Professional Documents
Culture Documents
Cc bnh thi r v thn do tc nhn gy bnh tn ti trong t l nguyn nhn gy thit hi nng sut nghim trng cho cy trng Vit Nam. Tnh cht trng trt quanh nm ti cc vng chu th Vit Nam, s lan truyn ca cc tc nhn gy bnh trong nc ti, thot nc km, cy ging khng sch bnh v kh hu nhit i l nhng yu t to iu kin thun li cho s pht trin ca cc bnh ny. Bnh do cc tc nhn c ngun gc t t gy ra cc triu chng khng in hnh, nh ci cc, vng l, ho v cht cy. Cn lu rng mt s tc nhn gy bnh khc cng nh su c thn, sng cun n r, v nhng iu kin t bt li cng c th gy ra nhng triu chng ny. Nhng bnh ny do mt s tc nhn gy bnh ph bin, bao gm nm, vi khun gy bnh v tuyn trng k sinh thc vt. Nhng tc nhn gy bnh lit k Bng 10.1 c nhng c tnh chnh sau: chng tn ti trong t qua mt thi gian di khi khng c mt k ch, v ngun bnh trong t tng dn qua vi nm (chu k ma v) chng u c ph k ch rng, ngoi tr cc dng loi (formae speciales) ca Fusarium oxysporum chng c th lan truyn theo: nc ti t do ng vt v ngi mang ging b nhim bnh (c khoai ty, c gng, cy ging) chng thng khng phn tn nh gi. Vi khun gy bnh ho cng c th tn ti trong ht ging.
105
Nhiu bnh r, Rng thn, l v qu ca cy trng lu nm Thi gc (ho nhanh) h tiu, thi r t v cc bnh khc Rng
Bo t hu, si nm trong tn d cy bnh v c th c bo t trng trong t Bo t hu, si nm trong tn d cy bnh trn rung v c th c bo t trng trong t Bo t hu, si nm trong tn d cy bnh v c th c bo t trng trong t
Phytophthora capsicia
Phytophthora nicotianaea
Rng
Ho Fusarium
C chua
Bo t hu trong Mch dn ha nu t, xm nhim c r cy khng phi l k ch Bo t hu trong Mch dn ha nu t, xm nhim c r cy khng phi l k ch Bo t hu trong Mch dn ha nu t, xm nhim c cy khng phi l k ch; trong ngun ging Hch nm ln, mu en trong t Hch nm trn, nh, mu nu trong t Hch nm l du hiu chn on trn ng rung Hch nm l du hiu chn on trn ng rung
Ho Fusarium
u H lan
Ho Fusarium
Chui
Thi gc thn
Rng
106
Ph k ch Rng
Nhn xt Hch nm l du hiu chn on cho mt s loi trn ng rung; si nm phn nhnh vung gc trong mu cy trn mi trng
Ho Verticillium Ho Verticillium
Rng Rng
Si nm trong Mch dn ha nu tn d cy bnh Hch nm cc Mch dn ha nu nh trong t, si nm trong tn d cy bnh Vi khun trong t, tn d cy bnh v vt liu nhn ging Thn ha nu v dch khun l nhng c tnh chn on trn ng rung
Ralstonia solanacearuma
Ho vi khun
Rng
Meloidogyne
Rng
Tuyn trng ng Tuyn trng ci sng ngh trong t trong nt sng r - mt c tnh chn on Tuyn trng ng C th nhn thy cc ngh trong t vt lot trn r bng knh lp cm tay Cc triu chng sng r c th chn on c trn ng rung; thm vi vo t phng tr
a Vic chn on chnh xc nhng tc nhn gy bnh ny ph thuc vo qu trnh phn lp v gim nh sau trong phng th nghim. Cn thc hin th nghim ly bnh nhn to chng minh chng l tc nhn gy bnh chnh trn cc k ch ti a phng, tr khi vic ly bnh nhn to c thc hin trc y Vit Nam. b Nhng loi ny cha c chnh thc ghi nhn Vit Nam.
Nhng tc nhn gy bnh ny thng b b st do kh gim nh (xem Khung 10.1) - a s nhng vi sinh vt ny ch c th c gim nh chnh xc trong phng th nghim. Hai hoc nhiu tc nhn gy bnh ny c th cng lc nh hng n mt cy trng trong cc vng trng rau thm canh Vit Nam. Chng hn nh mt rung t c th b bnh ho vi khun, thi r Phytophthora v thi gc thn. Su c thn cng c th cng lc gy hi. Tt c nhng tc nhn ny u gy ra cng triu chng (ho v cht).
107
L tng nht l cc cy b bnh thi r v thn c kim tra ti phng th nghim trong vng vi gi sau khi thu thp, khi 'cn ti'. V vy, cc phng th nghim chn on bnh cy c bn cn c t cc Chi cc Bo v thc vt cp tnh gn khu vc sn xut nng nghip. Cc phng th nghim chn on bnh cy quc gia nh Vin Bo v thc vt H Ni c th gim nh mu vi sinh vt nui cy, mu tiu bn, vi rt, tuyn trng v vi khun gy bnh thc vt.
Khung 10.1 Lu khi chn on: phn bit ho mch dn do thi r v thi thn
Trong mt s trng hp rt kh quyt nh nguyn nhn ca cc triu chng khng in hnh nh ci cc, vng l v ho. Cc bnh gy ho mch dn v cc bnh thi r, thi thn thng gy ra cc triu chng ny. S di y hng dn cch phn bit cc bnh ny.
