Ao de la Integracin Nacional y el Reconocimiento de Nuestra Diversidad

UAP
UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
DOCENTE : Q.F JAVIER JACK CALDERN GMEZ CURSO : BIOQUMICA I

TEMA

: ACCIN COMPARATIVA DE ENZIMAS FRENTE

A CATALIZADORES NO BIOLGICOS
ALUMNO : VARGAS INGA, Damel

CICLO

2012
INFORME DE LABORTORIO N 1 (BIOQUMICA I) ACCIN COMPARATIVA DE ENZIMAS FRENTE A CATALIZADORES NO BIOLGICOS. PREPARACIN: Hay que tener en cuenta, que para esta prctica de laboratorio hemos utilizado tres tipos de sustancias que actuarn como ENZIMAS para un sustrato, y son los siguientes:

Agua destilada HCl 10% Amilasa salival Como sustrato utilizaremos ALMIDN Como PRIMER PASO, a las tres sustancias nombradas anteriormente le agregamos el sustrato (ALMIDN) y se llev a bao mara por 20 minutos, para que supuestamente se lleve a cabo la hidrlisis. Posteriormente comprobamos mediante las siguientes reacciones, la actuacin de las enzimas. 1. DETERMINACIN DEL SUSTRATO Se realiza mediante el mtodo del Lugol; este ensayo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico.

Entonces lo que vamos a tener en cuenta en este acpite es saber si ocurri la hidrlisis nula, la hidrlisis parcial o la hidrlisis total.

TUBO 1

Este tubo contiene Agua destilada (enzima) con Almidn (sustrato): previamente fue calentado a bao mara 38C Agregamos una gota de Lugol. Existe una hidrlisis nula, por lo tanto no hay cambio de color. El lugol solo detecta al almidn (polisacrido)

TUBO 2

Este tubo contiene HCl 10% (enzima) con Almidn (sustrato): previamente calentado a bao mara hirviente. Agregamos una gota de lugol. Existe una hidrlisis parcial, cambia a color anaranjado. (productos dextrinas).

TUBO 3

Este tubo contiene Amilasa salival (enzima) con Almidn (sustrato): previamente calentado a bao mara 38C. agregamos una gota de lugol. Existe una hidrlisis total, cambia a color amarillo (productos glucosas)

o FUNDAMENTO DEL ENSAYO DE LUGOL

La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul o azul violeta.

o CONCLUSIONES
Bsicamente lo que nos ha servido el ensayo de lugol, para diferenciar la accin de las enzimas en nuestro sustrato. Los resultados obtenidos; evidenciados por el color, entend que: En el primer tubo el lugol solo reconoce la presencia del almidn. En el segundo tubo el lugol reconoce las partculas o los pedazos del almidn hidrolizado a los que se les llama DEXTRINAS. Y En el tercer tubo sucede la hidrlisis total, por lo tanto el lugol no tiene lugar para actuar, puesto que este solo se introduce entre las espiras de una cadena larga como lo es el almidn.

2. DETERMINACIN DEL PRODUCTO

Lo que vamos a tener en cuenta ac es determinar la diferencia entre los azcares reductores y los no reductores. Para ello vamos a realizar dos pruebas; la de Fehling y Benedict.

A) LA REACCIN DE FEHLING El reactivo de Fehling consta de : -Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O -Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disuletos en agua

PREPARACIN En tres tubos de ensayo, aadimos medio mililitro del preparado en el PRIMER PASO (en la primera parte est la explicacin).

TUBO 1* Este tubo contiene Agua destilada (enzima) con Almidn (sustrato): previamente fue calentado a bao mara 38C Agregamos 2 mL de Fehling (mezclado ya A y B), luego a Bao Mara hirviente. No existe precipitado

TUBO 2*

Este tubo contiene HCl 10% (enzima) con Almidn (sustrato): previamente calentado a bao mara hirviente. Agregamos 2 mL de Fehling (mezclado ya A y B), luego a Bao Mara hirviente. Si hay precipitado pero en poca cantidad.

TUBO 3*

Este tubo contiene Amilasa salival (enzima) con Almidn (sustrato): previamente calentado a bao mara 38C. agregamos 2 mL de Fehling (mezclado ya A y B), luego a Bao Mara hirviente.

Existe precipitado rojo ladrillo, positivo para azcar reductor.

o FUNDAMENTO DE LA REACCIN DE FEHLING

En medio alcalino, el cobre procedente del CuSO4 se encuentra en forma de hidrxido cprico, y se forma la correspondiente sal Na2SO4. Cuando el Cu(OH)2 (de color azul) se calienta en presencia de un compuesto reductor se forma xido cuproso (de color rojo ladrillo).

CuSO4 +2NaOH ___ Cu (OH)2+Na2SO4 Cu (OH)2+ RCOH___Cu2O+RCOOH+H2O (rojo ladrillo)

Si hay un compuesto reductor, el Cu cambia su estado de oxidacin de (2+ a 1+), lo que se evidencia por el cambio de color.

o CONCLUSIONES
La finalidad de la reaccin de Fehling es como ya se sabe, es la deteccin de azcares reductores que lo entend de la siguiente manera: En el tubo numero 1* no encontramos precipitado debido a que en este no ocurri la hidrlisis del almidn, por lo tanto la reaccin de Fehling no tubo lugar. En el tubo numero 2* encontramos precipitado en una cantidad muy menor, y eso se debe a que el reactivo interacciona con las dextrinas producto de la hidrlisis parcial del almidn, que suponemos algunas de ellas tienen la caracterstica de ser reductores. En el tubo numero 3* encontramos el precipitado rojo ladrillo, y ac s, que como ocurri la hidrlisis total del almidn, el reactivo de Fehling reacciona con el total de las glucosas presentes, demostrndose en el color rojo ladrillo.

B) LA REACCIN DE BENEDICT

En qumica, la reaccin o prueba de Benedict tambin, al igual que la prueba de Fehling, identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH anomrico libre). El reactivo de Benedict consta de: Sulfato cprico; Citrato de sodio; Carbonato anhidro de sodio. Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio

COMENTARIO: Debo decir en este prrafo que lo ocurrido con la reaccin de Fehling en la reaccin analizada anterior, es la misma lo que ocurrir en la presente, por lo tanto solo voy a fundamentar la reaccin qumica porque las dos reacciones detectan azcares reductores.

o FUNDAMENTO PRUEBA DE BENEDICT

En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.

El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O).

BIBLIOGRAFIA

o o o

http://organica1.org/lab2/135.htm http://www.slideshare.net/mihermosamusarusa/tema-2-los-glcidos-2-bachillerato http://payala.mayo.uson.mx/QOnline/Prueba_Fehling_y_Lugol.htm