SEPARACIN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFA SOBRE PAPEL 1.

INTRODUCCIN Entre todos los caracteres ms externos de los vegetales, el ms notable y caracterstico es probablemente el color. El color no es nicamente un carcter llamativo de la vegetacin, sino que, adems, algunos de los pigmentos que lo condicionan estn estrechamente ligados a las actividades fisiolgicas del propio vegetal. Por consiguiente, el estudio de cmo las plantas viven y se desarrollan, requieren el previo conocimie nto de los pigmentos vegetales. Si es posible encontrar en el reino vegetal todos los matices y combinaciones de colores del espectro, existe un predominio general de los colores primarios: verde, amarillo, rojo, azul. Estos colores son conferidos a los ve getales por determinados compuestos qumicos definidos, llamados pigmentos. El color particular que presenta un determinado rgano vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro o la combinacin de ellos. Se debe tener claro que cuando un vegeta l presenta un color blanco, es debido a la falta de tales pigmentos. La luz solar que incide sobre ellas no es absorbida selectivamente como ocurre en las partes coloreadas, sino que es transmitida o reflejada prcticamente sin sufrir modificacin.

Las Clorofilas. El color verde tan uniformemente presente en los vegetales es debido a la
presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados clorofila a y clorofila b. Se encuentran prcticamente en todas las plantas con semilla, helechos, musgos y a lgas. Pueden formarse en las races, tallos, hojas y frutos a condicin de que estos rganos estn situados por encima del suelo y queden expuestos a la luz. Tambin aunque aparentemente falten en algunas hojas de color rojo o amarillo, cuando se extraen l as otras sustancias colorantes de estas, puede comprobarse incluso all la presencia de las clorofilas, que estaban enmascaradas por los dems pigmentos. Estos pigmentos se encuentran en el interior de las clulas vegetales especficamente en una organela llamada cloroplasto. Los cloroplastos son simplemente plstidos que contienen pigmentos cloroflicos. Los compuestos cloroflicos estn ligados qumicamente con las estructuras internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan retenidos en estado coloidal. Asociados con las clorofilas, existen tambin en los cloroplastos dos clases de pigmentos amarillos y amarillo-anaranjados que son la s xantofilas y carotenoides.

2. OBJETIVOS  Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcn ica sencilla de cromatografa en papel.   Reconocer la vitamina C (cido ascrbico) mediante azul de metileno. Observar el efecto y accin del calor y el cobre sobre la Vitamina C.

3. MATERIALES Y MTODOS 3.1. Aportado por el alumno:    Hojas de Espinaca fresca 3 limones 1 naranjas    1 pia pequea 1 Paquete de gasa 250 ml de alcohol de 96

3.2. Materiales del Laboratorio:               Mortero Embudo Matraz Papel Filtro 8 Tubos de ensayo 4 Vasos de precipitacin de 100 ml 1 Vaso de precipitacin de 250 ml 1 Vaso de precipitacin de 600 ml Cocina elctrica Tabla de picar Cuchillos Mortero Sulfato de Cobre al 1 % Agua destilada

4. PROCEDIMIENTO 4.1. EXTRACCIN DE PIGMENTOS 1. Lavar las hojas de espinacas, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el alcohol y una pequea cantidad de carbonato clcico (que evita la degradacin de los pigmentos fotosintticos). Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso. 2. Filtrar con un embudo y papel de filtro. 3. Colocar el filtrado en una placa Petri, y sobre ella pon un rectngulo de unos 15 centmetros de ancho por 10 centmetros de alto doblado en V para que se mantenga en pie sobre la placa de Petri. 4. Dejar as el montaje y esperar unas horas. Los pigmentos se irn separando segn su adsorcin. 5. Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografa, vemos cuatro bandas o zonas (figura), que corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca. Segn su grado de solubilidad con el alcohol se reconocen estas bandas y en este orden:     clorofila b clorofila a xantofila carotenos

4.2. ENSAYOS SOBRE LA VITAMINA C EN ZUMOS a.- Reconocimiento de vitamina C (cido ascrbico) mediante azul de metileno. En varios tubos de ensayo numerados se vierten 3 ml. de zumo de limn, de naranja, de pia y soluciones que contengan vitamina C, se les aade unas gotas de azul de metileno, formndose una mezcla azul. Agitar las mezclas y dar una interpretacin de lo ocurrido en cada tubo de ensayo.

b.- Accin del calor y el cobre sobre la vitamina C. En un tubo de ensayo (nmero 1) se vierten 4 ml. de zumo de limn o de otras bebidas con vitamina C, se les aade unas gotas de disolucin de sulfato de cobre al 1 % y se deja reposar para una observacin posterior. En un segundo tubo se vierten otros 4 ml. de zumo de limn o de otra bebida, unas gotas de la disolucin de sulfato de cobre y se hierve durante diez minutos. Se retira, se deja enfriar y se le aade una gota de azul de metileno. Observar lo ocurrido. En el tercer tubo de ensayo se vierte slo 4 ml. del zumo de limn o de otra bebida. A los quince minutos de iniciada la experiencia se aade una gota de azul de metileno a los tubos 1 y 3. Se observarn y se interpretarn los resultados obtenidos. 5. BIBLIOGRAFA

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