Thn (mch dn) b nu + c dch khun* Thn (mch dn) b nu + khng c dch khun Ho vi khun Ho Fusarium hoc Ho Verticillium Tc nhn gy bnh thi r v thn (do nm hoc vi sinh vt ging nm) hoc Tuyn trng k sinh thc vt hoc Sng r
Ghi ch: Dch khun c th kh pht hin trong nhng giai on u khi cy mi nhim bnh do Ralstonia solanacearum.
C th d nhm ln ho Fusarium vi ho vi khun v ho Verticillium (hin l mt bnh ngoi lai Vit Nam). Chng gy ra cc triu chng tng t v u gy hin tng ha nu mch dn. Tuy nhin, cy b ho do vi khun thng c chn on nh s xut hin ca dch khun. Nu khng c du hiu ca dch khun th nn phn lp xc nh xem nguyn nhn l do F. oxysporum hay Verticillium. Cc dng loi ca F. oxysporum c th c phn bit d dng vi Verticillium albo-atrum v V. dahliae trn mi trng nhn to. Cc tn nm Verticillium mc chm so vi cc tn nm F. oxysporum.
Lun lun ly bnh nhn to cho cc mu Fusarium phn lp t r trc khi kt lun chng l tc nhn gy bnh.
108
Cc loi Fusarium ch yu gy cc bnh ho v thi thn c, r c trn rau v hoa. Chng khng phi l tc nhn ph bin gy bnh thi r. Tuy nhin, nm F. oxysporum v F. solani thng sng hoi sinh trn cc m r nh hng bi cc tc nhn gy bnh khc, v d dng c phn lp trn mi trng khng chn lc.
Bng 10.2 cung cp thng tin v Sclerotinia sclerotiorum, mt loi nm gy thi thn, qu v hoa.
Bng 10.2 c tnh ca Sclerotinia sclerotiorum
Cc triu chng chnh Cc du hiu chn on Ph k ch Thi t m cy S c mt ca si nm mu trng v cc hch nm ln, mu en vi hnh dng bt nh Gy hi trn nhiu cy trng hai l mm (l rng) bao gm c chua v khoai ty, x lch, u tng, lc, u c ve ln, u c ve leo, ci bp, sp l xanh, sp l trng v bu b. Thch hp vi thi tit m t v lnh Hch nm tn ti trong t qua thi gian di. Trong iu kin hi m, hch nm ny mm to ra qu th a. Cc qu th a to ra cc bo t ti xm nhim vo cy. Bo t ti c sinh ra t qu th a. Cc bo t ti thng xm nhim vo cy v tr nch l. Cc cnh hoa gi cng to iu kin thun li cho nm bnh trong qu trnh xm nhim. Lun canh vi cc cy trng nh ng v bng, trnh tn cy qu dy (tn dy lm cho m bn trong cao to iu kin thun li cho nm bnh xm nhp). 1. Kh trng b mt thn cy bnh bng cch nhng trong cn tyl 70% v kh trn giy kh trng (giy lau mt hoc giy v sinh cht lng cao cng c th dng c). 2. Ct nhng ming cy t ranh gii gia m khe v m bnh ri dng dng c v trng cy ln mi trng thch ng khoai ty. 3. Lm thun bng phng php cy nh sinh trng si nm. Nm cng c th c phn lp t hch nm: 1. Kh trng b mt hch nm 1 pht trong cn tyl 70%. 2. Ra li bng nc v trng v t kh. 3. Ct i hch nm. 4. Cy ming hch ln mi trng thch ng khoai ty sao cho mt ct tip xc vi mt thch.
Thi tit Bo tn
Xm nhim
Phng tr
Phn lp
109
Hnh 10.1 minh ha chu k bnh ca Sclerotinia sclerotiorum v Hnh 10.2 l mt lot cc hnh nh cho thy s gy hi ca Sclerotinia sclerotiorum trn nhiu cy trng khc nhau, cng nh cc hch nm v qu th a.
cy ho v cht
Bnh
nm gy thi t thn, l, qu v hoa
Tn ti Xm nhim
qu th a pht trin t hch nm
110
g c
Hnh 10.2 Sclerotinia sclerotiorum gy hi: (a) u c ve leo, (b) x lch, (c) ci bp (thi t), (d) ci bp, (e) qu th a t hch nm tn d cy u tng; (f ) qu th a cnh cy u c ve ln; (g) u c ve leo (hch nm hnh thnh trn qu u); (h) hch nm ny mm to ra qu th a
111
10.2
Sclerotium rolfsii
Phng tr Phn lp
112
Hnh 10.3 Sclerotium rolfsii: (a) trong th nghim ly bnh nhn to (ch cc si nm lan ra), (b) trn da hu b thi, (c) thi gc vi s hnh thnh cc hch nm hnh cu mu nu
C nhiu loi v chng Rhizoctonia Vit Nam. Nhng loi ny kh a dng v phn b v ph k ch ca chng. Vic gim nh hnh thi n loi l rt kh. Vit Nam c nhiu bnh do Rhizoctonia gy ra (Hnh 10.4). Mt s loi pht trin, xm nhim, gy bnh trn thn cy v b mt l trong iu kin thi tit m, ma hoc m cao. V d, mt loi Rhizoctonia xm nhim vo l ng v gy ra triu chng bnh kh vn in hnh trn l (Hnh 10.4d). Ngi ta cho rng cng loi , hoc mt loi tng t, gy thi bp ci bp. Nhng nm ny c th sinh ra cc hch nm mu nu vi hnh dng bt nh trn b mt cy b bnh. Rhizoctonia oryzae gy bnh kh vn trn la, mt bnh rt ph bin.
