6.

RSPUNSUL IMUN CELULAR Rspunsului imun celular (RIC) are rol de aprare prin recunoaterea i eliminarea: o celulelor proprii care au fost infectate cu microorganisme intracelulare patogene. Rspunsul imun celular este esenial n infeciile virale, virusurile fiind microorganisme cu replicare obligatorie intracelular i n infeciile cu unele bacterii (ex. mycobacterii, Listeria, Brucella, Legionella) i parazii intracelulari (ex. Toxoplasma). o celulelor proprii transformate neoplazic - acestea prezint modificri genetice i sintetizeaz proteine anormale, care sunt recunoscute ca non-self. o celulelor non-self care pot ajunge n organism prin transplant (rejetul grefelor). Altfel spus, RIC este implicat n recunoaterea i distrugerea: Celulelor singenice devenite antigenice: celulele infectate sau neoplazice; Celulelor alogenice aprute prin gref sau transplant. n cadrul rspunsului imun celular particip celule efectoare care aparin: sistemului imun specific (adaptativ) - prin limfocitele T citotoxice (LTC) sistemului imun nespecific (nnscut) - prin celulele natural killer (NK) i secundar prin macrofage, monocite, neutrofile i eozinofile. Celulele efectoare recunosc celulele non-self prin mecanisme diferite, dar le distrug printr-un mecanism comun, numit citotoxicitate extracelular. La contactul cu celulele int, LTC i NK elibereaz mediatori care le distrug prin dou mecanisme: Lezeaz membranele celulelor non-self, ducnd la liza osmotic a celulelor. Altereaz nucleul celulelor int, producnd apoptoza lor. RIC ADAPTATIV (SPECIFIC) RIC specific are drept celule efectoare limfocitele T citotoxice i se desfoar n dou etape: activarea, proliferarea i diferenierea limfocitelor T naive n LT efectoare distrugerea celulelor int de ctre LTC activate. Activarea limfocitelor T Aceast etap necesit prezena urmtoarelor celule: celule int - celule care prezint pe membran Ag, prezentate de MHC I LTC antigen specifice
1

LTH 1 antigen specifice celule prezentatoare de antigen (APC) - care au fagocitat resturi ale unor celule int distruse i prezint pe membran peptide antigenice mpreun cu MHC II. Un anumit antigen este recunoscut doar de TCR exprimate de clona LT corespunztoare. Aceasta nseamn c fiecare antigen este recunoscut de o clon specific de LT. Diversitatea antigenelor este foarte mare, de ordinul milioanelor, astfel c i recunoaterea se face prin milioane de clone diferite de LT. Spre deosebire de NK, LTC sunt diversificate clonal. Fiecare clon de LTC se definete prin receptorii TCR de suprafa. Limfocitele T au roluri eseniale n imunitatea adaptativ. LT sunt produse n mduva hematogen i se matureaz n timus. Timusul elibereaz limfocite T mature, dar care nu au venit nc n contact cu antigenul (limfocite T naive). Limfocitele T naive au o durat de via de civa ani. Sunt celule inactive, cu cromatin condensat, citoplasm redus i activitate metabolic sczut. LTC au pe suprafaa membranei coreceptorul CD8. CD8 se leag de un domeniu constant din structura moleculelor de MHC I. Dup cum fost menionat anterior, MHC I se afl pe membrana aproape tuturor celulelor nucleate din organism. Existena acestui coreceptor determin fenomenul de restricie MHC I, adic LTC CD8 pot s recunoasc numai Ag prezentate mpreun cu moleculele MHC I. Etapele transformrii LTC naive n celule efectoare sunt: LTC primesc semnale activatorii rezultate n urma recunoaterii complexelor antigen - MHC I (aflate pe membrana celulei int) de ctre complexul TCR-CD8 unele celule APC au fagocitat Ag provenite din distrugerea unor celule int. Ele prezint aceste Ag spre LTH1, care stimuleaz LTC. n urma acestor interaciuni celulare rezult numeroase LTC capabile s recunoasc i s distrug celulele int.

Distrugerea celulelor int de ctre LTC activate Interaciunea LTC efectoare cu celulele int dureaz aproximativ 5-10 minute. n acest timp se produc modificri biochimice care programeaz celula int pentru apoptoz, care survine la cteva ore dup contactul cu LTC. Limfocitele T citotoxice efectoare au granule citoplasmatice care conin mai multe enzime: o perforina - polimerizeaz similar componentei C9 a complementului i formeaz pori n membrana celulei int o granzimele - sunt serinproteaze, determin apoptoza celulei int o granulizina - are efecte antimicrobiene i induce de asemenea apoptoza celulei int. Apoptoza sau moartea celular programat este un mecanism esenial att
2

