Dr H.

BOUAB Immunologue
Hpital Militaire Rgional Universitaire de Constantine

INTRODUCTION

La reconnaissance de lantigne est assure par des molcules spcifiques : Membranaires, Situes la surface des lymphocytes T et B. Le rcepteur des lymphocytes T est appel TCR (T cell receptor) , celui des lymphocytes B est appel BCR (B cell recepor). Solubles = les immunoglobulines.

INTRODUCTION
Les immunoglobulines :
Famille de protines globulaires : globulines . Largement reprsentes dans les srums et liquides biologiques des vertbrs. Produites par les Ly B et les plasmocytes qui ont drivent aprs stimulation antignique. Prsentes la surface des lymphocytes B dont elles constituent les rcepteurs spcifiques pour lAg. Effecteurs de limmunit spcifique humorale = Anticorps.

CLASSIFICATION DES IMMUNOGLOBULINES

Plus de 108 les varits danticorps pouvant tre synthtises en rponse aux nombreuses sollicitations antigniques auxquelles est soumis chaque individu. Classement selon la nomenclature internationale reconnue par lOMS en 5 classes grce aux diffrentes mthodes dexploration des protines plasmatiques :

IgG IgA IgM IgD IgE

STRUCTURE DES IMMUNOGLOBULINES

STRUCTURE DE BASE
Elucidation de la structure des Ig, grce aux travaux de Porter et Edelman entre 1959 et 1969 ( prix Nobel en 1972).

Malgr la varit extraordinaire de leur spcificit anticorps, les Ig possdent en commun, une structure de base symtrique en Y et pluricatnaire comprenant 4 chaines polypeptidiques :
Deux chanes lgres identiques L (de Light) de PM = 23.500 Da et qui peuvent tre de deux types : Kappa () ou lambda ()

Deux chanes lourdes identiques H (de Haevy) de PM compris entre 50.000 et 80.000 Da et qui peuvent tre : gamma (), alpha (), mu () delta () ou epsilon(). Ces chanes sont relies entre elles : Par des ponts disulfure inter-catnaires; Par des liaisons non covalentes.

STRUCTURE DE BASE
Les chaines lourdes et lgres contiennent des ponts disulfures intra-catnaires, chaque pont permettant la formation dune boucle peptidique qui reprsente la partie centrale dune rgion fonctionnelle denviron 100 aa appele DOMAINE.

Les Ig comportent 4 ou 5 domaines par chane H (un domaine variable ou VH et 3 ou 4 domaines constants ou CH) et deux domaines par chane L (un VL et un CL)

Il existe sur les chanes lourdes une squence relativement linaire appele : rgion charnire (Hinge region), cette rgion constitue la cible des enzymes protolytiques et permet la molcule dIg une certaine flexibilit.

FRAGMENTATION DES IMMUNOGLOBULINES

Lutilisation des enzymes protolytiques a permis PORTER et NISONOFF de mener les premires tudes structurales sur lIgG de lapin :

Action de la papane (PORTER) : La papane coupe la molcule dIgG au niveau de la rgion charnire en trois fragments :

- Deux fragments Fab Fragment antigen binding identiques.

- Un fragment Fc fragment cristallisable (parce que il cristallise froid).

FRAGMENTATION DES IMMUNOGLOBULINES

Action de la pepsine (NISONOFF) : Une brve digestion par la pepsine donne : - Un seul fragment compos de deux fragments semblables au Fab et dsign F(ab)2. - Le fragment Fc est par contre digr en de multiples fragments Fc.

LES COMPOSANTS DE LA MOLECULE DIg (modle dtude : IgG)

Les chanes lgres Elles comportent entre 212 et 220 acides amins. Il existe deux types : et . Se divisent en deux parties sensiblement gales denviron 107 aa chacune : - Une rgion variable (VL) : comportant un pont disulfure intra-catnaire formant la boucle VL et faisant partie du site anticorps. Il existe : Des rgions peu variables constituant la charpente (Framework) ; Des zones hypervariables dnommes CDR (Complementary Determining Region). - Une rgion constante (CL) : avec un pont disulfure intra-catnaire formant la boucle CL et responsable de la diffrence antignique entre les chanes et .

LES COMPOSANTS DE LA MOLECULE DIg (modle dtude : IgG)

Les chanes lourdes Environ 446 aa, 02 parties :

- Une partie variable N terminale (VH) : denviron 110 aa, situe dans le fragment Fab et comportant une boucle VH forme par un pont disulfure intra-catnaire avec :
Des rgions peu variables constituant la charpente (Framework); Des zones hypervariables dnommes CDR.

- Une partie constante C terminale (CH) : denviron 330 aa, contenant des ponts disulfure intra-catnaires formant les boucles CH1, CH2, CH3.