113
Hnh 10.4 Cc v d v bnh Rhizoctonia: (a) triu chng nhn nh u mc r bnh, (b) bnh kh vn trn la do Rhizoctonia, (c) hch nm ca Rhizoctonia trn ci bp b bnh, (d) bnh do Rhizoctonia trn v ng
Cc loi Rhizoctonia cng gy hin tng l c r cy con nh u c ve, ci bp, lc v bng. Triu chng l c r do nm xm nhim phn c r st mt t c th lm cht cy con. Bnh thi r Rhizoctonia hnh thnh do nm xm nhp vo cy nh sinh trng ca cc r ph nh. Nm sau pht trin t u r v lan vo r chnh lm thi r. Rhizoctonia xm nhim nh sinh trng ca r con thng a n triu chng 'u mc' r (Hnh 10.4a). Bng 10.4 cho thy nhng c im ca nm Rhizoctonia, l nm gy ra nhiu bnh trn nhiu cy trng khc nhau.
114
Du hiu chn on
Ph k ch Thi tit
Bo tn Xm nhim
Phng tr
Phn lp
115
Cc chi Phytophthora v Pythium thuc lp Oomycetes trong Gii Chromista. Nh vy, chng khng phi l nm thc m l vi sinh vt ging nm. Nhng chi ny sn sinh ra cc si nm khng vch ngn, mt c im chnh phn bit chng vi cc chi nm thc.
Pythium
Phytophthora
Hnh 10.5 Du ng bo t Pythium c gii phng qua bc gi (tri), v du ng bo t Phytophthora c gii phng trc tip t bc bo t (phi)
116
Mt s loi Phytophthora, nh P. cinnamomi, to bo t hu trn mi trng nhn to. Cc bo t ny c chc nng bo tn trong t.
bo t trng
Hnh 10.6 S minh ha qu trnh sinh sn hu tnh Pythium, lin quan n s tip xc gia ti c v ti non to ra bo t trng
117
Cc loi Pythium thng to ra rt nhiu si nm bng xp mu trng trn mi trng thch ng khoai ty (PDA), chon ngp a cy (Hnh 10.7). Mt s loi Pythium mc rt nhanh, v c th che kn mt a PDA ln (ng knh 90mm) trong vng di 2 ngy. Ngc li, cc loi Phytophthora thng mc chm hn, to ra t si nm trng hn. Tuy nhin, y khng phi l mt tiu ch tin cy phn bit hai chi ny.
Hnh 10.7 Pythium sp. (tri) v Phytophthora sp. (phi), cho thy c tnh mc nhanh v to thnh cc si nm kh sinh trn a Pythium
Cc loi Pythium thng sn sinh bc bo t v du ng bo t trn mi trng thch nc ct (WA) hoc PCA sau khi nc ngp mi trng. Trng thi sc vi nhit thp (5-10C trong khong 2 gi) c th gip cho vic sn sinh bc bo t Pythium. Mt s loi Pythium ng tn cng c th sn sinh bo t trng trn WA. Tuy nhin, mt s mu cy ca cc loi Pythium ng tn mc trn mi trng nc v trng c cha l la c kh trng sn sinh rt nhiu ti non v ti c iu kin nhit thng. Tham kho ti liu m t hnh thi cc loi Pythium nhm gip vic gim nh ti mc loi v chuyn mu cy n cc phng th nghim c uy tn khng nh li kt qu gim nh. Cc loi Pythium phn lp c Vit Nam cng sn sinh bc bo t v du ng bo t trn mi trng nc l la. Mt s loi Phytophthora sn sinh bc bo t trn mi trng chn lc cho Phytophthora (PSM) nu c t trong iu kin c chiu sng. Mt s loi cng sn sinh bc bo t trn PCA, mi trng nui cy c chun b sn trong phng th nghim.
118
Vic hnh thnh bc bo t c th c kch thch bng cch cy mt ming agar khong 1cm2 t mi trng PSM hoc PCA vo mt a Petri nc v trng v di nh sng trong 2 ngy. Nn tham kho nhiu cun sch hay c xut bn c thm thng tin su rng hn. Tham kho sch Phytophthora Diseases Worldwide ca Erwin v Ribeiro (1996) tm thng tin m t chi tit cc bc bo t ca cc loi Phytophthora nhm gip cho vic gim nh. tr gip cho vic gim nh Phytophthora, nn tham kho thm cun Practical Guide to Detection and Identification of Phytophthora ca Drenth v Sendall (2001) Phn ln cc loi Phytophthora gy bnh ph bin Vit Nam l d tn, nh P. capsici, P. palmivora, P. nicotianae, P. infestans, P. cinnamomi v P. colocasiae. Lu P. heveae l loi ng tn, v vic sinh sn hu tnh P. citrophthora l him. Trong loi d tn, sinh sn hu tnh c cn lai cc c th c dng gii tnh khc nhau. Vic ny c th khng thc hin c cc phng th nghim chn on bnh cy cp tnh. Cch thc hnh thnh v hnh thi ca cc bc bo t Phytophthora l tiu ch thc tin cho vic gim nh nhng loi quan trng nht Vit Nam nu c cc ti liu tham kho ng tin cy nh Erwin v Ribeiro (1996).
