7.

3 基因重组
 基因重 组

凡把两个不同性状个体内的遗传基因转
移到一起，经过遗传分子间的重新组合，
形成新遗传型个体的方式。
基因重组的四种主要方式

 杂交
 转化
 转导
 原生质体融合
一、杂交
遗传物质分子水平
 杂交指把两个不同性状个体内的遗传基因
转移到一起，经过遗传分子间的重新组合
，形成新遗传型个体的方式
 细菌、放线菌中常见：结合
简单、复杂（膜限定）
二、转化
 受体菌直接吸收了来自供体菌的 DNA 片段，通过
交换整合到自己的基因组中，从而获得部分新的
遗传型状的现象
 接受了供体菌 DNA 的受体菌称为转化子
肺炎链球菌的转化
五个阶段
感受态（去壁，
CaCl2)
感受态因子
（种属特异性蛋白）
转化因子
（双链 DNA ，质粒）
DNA 长度
三、转导
 通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，
把供体细胞的 DNA 小片段携带到受体细胞
中，通过交换与整合，使后者获得前者部
分遗传形状的现象。
 获得新遗传形状的受体细胞称为转导子
噬菌体？
转导的方式：

普遍转
导
转导
局限转
导
1. 普遍转导

通过完全完全缺陷噬菌体对供体菌任何小片
段的误包，而实现其遗传性状传递到受体菌的转
导现象

完全普遍 转导
流产普遍 转导
1 ）完全 普遍 转导

感染复数 <1
稳定遗传的
转导子
2 ）流产 普遍 转导

经转导而获得了供体菌 DNA 片段的受体菌，

如果外源 DNA 在其内既不进行交换、整合和复制
，也不迅速消失，而仅进行转录、转译和性状表
达，这种现象就称流产转导
2 ）流产 普遍 转导

微小菌落
2. 局限转导

指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特
定基因携带到受体菌中，并获得表达的转导现象。
特点：
① 只能转导供体菌的个别特定基因（一般为噬菌体整合
位点两侧的基因）；
② 该特定基因由部分缺陷的噬菌体携带；
③ 缺陷噬菌体是由于其在形成过程中所发生的低频率
（可形成 10-5 左右）“误切”，或由于双重溶源菌的
裂解 而形成，在后一情况下可形成 50 ％缺陷噬菌体。
根据转导频率的高低可把局限转导分成：
低频转导

高频转导
低频转导
（ LFT ）
10-4 ～ 10-6
低 m.o.i
 高 m.o.i
LFT 双重溶源 HFT

低 m.o.i

50 ％局限转导
子
四、原生质体融合
通过人为的方法，使遗传性状不同的两细
胞的原生质体发生融合，并进而发生遗传
重组以产生同时带有双亲性状的、遗传性
稳定的融合子的过程，称为原生质体融合
7.4 基因工程
 基因工程
用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传
物质 ----DNA 大分子提取出来，在离体的条件下
用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的
DNA 分子连接起来，然后与载体一起导入某一更
易生长、繁殖的受体细胞中使供体 DNA 进行正常
的复制和表达，从而获得新遗传特性的一种育种
技术
1 、目的基因的取得
2 、载体系统的选择
3 、重组体的构建
4 、重组体导入受体
5 、受体表达、检测
6 、实验室及生产试
验
（ 1 ）目的基因的取得
一般有三条途径：
① 从适当的供体细胞（各种动、植物及微
生物均可选用）的 DNA 中分离
② 通过反转录酶的作用由 mRNA 合成
cDNA （即互补 DNA ）
③ 由化学方法合成特定功能的基因
（ 2 ）载体的选择
载体必须具有这几个条件：
① 是一个有自我复制能力的复制子
② 能在受体细胞内大量增殖，即有较高的复制率
③ 载体上最好只有一个限制性内切核酸酶的切
口，使目的基因能固定地整合到载体 DNA 的一定
位置上
④ 载体上必须有一种选择性遗传标记，以便及时
把极少数“工程菌”或“工程细胞”选择出来
常用载体
原核：细菌质粒（松弛型）、 λ 噬菌体
真核： SV40 病毒（猴小型 DNA 病毒）、
Ti 质粒（植物）
（ 3 ）目的基因与载体 DNA 的体外重
组
粘性末端结合 嵌合体

使用特定的内切酶消化目的基因与载体
DNA ，使它们产生互补的粘性末端，如
EcoRⅠ 消化 DNA 产生的粘性末端为：
G3’ 5’AATTC
CTTAA5’ 3’G
（ 4 ）重组载体引入受体细胞
受体细胞可以是微生物细胞，也可以是动
物或植物细胞。
大肠杆菌、枯草杆菌；酿酒酵母

方法：转化、转染等
基因工程的应用及展望
 基因工程在工业、农业、医疗、环保方面
的应用
抗生素、胰岛素、干扰素、透明质酸、各种疫苗
、降解纤维素、基因治疗、降解芳香物和烃类

 基因工程与基本理论研究的关系
基因结构与表达、肿瘤发生、细胞分化及发育
 转基因动物和植物
 更广泛领域（海洋、宇宙空间）
 人类基因组计划
 小结
 三个经典实验
 遗传变异的物质基础
 概念：基因、基因突变、基因重组
 理解：转化、转导
 基因工程的基本操作