‫‪27/05/08‬‬

‫ביולוגיה מולקולרית – שיעור ‪20‬‬

‫בקרה על התבטאות גנים ‪ -‬המשך‬
‫אינאקטיבציה של ‪X‬‬
‫אמור להיות הבדל עצום בין זכרים לנקבות בגלל העודף של כרומוזום ‪.X‬‬
‫ליצורים שונים יש אסטרטגיות שונות לטיפול בבעיה‪ ,‬נסתכל על תולעים‪ ,‬זבובים‬
‫ויונקים‪.‬‬
‫תולעים –‬
‫מנגנון שגורם לכל אחד משני ה – ‪ X‬להתבטא פחות‪.‬‬
‫זבובים –‬
‫הזכרים מבטאים יותר מכרומוזום ה – ‪ X‬הבודד‪.‬‬
‫יונקים –‬
‫אחד ה – ‪ X‬בנקבות לא מתבטא (אינאקטיבציה)‪.‬‬
‫דרישות‬
‫‪.1‬המערכת צריכה לזהות האם בתא יש ‪ X‬אחד או שניים‪.‬‬
‫‪.2‬בחירת ה – ‪ X‬שיישאר אקטיבי‪.‬‬
‫‪.3‬השתקת ה – ‪ X‬האחרים‪.‬‬
‫‪.4‬העברת הבחירה לתאי הבת‪.‬‬
‫אינאקטיבציה‬
‫‪ .1‬מתילציה של ה – ‪.DNA‬‬
‫‪ .2‬קשירת חלבונים לקבלת הטרוכרומטין‪.‬‬
‫‪ .1‬הפעלת גן ‪ Xist‬המייצר ‪ microRNA (1‬בהתחלה זה לא טעות‪ ,‬התחלת התהליך)‪.‬‬

‫במרכז כרומוזום ‪ X‬יש אזור ‪( Xic‬אזור אינאקטיבציה של ‪)X‬‬

‫שאחראי על האינאקטיבציה ועוזר בהכרה (זיווג) של‬
‫כרומוזומי ‪( X‬אם אין זיווג אז הכרומוזום לבד)‪.‬‬

‫באזור ה – ‪ Xic‬יש את גן ה – ‪ Xist‬שעושה את האינאקטיבציה‪.‬‬

‫ה – ‪ Xist‬עובר ספלייסינג ופולי ‪ ,A‬הוא נשאר בגרעין ולא מקודד לחלבון‪ ,‬הוא לא‬
‫מבוטא ב – ‪ X‬האקטיבי אלא במשותק‪.‬‬

‫ה – ‪ Xist RNA‬נקשרים לאזורים שנקראים ‪ LINE‬על אותו‬

‫כרומוזום ואליו נקשרים פקטורים חלבוניים שיוצרים את‬
‫הדחיסה‪.‬‬

‫‪– TSIX‬‬
‫גן נוסף שנמצא על ‪ Xic‬ומכיל רצף הופכי ל – ‪( Xist‬אנטיסנס) ומייצר ‪RNA‬‬
‫שמתחבר אליו ומבטל את פעולתו‪.‬‬
‫גן זה מבוטא בכרומוזום ה – ‪ X‬האקטיבי ולא במשותק‪ ,‬בנוסף הוא אחראי על‬
‫הצימוד‪ ,‬הספירה והצימוד של כרומוזומי ה – ‪( X‬לפני הבחירה של ה – ‪ X‬האקטיבי‬
‫והמשותק)‪.‬‬

‫‪-1-‬‬
‫‪27/05/08‬‬
‫ביולוגיה מולקולרית – שיעור ‪20‬‬
‫‪– DXPas34‬‬
‫אזור בקרה‪ ,‬חזרה של ‪ 34‬זוגות בסיסים ומשמש כפרומוטור דו כיווני‪.‬‬
‫מפעיל את ה – ‪ Tsix‬בתאי גזע עובריים ולא מפעיל אותו בתאים ממוינים‪.‬‬