Du ng bo t ca Pythium thng c hnh thnh trong bc gi cui ng tho. Ngc li, cc du ng bo t ca Phytophthora thng c hnh thnh trc tip trong bc bo t. y l mt c im tin cy phn bit gia hai chi ny.
119
Pythium c th gy cht cy con, nhng him khi gy cht cy trng thnh. Tuy nhin, chng c th gy thi r con trm trng v cn tr qu trnh hp thu cht dinh dng, khin cy ci cc, hi vng v gim nng sut.
Bng 10.5 cung cp thng tin v Pythium, l nm trng gy bnh trn nhiu cy trng khc nhau.
Cy ho v cht
Bnh
Tn ti Xm nhim Bo t trng trong t
120
Hnh 10.9 (a) Th trng ca Pythium spinosum vi thy th c bm vo, (b) bo t trng trng thnh ca P. mamillatum, (c) bc bo t P. mamillatum vi ng tho v bc gi cha cc du ng bo t ang pht trin, (d) bc bo t ca P. irregulare vi cc du ng bo t trng thnh trong bc gi c vch mng trc khi c gii phng ra ngoi, (e) Cc bc bo t hnh ngn P. myriotilum, (f ) cnh mang bc bo t v bc bo t c trng ca Phytophthora sp.
121
Bo tn
Xm nhim
Phng tr
Phn lp
122
Hnh 10.10 Cc bnh do Pythium trn lc: (a) thi r con v thi thn cy con do Pythium trong iu kin rt m t, (b) so snh hai cy trng thnh, cy khe (tri), cy ci cc do thi r nng (phi), (c) thi r ci v qu lc trm trng do Pythium.
123
Vic chn on i hi qu trnh phn lp v gim nh tc nhn gy bnh. Triu chng ho cng c th do cc tc nhn khc lm thi r v thn. Cch thc xm nhim ty thuc tng loi. Tuy nhin, bo t trng, bc bo t ng v du ng bo t to iu kin cho vic xm nhim vo cc b phn khc nhau ca cy. Ma tt phn tn bo t ln b l ca cy v vy qu trnh xm nhim c th bt u t thn, l v qu, ty thuc loi Phytophthora v k ch. Cn trng b hoc bay cng c th mang nm t t ti cc b phn pha trn ca cy. Ph k ch ca Phytophthora ty thuc vo tng loi c th. Mt s loi nh P. palmivora c ph k ch rng, trong khi cc loi khc nh P. infestans c ph k ch hp. Cc tc nhn gy bnh bo tn di dng bo t trng v/ hoc bo t hu trong t, v c th c di chuyn theo vt liu nhn ging, t hoc nng c c cha nm bnh. Cc bnh do Phytophthora thch hp vi iu kin m t. Lng ma cao ti cc vng nhit i thc y qu trnh lan truyn ca du ng bo t v cc mm bnh khc theo nc ma tt. Du ng bo t cng di chuyn theo nc trong cc lch v knh ti tiu. Nhiu loi Phytophthora a iu kin nng m trong khi mt s loi nh P. infestans (mc sng), li a iu kin m t v mt. phng tr thnh cng cc bnh do Phytophthora thng phi c s kt hp cc bin php phng tr khc nhau: thot nc tt dng ging sch bnh ngn chn Phytophthora vo nhng vng khng nhim bnh dng phn g c ch hot ng ca tc nhn gy bnh trong t tim phosphonate vo cy nhng r cy con vo thuc trc khi trng gim s cy con cht. Phytophthora c th c phn lp trc tip t cc phn l cy bnh, nh l da, dng mi trng phn lp chn lc. V phng php, tham kho quy trnh phn lp t mu bnh thi nn da c m t bng hnh nh trong phn nghin cu c th bnh thi nn da (Phn 3.1). Phn lp t r cy bnh c th kh hn nhiu do c nhiu nm v vi khun hoi sinh mc trong cc m r bnh. Tham kho quy trnh phn lp tc nhn gy bnh r Phn 6.3.2. Nn dng by phn lp Phytophthora t r nh v t. Tham kho chi tit v phng php ny phn by tc nhn gy bnh t r v t (Phn 6.3.4).
Ph k ch
Bo tn
Kh hu
Phng tr
Phn lp
124
Hnh 10.11 Bnh do Phytophthora palmivora su ring: (a) cy vng l, (b) thi mc thn, (c) thi qu. Bnh do P. palmivora cacao: (d) tn li cy con, (e) qu b en. Thi r (ho nhanh) h tiu do P. capsici: (f ) rng l, (g) ho. Bnh do P. infestans: (h) mc sng khoai ty. Cc hnh nh (a) n (e) do David Guest cung cp, (f ) n (g) do N. V. Truong cung cp.
125
10.5 Fusarium
Cc loi Fusarium hoi sinh r mc nhanh trn mi trng PDA v thng c chn on nhm l tc nhn gy bnh.
