ASPECTOS BSICOS DE LA INGENIERA DE BIORREACTORES

Biorreactor Es un dispositivo o un recipiente utilizado para llevar a cabo una reaccin bioqumica, la cual consiste en convertir algn sustrato en algunos productos.
Inoculo

Cultivos Iniciadores

Ejemplos
Levadura

Produccin de Biomasa

Protena de seres unicelulares Enzimas Microorganismos

Biocatalizadores

Produccin de metabolitos

Etanol Aminocidos Antibiticos cidos orgnicos

Tratamiento de desechos

Diseo de Biorreactores

El biorreactor es el corazn de un bioproceso Est basado en principios cientficos y de ingeniera y en muchas reglas empricas (Heurstica) Aspectos a tener en cuenta: Modos de operacin Configuracin del biorreactor Tamao del biorreactor Condiciones del proceso en el biorreactor Otros (Costos, materiales y operacin asptica)

Diseo de biorreactores

Cintica Balances de masa y energa Transferencia de masa y calor Mezclado Actividad microbiolgica y metabolismo Capacidad Costos Otros

Tipos de Biorreactores

Reactor de Tanque Agitado (CSTR o FSTR) Reactor de columna de burbujas Reactor de tiro o de corriente de aire Reactor fluidizado Reactor de lecho empacado Fotorreactores Otros.

Biorreactores de tanque agitado y columna de burbujas

Tanques agitados columna de burbujas

Reactor de tiro o de corriente de aire

Reactor Fluidizado y de lecho empacado

Operacin asptica

Asptico: libre de microorganismos patgenos. En la Industria Operacin sptica Operacin semiasptica Operacin asptica Esterilizacin
3-5% fermentaciones Se pierden por Fallos en la esterilizacin

Otros
Materiales de construccin (30L-250m3)
<20L vidrio Escala piloto y gran escala acero inoxidable Acero dulce recubierto de acero inoxidable Soldadura pulida Evitar Cu o materiales que lo contenga

Costos

Costos Determinantes

Diseo Biorreactores
Mecnico

Diseo
Operacional
Diseo operacional Modos de operacin Discontinuo Continuo Semicontinuo

Modos de operacin ventajas y desventajas

Operacin discontinua

Ventajas
Simplicidad de uso y operacin (hasta 24h, dependiendo del microorganismo).

Desventajas
Envejecimiento del cultivo, esto puede traer problemas con los productos relacionados al crecimiento. Limitacin de concentracin inicial de sustrato (efectos de inhibicin) Posible formacin de productos txicos (inhibicin por producto) Largos perodos productivo Fisiologicamente variables de sistema tiempo no

Mayor seguridad. Empleo de menos instrumentacin por corrida.

Permite la produccin de metabolitos secundarios, estos, no estn relacionados con el crecimiento (Fase estacionaria) Bajas posibilidades de contaminacin (Esterilizacin antes de cada corrida) Trazabilidad, osea permite conocer la historia de cada producto.

altamente

Autlisis celular, liberacin de los productos de degradacin autoltico.

Operacin semicontinua

Ventajas
Permite controlar la concentracin de sustrato limitante. Es posible alcanzar altas densidades celulares. Aumento de la metabolitos no crecimiento. produccin asociados de al

Desventajas
Mayor conocimiento del crecimiento del microorganismo (metabolismo y microbiologa). Instrumentacin especializada (preferiblemente sensores en tiempo real) Requiere de sistemas de control para evitar desajustes entre la tasa de dilucin y el metabolismo. Capacitacin del personal para la operacin del proceso.

Adicin de precursores Reduccin de la viscosidad del caldo (fermentacin realizada por hongos filamentosos). Menor viscosidad, mayor aireacin y menor agitacin.

Operacin continua

Ventajas
Puede controlarse la velocidad de crecimiento y mantener constante las concentraciones. Permite realizar estudios de los factores ambientales que afectan al cultivo (determinacin de parmetros cinticos y estequiomtricos). Mayor productividad volumtrica A menudo, se puede mantener la produccin simultnea de metabolitos secundarios con el crecimiento celular. Permite el uso de cultivos mixtos.

Desventajas
Productos que requieren trazabilidad (producto farmacuticos o de qumica fina) No siempre puede producirse metabolitos no asociados al crecimiento. El crecimiento continuo por largos perodos de tiempo puede causar perdida de la cepa original y problemas de contaminacin. Equipos y personal de alta calidad y confiabilidad. Dificultad en hongos filamentosos debido a la viscosidad y naturaleza heterognea.