‫גן אוקריוטי אופייני‬

‫יש את הפרומוטור ואזורי בקרה‪,‬‬
‫יש ‪( Enhancer‬אזורים מעודדים)‪ ,‬גורמים‬
‫לגן מסוים להתבטא בזמן ומקום מסוים‪.‬‬
‫יכול להיות גם ‪ Silencer‬שעושה את הפעולה ההפוכה‪.‬‬
‫כל האלמנטים האלה בדר"כ עובדים בהגעה של חומרים בטרנס‪ ,‬יגיעו יותר חומרים‬
‫שיודעים להתחבר ‪ ,Enhancer‬יהיה ביטוי גדול יותר‪.‬‬
‫הפרומוטור עצמו מכיל אלמנטים שגורמים לפולימרז‬
‫להקשר יותר טוב (‪.)TATA/ CAAT/GC box‬‬

‫‪ – Enhancer‬מגבירים שיעתוק גן‪ ,‬יכולים להיות לפני‪,‬‬

‫אחרי או בתוך גנים‪ ,‬לרוב כיוונם לא משנה וניתן‬
‫להעבירם ולהפעילם בגנים אחרים‪.‬‬
‫הרבה פעמים יהיה להם מוטיבים חוזרים שיכולים‬
‫לעזור לקשירת הפולימרז‪.‬‬
‫יש כאלה שהם כלליים ויש כאלה שהם ספציפיים‬
‫לריקמה ויגרמו לביטוי יותר טוב של גן בריקמה‬
‫מסוימת על ידי חיבור של חלבונים אליו‪.‬‬

‫עיבוד גלקטוז בשמרים‬

‫באוקריוטים‪ ,‬הגנים הם בדר"כ עצמאיים‪.‬‬
‫יש לנו תופעות שאזורים מסוימים משמשים ‪ Enhancer‬לגנים‬
‫שנמצאים בשני הכיוונים‪.‬‬
‫בשמרים‪ ,‬חלק מצריכת הגלוקוז שלהם מגיעה מעיבוד גלקטוז על ידי‬
‫אנזימים‪.‬‬
‫שלושה מהאנזימים נמצאים בצבר ב – ‪ )DNA (GAL 1/10/7‬בניהם‬
‫יש גן שיודע לקשור ‪ GAL 4‬ומשמש כפקטור שיעתוק ועוזר לביצוע‬
‫שיעתוק מוגבר‪.‬‬

‫‪ – UASg‬אזור שאליו נקשר ה – ‪ GAL4‬שאליו נקשר ‪ GAL 80‬שאליו‬

‫נקשרים תוצרי פירוק של גלקטוז (מטבוליטים) שיאמרו שיש גלקטוז‬
‫באזור‪.‬‬
‫רק כשכל החומרים מתחברים‪ ,‬ה – ‪ RNA‬פולימרז מגיע לאזור‬
‫ומשעתק את הגנים ‪.GAL 1,10.7‬‬

‫כדי שהפולימרז יעבוד‪ ,‬צריכים להתחבר הרבה‬

‫פקטורים שיקפלו את ה – ‪ DNA‬והפולימרז יוכל לעבוד‪.‬‬

‫‪-2-‬‬
‫‪27/05/08‬‬
‫ביולוגיה מולקולרית – שיעור ‪20‬‬
‫כל אחד מהפקטורים משמש כפוטנציאל בקרה לתהליך‪.‬‬

‫‪-3-‬‬
‫‪27/05/08‬‬
‫ביולוגיה מולקולרית – שיעור ‪20‬‬
‫הורמונים‬
‫מולקולות המיוצרות על ידי תאים מסוימים וגורמות לתגובות‬
‫פיזיולוגיות בתאים אחרים‪.‬‬
‫הורמונים סטרואידים חודרים לתא וגורמים לפעילות‬
‫והורמונים פוליפפטידים נקשרים לדופן התא וגורמים לפעילות‪.‬‬
‫הורמונים יכולים לגרום לשינוי בהתבטאות הגנים‪.‬‬

