III .2 . Cara Kerja A. Pengenceran Sampel - Disiapkan alat dan bahan.

- Ditimbang 1 gram Sampel kue brownies kemudian dimasukkan secara aseptis ke dalam 10 ml Aqua steril lalu dihomogenkan.
-

Disiapkan aqua pengencer 10-2 dan 10-3 yang telah berisi 9 ml air steril. Dari botol pengencer 10-1 diambil 1 ml sampel lalu dimasukkan kedalam botol pengencer 10-2, berturut-turut hingga 10-3.

B. Pengerjaan Uji Mikroorganisme (MPN) Coliform - Disiapkan hasil pengenceran sampel uji Kue brownies - Disiapkan 9 tabung reaksi steril yang telah berisi medium PW. - Dibuat 3 seri tabung, seri I terdiri dari 3 tabung reaksi, begitu pula dengan seri II dan III. Masing-masing seri tabung diisi dengan sampel 10-1 , 10-2, dan 10-3 sebanyak 1 ml. - Disiapkan pula 3 tabung reaksi steril yang berisi medium TSB, yang masing-masing diisi sampel 10-1, 10-2 dan 10-3 sebanyal 1 ml. - Diinkubasi selama 1 x 24 jam pada 37C di Inkubator. - Diamati perubahan warna yang terjadi dari hijau menjadi kuning, atau TSB berubah coklat keruh, jika terjadi perubahan ini maka positif (+). - Dihitung nilai MPN-nya, dan digambar. - Apabila terjadi perubahan yang positif maka diteruskan dengan medium EMBA, CETA, VJA, TCBSA, dan SSA dengan cara diambil satu ose bulat kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang positif.

- Diambil satu ose dari medium PW kemudian digunakan metode gores dalam medium EMBA, VJA, TCBSA, dan SSA sedangkan satu ose dari medium TSB digoreskan pada medium selektif CETA dan diinkubasikan selama 1 x 24 jam pada suhu 37o C di Inkubator. - Diamati perubahan yang terjadi. C. Pengerjaan Uji Angka Lempeng Total (ALT) bakteri - Disiapkan alat dan bahan. - Dilakukan pengerjaan secara aseptis. - Dipipet 1 ml dari pengenceran 10-1, 10-2 dan 10-3 (sampel) lalu dimasukkan ke dalam masing-masing cawan petri. - Dituang medium NA hingga menutupi dasar cawan petri lalu dihomogenkan dan dibiarkan memadat. - Sampel diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37C di inkubator. D. Pengerjaan Uji Angka Lempeng Total (ALT) Kapang - Disiapkan alat dan bahan. - Dilakukan pengerjaan secara aseptis. - Dipipet 1 ml dari pengenceran 10-1, 10-2 dan 10-3 (sampel) lalu dimasukkan ke dalam masing-masing cawan petri. - Dituang medium PDA hingga menutupi dasar cawan petri lalu dihomogenkan dan dibiarkan memadat. - Sampel diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37C di inkubator. E. Uji Identifikasi Cemaran Bakteri Patogen.

- Untuk mengetahui jenis bakteri yang tumbuh pada media selektif, kita harus mencocokkan dengan tabel tahap seleksi pada buku penuntun praktikum mikrobiologi farmasi politeknik kesehatan makassar 2010 halaman 21 yang menyatakan bahwa : a. Pada media selektif EMBA dan media enricmentnya PW , jika hasilnya positif maka bakteri yang tumbuh adalah Escerichha coli. b. Pada media selektif SSA dan media enricmentnya PW, jika hasilnya positif maka bakteri yang tumbuh adalah Salmonella thypi. c. Pada media selektif CETA dan media enricmentnya TSB, jika hasilnya positif maka bakteri yang tumbuh adalah Pseudomonas aeroginosa. d. Pada media selektif VJA dan media enricmentnya PW, jika hasilnya positif maka bakteri yang tumbuh adalah Staphylococcus aureus. e. Pada media selektif TCBSA dan media enricmentnya PW, jika hasilnya positif maka bakteri yang tumbuh adalah Vibrio cholarae.