126
Mt s dng Fusarium solani gy thi c r cy con h u nh u H Lan, u c ve, v thi r cc cy trng thnh. Cc dng khc c th gy hi khu vc gc thn cy ln, nh cy vi, b yu i do yu t mi trng lm stress v do cc bnh khc. Fusarium decemcellulare c phn lp t cnh nhn b thi min bc Vit Nam (L. Burgess, thng tin cha xut bn) v t c ph Tnh c Lc (TS. Trn Kim Loang, giao tip ring). Danh mc ny cha phi l y v cn nhiu loi khc c th c mt Vit Nam. Hnh 10.12 minh ha mt s bnh do Fusarium gy ra. Bng 10.7 Danh mc mt s dng loi Fusarium oxysporum gy ho.
b a
Hnh 10.12 Bnh do cc loi Fusarium gy ra: (a) Fusarium oxysporum f. sp. pisi gy ho u H Lan, (b) khi bo t phn sinh Fusarium oxysporum f. sp. zingiberi trn c gng, (c) thn cy b ha nu do F. oxysporum, (d) qu th ca F. graminearum trn thn ng. Cc nh (a) v (c) do Ameera Yousiph cung cp.
127
Cn iu tra cc bnh ho Fusarium Vit Nam bi v theo cc tc gi, c nhiu bnh ho Fusarium ngoi lai quan trng cha c cng b (nh ho Fusarium trn ci bp). Cch tt nht hn ch nhng bnh ny l a ra cc quy nh cht ch v kim dch thc vt. Triu chng Cc triu chng sm bao gm vng l, hi ho trong ngy v ci cc. Khi tri nng, nhng cy bnh nh c chua v u H Lan s cht trong vng vi ngy. Chui b bnh thng cht chm hn, trong vng 1-2 thng.
Ha nu mch dn bn trong thn cy l triu chng in hnh ca cc bnh ho do tc b mch, bao gm c cc bnh ho Fusarium.
Hnh 10.13 cho thy mt s bnh ho Fusarium xut hin Vit Nam. Bng 10.8 cung cp thng tin v cc dng loi ca Fusarium oxysporum, nm gy ho do tc b mch trn cy trng.
128
Hnh 10.13 Ho Fusarium trn chui do F. oxysporum f. sp. cubense: (a) cc triu chng ho trm trng, (b) triu chng nt thn, (c) ha nu mch dn. Ho Fusarium trn cm chng do F. oxysporum f. sp. callistephi: (d) ho trm trng gy cht cy, (e) thn cy ho vi nhiu khi bo t phn sinh mu trng trn b mt. Ho Fusarium u H Lan do F. oxysporum f. sp. pisi: (f ) cc triu chng ho trn ng rung (ch cc m cy cht), (g) ha nu mch dn cnh b ho. nh (f ) do Ameera Yousiph cung cp.
129
Thi tit Bo tn
Xm nhim
130
Phng tr
Cc bnh ho Fusarium rt kh phng tr do bo t hu tn ti qua thi gian di trong t, Lun canh cc cy trng c kh nng khng bnh t nht 2 nm trc khi trng li cc cy trng mn cm c th gip lm gim ngun bnh. Tuy nhin, loi nm ny vn c th tn ti bng cch xm nhim vo v r cc cy trng khng phi l k ch v khng biu hin triu chng. Vic ny nu r s cn thit nghin cu c tnh sinh hc ca loi nm ny tng quc gia nhm xc nh vai tr ca nhng cy trng khng phi l k ch v thi gian tn ti ca bo t hu trong t. C nhng ging cy trng c kh nng khng bnh ho Fusarium. Tuy nhin mt ging khng bnh khng c ngha l c kh nng khng vi tt c cc chng ca mt dng loi no . Mt s bnh ho Fusarium c phng tr thnh cng bng phng php s dng gc ghp c kh nng khng bnh. V d, phng php ny c p dng phng tr bnh ho Fusarium trn da hu. Khng c thuc tr nm hu hiu phng tr.
Phn lp
C th phn lp nm bnh Fusarium mt cch d dng t m thn b bnh (Phn 6.3.1), dng mi trng chn lc cho Fusarium (PPA) hoc WA. Cn s dng cc mu thn mi nhim bnh phn lp.
131
Gim nh tc nhn gy bnh trn CLA hoc mi trng thch thn la qua cc c tnh chnh nh sau: bo t nh hnh bu dc hnh thnh trong nhng bc gi gn trn t bo sinh bo t ngn bo t ln hnh qu chui c chiu di trung bnh vi cc t bo cui hnh bn chn trong khi bo t trn cc mu l bo t hu (to thnh sau 2-3 tun)
Khng s dng bo t hnh thnh trn mi trng PDA gim nh Fusarium n loi. Trn PDA F. oxysporum sn sinh ra: mt lot cc sc t do cc tn nm pht trin trn mi trng thch, t khng mu n ta n tm si nm c mu trng n ta.
10.5.4 Fusarium oxysporum v Fusarium solanicc c im hnh thi chnh gip cho vic gim nh
Nhng ngi nghin cu khng c kinh nghim v Fusarium kh c th phn bit nm F. oxysporum v F. solani (Bng 10.9 v Hnh 10.14-10.16). F. oxysporum ch yu gy bnh ho do tc b mch, trong khi F. solani ch yu gy thi r v c r. iu quan trng nn lu l mt s F. oxysporum v F. solani hoi sinh (khng phi tc nhn gy bnh) li thng c phn lp t r khe v r bnh. V vy, cn tin hnh ly bnh nhn to trc khi i n kt lun v vai tr gy bnh ca chng.
