A. Skrining senyawa bioaktif sponge terhadap jamur Mucor miehei A. 1.

Ekstraksi sampel sponge 2-3 gram sampel

S1

S2

S3

S4

S5

Maserasi dgn 5-10 mL metanol Dikering anginkan/ dialirkan gas N2

E1

E2

E3

E4

E5

A. 2. pembuatan media PDA untuk jamur Potong dadu kecil Rebus dgn 100 mL aquadest disaring + 3 gr dekstrosa + 2 gr agar

25 gr kentang

Sterilisasi dgn autoclave suhu 121 0C, 1 atm, 15 mnt

Dituang dlm cawan petri 20mL

Sterilisasi UV 15 mnt

Media siap digunakan

A. 3. Peremajaan jamur Mucor miehei Isolat murni jamur Mucor miehei Penanaman dgn teknik agar tusuk

Inkubasi dlm inkubator pada suhu 28 0C

Lama waktu peremajaan 2 minggu sekali

A. 4. Uji aktifitas sampel terhadap jamur Mucor miehei

S1

S2

S3

S4

S5

Konsentrasi sampel 100 ppm Diffusion paper disc assay Inkubasi pada suhu 28 0C Jamur mucor miehei

Pengamatan zona bening

S2

B. Pemurnian senyawa bioaktif sponge Ekstraksi 500 gr sampel sponge S2 mengacu point A.1 Analisis KLT dan fitokimia

Fraksinasi dgn HPLCsemi preparatif

F1

F2

F3

F4

F5

Uji aktivitas jamur mengacu point A. 4

F5

Pemurnian dgn teknik KLT dan HPLC-semi preparatif

Di dapat fraksi murni

C. Karakterisasi senyawa menggunakan spektroskopi IR dan GC-MS fraksi murni

Analisis spektrofotometri IR

Analisis GC-MS