‫מודל פעילות של ‪Glucocorticoid‬‬

‫סטרואיד זה נכנס לתא ונמצא בתחרות עם חלבון (‪,)Hsp90‬‬
‫צריך לייצר תחרות עם החלבון כדי שהוא יוכל להשפיע‪.‬‬
‫קורטיזול – עובד כסטרואיד טבעי‪ ,‬יש לו אנלוג שמשנה את‬
‫האפיניות וכך ניתן להתערב בפעולת הסטרואיד בצורה חיצונית‪.‬‬

‫‪( Alternative Splicing‬שחבור אלטרנטיבי)‬

‫למרות שיש כ – ‪ 32,000‬גנים אנושיים‪ ,‬יש הרבה יותר ‪.mRNA‬‬
‫‪ 60%-30%‬מהגנים עוברים שחבור אלטרנטיבי‪,‬‬
‫כ – ‪ 20,000 – 10,000‬גנים‪.‬‬
‫תופעה זו מתרחשת כמעט בכל האוקריוטים וחשובה מאוד‬
‫באבולוציה מכיוון שערבוב המידע הגנטי נותן לנו תפקודים‬
‫שאינם רשומים ישירות בגנים‪.‬‬
‫ספלייסינג יכול להיות שונה בין רקמות שונות לפי הדרישות‬
‫התפקודיות שלה והוא יכול גם להיות ספציפי לשלב התפתחותי‪.‬‬
‫הגן מכיל אינטרונים ואקסונים‪ ,‬האינטרונים יוצאים בתהליך הספלייסינג‬
‫והאקסונים יכולים להיות מחוברים בגרסאות שונות ליצירת ה – ‪RNA‬‬
‫השונה מאותו גן‪.‬‬
‫בתהליך הספלייסינג עצמו משולבים הרבה פקטורים חלבוניים‬
‫ו – ‪ mRNA‬כדי שהתהליך יבוצע בצורה מדויקת‪.‬‬
‫הפקטורים נקשרים לאינטרון‪ ,‬מקפלים אותו‪ ,‬מקרבים את האקסונים‬
‫אחד לשני ומחברים אותם‪.‬‬

‫‪-4-‬‬
‫‪27/05/08‬‬
‫ביולוגיה מולקולרית – שיעור ‪20‬‬
‫דוגמאות מגנים‪:‬‬
‫‪ – PPT‬לגן זה יש ביטוי אחד במערכת העצבים וביטוי שונה‬
‫במערכות אחרות‪.‬‬
‫השחבור האלטרנטיבי מבוצע על ידי השמטת אקסון‬
‫מסוים וחיבור האקסונים שמצדדיו‪.‬‬

‫‪ – Calcitonin‬יכול להיות מבוטא לקלציטונין או‬

‫ל – ‪.CGRP‬‬
‫ביצור ‪ CGRP‬נוסף אקסון בשעתוק ל – ‪ RNA‬אבל בכל מקרה אחרי האקסון‬
‫האחרון ייוצר פולי ‪.A‬‬

‫קביעת מין בדרוזופילה‬

‫למדנו בעבר שמה שקובע את המין זה היחס בין‬
‫הכרומוזומים‪.‬‬
‫יש פקטורים שמיוצרים בכמות מסוימת מכל כרומוזום‬
‫(‪ X‬ו – ‪ )A‬וכך נקבע השחבור האלטרנטיבי והמין‪.‬‬

‫כתוצאה מהיחס בין הגנים‪,‬‬

‫מתבטאים גנים שונים בשלבים‬
‫שונים‪ ,‬נוצרת שרשרת של‬
‫התבטאות גנים והורמונים‬
‫ויפתחו זכר או נקבה‪.‬‬

‫זכרים מול נקבות‬

‫חלבון ה – ‪ Sxl‬נקשר לאזור מסוים ב – ‪ DNA‬אצל‬
‫נקבה ומשמיט אקסון‪ ,‬אצל זכרים האקסון לא‬
‫מושמט ומכיל קודון עצירה שלא מאפשר ייצור‬
‫חלבון‪.‬‬
‫החלבון שנוצר‪ ,‬מייצר שוב את חלבון ה – ‪.Sxl‬‬

‫‪-5-‬‬