

LIMA - PERU 2011

FECHA
ASISTENCIA

27/04/11

04/05/11

11/05/11

18/05/11

25/05/11

01/06/11

08/06/11

   

   

   

   

PRESENTACIN ENTREGA DE FOLDER DESEMPEO EN LA PRACTICA

PRACTICA N 09 RECONOCIMIENTO Y USO CORRECTO DEL BAO MARIA, INCUBADORA, MICROPIPETA, COCINILLA Y AGITADOR ORBITAL
OBJETIVO y y

Reconocer equipos de laboratorio. Usos de los equipos de laboratorio.

MATERIALES y y y y y

1 equipo vacutainer tubo de tapa roja. Guantes Algodn Alcohol Pipetas serolgica de distintos colores

EQUIPOS y y y y

Bao mara Cocinilla Agitador orbital Micropipeta

MARCO TERICO INCUBACIN

Este proceso es muy utilizado en microbiologa. Los microorganismos para mantenerse viables y poder desarrollar necesitan una temperatura adecuada lo que se consigue al ser introducidos en las incubadoras. Se puede incubar medios de cultivos de bacterias, hongos y en general cualquier estructura viva. Las incubadoras proporcionan calor por encima de la temperatura ambiental y no con rangos tan elevados que destruiran los microorganismos vivos.

Existen dos mtodos de incubacin:

1) Incubacin por calor sec o

Este tipo de incubacin se realiza en incubadoras, estufas de cultivo, e incluso en hornos. a) Incubadoras.- Proporciona calor seco a travs del aire caliente que circula por el interior del aparato, calor es generado por un aparato de calentamiento (mechero o juego de resistencias). La temperatura requerida puede controlarse mediante un termostato, el que se compone de una tira bimetlica que opera como un interruptor elctrico, conectado a un aparato de calentamiento.  Incubadora de conveccin mecnica. - El aire circula por accin de un ventilador. b) Estufas de cultivo.- Tambin sirven para incubar medios de cultivo u otras estructuras vivas. Tienen dos paredes y son de forma cbica. c) Hornos.- Los hornos aparte de servir para esterilizar, tambin pueden ser utilizados para incubar. Las incubadoras y hornos se basan en los mismos principios, la diferencia radica simplemente en la T que puede obtenerse en su interior. Usualmente se denomina horno al aparato que es capaz de soportar T de 100C o ms. El ms conocido es el horno Pasteur.
2) Incubacin por Calor Hmedo (bao mara)

Este tipo de incubacin se realiza con el llamado bao mara. Est constituido de una bandeja que posee un dispositivo enrollable que es sumergido en el agua y la calienta. La fuente de calor es por medio de una corriente de conveccin, lo que permite que el agua se caliente en forma ms uniforme. La cubierta de la incubadora tiene doble finalidad, mantener la temperatur a requerida en el interior del aparato y reducir el ndice de evaporacin. El agua de condensacin se acumular en la parte inferior de la tapa; y para impedir que esta agua gotee a los tubos de ensayo cultivados debe tener una tapadera que permite un dre naje adecuado.

Horno de Agua Caliente

Bao Mara

TIEMPO DE COAGULACIN
OBJETIVO y

Aprender a controlar al tiempo de coagulacin de la sangre, extrada del paciente.

MATERIALES PARA LA EXTRACCIN DE SANGRE VENOSA y y y y y

Tubo al vacio tapa roja. Algodn Ligadura Alcohol 70 Guantes quirrgicos

MATERIALES PARA LA PUNCION DEL LOBULO y y y y

Algodn Alcohol Lanceta Papel filtro

PROCEDIMIENTO

1) Extraer sangre venosa 4ml en vacutainer tapa roja, luego separar la sangre en cantidad de 2ml en cada tubo, luego llevar a bao mara a 37C, controlar el tiempo para determinar el tiempo de coagulacin.
y

La sangre debe congelarse de 5 - 10 minutos mximo.

Llevar ambos tubos a bao mara para ver tiempo de coagulacin.

PUNCIN EN EL LBULO EXTERNO DEL OIDO Mide el tiempo de hemorragia

Esto consiste en pinchar el odo, esperando que salga la primera gota, se procede a tomar el tiempo en segundos hasta que seque el sangrado. Cada gota extrada del odo, desde la primera se coloca en papel filtro, formando cada una de estas una lnea.
Razones por las que se realizan el examen

Ayuda a diagnosticar problemas de sangrado.