Hnh 10.14 Mu cy Fusarium oxysporum (tri) v F. solani (phi) nui cy c bn ngy, trong a Petri 60mm trn mi trng thch ng khoai ty
132
Hnh 10.15 Phn bit gia Fusarium oxysporum (tri) v F. solani (phi): (a) v (b) bo t ln, (c) v (d) bo t nh v mt s bo t ln, (e) v (f ) bo t nh trong bc gi trn t bo sinh bo t (lu F. oxysporum c t bo sinh bo t ngn v F. solani c t bo sinh bo t di)
133
Hnh 10.16 Bo t hu ca Fusarium solani hnh thnh trn mi trng thch l cm chng (CLA) (Bo t hu F. oxysporum trng tng t)
134
Hnh 10.17 Verticillium dahliae: (a) Mu nm trn mi trng thch ng khoai ty (nm mc chm), (b) hch nm nh trn thn cy bng gi, (c) si nm trong mch xylem b bnh, (d) cy h trn ho do V. dahliae, (e) v (f ) l c tm ho do V. dahliae
135
Ph k ch
Bo tn
Thi tit
Phng tr
Phn lp
136
Tuyn trng k sinh thc vt thuc nhm giun trn nh khng phn t. Tuyn trng k sinh v khng k sinh thc vt u c trong t. S c mt ca kim chch ht (Hnh 10.18a) l c tnh chnh ca tuyn trng k sinh thc vt. C th quan st c kim chch di knh hin vi hoc knh lp soi ni vi phng i cao. Lu rng c mt s loi c kim chch nhng li sng nh thc n l si nm trong t ch khng gy hi cho cy.
Hnh 10.18 Tuyn trng: (a) k sinh thc vt vi kim chch, (b) khng k sinh thc vt, khng c kim chch.
Tuyn trng k sinh thc vt l nguyn nhn ca rt nhiu bnh trn cy trng Vit Nam (Nguyen 2003). Cc bnh thng thng nht Vit Nam l tuyn trng nt sng do cc loi thuc chi Meloidogyne v tuyn trng gy vt thng ni r do Pratylenchus v cc loi khc (Hnh 10.19). Tuyn trng nang gy hi r, gy hin tng mc thm r ph. Cc tuyn trng nang ci c th c pht hin d dng, bm vo bn ngoi r ni r ph mc thnh bi. Tuyn trng k sinh thc vt thng gy hi b r, lm gim qu trnh hp th nc v dinh dng. Chng thng gy triu chng ci cc, nng sut thp v i khi c biu hin vng l r rt. Cy nhim tuyn trng nng c hin tng ho v tn li trong iu kin mi trng khc nghit. Hin tng ny ph bin nht c chua b tuyn trng nt sng gy hi. Tuyn trng nt sng c th c chn on trn ng rung bng cc nt sng r rt trn r.
137
Hnh 10.19 H thng r cy b ph hy do: (a) tuyn trng nt sng, (b) tuyn trng gy lot r, c hai bnh u lm cy ci cc v vng l
Hnh 10.20 Cc triu chng ca tuyn trng nt sng: (a) triu chng sng r, (b) tuyn trng ci k sinh trong cc nt sng
Kh nhn bit triu chng hi ca tuyn trng gy lot r r nh trn ng rung, nhng c th quan st c cc vt lot bng knh lp cm tay. Dng knh lp soi ni c th quan st c cc vt lot d dng hn. Nu nghi ng i tng gy hi l tuyn trng gy lot r, c th nhum mu r bnh quan st s c mt ca tuyn trng di knh hin vi. Tuyn trng k sinh v ly thc n t cy trng c phn lp bng cc phng php tch tuyn trng t t (xem Phn 10.7.1).
138
Cc cy trng c kh nng khng i vi mt s loi tuyn trng nht nh th khng b tuyn trng gy hi v c kh nng ngn chn s sinh sn ca tuyn trng k sinh cy. Nhng k ch ny gip lm gim mt tuyn trng trong t. Cc cy trng c kh nng chu ng i vi mt s loi tuyn trng nht nh th khng b tuyn trng gy hi, nhng li cho php tuyn trng sinh sn. Nhng k ch ny duy tr hoc lm tng ngun tuyn trng trong t. V vy, khi khuyn co cc bin php phng tr cn hiu bit v s khc bit ny trong mi quan h k ch-tuyn trng. Tuyn trng khng bi c. Chng di chuyn trong t hoc r bng cch un mnh chuyn ng nh rn da vo cc phn t t hoc m cy. Tuyn trng c th c lan truyn theo dng di chuyn ca nc ti, nhng trong nc lng chng chm xung y. Chng c th di chuyn tt c mi hng thng qua t t tm r k ch. Tuyn trng c th tn ti khi khng c k ch trng thi ng ngh. Vo ma kh, chng thng di chuyn su hn xung di t. a s tuyn trng k sinh thc vt c ph k ch rng, nhng mc mn cm vi bnh thay i ty tng loi k ch.
139
3. Sau 24 gi m kp cho thot 5mL nc t ng sang mt a Petri nh hoc a m. Tuyn trng khi di chuyn t t t xung qua giy thm vo trong nc. Bi v tuyn trng khng bit bi, chng s chm xung v tch t y ng nha. 4. Dn u dung dch tuyn trng trn a v kim tra di knh lp soi ni phng i ln nht, hoc a sang mt lam knh kim tra di knh hin vi. Tuyn trng k sinh thc vt c th c xc nh nh s c mt ca kim chch ht.