pentru pentru homeostazia esuturilor, ct i pentru buna funcionare a sistemului imunitar. Moartea celular are loc prin clivarea ADN-ului n fragmente de aproximativ 200 de baze, realizat de ctre enzime specializate numite endonucleaze. n urma procesului de apoptoz rezult corpi apoptotici care sunt fagocitai. Endonucleazele au capacitatea de a fragmenta i ADN-ul viral, ceea ce mpiedic apariia de virioni cu capacitate infectant n urma distrugerii celulei infectate. Exist dou mecanisme principale prin care LT citotoxice elimin celulele int: liza osmotic i apoptoza. o Moleculele de perforin polimerizeaz i formeaz pori n membrana celulei. Experimentele in vitro au artat c formarea porilor poate duce la liza osmotic a celulei respective prin influxul rapid de ap i sodiu. o Moleculele de granzime i granulizin ptrund n citoplasma celulei int prin intermediul porilor. Granzimele activeaz caspaza 3, o enzim care declaneaz o cascad proteolitic ce duce n final la activarea deoxiribonucleazei, enzima responsabil de fragmentarea ADN-ului nuclear. o prin legarea unui receptor numit Fas de pe membrana celulei int de ctre ligandul Fas (FasL), aflat pe suprafaa LTC activate. Cuplarea receptorului Fas determin declanarea cascadei caspazelor cu activarea endonucleazei. n afar de mecanismele prezentate, limfocitele T citotoxice efectoare elibereaz citokine cu roluri importante n aprarea imun: o interferonul - inhib n mod direct replicarea viral i crete expresia moleculelor MHC I pe suprafaa celulelor infectate. Activeaz i recruteaz MF la locul infeciei, unde acestea acioneaz ca APC sau ca celule fagocitare. o TNF i TNF - au aciuni similare interferonului . n plus, pot determina distrugerea anumitor tipuri de celule int prin cuplarea cu un receptor specific, numit TNFR - 1. RIC NNSCUT (NESPECIFIC) Cel mai important rol n cadrul rspunsului imun celular nespecific il au celulele NK. Exist i alte celule implicate (macrofage, monocite, neutrofile i eozinofile), care au roluri secundare i care recunosc celulele int prin intermediul anticorpilor (citotoxicitatea celular mediat de anticorpi). Citotoxicitatea celular determinat de celulele NK Celulele natural killer reprezint ntre 5 i 10% din totalul limfocitelor. Sunt implicate n aprarea antiviral i antitumoral. Celulele NK se difereniaz din precursorul comun limfoid, dar nu se matureaz n timus. Celulele NK reprezint prima linie de aprare n aprarea mpotriva
3

infeciilor cu virusuri i bacterii intracelulare. Celulele NK au activitate maxim la 3 zile dup ptrunderea agentului patogen. Prezena lor ofer rgazul necesar declanrii RIC specific, pentru c activarea, diferenierea i proliferarea LTC necesit aproximativ 5-7 zile. Celulele NK nu exprim receptori specifici pentru antigen. Recunoaterea nu este condiionat de prezena MHC. Rspunsul imun nu prezint memorie imunologic. NK difer semnificativ de LTC prin modalitatea de recunoatere a celulelor infectate. Celulele NK prezint pe membran receptori activatori: receptori lectinici care recunosc unii receptori de suprafa modificai n cazul celulelor tumorale sau infectate viral. Fc III R (CD16) - receptor pentru regiunea Fc a IgG. Permite recunoaterea celulelor int prin intermediul anticorpilor. Mecanismele citotoxicitii celulelor NK sunt similare LTC. Citoplasma celulelor NK conine numeroase granule cu perforin i granzime. n afar de citotoxicitatea nespecific, celulele NK elibereaz citokine care influeneaz att imunitatea specific ct i pe cea nespecific. Cea mai important este interferonul care are mai multe efecte: stimuleaz RIC stimuleaz activitatea fagocitar i bactericid a macrofagelor. Citotoxicitatea celular mediat de anticorpi Citotoxicitatea celular mediat de anticorpi este cunoscut sub acronimul ADCC - antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity. Exist celule cu potenial citotoxic care exprim pe membran receptori pentru regiunea Fc a Ac. FcR permit leagarea de moleculele de Ac aflate pe suprafaa celulei int. Aceast interaciune favorizeaz apropierea celulelor citotoxice de celulele int. Modalitatea de recunoatere este nespecific. Celulele cu potenial citotoxic, implicate n ADCC sunt: celulele NK, monocitele i MF, neutrofilele, eozinofilele. Mecanismele prin care aceste celule determin citotoxicitate sunt multiple: MF, neutrofilele i eozinofilele se activeaz metabolic, cu creterea numrului de lizozomi i granule litice. Ulterior acesta sunt eliberate i distrug celula int. Monocitele activate, MF i celulele NK elibereaz TNF care are efecte citotoxice. Eozinofilele i NK conin perforin n granulele citoplasmatice, care determin liza osmotic a celulei int.