Valores normales

El sangrado normal se detiene entre 1 5 minutos.

o En nuestro paciente dio como resultado siguiente:

7 gotas x 30 seg = 210 3 1/3 minutos

Algunos apuntes dems Micropipetas.- Es un instrumento de laboratorio empleado para observar y

transferir pequeos volmenes de lquidos y permitir su manejo en las distintas tcnicas cientficas. Micropipeta de Embolo Amarillo: Pipetear volmenes pequeos, por ejemplo: 10 ul. Micropipeta de Embolo Azul: Pipetear volmenes grandes, por ejemplo: 800 ul.

Micropipeta

Punta para micropipeta

CONCLUSIONES y

Es importante conocer y saber usar los equipos (bao mara, incubadora, micropipetas) en el laboratorio, ya que son de fcil uso y son frecuentemente utilizados en prcticas. El tiempo de coagulacin y tiempo de sangra son de mucha importancia para detectar una posible enfermedad.

BIBLIOGRAFIA

Instrumentos de Laboratorio. Mendo Rubio.

WEBGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/equipolaboratorio .

PRACTICA N 10 PREPARACION DE AGENTES DESINFECTANTES, FILTRO DE MEMBRANAS, CABINA DE FLUJO LAMINAR

OBJETIVO y

Preparar y determinar el uso de desinfectantes para mejorar la calidad de higiene en los ambientes como: hospitales, laboratorio, etc.

MATERIALES y y y y

2 beacker 1 probeta 1 pipeta 1 piceta

REACTIVOS y y

Betagen Etanol al 96%

DESINFECTANTES

DAN (Desinfectantes de alto nivel)

y Alcohol etlico 96% 70% alcohol comercial

Preparar 20ml de alcohol al 70 C1 . V1 = C2 . V2 96 . V1 = 70 . 20 V1 = 14,6 ml de alcohol 5,4 ml de agua destilada

Betagen

Para bacterias y virus Para hongos

4ml de Betagen para 1 lt. de H2O destilada 8ml de Betagen para 1 lt de H2= destilada

Preparar

1ml de Betagen Eliminacin de Bacterias 250ml de H2O destilada

Resultados:

DESINFECTANTES

Se denomina desinfeccin a un proceso fsico o qumico que mata o inactiva agentes patgenos tales como bacterias, virus, protozoos, impidiendo el crecimiento de microorganismos patgenos en una fase vegetativa que se encuentran en organismos vivos. Los desinfectantes se aplican sobre objetos inanimados como instrumentos y superficies, para tratar de prevenir infecciones.
CABINA DE FLUJO LAMINAR O CMARA O CAMPANA DE FLUJO LAMINAR

Es un receptculo en forma generalmente prismtica con una nica cara lib re (la frontal) que da acceso al interior; donde se localiza la superficie de trabajo, que normalmente permanece limpia y estril.
y Modo de uso:

Dentro de estas cabinas se trabaja con obleas de semiconductor, cultivos celulares, muestras biolgicas o cualq uier otro sistema que deba mantenerse limpio y deba evitarse la contaminacin de partculas minsculas. Su sistema de cierre, estn diseados para evitar contaminacin. La cabina se construye de acero inoxidable, sin espacio o juntas donde las esporas pued an acumularse.

Estas cabinas tienen una lmpara de rayos ultravioleta con accin germicida para esterilizar el recinto y su contenido.

Cabina de flujo laminar

CONCLUSION y

Es de suma importancia saber la cantidad de concentracin de los reactivos en un desinfectante, para as saber en qu ambiente usar.

WEBGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/desinfectante http://es.wikipedia.org/wiki/cabinadeflujolaminar.

PRACTICA N 11 RECONOCIMIENTO Y USO CORRECTO DEL ESPECTROFOTMETRO I

OBJETIVO y y

aprender a utilizar el espectrofotmetro. Practicar diluciones.

MATERIALES y y y y y

Pipeta graduada de franja azul es decir 5ml. 0,1. Propipeta 4 tubos 1 gradilla Piceta

PROCEDIMIENTO

 Tomamos o indicamos al Nitrato de Cobalto como reactivo de Glucosa.  Rotular los tubos de 1 -7 y a cada uno de estos agregar 1ml de agua destilada.  Al tubo 1 aadir glucosa; sacar de este 1ml y aadir al siguiente. repetir este procedimiento hasta el 7mo. tubo, al cual se le extrae despus del procedimiento 1ml, se elimina.  Luego estos 7 tubos son llevados al espectrofotmetro para su posterior lectura.