Phng php khay Whitehead Phng php khay Whitehead cng thng c s dng cho mu t v r dng thit b nh minh ha trong Hnh 10.23. 1. t mt ry lc (loi thng dng trong bp gia nh) ln mt ci bt to, trn ry lc c lt mt lp giy thm dy. 2. nc vo ry sao cho mt nc cch mt ry khong 2cm. 3. Nh nhng t t hoc r trong nc trn ry. Ch khng lm rch giy. Tuyn trng s tp trung li trong nc bn di lp giy thm.
140
4. Sau 24 gi, nc vo mt cc ong hoc l thy tinh v cho tuyn trng lng xung y l. 5. Dng pipet ht nc t y l sang mt a Petri nh kim tra di knh lp soi ni. Nhiu kh nng l c tuyn trng k sinh v khng k sinh thc vt u c mt.
Nhng phng php ny c xy dng ch yu phc v cho vic chn on. Tuy nhin, vi kinh nghim v vic s dng cc phng php ly mu tiu chun, cc cch phn lp tuyn trng trn c th gip cung cp cc s liu hu ch v s lng tuyn trng. Khay Whitehead l phng php thch hp nht c s dng trong vic nghin cu s lng.
141
Nhiu loi vi khun gy bnh thc vt, trong khi cc loi khc gy bnh cho ng vt v con ngi. a s vi khun l hoi sinh v c mt trong t cng nh trong vt liu hu c vi vai tr l tc nhn phn hy. Vi khun gy bnh cy l cc vi sinh vt nhn nguyn thy nh c th thy c di knh hin vi dng vt knh 100. Nhum mu vi khun ph hp s d quan st hn. Chng kh a dng v kch c v hnh thi; mt s loi c lng roi v di chuyn c. Hu ht vi khun gy bnh cy c th c phn lp v nui cy trn mi trng thch hp. Mt t bo vi khun sinh sn bng cch phn chia n gin thnh hai t bo. Vi khun c nhn ln rt nhanh v s lng trong cc iu kin thch hp. Cc bnh do vi khun thng ph bin nhng vng nhit i. C rt nhiu bnh do vi khun gy ra, bao gm ho vi khun, m l, chy l, u sng v lot (Hnh 10.24). Mt s loi cng gy thi nhn rau qu trc v sau khi thu hoch. Cc vi khun gy bnh cy thng thng Vit Nam bao gm cc chi Ralstonia, Xanthomonas, Pseudomonas v Erwinia. Mt s vi khun tn ti trong ht, mt s khc trn cy ging nhim bnh. Dch khun l mt du hiu ch ra s c mt ca vi khun trong m cy bnh. Vi khun gy bnh c th sn sinh ra dch khun trn cc vt m l trong iu kin m t v t cc m mch dn trong thn cy b ho vi khun.
10.8.1 Ho vi khun
Ho vi khun do Ralstonia solanacearum l mt bnh nghim trng gy hi trn nhiu loi rau v cy trng Vit Nam. Chng hn nh tnh Qung Nam, ho vi khun gy hi trn c chua, t, c tm, mp ng, thuc l v mt s cy trng, c di khc. Do c ph k ch rng, bnh rt kh phng tr bng bin php lun canh. Vi khun ny tn ti lu di trn tn d k ch trong t. R. solanacearum c th lan rng theo vt liu lm ging nhim bnh nh khoai ty v gng, theo cy con v dng c lm rung cng nh ng vt c dnh t. Ho vi khun c th c chn on da vo mu cy ho trn ng rung hoc trong phng th nghim qua triu chng ha nu ca mch dn trong thn v s xut hin dch khun. Nu nhng mt on cnh mi ct vo nc, nhng dng dch khun dng si trng chy ra trong nc. Lu l ngoi R. solanacearum cng c cc vi khun khc gy bnh ho.
142
Hnh 10.24 Bnh do vi khun gy ra: (a-c) mp ng b ho do vi khun, (d) chy l do vi khun, (e) Ralstonia solanacearum gy ho nhanh trn gng, (f ) thi nhn ci tho do Erwinia aroideae, (g) Pseudomonas syringae trn l bu b
143
Cc bin php phng tr bao gm lun canh cy trng nh ng v la, dng cy ging sch bnh (cy con v cnh gim) v di chuyn hoc t cy bnh. C mt s ging lc v cc cy trng khc c kh nng khng bnh. Bnh ho vi khun trn mt s ging cy trng mn cm c phng tr bng cch s dng cy ging vi gc ghp khng bnh.
5. 6. 7. 8. 9.
10. Lm li cc bc 8 v 9 mt ln na, ri vch mt ng cui cng hnh ch Z. 11. t a cy nhit khong 25-30C trong 2 ngy (Hnh 10.27). 12. Kim tra a tm nhng khun lc n nh trn cc vt vch ln th ba hoc th t (Nhng khun lc ln pht trin trong vng 24 gi khng phi l R. solanacearum. 13. Dng que cy khun kh trng ly mt khun lc nh v cy ln mi trng King's B. 14. trong 2 ngy. 144
Cm nang chn on bnh cy Vit Nam
15. Cy truyn mt khun lc n mc t a cy mi sang mt l McCartney hoc ng nghim cha mi trng King's B nghing. y l nhng mu thun v c th s dng cho qu trnh ly bnh nhn to (xem v d nghin cu c th ho gng trong Phn 3.1).