LES COMPOSANTS DE LA MOLECULE DIg (modle dtude : IgG)

Cupules glucidiques Les Ig contiennent une ou plusieurs copules glucidiques (selon les classes et la sous-classes), localises sur les chanes lourdes.

La teneur et la disposition des glucides sur les chanes sont variables.

Leur fonction semble trs importante dans : Lactivation du complment ; La fixation sur le rcepteur du Fc ; Le catabolisme des Ig.

HETEROGENIETE DES Ig
Les Ig sont caractrises par une trs grande htrognit qui sexprime 3 niveaux : Lisotypie, lallotypie et lidiotypie.
1. LISOTYPIE : Les caractres isotypiques sont communs tous les individus dune mme espce et dfinissent les classes et les sous-classes dimmunoglobulines ainsi que les types de chanes lgres. Les dterminants isotypiques sont ports par les domaines constants des chanes lourdes et lgres. Il existe : 9 isotypes diffrents pour les chanes lourdes permettant de distinguer : 5 classes dIg : IgG, IgA, IgM, IgE, IgD incluant : 4 sous/classes dIgG : IgG1, IgG2, IgG3, IgG4. 2 sous/ classes dIgA : IgA1, IgA2. 2 types de chanes lgres Kappa et Lambda.

HETEROGENIETE DES Ig
2. LALLOTYPIE Les spcificits allotypiques sont des dterminants antigniques qui permettent de distinguer les Ig de 2 individus ou de groupes dindividus au sein dune mme espce. Les dterminants allotypiques sont prsents au niveau de certaines rgions sur les domaines constants des chanes , des chanes et des chanes :
- Les allotypes de la chane sont dits marqueurs Gm. Il existe au moins, 25 allotypes Gm. - La chane de lIgA2 prsente 2 allotypes : A2m(1) et A2m(2) - La chane lgre a trois allotypes : Km(1), Km(2) et Km(3)

HETEROGENIETE DES Ig
3. LIDIOTYPIE : Les spcificits idiotypiques sont des dterminants antigniques qui caractrisent un anticorps donn chez un individu. Elles sont portes par les domaines variables des Ig.

FONCTIONS DES IMMUNOGLOBULINES

Les Ig sont caractrises par une dualit structurale et une dualit fonctionnelle :
- La dualit structurale est lie lexistence de parties constantes et de parties variables sur chaines lourdes et lgres. - La dualit fonctionnelle est reprsente par : * La fonction de reconnaissance de lAg qui est localise au niveau du fragment Fab. Cest une fonction assure par toutes les Ig. * Les fonctions effectrices dont le support est le fragment Fc et qui varient selon la classe dIg.

FONCTION DE RECONNAISSANCE
Cest la fonction anticorps porte par le fragment Fab. Linteraction Ac-Ag (impliquant lpitope sur lAg et le paratope sur lAc) est base sur la complmentarit de structure qui dtermine laffinit de lAc pour lAg.

Cette interaction est spcifique mais, il peut exister des ractions croises :
Un mme Ac reconnait un pitope prsent sur deux molcules dAg diffrentes ; Un mme paratope peut se lier avec des affinits diffrentes des pitopes de structure semblable, mais lgrement diffrents les uns des autres.

FONCTIONS BIOLOGIQUES DES IMMUNOGLOBULINES

Lie au fragment Fc des immunoglobulines. 03 fonctions effectrices essentielles, rsultent de linteraction Fc/protines sriques ou Fc/rcepteurs membranaires des cellules : 1- Lactivation de la voie classique du complment ; 2- La cytotoxicit mdiation cellulaire dpendante des Ac : ADCC. 3- Lopsonisation ;
Activation du complment par la voie classique

Opsonisation Cytotoxicit mdiation cellulaire dpendante des Ac : ADCC Transfert placentaire Fragment Fc

Les fonctions biologiques des Ig sont lies aux rgions constantes des chanes lourdes qui diffre dune classe une autre, ceci implique que toutes les classes dimmunoglobulines nont pas les mmes proprits fonctionnelles.

CARACTERISTIQUES DES DIFFERENTES CLASSES DIg

LES IMMUNOGLOBULINES g (IgG)

Reprsentent 75 85 % des Ig sriques humaines.

Concentration srique : 8 12 g/l. Molcules monomriques formes par lassociation de 2 chanes lourdes et 2 chanes lgres ou .

Proprits physicochimiques : PM : 150.000 Teneur en glucides : 2 3 %

LES IMMUNOGLOBULINES g (IgG)

Sous classes dIgG 4 sous classes dnommes IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 se distinguant entre elles par : Des dterminants antigniques de s/classe . Le nombre des ponts disulfure inter-chanes lourdes localiss dans la rgion charnire.