Luego son llevados al espectofotmetro. Longitud de onda. Observacin = 510mm x 5 seg.

Antes de comenzar se calibra con un tubo blanco extra.

Absorvancia

Tubo blanco = 0.100 Tubo nitrato = 0.756 En la observancia va de mayor a menor. Absorvancia 1/2 = 0.390 Absorvancia 1/4 = 0.208 Absorvancia 1/8 = 0.083 Absorvancia 1/16 = 0.037 Absorvancia 1/32 = 0.052 Absorvancia 1/64 = 0.011 Absorvancia 1/128 = 0.035 Nunca debe subir despus de bajar, esto significa que la dilucin est mal hecha.
y

El signo negativo significa que no homognea la dilucin.

TRANSMITANCIA

Se calibra con el tubo blanco a 100.0. En la transmitancia va de menor a mayor. Tubo de Nitrato de Cobalto 20.9 Transmitancia 1/2 = 56.1 Transmitancia 1/4 = 82.0 Transmitancia 1/8 = 88.4 Transmitancia 1/16 = 114.2 Transmitancia 1/32 = 117.3 Transmitancia 1/64 = 110.2 Transmitancia 1/128 = 115.4

ESPECTOFOTOMETRO

Este equipo es utilizado en el laboratorio clnico para el anlisis de muestras fisiolgicas. La lectura de las sustancias se da por la absorcin de luz de cada molcula en la sustancia. Este equipo trabaja con ondas de luz el cual es graduado para cada tipo de sustancia. La diferencia entre un espectrofotmetro y un fotocolormetro es en que el primero trabaja con una determinada longitud de onda, mediante filtros fijos y el otro trabaja con el espectro de luz visible.

CONCLUSION y

Para utilizar un espectrofotmetro y realizar un anlisis hay que aprender a ser precisos en la dilucin.

BIBLIOGRAFIA

Instrumentacin de Laboratorio. Mendo Rubio.

PRACTICA N 12 USO Y CUIDADOS DEL ESPECTROFOTMETRO FACTOR CURVA DE CALIBRACION OBJETIVOS y

Aprender a identificar el pico mximo de absorbencia de la muestra. Clase full prctica con el espectrofotmetro

Lo llevamos a varias longitudes de onda.

TRANSMITANCIA

350 0.115 360 0.118 370 0.104 380 0.045 390 0.102 400 0.098 410 0.098 420 0.181 430 0.208 440 0.293 450 0.376 460 0.450

470 0.494 480 0.623 490 0.643 500 0.774 510 0.801 520 0.764 530 0.669 540 0.509 550 0.348 560 0.240 570 0.150 580 0.101

590 0.104 600 0.097 610 0.083 620 0.076 630 0.063 640 0.077 650 0.060

CURVA DE CALIBRACIN

Es un grfico que se realiza en papel milimetrado, papel logartmico y semilogaritmico. Esta curva se realiza en base o utilizando stndares st.

FACTOR DE CALIBRACIN

El factor de calibracin a reemplazarlo a la curva de calibracin excepto para la prueba de transmitancia. El factor es un nmero que se obtiene en base a estndares. El nmero se obtiene al dividir la concentracin de estndar entre la absorbencia de estndar, deben conocerse como mnimo 2 estndares.

RECONOCIMIENTO Y MANEJO DEL POTENCIOMETRO INDICADORES BUFFERS OBJETIVO y

Aprender a diferenciar el pH de las sustancias en un laboratorio clnico.

MATERIALES y y y y y y y y y

5 tubos Probeta Beaker Matraz Gotero Pipeta Propipeta Esptula Piceta pH metro potencimetro

REACTIVOS y y y y y

Fenolftalena Anaranjado de metilo Papel tornasol rojo Papel tornasol azul Papel universal

PROCEDIMIENTO

1) Na OH 0.01 N Hidrxido de sodio

Na = 23 O=1 H = 16

40 X

1mol 0.01N 0.4gr.