Utilidad del balance de energa

Tanques agitados y columna de burbujas

Balance de energa
H rx M v hV Q + W =
Q =U A T m

mE t

1 1 B 1 1 1 = + + + + U A h h A K A hc A h fh A h fc A
Cuando un fluido se mantiene a T constante Tf: Temperatura del caldo de cultivo T1 y T2 Temperatura entrada y salida del fluido de calentamiento o enfriamiento

2T f ( T 1 + T 2 ) T m= 2
Para el fluido de intercambio de calor

Q = mC p ( T 2 T 1 )

Configuracin de biorreactores

Clculo del coeficiente de transferencia de calor por conveccin en fermentadores

2 3 2 N D C p b h D Dv D g T i i Nu = ; = ; i = ; Pr = ; Gr = b b K fb K fb 2 b

h: coeficiente de transferencia de calor por conveccin D: dimetro de la tubera o del tanque Kfb: conductividad trmica del fluido V: velocidad del fluido : densidad media del fluido b: viscosidad del fluido Ni: velocidad de giro del rodete Cp: calor especfico medio del fluido g: aceleracin de la gravedad : coeficiente de expansin trmica del fluido Correlaciones emprica para Nu

b b c Nu = a Pr w

( )

0,14

Correlaciones Nu
Configuracin del biorreactor
Tanques agitados con serpentines Tanques agitados con camisa o chaqueta

Correlacin
b 0,62 (1 / 3 ) Nu = 0,87i Pr w

Intervalos

( )

0,14

Fluido de refrigeracin Newtoniano w viscosidad del caldo en la pared Fluido de refrigeracin Newtoniano Caldos Newtonianos 10^-3<(Kg/ms)<5x10^-2; Vg<0,1m/s D<1m (basada en el rea transversal del tanque) Caldos Newtonianos Caldos Newtonianos b= (0,78-5,27)x10^-3 Kg/ms 0,008<Vg<0,16m/s; 0,25<Aa/Ad>1,20 Aa: rea del tubo ascendente Ad: rea del tubo descendente El valor de h vara desde 600-2400W/m2C

Nu = 0,36

0,67 i

Pr
0,25 g

( 1/3)

b w
0,14

( )

0,14

h = 9391V
Tanques de burbujas

( )

b w

V3 h g = 0,1 Pr 2 C pV g bg

0,25

Airlift

h = 8710 V

0,22 g

( )

Aa Ad

0,25

Pr

0,5

Ejemplo
Un fermentador agitado de 5m de dimetro contiene un serpentn interno para la trasmisin de calor. El fermentador contiene un rodete tipo turbina para la mezcla cuyo dimetro es de 1,8m y opera a 60rpm. El caldo de fermentacin tiene las siguientes propiedades b=5x10^-3Pa*s, densidad 1000Kg/m3, Cp=4,2KJ/Kg*C, Kfb=0,70W/m*C. Despreciando los cambios de viscosidad en pared del serpentn, calcular el coeficiente de transferencia de calor Respuesta h=1,5KW/m2*C

Ejemplo
Un fermentador que se utiliza para la produccin de antibitico debe mantenerse a 27C. El calor de reaccin y la disipacin de calor en el agitador es de 550KW. Se dispone de agua de refrigeracin a 10C y la temperatura de salida es de 25C. El coeficiente de transferencia de calor para el caldo de fermentacin es de 2150W/m2*C (calculado por correlacin). El coeficiente de transferencia de calor para el agua refrigeracin es de 1400W/m2*C. Se propone instalar un serpentn de refrigeracin helicoidal dentro del fermentador. El dimetro exterior de la tubera es de 8cm, el espesor de 5mm y la conductividad trmica del acero de 60W/m2*C. Se espera un factor de ensuciamiento medio en el interior de 8500W/m2*C mientras la superficie del serpentn del lado del fermentador se mantiene relativamente limpia. Cunto es la longitud de serpentn que se necesita? rea superficial de un cilindro Ac=2RL Respuesta: L=169.9m

Reactor de tanque agitado

Generalmente, slo el 70-80% del volumen del reactor se llena con lquido. El factor de forma, es decir, la relacin entre la altura (H) y el dimetro (T) puede variar desde 2:1 hasta 6:1 dependiendo de la cantidad de calor a retirar. Los rodetes ms utilizados son los tipo turbina, por ejemplo, tipo hlice, plana (Rushton) y disco. Dimetro del rodete (D), D=T/12. Distancia del fondo del tanque al rodete es T/3. Espesor de los bafles es T/12

Reactor de Columna de Burbuja

Usos industriales en la produccin de levadura de panadera, cerveza, vinagre y en el tratamiento de aguas residuales. Factor de forma es comn 3:1 y puede llegar hasta 6:1.

Tipos de Biorreactores

Reactor de Tanque Agitado (CSTR o FSTR) Reactor de columna de burbujas Reactor de tiro o de corriente de aire (Airlift) Aeroelevadores o con elevacin de aire Reactor fluidizado Reactor de lecho empacado Fotorreactores Otros.

Especificaciones de diseo

Requerimientos energticos (calor) Reologa: tiempo de mezcla, agitacin, tolerancia al estrs por cizalla, viscosidad del caldo y propiedades de flujo. Satisfacer la demanda de oxgeno Otros (materiales de construccin, costos, etc.)