LES IMMUNOGLOBULINES g (IgG)

Fonctions biologiques Les IgG constituent la majeure partie des Ac anti-bactriens et anti-viraux. En outre, elles possdent les proprits biologiques suivantes : ADCC Opsonisation
FcR
FcR Cellule infecte par un virus
FcR
Bactrie

Activation du complment par la voie classique

Cellule NK
Macrophage

ou PN

APOPTOSE

PHAGOCYTOSE

Cascade du complment + LYSE ou ELIMINATION

LES IMMUNOGLOBULINES g (IgG)

Fonctions biologiques

Transfert placentaire : Les IgG sont les seules Ig pouvoir traverser la barrire placentaire.

Les IgG1, IgG3 et IgG4 passent facilement la barrire placentaire et jouent un rle important dans la protection du ftus au cours de son dveloppement.

LES IMMUNOGLOBULINES A (IgA)

Les IgA sriques Reprsentent 15% environ des Ig circulantes. Concentration srique de 2 4 g/l. La quantit quotidienne dIgA synthtise (60 mg/kg/jour) > IgG (30mg) > IgM (8mg) fait des IgA une Ig majeure . Monomres : deux chanes lgres ( ou ), fixes deux chanes lourdes possdant 4 domaines.

Deux sous-classes : IgA 1 (80 %) et IgA2 (20 %).

Proprits physicochimiques : PM : 160.000 Da Teneur en glucides : 6 9 %

LES IMMUNOGLOBULINES A (IgA)

Les IgA scrtoires (IgAs) Constituent chez lHomme lessentiel des Ig prsentes dans la salive, les larmes, le colostrum, le lait, la bile, les scrtions nasales, bronchiques et gastro-intestinales.
PM : 400.000 Chane J

Pice scrtoire

Complexes constitus de deux molcules dIgA runies par une chane J une glycoprotine appele Pice scrtoire (SC) : La chane J (Joining) : Glycoprotine de jonction synthtise par les cellules productrices dIg. La pice scrtoire : Synthtis par les cellules pithliales des surfaces muqueuses et glandulaires.

LES IMMUNOGLOBULINES A (IgA)

Les IgA scrtoires (IgAs) la transcytose.

LES IMMUNOGLOBULINES A (IgA)

Fonctions biologiques Toutes les formes dIgA : Ne fixent pas le complment par la voie classique ; Ne traversent pas la barrire placentaire. 1. IgA sriques :

Une grande varit de spcificits a t retrouve pour les IgA sriques (antibactriens, antiviraux).
Les IgA sriques monomriques induites par une immunisation ancienne, auraient une action anti-inflammatoire lie leur capacit de rentrer en comptition avec les IgG et les IgM et empcheraient ainsi le dclenchement de la cascade du complment.

LES IMMUNOGLOBULINES A (IgA)

2. IgA scrtoires : Fonctions biologiques

Rle de barrire immune : En sopposant lentre des agents trangers dans les pithliums :
Diminuent ladhsion des bactries (salmonella, vibrio cholerae, neisseria gonorrhoeae ) aux muqueuses, facilitant, leur mlange au mucus et donc leur limination.

Neutralisent les virus (virus de la poliomylite), en empchant leur fixation sur les cellules cibles.

En empchant labsorption dimmunognes alimentaires non dgrads (protines du lait, protines du buf) travers le tractus gastro-intestinal et qui risquent de provoquer des ractions dhypersensibilit de type I ou III. Rgulation de flore bactrienne : Action bactriostatique.

LES IMMUNOGLOBULINES M (IgM)

5 10 % de lensemble des Ig. Existent dans le srum, sous forme de pentamre dont lunit de base est constitue par deux chaines lgres ( ou ) et par deux chanes lourdes qui comportent 5 domaines : CL ,CH1, CH2, CH3 et CH4. Les 5 monomres sont relis entre eux par des ponts disulfure et par des chaines J, analogues celles retrouves dans les IgAs. Structure caractristique en toile, avec au bout de chacune des 5 branches, deux fragments Fab. Proprits physicochimiques : PM : 960.OOO Teneur en glucides : 10 12 %

LES IMMUNOGLOBULINES M (IgM)

Fonctions biologiques - Essentiellement confines au compartiment intra-vasculaire (Ne diffusent pas bien en raison de leur grande taille) - Particulirement actives dans les processus suivants : Anticorps dits naturels (anti-A et anti-B des groupes sanguins) ; Anticorps immuns (bactries Gram ngatif) ; Auto-anticorps (facteur rhumatodes, agglutinines froides). Macromolcules multivalentes constituant un difice parfaitement adapt la capture des gros antignes, elles sont les plus efficaces pour :

Agglutiner les antignes corpusculaires ; Provoquer une neutralisation ; Fixer le complment par la voie classique.
Ne traversent pas la barrire placentaire. Jouent un rle accessoire important en tant quimmunoglobuline de scrtion.