2) H2SO4 0.01N

cido sulfrico H2 = 2 S = 32 O = 64 98 X 1mol 0.01N 0.98

3) HCL 0.01N

cido clorhdrico H=1 Cl = 25 36 X X = 0.36 1mol 0.01N

4) N2HCO3 0.01N Bicarbonato de sodio N2 = 28 H=1 C = 12 O = 48 99 X 1mol 0.01N 0.99

Se procede a ver la reaccin con los indicadores (papel tornasol, papel universal) colorantes (fenolftalena, anaranjado de metilo). Con el potencimetro se debe calibrar antes de usar con reactivos de: pH 4 pH 7 pH 10 Para luego medir el pH de cada sustancia.
SOLUCIONES INDICADORES DE pH

En el laboratorio se utilizan determinados colorantes denominados soluciones indicadores porque tienen la propiedad de cambiar de color cuando se encuentran en un medio base o medio cido. Estos miden de forma aproximado.

El indicador ms conocido es la fenolftalena ; dicho colorante es incoloro en medio cido y de color grosella en medio alcalino, este medio permite averiguar si una solucin es alcalina o cida. El indicador anaranjado de metilo es un medio cido, cambia a rojo; en un medio alcalino sigue siendo anaranjado. El papel tornasol rojo cambia a azul en sustancia alcalina; en sustancia cida no cambia. El papel tornasol azul cambia a rojo en sustancia cida, en sustancia alcalina no cambia. El potencimetro mide de forma precisa, es un instrumento que mide la diferencia de potencial entre dos electrodos: un electrodo de referencia (generalmente de plata/cloruro de plata y un electrodo de vidrio que es s ensible al in hidrgeno). Para utilizar el equipo se usa buffer pH4, pH 7, pH 10, para calibrar el equipo y obtener un resultado exacto.

RESULTADOS
ANARANJADO DE METILO PAPEL DE TORNASOL ROJO PAPEL DE TORNASOL AZUL UNIVERSAL POTENCIOMETRO

FENOLFTALENA

Limn

No cambia

Rojo

No cambia

Rojo

3.11

Cerveza Hidrxido de sodio cido sulfrico Bicarbonato de sodio cido clorhdrico

No cambia

Anaranjado

No cambia

Rojo

4.85

Fucsia fuerte

Cereza

Azul

No cambia

14

12.49

No reacciona

Rojo

No cambia

Rojo

2.14

Fucsia

Rojo

Azul

No cambia

7.65

No cambia

Rojo

No cambia

Rojo

1.5

1.46

CONCLUSIONES y

Los indicadores y colorantes viran de color cuando se ponen en contacto con una solucin cida o alcalina. Estos dan solo cantidades aproximadas de pH. El potencimetro nos da un resultado exacto.

BIBLIOGRAFIA

Enciclopedia Paramdica Laboratorio. Tomo 1. 3er. Ciclo.

PRACTICA N 14 PROCEDIMIENTO DE DESTILACION OBJETIVOS y

Conocer los procedimientos para la destilacin.

DESTILACION

Es un proceso que consiste en separar los diferentes componentes de una mezcla mediante el calor, para ello se calient a esta sustancia normalmente lquida, para que sus componentes ms voltiles pasen a estado gaseoso o vaporizacin y a continuacin volver esos componentes al estado lquido mediante condensacin por enfriamiento. El principal objetivo es separar los dife rentes componentes de una mezcla aprovechando para ello sus distintos grados de volatilidad, la finalidad es obtener el componente ms voltil en forma pura, por ejemplo: la eliminacin de agua de glicerina evaporada, el agua se llama evaporacin; pero la eliminacin de agua del alcohol recibe el nombre de destilacin. Este cambio se da porque el grado de ebullicin es menor que el agua. Alcohol 70 H2O + glicerina
DESIONIZADOR AGUA DESIONIZADA

78.5 100C

Es un proceso el cual utiliza recinas de intercambio inico de fabricacin especial que elimina las sales inicas del agua. Tericamente puede eliminar el 100% de las sales. La desionizacin no elimina compuestos orgnicos ni bacterias, ni virus.

El agua destilada es mejor que e l agua desionizada.

PRACTICA DEPARTAMENTO DE INVESTIGACION DOCENCIA Y APOYO AL DIAGNOSTICO EN NEUROPATOLOGIA OBJETIVOS y

Reconocimiento de materiales en el servicio de Anatoma Patolgica.