Flujo y mezcla de fluidos

Tipo de fluido Newtoniano No Newtonianos Pseudoplsticos Dilatantes Plsticos de Bingham Plsticos de Casson Ejemplo
Todos los gases, dispersiones de gas en agua, lquidos de bajo peso molecular y soluciones acuosas de bajo peso molecular Slns de goma, de adhesivos, de polmeros, algunas grasas, suspensiones de almidn, acetato de celulosa, mayonesa, suspensiones de detergentes, algunas pulpas de papel, pinturas y fluidos biolgicos Algunas slns de harina de maz y azcar, almidn, polvo de hierro disperso en lquidos de baja viscosidad y agregados de cemento hmedo. Algunos fundidos de plsticos, margarina, grasas de cocina, algunas grasas, pasta de dientes, suspensiones de detergentes y algunas pulpas de papel Sangre, salsa de tomate, zumo de naranja, chocolate cocido y tinta de impresin.

Clasificacin reolgica
Fluido Curva de flujo Ecuacin Viscosidad aparente

Newtoniano

Constante

K ; es el ndice de consistencia
Psedoplstico (Ley exponencial) Disminuye al aumentar la velocidad de cizallamento Aumenta al aumentar la velocidad de cizallamiento

velocidad de cizalla

n ; ndice de comportamient reolgico

Dilatante (Ley exponencial)

Plstido Bingham

Disminuye al aumentar la velocidad de cizallamiento cuando sobrepasa o

Cuando la viscosidad aparente aumenta con el tiempo se denomina un fluido reopctico y cuando aumenta con el tiempo tixotrpico

Plstico Casson

Disminuye al aumentar la velocidad de cizallamiento cuando sobrepasa o

Factores que afectan la viscosidad del caldo de fermentacin

Concentracin celular Morfologa celular, incluyendo forma, tamao y masa Flexibilidad y deformabilidad de las clulas. Presin osmtica del fluido de la suspensin Concentracin de sustratos polimrico Concentracin del producto polimrico Velocidad de cizalla

Mezclado

Homogeneizar los componentes de la mezcla Mejorar la trasmisin de calor El equipo de mezcla ms comnmente utilizado son los tanques agitados.

Heurstica de biorreactores agitados

Ejemplos de tipos de rodetes

Ancla

Hlice

Turbina Rushton

Canalete

Ancla de Reja

Tornillo Helicoidal

Viscosidad (centipoises) Anclas Hlices Turbinas Rushton Anclas de Rejas Canaletes Tornillos Helicoidales Cintas Helicoidales Tipo de Rodete

Heurstica de biorreactores agitados

Seleccin del rodete

Heurstica de biorreactores agitados

Generalmente, slo el 70-80% del volumen del reactor se llena con lquido. El factor de forma, es decir, la relacin entre la altura (H) y el dimetro (Dt) puede variar desde 2:1 hasta 6:1 dependiendo de la cantidad de calor a retirar. Los rodetes ms utilizados son los tipo turbina, por ejemplo, tipo hlice, plana (Rushton) nd: nmero de deflectores Wd: Ancho del deflector S: distancia desde el agitador hasta el nivel de lquido. np: nmero de palas o paletas

nd Turbina de disco Turbina Rushton Hlice 4 4 4

Wd Dt/12 Dt/12 Dt/10

J Dt/60 Dt/60 0

Di Dt/3 Dt/3 Dt/3

E Dt/3 Dt/3 Dt/3

S 2Dt/3 2Dt/3 2Dt/3

W Di/5 Di/5 -

L Di/4 -

np 6 6 3

Tiempo de mezclado
tm=4tc Turbina Rushton Para Rei mayores a 5000

N it m =

1,54V 3 Di

tm: tiempo de mezcla tc: tiempo de circulacin Ni: velocidad de rotacin del agitador V: volumen de lquido Di: dimetro del rodete

Potencia para el mezclado

Np: nmero de potencia 1=Turbina Rushton 2=Canalete 3=Hlice marina

Potencia para el mezclado

Fluidos Newtonianos sin aireacin Rgimen laminar
P = K 1 N i D i
2 3

Rgimen turbulento
P = N p ' N i Di
3 5

Tipo de rodete Turbina Rushton Canalete Hlice marina Ancla Cinta helicoidal

Potencia para el mezclado

Fluidos no Newtonianos sin aireacin Para fluidos pseudoplsticos
N i D 2 i i = a

= k N i

a: viscosidad aparente k: constante para el tipo de rodete

Tipo de rodete Turbina Rushton Canalete Canalete de palas curvadas Hlice Ancla Cinta helicoidal

Potencia de mezclado

Pg: consumo de potencia con aireacin Po: consumo de potencia sin aireacin Fg: caudal volumtrico de gas V: volumen de lquido Wi: anchura de la pala del rodete n: nmero de rodetes

Pt = n P