LES IMMUNOGLOBULINES D (IgD)

Les chanes Lourdes sont constitues de 4 domaines. Taux sriques faibles (25 40 mg/l), moins de 1% des Ig sriques.

Proprits physicochimiques : PM : 180.000 Teneur en glucides : 7 14 %

LES IMMUNOGLOBULINES D (IgD)

Fonctions biologiques

Les IgD sont prsentes la surface des lymphocytes B du sang priphrique. Elles constituent, ce niveau, (avec les IgM de surface) les rcepteurs spcifiques par lesquels ces cellules reconnaissent les antignes.

LES IMMUNOGLOBULINES E (IgE)

Constitues, comme les autres Ig par deux chaines lgres ( ou ) , et par deux chanes lourdes . Les chanes possdent comme les chanes , cinq domaines dont un variable. Concentration srique trs faible. Demie vie trs courte : 2 4 J

Proprits physicochimiques : PM : 190.000 Teneur en glucides : 12 %

LES IMMUNOGLOBULINES E (IgE)

Fonctions biologiques

Le rle des IgE dans les manifestations allergiques : Hypersensibilit type I

Le rle cytotoxique des IgE : Il sagit dune fonction de protection pour lorganisme contre certains parasites. Les IgE contribuent la destruction immune des parasites par le biais des polynuclaires osinophiles.

En rsum
Les cinq classes dIg diffrent par leur capacit effectuer les diverses fonctions effectrices, par leur concentrations sriques moyennes et par leur demi-vie. LIgG, la classe la plus abondante du srum, particulirement importante pour liminer les antignes par divers mcanismes ; elle est aussi la seule classe pouvoir traverser la barrire placentaire. LIgM srique existe sous forme de pentamre ; en raison de sa valence leve, lIgM est plus efficace que les autres classes dans la neutralisation des virus, lagglutination des bactries, et lactivation du complment. LIgA est la classe prdominante des scrtions externes, y compris le lait et le mucus. Dans ces scrtions, lIgA scrte existe sous forme de dimre (principalement) ou de ttramres unis par des liaisons disulfures la chane J et au composant scrtoire. LIgD et lIgE sont les deux classes les moins abondantes du srum. LIgD (de concert avec lIgM) est lIg membranaire des cellules B matures. LIgE mdie la dgranulation des mastocytes.

En rsum
Proprit/Activit Poids molculaire Composant de la chane lourde Taux srique normal (mg/ml) Demi vie dans le srum in vivo (jours) Active la voie classique du complment Passe travers le placenta Prsent sur la membrane des cellules B matures Se lient aux rcepteurs du Fc des phagocytes Transfert travers la muqueuse Induit la dgranulation des mastocytes IgG1 150.000 1 9 23 + IgG2 150.000 2 3 23 +/IgG3 150.000 3 1 8 ++ IgG4 150.000 4 0,5 23 IgA1 160.00600.000 1 3 6 IgA2 160.00600.000 2 0,5 6 IgM 9OO.000 1,5 5 +++ IgE 190.000 0,003 2,5 IgD 180.000 0,03 3 -

+ -

+/-

+ -

+ -

++

+/-

++

++ -

++ -

+ -

++

Les niveaux dactivit sont indiqus comme suit : ++ = leve ; + = modre ; +/- = faible ; - = aucune ; ? = Douteuse.

VI. ONTOGENIE DES IMMUNOGLOBULINES

Production dAc aprs la naissance

Lvolution du taux des Ig synthtises par lenfant durant les premiers mois de la vie est influence par : Le taux danticorps maternels acquis par transmission transplacentaire ; Limportance des stimulations antigniques tant de la flore saprophyte que de la flore pathogne quil est appel rencontrer.

Rponse humorale primaire et secondaire

Lintroduction dun Ag donn donne lieu deux types de rponses selon ltat immunitaire de lorganisme receveur: La rponse primaire : Survenant lors du premier contact avec lantigne. La rponse secondaire : Survenant aprs un deuxime contact, ou lors des contacts ultrieurs avec lantigne.

Ces deux types de rponse se distinguent par : Lisotype des Ac produits ; La quantit danticorps produits ; Le dlai dapparition des Ac ; Laffinit des Ac produits.

CARACTERISTIQUES DES REPONSES PRIMAIRES ET SECONDAIRES

Rponse primaire Dlai de rponse Amplitude de rponse Isotype des Ac produits 5 10 J Faible IgM >>> IgG Rponse secondaire 1 3 jours 100 1000 fois plus forte que la rponse primaire Prdominance des IgG dans certaines conditions : IgA, IgE Forte Ag T dpendants Faible dose dAg, sans besoin dadjuvant Mmoire

Affinit des Ac produits Nature des Ag Inducteurs Type dimmunisation ncessaire LB rpondeurs activs

Faible Ag T dpendants et Ag T indpendants Haute dose dAg, de faon optimale avec des adjuvants nafs