MICROTOMO

Del griego micros que significa pequeo, y temnein, que significa cortar. Es un instrumento de corte que permite obtener rebanadas muy finas de material, conocidos como secciones. Los micrtomos son un instrumento muy importante de la microscopia porque permiten la preparacin de muestras para su observacin en microscopios de luz transnitida o de radiaciones de electrones. Los micrtomos utilizan cuchillos de acero, vidrio o diamante.  Objetivo El objetivo del micrtomo es conseguir cortes lo suficientemente finos (de 4 a 6 micrmetros) del tejido incluido (en parafina) para su posterior visualizacin con el microscopio ptico.  Componentes y material necesario El micrtomo se compone de: un porta bloques con orientacin regulable que avanza sobre una cuchilla discontinuamente, un porta cuchillos con un sistema para regular la inclinacin de la cuchilla, una palanca que acta de tornillo macromtrico que acerca o aleja el porta bloques a la cuch illa, un tornillo micromtrco que mueve el porta bloques de arriba abajo hacindolo incidir sobre la cuchilla y un tornillo en donde el grosor de los cortes. El material necesario para realizar la microtoma adems del micrtomo es: una cuchilla para micrtomo, un bao con agua relativamente caliente para estirar los cortes ya que se pliegan, una aguja histolgica para recoger los cortes realizados y ponerlos en el bao para que se estiren, una bolsa de

basura para tirar lo devastado y los cortes inservibl es, un cepillo para limpiar el micrtomo, portaobjetos para recoger los cortes elegidos del bao y un lpiz de grafito para numerar las partes.  Procedimiento tcnico Se procede a colocar todo el material necesario en la mesa del micrtomo para no perder tiempo, se coge un bloque de parafina del refrigerador y se eliminan los restos de parafina d su periferia, se coloca en el porta bloques, se orienta el porta bloques y la cuchilla, se pone un grosor de 20 micrometros para devastar hasta conseguir un corte uniforme en el que aparezca toda la superficie del tejido, se cambia el grosor a 4 6 micrometros para obtener cortes finos que se recogen con la aguja histolgica y se depositan en el bao. Una vez estirados se recogen los cortes, seriados o no, con partes numeradas para su secado en la estufa. Se limpia el micrtomo y se recoge todo el material. El bloque se vuelve a guardar en el refrigerador.
ESTACION DE PARAFINA

 Objetivos Es lograr un bloque consistente en el que este incluido el tejido procesado previamente para poder obtener cortes finos (de 4 a 6 micros de grosor) con el micrtomo.  Componentes Est compuesto de un dispensador de parafina, un recipiente con parafina lquida para depositar las muestras que no se van a recubrir con parafina por el momento, una placa fra para que se endurezcan los bloques ya recubiertos y un aparato para los recipientes de metal en los que se ponen los tejidos.  Procedimiento tcnico

Se coge un cassette del recipiente con parafina lquida, se abre, se pone el tejido en un recipiente de metal (que estn calientes) y encima se coloca la parte de abajo del cassette. Se le hecha parafina por encima (apretndolo en la palanca unas pinzas para que salga la parafina del dispensador), se deja enfriar unos segundos y se le vuelve a echar parafina, se pone en la placa fra para endurecer el bloque de parafina. Una vez enfr iado se guarda en el refrigerador hasta el momento de realizar los cortes con el micrtomo.

PROCESADOR DE TEJIDO

 Objetivos El objetivo del procesador de tejidos es rellenar los espacios de los tejidos intro y extracelular para otorgarle consistencia para la posterior microtoma.  Componentes del procesador El procesador est compuesto por diez recipientes de cristal y dos de metal con resistencia. Los recipientes de cristal se reparten de la siguiente forma : 2 para etanol de 80, 2 para etanol de 96, 3 para etanol de 100 o absoluto y 3 para xilol. En los de metal se introduce parafina que se deshace por accin del calor y penetra en los tejidos dndoles una cierta consistencia. Adems las muestras van introducidas en un cestillo metlico que se va moviendo automticamente.  Procedimiento tcnico Para comenzar la inclusin hay que programar el procesador, lo cual se hace de la siguiente manera: a los dos primeros recipientes se les da un tiempo de dos horas, a los ocho siguientes un tiempo de una hora y media, y a los dos de parafina que son los ltimos, se les da un tiempo de dos horas. Hecho esto se procede a introducir el cestillo con las muestras en el primer recipiente y cuando termina en este se pasa automticamente al segundo y

as sucesivamente hasta terminar el programa. El programa dado puede ser modificado dependiendo del laboratorio donde se trabaja. Una vez sacadas las muestras del procesador de tejidos se ponen en la estacin de parafina para recubrirlos por fuera con este material.

CONCLUSION y

Los equipos especializados ya mencionados sirven de gran ayuda para el estudio de una muestra histolgica.

WEBGRAFIA

www.wikipedia.com www.leicainstrumentos