145
H LA
H LA
H LA
Hnh 10.26 S minh ha a cy vi khun, cho thy th t cc vch cy v h la kh trng que cy gia cc bc
146
Phn lp vi khun t vt m v chy l 1. Kh trng b mt mt lam knh v nh mt git nc v trng ln lam. 2. Nh nhng lau kh trng b mt l bng giy thm cn tyl 70%. 3. Vi dng c c kh trng, ct mt ming nh ca vt m hoc chy l, k c gn l, v a sang git nc trn lam knh. Quan st ming ct di knh hin vi (vt knh X10). Nu vt bnh do vi khun gy ra, thng s thy dch khun a ra t ch gn l b ct. 4. Ct nh, ch xt ming ct gii phng vi khun vo git nc. khong 3-5 pht cho vi khun c thi gian gii phng vo git nc. 5. Nhng u que cy khun kh trng vo git nc v cy ln mi trng King's B nh m t trn. 6. Lm thun mu khun nh m t trn, thc hin qu trnh ly bnh nhn to, v gi mu sch cho chuyn gia v vi khun gim nh chnh xc nu cn thit. 7. thc hin qu trnh ly bnh nhn to, phun dch vi khun sch ln l cy v m bng cch bc mt ti nilon ln. Khng ngoi nng v ti s qu nng, ngn cn qu trnh xm nhim. Phn lp vi khun t r hoc thn r Vic phn lp vi khun t r v thn r v cn bn tng t nh vic phn lp t vt m v chy l (Hnh 10.28). Tuy nhin, mc kh trng b mt thay i ty theo dy ca r v vi khun cn phn lp. Nn gt b phn m ngoi ca r hoc thn r trc khi kh trng v phn lp.
147
10.9 Bnh do vi rt gy ra
Vic tho lun chi tit v vi rt gy bnh cy nm ngoi phm vi ca cm nang ny. Cn tham kho cc ti liu khc nu nghi ng virt l tc nhn gy bnh. Mc d virt gy bnh cy thng c cc triu chng kh in hnh, vic gim nh chng thng qua vic s dng k thut phn t hoc cc k thut chn on khc. K ch ch th c th tr gip cho vic gim nh. Cc phn t vi rt thc vt rt nh v khng th nhn thy c di knh hin vi. Cn s dng knh hin vi in t quan st cc phn t vi rt thc vt. Mt phn t vi rt thc vt c gi l mt virion. Vi rt c th c hnh si, hnh cu hoc hnh que. Tt c cc vi rt gy bnh thc vt c cu to t axit nucleic, thng l ARN; tuy nhin, mt s cu to t ADN. Hu ht vi rt c v protein. Khng th phn lp v nui cy vi rt thc vt trn mi trng thch, bi v chng ch c th ti to trong t bo k ch cn sng. Vi rt thc vt ch c th xm nhim vo t bo cy k ch thng qua cc vt thng nh do su b hoc cc vc t khc, qua cc vt thng c gii. Vi rt ti to trong t bo cy, cn tr cc hot ng bnh thng ca t bo. S cn tr cc t bo cy tc ng n cy k ch v c th a n cc triu chng r rt. Cc phn t vi rt di chuyn t t bo ny sang t bo khc, lan n cc b phn khc ca cy (Hnh 10.29). Cy c th b nhim nhiu vi rt cng mt lc. Mt s k ch b nhim vi rt m khng biu hin triu chng. Cc triu chng bnh do vi rt bao gm cy ci cc, bin vng, khm hoc vn l, l vng hoc c cc vt lot, m vng, l bin dng, l cun, ci cc, v trong mt s trng hp, gy cht cy. Mt s triu chng do vi rt gy ra tng t nh cc du hiu ri lon dinh dng hoc do cc tc nhn khc gy ra. Vi rt gy bnh cy c th lan truyn thng qua cc vct cn trng, r, thn c ging nhim bnh, gc hoc chi ging s dng ghp cy. Mt s vi rt lan truyn qua ht ging b bnh. Mt s vi rt c th c lan truyn mt cch c hc t cy ny sang cy khc thng qua cc dng c nh dao ghp, ko ct cnh (v vi mt s virt, qua tay ngi). Vi rt khm l thuc l d truyn lan qua dng c ct v tay ngi, v thm ch c th tn ti trong iu thuc l, lan truyn thng qua tay ngi.
148
Hnh 10.29 Cc bnh do vi rt: (a) vi rt ho m c chua t, (b) vi rt bin vng c ci ng da chut, (c) vi rt vng l xon l c chua, (d) vi rt khm c ci cy n l h ci bp (phi), cy khe (tri), (e) vi rt da chut, (f ) qun l do vi rt mn nh hng (Althaea rosea)
149
Vic gim nh vi rt gy bnh cy i hi phi c phng th nghim chuyn su. Cc phng th nghim chn on cp tnh Vit Nam nn yu cu tr gip t Vin Bo v thc vt trong vic chn on cc bnh do vi rt. C mt s b kt chn on cho mt s vi rt chn on nhanh trn ng rung, nhng cc b kit ny kh t tin. Khi khng c mt cy k ch, vi rt bo tn ch yu c di. Tuy nhin, mt s tn ti trong ht v c th tm thy trong cc cy nhn ging v tnh. Vic phng tr bnh vi rt ty thuc vo c tnh ca vi rt, ph k ch, phng thc lan truyn v bo tn. Cc bin php phng tr bao gm: loi b k ch c di ca vi rt v vc t lan truyn phng tr vc t truyn vi rt trong v trng s dng ging sch bnh dng nhng h thng danh mc cung cp cy trng sch bnh v sinh cy trng tt gim thiu vic tip xc vi cy bnh kh trng dng c ta cy trc khi dng
150